检索结果-内蒙古大学图书馆

HIF-1α过表达慢病毒载体的构建及对心肌细胞Notch配体Jagged1表达的影响

临床与实验病理学杂志 2016年第4期32卷 416-420页

作者：王振良丁然然哈艳平雷洪王可可申志华姜汉国揭伟广东医科大学病理学系湛江524023 广东医科大学基础医学院病理生理学教研室湛江524023

目的构建低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）过表达重组慢病毒质粒并包装病毒,将病毒感染乳鼠心肌细胞,分析其对Notch配体Jagged1表达的影响。方法从cDNA文库中PCR扩增人HIF-1α编码序列并克隆入酶切线性化慢... 详细信息

目的构建低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）过表达重组慢病毒质粒并包装病毒,将病毒感染乳鼠心肌细胞,分析其对Notch配体Jagged1表达的影响。方法从cDNA文库中PCR扩增人HIF-1α编码序列并克隆入酶切线性化慢病毒载体GV218,转化感受态大肠杆菌细胞筛选出阳性克隆并测序鉴定。将HIF-1α过表达慢病毒质粒与病毒包装辅助质粒共转染工具细胞HEK293T,包装出慢病毒颗粒。原代分离SD乳大鼠心肌细胞,将HIF-1α过表达慢病毒感染心肌细胞,定量PCR分析Jagged1mRNA水平的变化。结果成功扩增HIF-1α编码序列并正确连接入线性化载体GV218,获得阳性转化子并测序无误。将转化子质粒与病毒包装辅助质粒共转染HEK293T后,获得滴度为1×108TU/ml的慢病毒颗粒,Western blot法检测到HIF-1α-GFP融合蛋白。重组慢病毒感染乳鼠心肌细胞后,胞核中见GFP信号。与对照组相比,HIF-1α过表达5天后显著上调Jagged1mRNA的水平。结论心肌细胞中HIF-1α可诱导Jagged1的表达。HIF-1α过表达重组慢病毒载体的成功构建,为研究缺血缺氧性心肌损伤反应的分子机制奠定了基础。

关键词：质粒构建慢病毒包装心肌细胞 Notch信号低氧诱导因子1α

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Rab7蛋白参与了BLP耐受巨噬细胞对细菌清除能力增强的过程

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中国病理生理杂志 2016年第5期32卷 900-906页

作者：赵舒祺蔡军伟李雪杨勤黄林罗海华项静乔敏姜勇刘靖华贵州医科大学病理生理学教研室贵州贵阳550004 南方医科大学基础医学院病理生理学教研室广东省蛋白质组学重点实验室广东广州510515

目的:探讨Rab GTP酶是否参与了对细菌脂蛋白(BLP)耐受的骨髓诱导分化巨噬细胞(BMDMs)杀菌能力增强的过程。方法:首先利用real-time PCR比较BLP耐受巨噬细胞和非耐受细胞中Rab5a、Rab5b、Rab7、Rab9、Rab9b、Rab11a、Rab11b、Rab12、Rab3... 详细信息

目的:探讨Rab GTP酶是否参与了对细菌脂蛋白(BLP)耐受的骨髓诱导分化巨噬细胞(BMDMs)杀菌能力增强的过程。方法:首先利用real-time PCR比较BLP耐受巨噬细胞和非耐受细胞中Rab5a、Rab5b、Rab7、Rab9、Rab9b、Rab11a、Rab11b、Rab12、Rab32和Rab34的表达变化,筛选出水平升高的Rab7分子;进一步用real-time PCR和Western blot实验证实Rab7的mRNA和蛋白表达是否在BLP耐受细胞感染大肠杆菌后继续升高;接下来用RNAi技术下调BLP耐受巨噬细胞Rab7表达,观察细胞对细菌的吞噬能力及杀灭能力的影响。结果:在检测的10个Rab GTP酶中,Rab7在BLP耐受BMDMs的mRNA水平升高,是非耐受细胞的1.4倍;进一步用real-time PCR和Western blot实验证实Rab7的mRNA和蛋白表达在BLP耐受细胞感染大肠杆菌后,随着时间延长均明显升高;下调Rab7表达不影响BLP耐受巨噬细胞对细菌的吞噬能力,但是显著降低其对细菌的杀灭能力。结论:BLP耐受通过上调巨噬细胞Rab7的表达,在增强巨噬细胞对细菌的杀灭过程中发挥重要作用。

关键词：细菌脂蛋白耐受细菌清除 Rab GTP酶 Rab7蛋白

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Rho GTP酶在阿尔茨海默病中的研究进展

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实用医学杂志 2016年第5期32卷 693-694页

作者：喻慎仪张璐南方医科大学基础医学院病理生理学教研室广州市510515

阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease,AD）是最常见的进行性神经系统退行性疾病,以渐进性的认知和记忆的障碍和情志的异常改变为主要临床特征。AD的标志性病理改变为β-淀粉样蛋白（β-amyloid protein,Aβ）沉积形成的老年斑（senile p... 详细信息

阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease,AD）是最常见的进行性神经系统退行性疾病,以渐进性的认知和记忆的障碍和情志的异常改变为主要临床特征。AD的标志性病理改变为β-淀粉样蛋白（β-amyloid protein,Aβ）沉积形成的老年斑（senile plaques）和由磷酸化的不溶性tau蛋白组成的神经原纤维缠结（neurofibrillary tangles,NFTs）。

关键词：阿尔茨海默病 Rho GTP酶 β-淀粉样蛋白 senile amyloid 神经原纤维缠结蛋白磷酸化树突棘 plaques 蛋白组成

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泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性机制研究

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中国病原生物学杂志 2017年第6期12卷 489-494页

作者：张帅张舜文吴芳吴江东章乐张杰董江涛张玉清柳小玲梁粟朱荟云张大龙武青青张万江石河子大学医学院病理生理学教研室新疆地方与民族高发病教育部重点实验室西部地区高发人兽共患传染性疾病防治协同创新中心新疆石河子832002 南京医科大学基础医学院石河子大学医学院第一附属医院

目的探讨泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性的影响及其机制。方法采用刃天青显色法,比较单耐异烟肼结核分枝杆菌(对照组)与4种基因(Pup、Dop、PafA、Mpa基因)分别过表达和缺失单耐异烟肼结核分枝杆菌菌株异烟肼最... 详细信息

目的探讨泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性的影响及其机制。方法采用刃天青显色法,比较单耐异烟肼结核分枝杆菌(对照组)与4种基因(Pup、Dop、PafA、Mpa基因)分别过表达和缺失单耐异烟肼结核分枝杆菌菌株异烟肼最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)值的差异;比较加入改变细胞壁通透性试剂后,单耐异烟肼结核分枝杆菌(对照组)与4种基因分别过表达和缺失单耐异烟肼结核分枝杆菌菌株异烟肼MIC差值间的差异。结果 (1)与单耐异烟肼结核分枝杆菌相比,异烟肼的MIC值过表达PafA基因株增加1.03μg/ml,过表达Dop、Mpa基因株分别降低1.03μg/ml、0.68μg/ml,差异均无统计学意义(F=1.898,P>0.05);过表达Pup基因株异烟肼的MIC值增加8μg/ml,差异有统计学意义(t=2.185,P<0.05);缺失Pup、Dop、PafA、Mpa基因株异烟肼的MIC值分别降低4.82、4.98、4.99、4.9μg/ml,差异均有统计学意义(F=35.809,P<0.05)。(2)与加入改变细胞壁通透性试剂后单耐异烟肼结核分枝杆菌相比,异烟肼的MIC差值过表达Pup基因株增加7.78μg/ml,差异有统计学意义(t=2.173,P<0.05);缺失Pup、Dop、PafA、Mpa基因株分别降低4.58、4.73、4.75、4.68μg/ml,差异均有统计学意义(F=33.598,P<0.05);过表达Dop、Mpa基因株分别降低1μg/ml和0.7μg/ml,过表达PafA基因株增加0.97μg/ml,差异均无统计学意义(F=1.935,P>0.05)。结论结核分枝杆菌泛素样蛋白蛋白酶体系统可能通过调控单耐异烟肼结核分枝杆菌细胞壁的通透性影响其耐药性。

关键词：结核分枝杆菌泛素样蛋白-蛋白酶体系统耐药性异烟肼机制

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术中冰冻切片对复杂性肾囊性病变的临床诊断价值

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河北医科大学学报 2017年第1期38卷 86-88页

作者：苏世强刘丽哲王香芝李瑞玲赵敬霞庞书舰河北省石家庄市第一医院泌尿外科河北石家庄050011 河北医科大学基础医学院病理生理学教研室河北石家庄050017

目的探讨术中冰冻切片对复杂性肾囊性病变的诊断价值。方法回顾性分析93例术中行冰冻切片检查的复杂性肾囊性病变患者临床资料。按照Bosniak分类,BosniakⅡ类囊肿13例、ⅡF类囊肿19例、Ⅲ类囊肿37例、Ⅳ类囊肿24例。行肾囊肿去顶减压术2... 详细信息

目的探讨术中冰冻切片对复杂性肾囊性病变的诊断价值。方法回顾性分析93例术中行冰冻切片检查的复杂性肾囊性病变患者临床资料。按照Bosniak分类,BosniakⅡ类囊肿13例、ⅡF类囊肿19例、Ⅲ类囊肿37例、Ⅳ类囊肿24例。行肾囊肿去顶减压术27例,肾部分切除术37例,根治性肾切除术29例。比较术中冰冻切片病理和术后常规石蜡切片病理的诊断结果。结果术中冰冻切片病理结果为恶性肾肿瘤51例、良性肾肿瘤14例、肾囊肿27例及肾结核1例;术后石蜡切片病理为恶性肾肿瘤54例、良性肾肿瘤13例、肾囊肿25例及肾结核1例。术中冰冻切片病理诊断肾脏恶性病变的敏感度为94.1%,特异度为100.0%,术中冰冻切片诊断复杂性肾脏囊性病变良恶性总体符合率为96.8%。病理亚型诊断符合率分别为肾透明细胞癌97.3%、肾乳头状细胞癌44.4%,肾嫌色细胞癌33.3%,多房囊性肾细胞癌28.6%,肾滑膜肉瘤0、肾囊肿92.6%、肾结核100.0%。结论术中冰冻切片检查诊断复杂性肾囊性病变的敏感度、特异度及符合率高,但是其在诊断病理亚型方面存在局限性。

关键词：肾肿瘤囊肿诊断,鉴别

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下调CD147表达对甲状腺癌细胞SW579运动能力的影响

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实用医学杂志 2016年第20期32卷 3335-3338页

作者：王巍邵跃宋晓雯赵成海中国医科大学基础医学院病理生理学教研室沈阳市110122

目的:检测CD147 siRNA对甲状腺癌SW579细胞的作用及其机制。方法:检测CD147 siRNA处理后SW579细胞的CD147 mRNA和蛋白水平。利用CKK-8实验检测细胞增殖。同时利用transwell检测细胞运动能力变化。并利用Western-blot技术检测运动相关蛋... 详细信息

目的:检测CD147 siRNA对甲状腺癌SW579细胞的作用及其机制。方法:检测CD147 siRNA处理后SW579细胞的CD147 mRNA和蛋白水平。利用CKK-8实验检测细胞增殖。同时利用transwell检测细胞运动能力变化。并利用Western-blot技术检测运动相关蛋白的变化。结果:下调CD147可以明显抑制SW579细胞增殖,并且阻碍其运动。处理后细胞的MMP-2和MMP-9蛋白水平明显下降。一种运动相关蛋白WAVE2的表达随着CD147的下调而下降。结论 :CD147下调可能通过抑制MMP-2、MMP-9和WAVE2表达导致SW579细胞运动能力下降。

关键词： SW579细胞 CD147 siRNA 运动能力 WAVE 2

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氧化苦参碱对糖尿病大鼠肾组织纤维化的作用及可能机制研究

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贵州医药 2017年第11期41卷 1123-1125,F0003页

作者：刘丽荣彭应会张小欢彭伟郭兵贵州医科大学医学检验学院临床血液学教研室贵州贵阳550004 贞丰县民族中医院检验科贵州贞丰562200 贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州贵阳550004

目的探讨氧化苦参碱(OM)对糖尿病(DM)大鼠肾组织纤维化的作用及可能机制。方法 SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组、氧化苦参碱治疗(OM)组大鼠,尾静脉注射STZ复制DM模型,于成模13周起,DMA组大鼠采用OM个体化治疗,以血糖控制在... 详细信息

目的探讨氧化苦参碱(OM)对糖尿病(DM)大鼠肾组织纤维化的作用及可能机制。方法 SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组、氧化苦参碱治疗(OM)组大鼠,尾静脉注射STZ复制DM模型,于成模13周起,DMA组大鼠采用OM个体化治疗,以血糖控制在4~7mmol/L,尿糖阴性为准,分别于24周处死各组大鼠。生化方法测血糖、血肌酐和24h尿蛋白;HE和Masson染色观察大鼠肾组织结构改变;免疫组化检测各组大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、E-钙黏附素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白(FN)蛋白的表达变化;免疫荧光检测大鼠肾组织中Arkadia和核转录共抑制因子(SnoN)蛋白的表达。结果与NC组相比,DM组大鼠血糖,血肌酐,24h尿蛋白明显增多(P<0.05),并出现肾组织形态学异常改变;而OM组大鼠血糖、血肌酐、24h尿蛋白均显著低于DM组(P<0.05),肾纤维化病变明显改善;DM组TGF-β1、α-SMA和FN蛋白表达显著增加(P<0.05)、E-cadherin蛋白表达显著减少(P<0.05);与DM组相比,OM组TGF-β1、α-SMA和FN蛋白表达显著减少(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.05);免疫荧光显示Arkadia与SnoN蛋白的表达趋势相反。结论 OM具有抑制DM大鼠肾组织纤维化的作用,其机制可能与通过抑制TGF-β1表达和抑制Arkadia泛素化降解SnoN蛋白有关。

关键词：糖尿病肾病肾组织纤维化核转录共抑制因子 Arkadia 转化生长因子-β1 氧化苦参碱

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下调MDA-MB-231乳腺癌细胞骨硬化蛋白(SOST)可增加间接共培养的MG-63成骨细胞的成骨作用

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第11期32卷 1481-1485页

作者：程俊雄郭丹陈茜王婷黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学第二附属医院乳腺外科重庆400016

目的构建靶向抑制骨硬化蛋白(SOST)基因的小干扰RNA(siRNA)腺病毒,感染MDA-MB-231乳腺癌细胞并与MG-63成骨细胞共培养,检测对成骨相关分子表达的影响。方法针对SOST基因RNA序列设计带3个干扰片段的2对引物,以p B2B为模板,扩增"背靠... 详细信息

目的构建靶向抑制骨硬化蛋白(SOST)基因的小干扰RNA(siRNA)腺病毒,感染MDA-MB-231乳腺癌细胞并与MG-63成骨细胞共培养,检测对成骨相关分子表达的影响。方法针对SOST基因RNA序列设计带3个干扰片段的2对引物,以p B2B为模板,扩增"背靠背"排列的H1和U6启动子。两个PCR产物以Gibson DNA Assembly的方式同时连接腺病毒穿梭质粒p Ad Trace-OK,经同源重组、HEK293细胞包装获得SOST-siRNA腺病毒。感染MDA-MB-231乳腺癌细胞,实时定量PCR检测SOST mRNA的表达水平,ELISA检测SOST蛋白水平。将转染该腺病毒的MDA-MB-231细胞与MG-63成骨细胞间接共培养,实时定量PCR检测护骨因子(OPG)、骨钙蛋白(OCN)、整合素结合涎蛋白(IBSP)、核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)的表达情况。结果成功获得带3个干扰片段的腺病毒穿梭质粒,经同源重组和包装后,获得AdR-si SOST腺病毒。用该病毒感染MDA-MB-231细胞后,明显抑制SOST的表达。在乳腺癌骨转移体外模型中感染Ad-si SOST腺病毒,能导致MG-63细胞的OPG、OCN、IBSP mRNA表达上升,RANKL mRNA降低。结论在乳腺癌骨转移体外模型中感染Ad-si SOST腺病毒,能促进MG-63细胞的成骨分化,提高OPG/RANKL的比例。

关键词： SOST siRNA 腺病毒乳腺癌骨转移

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银杏叶提取物防治心脑血管疾病的研究进展

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中国新药杂志 2016年第1期25卷 76-81页

作者：李淑琴朱嘉宝武宇洲河北医科大学基础医学院病理生理学教研室河北医科大学第二医院心血管内科

银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract)是目前国际上使用最为广泛的中药提取物之一,主要活性成分是银杏黄酮和银杏内酯类化合物。心脑血管疾病是全球主要的病死原因,对其防治具有重要的意义。近年来的研究表明,银杏叶提取物对心脑血管疾... 详细信息

银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract)是目前国际上使用最为广泛的中药提取物之一,主要活性成分是银杏黄酮和银杏内酯类化合物。心脑血管疾病是全球主要的病死原因,对其防治具有重要的意义。近年来的研究表明,银杏叶提取物对心脑血管疾病的防治有多环节、多靶点、不良反应小的优势,应用前景良好。因此,本文综述了近年来银杏叶提取物对心脑血管疾病的防治作用和机制。

关键词：银杏叶提取物心血管疾病脑血管疾病 EGb 761

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氢化肉桂基-L-缬氨酰吡咯烷对小鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合质量的影响

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中华烧伤杂志 2016年第11期32卷 -页

作者：杨敏烈李跃华谭谦李建涛阙伶俐无锡市第三人民医院烧伤整形科 214041 南京医科大学基础医学院病理生理学教研室 210008 南京医科大学鼓楼临床医学院

目的观察Toll白细胞介素1受体同源区/BB环状拟似物——氢化肉桂基-L-缬氨酰吡咯烷(AS-1)对小鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合质量的影响. 方法将42只成年C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假伤组、烫伤组、AS-1早期治疗组、二甲基亚砜(DMSO)早期对... 详细信息

目的观察Toll白细胞介素1受体同源区/BB环状拟似物——氢化肉桂基-L-缬氨酰吡咯烷(AS-1)对小鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合质量的影响. 方法将42只成年C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假伤组、烫伤组、AS-1早期治疗组、二甲基亚砜(DMSO)早期对照组、AS-1晚期治疗组、DMSO晚期对照组,每组7只.假伤组小鼠模拟致假伤后不行其他处理;其余小鼠在背部造成约10％ TBSA深Ⅱ度烫伤,伤后每日以生理盐水清洁创面并更换凡士林纱布.AS-1早期治疗组、AS-1晚期治疗组小鼠分别自伤后8h、15d起,每日腹腔注射20 mg/mL AS-1 50 mg/kg;DMSO早期对照组、DMSO晚期对照组小鼠分别自伤后8h、15d起,每日腹腔注射20 mg/mL DMSO 50 mg/kg.伤后21 d,观察烫伤小鼠创面愈合大体情况,计算创面愈合率;取烫伤小鼠创面愈合组织,分别行HE、Masson染色,观察组织形态学变化、胶原纤维化情况,并计算胶原纤维化百分比;取烫伤小鼠创面愈合组织,采用实时荧光定量RT-PCR法检测IL-1β、TNF-α、TGF-β1、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)、结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的mRNA表达,采用蛋白质印迹法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原的蛋白表达.假伤组以与烫伤小鼠观察和取材相同区域的皮肤组织为对象,同期同前进行相关观测.对数据行单因素方差分析、Tukey检验. 结果伤后21 d,假伤组小鼠皮肤组织未见异常;AS-1早期治疗组小鼠创面完全愈合,无瘢痕形成;其余4组小鼠创面均未完全愈合,均伴有不同程度的瘢痕形成.伤后21d,AS-1早期治疗组小鼠创面愈合率为(97±4)％,与假伤组小鼠的100％相近(q=1.753,P＞0.05),均明显高于烫伤组、DMSO早期对照组、AS-1晚期治疗组、DMSO晚期对照组的(83±8)％、(87±6)％、(85±9)％、(85±7)％(q值为4.819 ～6.803,P＜0.05或P＜0.01).伤后21 d,假伤组小鼠皮肤组织形态未见明显异常;AS-1早期治疗组小鼠创面愈合组织形态与假伤组接近,表皮玻璃样变性少,新生胶原纤维较少,排列相对有序;其余4组小鼠创面愈合组织中表皮呈现带状或片状均匀一致的玻璃样变性,胶原纤维增生较为明显,排列紊乱,其中烫伤组有较多炎性细胞浸润.AS-1早期治疗组小鼠创面愈合组织胶原纤维化百分比为(30±3)％,与假伤组的(30±4)％相近(q=0.159,P＞0.05),均明显低于烫伤组、DMSO早期对照组、AS-1晚期治疗组、DMSO晚期对照组的(86±9)％、(74±5)％、(82±4)％、(82±7)％(q值为12.080～15.530,P值均小于0.01).伤后21 d,与假伤组比较,烫伤组小鼠创面愈合组织中IL-1β、TNF-α、TGF-β1、MMP-1、CTGF mRNA,DMSO早期对照组、DMSO晚期对照组小鼠创面愈合组织中TGF-β1mRNA,AS-1晚期治疗组小鼠创面愈合组织中MMP-1 mRNA表达量明显增多(q值为4.039～5.232,P值均小于0.05);烫伤组小鼠创面愈合组织中TIMP-1 mRNA表达量明显减少(q=4.921,P＜0.05).与烫伤组比较,AS-1早期治疗组小鼠创面愈合组织中IL-1β、TNF-α、TGF-β1、MMP-1、CTGFmRNA及AS-1晚期治疗组小鼠创面愈合组织中IL-1β、CTGF mRNA表达量明显减少(q值为4.418 ～6.402,P＜0.05或P＜0.01),AS-1早期治疗组和AS-1晚期治疗组小鼠创面愈合组织中TIMP-1 mRNA表达量明显增多(q值分别为3.929、8.299,P＜0.05或P＜0.01).与假伤组比较,其余各组小鼠创面愈合组织中Ⅲ型胶原mRNA及蛋白,烫伤组、DMSO早期对照组、AS-1晚期治疗组、DMSO晚期对照组小鼠创面愈合组织中Ⅰ型胶原mRNA及蛋白表达量均明显增多(q值为7.054 ～ 11.650,P值均小于0.O1).与AS-1早期治疗组比较,烫伤组、DMSO早期对照组、AS-1晚期治疗组、DMSO晚期对照组小鼠创面愈合组织中Ⅰ型胶原mRNA及蛋白表达量明显增多(q值为5.156～7.451,P＜0.05或P ＜0.01). 结论在小鼠深Ⅱ度烫伤后早期炎症反应阶段进行AS-1干预,可有效促进创面愈合并减轻纤维化程度,可能与其降低炎症反应相关因子IL-1β、TNF-α和纤维化相关因子TGF-β,、MMP-1、CTGF以及Ⅰ型胶原的表达有关.

关键词：烧伤伤口愈合纤维化瘢痕氢化肉桂基-L-缬氨酰吡咯烷炎症反应

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