检索结果-内蒙古大学图书馆

上海医科大学学报 1993年第4期20卷 251-254,T014页

作者：李赤波郑葆芬上海医科大学基础医学院生物物理学教研室

从重组质粒pSF_(11)中提取SRS白血病病毒(SRSV)5kb DNA片段,用双脱氧法对其两末端进行测序,每端测得约150bp,从中筛选出PCR引物。SRSV新鲜感染NIH/3T3细胞,从感染细胞的胞质内提取前病毒DNA。用PCR法对SRSV前病毒DNA中的约3.4kb片段进... 详细信息

从重组质粒pSF_(11)中提取SRS白血病病毒(SRSV)5kb DNA片段,用双脱氧法对其两末端进行测序,每端测得约150bp,从中筛选出PCR引物。SRSV新鲜感染NIH/3T3细胞,从感染细胞的胞质内提取前病毒DNA。用PCR法对SRSV前病毒DNA中的约3.4kb片段进行扩增,扩增产物用BamHⅠ酶切后与碱性磷酸单酯酶处理的pUC_(19)载体连接,并转化大肠杆菌JM_(103),得到含约3.4kb前病毒DNA片段插入子的重组质粒,并经Southern Blot证实,定名为pSF_(12),该克隆的SRSV DNA片段含有部分的env和pol基因。pSF_(12)和pSF_(11)构成SRSV的完整基因克隆。

关键词：白血病病毒前病毒DNA 分子克隆

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反义寡核苷酸对HL60细胞c-myc基因表达的抑制和诱导分化作用

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上海医科大学学报 1998年第3期25卷 167-170页

作者：王松梅单易非高红阳汤华上海医科大学基础医学院生物物理学教研室

目的研究ｃｍｙｃ反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞中ｃｍｙｃ基因的表达及ＨＬ６０细胞分化的影响。方法采用针对原癌基因ｃｍｙｃ的ｍＲＮＡ５’非翻译区的一个１８ｂｐ的反义寡核苷酸５’ｄ（ＣＴＴＣＴＣＧＡＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧ... 详细信息

目的研究ｃｍｙｃ反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞中ｃｍｙｃ基因的表达及ＨＬ６０细胞分化的影响。方法采用针对原癌基因ｃｍｙｃ的ｍＲＮＡ５’非翻译区的一个１８ｂｐ的反义寡核苷酸５’ｄ（ＣＴＴＣＴＣＧＡＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧ）３’与人早幼粒白血病细胞系ＨＬ６０细胞共培养５ｄ，检测ｃｍｙｃｍＲＮＡ量的变化及其对ＨＬ６０细胞分化的影响。结果用ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ检测出ＨＬ６０细胞ｃｍｙｃｍＲＮＡ的含量减少；细胞形态学变化以及非特异性酯酶（ＮＳＥ）染色、硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原试验均提示ＨＬ６０细胞出现了分化，部分细胞向粒细胞方向分化，部分细胞向单核细胞方向分化。结论ｃｍｙｃ反义寡核苷酸能够抑制ｃｍｙｃ基因的表达并能诱导ＨＬ６０细胞分化。

关键词： c-myc基因 HL60细胞反义寡核苷酸分化

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兔血小板被A23187、凝血酶、ADP激活时其超微结构和颗粒数的变化

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上海医科大学学报 1996年第6期23卷 434-438页

作者：丁舰俞彰钟慈声上海医科大学基础医学院生物物理学教研室

研究钙离子导体Ａ２３１８７（１μｍｏｌ／Ｌ）、凝血酶（２ｕ／ｍｌ）、腺苷二磷酸（ＡＤＰ，２００μｍｏｌ／Ｌ）激活血小板的超微结构和颗粒数的变化。采用电子显微术和颗粒数密度（Ｎｖ）计量法。结果：激活的血小板有变形，包括... 详细信息

研究钙离子导体Ａ２３１８７（１μｍｏｌ／Ｌ）、凝血酶（２ｕ／ｍｌ）、腺苷二磷酸（ＡＤＰ，２００μｍｏｌ／Ｌ）激活血小板的超微结构和颗粒数的变化。采用电子显微术和颗粒数密度（Ｎｖ）计量法。结果：激活的血小板有变形，包括伪足生成，颗粒移向中央区，微管解聚，分泌颗粒的胞吐现象及分泌颗粒减少等一系列反应，３种激动剂所引起的形态变化并无明显差异。小剂量Ａ２３１８７引起αＧ和ｄＧ的数密度分别下降５２．８８％和３６．０２％，两者差异显著（Ｐ＜０．０１）。用量大的ＡＤＰ对两种颗粒促释放的影响则无差异。结论：激动剂作用较弱时αＧ较ｄＧ更易释放。

关键词： A23187 凝血酶 ADP 激活血小板颗粒超微结构

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用试管PCR法和玻片PCR法检测SRSV感染细胞中的病毒顺序

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上海医科大学学报 1993年第3期20卷 228-230页

作者：高红阳吴春根单易非上海医科大学基础医学院生物物理学教研室

多聚酶链反应(PCR)作为一种快速灵敏的分子生物学实验手段正日益引起科研及实践工作者的重视。传统的PCR常需先提得核酸,再对核酸样品进行扩增。我们采用的试管PCR法和玻片PCR法可省去提取核酸的步骤,而直接从细胞开始,对小鼠SRS腹水瘤... 详细信息

多聚酶链反应(PCR)作为一种快速灵敏的分子生物学实验手段正日益引起科研及实践工作者的重视。传统的PCR常需先提得核酸,再对核酸样品进行扩增。我们采用的试管PCR法和玻片PCR法可省去提取核酸的步骤,而直接从细胞开始,对小鼠SRS腹水瘤病毒基因进行扩增,灵敏度达到1×10~5个细胞。

关键词：聚合酶链反应基因检测病毒

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聚合酶链反应中引物的计算机辅助筛选

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上海医科大学学报 1994年第2期21卷 143-145页

作者：李赤波吴春根郑葆芬上海医科大学基础医学院生物物理学教研室

利用计算机辅助筛选聚合酶链反应（ＰＣＲ）的扩增引物。计算机程序根据引物筛选规则编写。这些规则包括：①引物的３′端均以ＧＣ对结尾；②引物的长度为１８～的个寡核苷酸；③每个引物中的ＧＣ含量为４５％～６０％；④避免引物自身... 详细信息

利用计算机辅助筛选聚合酶链反应（ＰＣＲ）的扩增引物。计算机程序根据引物筛选规则编写。这些规则包括：①引物的３′端均以ＧＣ对结尾；②引物的长度为１８～的个寡核苷酸；③每个引物中的ＧＣ含量为４５％～６０％；④避免引物自身及引物之间的同源性。由此我们设计了ＳＲＳ小鼠白血病病毒的引物，成功地扩增了３．４ｋｂ的大片段目的基因。实验结果证明了由此法筛选出来的引物的有效性和特异性。

关键词：聚合酶链反应引物计算机

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肝癌组织中GD3合成酶的纯化

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生物化学与生物物理学报 1994年第4期26卷 351-356页

作者：夏霞娟谢天培顾天爵上海医科大学基础医学院生物化学教研室

ＧＤ３合成酶（ＣＭＰ－ＮｅｕＡｃ：ＧＭ３唾液酸转移酶，ＳＴ２）是膜嵌合蛋白，定位于高尔基体。经过制作微粒体、Ｔｒｉｔｏｎ增溶、ＡＨ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ及ＧＭ３－Ｇｌａｓｓｂｅａｄｓ亲和层析等步骤，二乙基亚硝胺诱发大鼠... 详细信息

ＧＤ３合成酶（ＣＭＰ－ＮｅｕＡｃ：ＧＭ３唾液酸转移酶，ＳＴ２）是膜嵌合蛋白，定位于高尔基体。经过制作微粒体、Ｔｒｉｔｏｎ增溶、ＡＨ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ及ＧＭ３－Ｇｌａｓｓｂｅａｄｓ亲和层析等步骤，二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌组织中的ＳＴ２被纯化了３１５９７倍，得率为０．３５％。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染色呈１条蛋白着色带，分子量为５５ｋｄ．

关键词：肝癌 GD3合成酶纯化

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亚硝胺诱发大鼠肝癌不同细胞组分中三类蛋白激酶的变化

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上海医科大学学报 1994年第3期21卷 176-181页

作者：汤华陈惠黎上海医科大学基础医学院生物化学教研室

作者研究了正常大鼠肝三个亚细胞组分中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）、蛋白檄酶Ａ（ＰＫＡ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的活力和亚硝胺诱发大鼠肝癌后这些蛋白激酶的变化。发现正常鼠肝中的ＴＰＫ的活力为胞核＞膜性结构＞胞液，ＰＫＡ为胞液... 详细信息

作者研究了正常大鼠肝三个亚细胞组分中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）、蛋白檄酶Ａ（ＰＫＡ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的活力和亚硝胺诱发大鼠肝癌后这些蛋白激酶的变化。发现正常鼠肝中的ＴＰＫ的活力为胞核＞膜性结构＞胞液，ＰＫＡ为胞液＞膜结构＞胞核，而ＰＫＣ则为膜结构＞胞液＞胞核。在胞液的三类蛋白激酶中，ＰＫＣ＞ＰＫＡ＞ＴＰＫ；膜结构为ＰＫＣ＞ＴＰＫ＞ＰＫＡ；而胞核却以ＴＰＫ特别高，ＰＫＡ和ＰＫＣ的含量甚微。ＤＥＮ诱发大鼠肝癌１８周后，膜性和胞核ＴＰＫ升高，尤以膜性ＴＰＫ升高明显。但膜性ＰＫＡ则降低而胞核ＰＫＡ升高，胞液中ＴＰＫ和ＰＫＡ均无明显变化；而ＰＫＣ和ＴＰＫ相反，胞液中显著升高，膜性及胞核变化不大。其中ＰＫＣ的增高不是激活剂含量上升的结果。

关键词：亚硝胺肝肿瘤细胞组分蛋白激酶

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短期给予雌激素可增强雄性大鼠肾血管对加压素的敏感性

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上海医科大学学报 1996年第1期23卷 34-36页

作者：李相端徐葆裕上海医科大学基础医学院药理学教研室复旦大学物理二系

研究短期给予雌激素（每日皮下注射１７－β－雌二醇１００μｇ／ｋｇ，共３ｄ）对雄性大鼠肾血管反应性的影响。应用多普勒超声技术测量大鼠肾动脉血流管（ＲＢＦ），并计算肾血管传导性（ＲＶＣ）。比较雌激素处理组和对照组ＲＢＦ、... 详细信息

研究短期给予雌激素（每日皮下注射１７－β－雌二醇１００μｇ／ｋｇ，共３ｄ）对雄性大鼠肾血管反应性的影响。应用多普勒超声技术测量大鼠肾动脉血流管（ＲＢＦ），并计算肾血管传导性（ＲＶＣ）。比较雌激素处理组和对照组ＲＢＦ、ＲＶＣ对加压素和去甲肾上腺素的剂量反应曲线及对巯甲丙脯酸的反应。数据用方差分析和ｔ检验。结果：处理组大鼠ＲＢＦ和ＲＶＣ对加压素的剂量反应曲线较对照组显著左移，对巯甲丙脯酸的反应也显著高于对照组，两组对去甲肾上腺素的剂量反应曲线几乎相同。结论：雌激素处理增强了大鼠肾血管对加压素的敏感性，还可能激活了肾素血管紧张素系统，由此推测雌激素处理大鼠肾血管对加压素的敏感性增加可能与肾素血管紧张素系统的激活有关。

关键词：肾血流雌二醇加压素

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旋毛虫核酸酶Ts87降解小鼠中性粒细胞胞外捕获网DNA骨架的研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2025年第1期32卷 1-9,15页

作者：张明明郝瑜琬程喻力黄京京贾智惠诸欣平首都医科大学基础医学院病原生物学系寄生虫学教研室北京100069 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所国家热带病研究中心WHO热带病合作中心科技部国家级热带病国际联合研究中心国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

目的本研究旨在探索旋毛虫Ts87蛋白是否可以通过对小鼠NETs DNA骨架的降解作用实施宿主免疫逃避。方法首先,利用生物信息学软件分析Ts87蛋白的理化性质,通过序列同源性比对确认其属于核酸酶家族。随后,通过分子克隆及蛋白纯化技术,获得... 详细信息

目的本研究旨在探索旋毛虫Ts87蛋白是否可以通过对小鼠NETs DNA骨架的降解作用实施宿主免疫逃避。方法首先,利用生物信息学软件分析Ts87蛋白的理化性质,通过序列同源性比对确认其属于核酸酶家族。随后,通过分子克隆及蛋白纯化技术,获得高纯度的Ts87蛋白,并证实其具有核酸酶活性。将Ts87与已知酶活性位点的人溶酶体DNaseⅡα以及结构已解析的泰国伯克霍尔德氏菌DNaseⅡ的一级序列进行比对,预测出其可能的活性位点,并通过定点突变技术获得Ts87酶活突变体,酶活性实验证实其功能。在体外检测小鼠骨髓中性粒细胞胞外核酸量及免疫荧光染色小鼠NETs,来证实Ts87蛋白酶活突变体降解NETs能力是否有所下降。最后,Ts87免疫小鼠后,通过免疫荧光染色小鼠肠道NETs的MPO与CitH3表达量,观察小鼠体内NETs的降解情况及虫荷。结果成功获得高纯度Ts87蛋白,并证实其具有核酸酶活性,在体外可以降解小鼠NETs,且Ts87突变体降解NETs的能力下降。体内实验结果表明,免疫小鼠产生抗Ts87抗体后,体内NETs降解减少,利于NETs对虫体攻击,使小鼠体内虫荷降低。结论旋毛虫能利用Ts87核酸酶逃避NETs的捕获,该研究为旋毛虫病的防治提供潜在的疫苗与药物靶点。

关键词：旋毛虫核酸酶Ts87 中性粒细胞胞外捕获网免疫逃避

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加压素引起麻醉犬心输出量显著下降的机制研究

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上海医科大学学报 1996年第2期23卷 134-137页

作者：李相端徐葆裕上海医科大学基础医学院药理学教研室复旦大学物理二系

研究加压素引起麻醉犬ＣＯ显著下降的机制。应用传导（容量）导管技术测定左心室容量和收缩末期压力容量关系及相关的左室收缩功能指标（Ｅｅｓ），并通过心房起博固定心率，以消除心率影响，比较ＡＶＰ和ＡⅡ在自主神经反射完整和阻断... 详细信息

研究加压素引起麻醉犬ＣＯ显著下降的机制。应用传导（容量）导管技术测定左心室容量和收缩末期压力容量关系及相关的左室收缩功能指标（Ｅｅｓ），并通过心房起博固定心率，以消除心率影响，比较ＡＶＰ和ＡⅡ在自主神经反射完整和阻断组犬中引起的血流动力学改变。数据经ｔ检验。结果：在自主神经反射完整犬，当ＡＶＰ和ＡⅡ引起相似水平的平均血管阻力增加（５０％）时，ＡＶＰ显著减少ＣＯ，减少值为（２９．６２±９．０８）％；轻度增加平均动脉血压（ＭＢＰ）和左室舒张末期容量（ＥＤＶ），增加值分别为（５．５３±４．７４）％和（１１．１１±３．７５）％。ＡⅡ显著增加ＭＢＰ和ＥＤＶ，增加值分别为（２２．２４±４．４２）％和（３０．９１±１４．０８）％；轻度减少ＣＯ，减少值为（１８．７５±１２．７１）％。在自主神经反射阻断犬，这种反应的不一致性完全消失。在上述两种实验状态下，ＡＶＰ和ＡⅡ均未引起Ｅｅｓ显著改变。结论：ＡＶＰ导致ＣＯ显著下降是由于它引起较大的静脉充盈，以致舒张末期的ＣＯ增加比ＡⅡ较少。此作用是通过自主神经反射调节。

关键词：加压素心输出量麻醉犬

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