检索结果-内蒙古大学图书馆

中华肿瘤杂志 1999年第4期21卷 278-280页

作者：杨文涛许良中张泰明朱伟萍李小妹金爱萍何开玲上海医科大学肿瘤医院分子病理研究室 200032

目的　探讨乳腺癌中端粒酶活性的意义及其与腋窝淋巴结状态的关系。方法　用建立在多聚酶链反应（ＰＣＲ）基础上的端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ），对８８例乳腺癌和１６例乳腺良性疾病进行端粒酶活性检测。结果　８８例乳腺癌... 详细信息

目的　探讨乳腺癌中端粒酶活性的意义及其与腋窝淋巴结状态的关系。方法　用建立在多聚酶链反应（ＰＣＲ）基础上的端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ），对８８例乳腺癌和１６例乳腺良性疾病进行端粒酶活性检测。结果　８８例乳腺癌中，７５例（８５２％）检测到端粒酶活性（其中３例导管内癌端粒酶均为阳性），而在１６例乳腺良性疾病中仅２例（１２５％）端粒酶阳性，两组的差异有显著性（Ｐ＜０００１）。此外，端粒酶活性在淋巴结阳性的乳腺癌（９３２％）中显著高于淋巴结阴性者（７７３％，Ｐ＜００５）。结论　端粒酶活化在乳腺癌的发生过程中起重要作用，且有可能成为乳腺癌发生的早期指标。

关键词：乳腺癌端粒酶病理学 TRAP

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PCR克隆技术构建抑癌基因NOEY2真核表达载体

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癌症 2001年第1期20卷 99-100页

作者：施宗高许良中药锦娟杨文涛朱伟萍上海医科大学肿瘤医院分子病理研究室上海200032

在肿瘤分子生物学研究中，经常需要对PCR产物进行克隆，其最基本目的是为被检测的基因留下一份硬拷贝。基于PCR的克隆方法很多，最常被提到的策略是预先于引物的5′端设置限制性酶切位点，PCR产物经酶切后再与线性化的载体相连接[1，2]... 详细信息

在肿瘤分子生物学研究中，经常需要对PCR产物进行克隆，其最基本目的是为被检测的基因留下一份硬拷贝。基于PCR的克隆方法很多，最常被提到的策略是预先于引物的5′端设置限制性酶切位点，PCR产物经酶切后再与线性化的载体相连接[1，2]。但是，某些常用的限制性内切酶对线性PCR产物双链末端的位点识别和切割效率很差，这一路线有时难以实现[3]。最近我们利用这种方法构建最新报道的抑癌基因NOEY2的真核表达质粒失败后，改用T/A策略作为过渡,很快获得成功,现介绍如下。1 材料与方法1.1 主要材料、试剂及设备 Raji细胞株和大肠杆菌DH5α由本室保种。总RNA提取试剂Trizol，购自Gibcol BRL公司。逆转录PCR试剂：MMLV、RNasin、OligodT、dNTP、Taq DNA聚合酶、琼脂糖、T4DNA连接酶、pGEMT载体均购自Promega公司。真核表达载体pc DNA3来自Invitrogen公司。引物合成：北京赛百胜公司。凝胶DNA纯化试剂盒QIAEXII购自Qiagen公司。PE9700型热循环仪、ABI310型自动DNA测序仪及测序试剂(BigDye Terminator Kit等)，均为Perkin-Elmer公司产品。

关键词： PCR克隆 NOEY2基因真核表达载体抑癌基因

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500例良恶性肿瘤ICM-DNA分析研究

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癌症 1999年第4期18卷 385-388,391页

作者：许良中周晓燕杨文涛朱伟萍施宗高李小秋上海医科大学肿瘤医院分子病理研究室上海200032

目的：观察各种恶性肿瘤及相应良性病变中ＤＮＡ含量及倍体的变化，分析其对诊断、分级和预后判断的价值。方法：利用ＤＩＰＡＳ２００生物图像处理分析系统，对常见恶性肿瘤及其良性病变共５００例作ＩＣＭ ＤＮＡ... 详细信息

目的：观察各种恶性肿瘤及相应良性病变中ＤＮＡ含量及倍体的变化，分析其对诊断、分级和预后判断的价值。方法：利用ＤＩＰＡＳ２００生物图像处理分析系统，对常见恶性肿瘤及其良性病变共５００例作ＩＣＭ ＤＮＡ分析研究。结果：（１）宫颈鳞癌、卵巢常见恶性肿瘤（浆液性及粘液性囊腺癌）、滤泡性淋巴瘤的ＤＮＡ含量和超二倍体率均显著高于相应起源组织或良性肿瘤；（２）结直肠高分化腺癌与良性病变之间、各种类型甲状腺癌与正常甲状腺滤泡上皮和良性肿瘤之间的ＤＮＡ含量和倍体无显著差异；（３）乳腺浸润性导管癌、宫颈鳞癌、结直肠腺癌的分化程度越低，ＤＮＡ含量均越高，超二倍体率也越高。结论：ＩＣＭ ＤＮＡ检测能在定量水平分析肿瘤，可有助于良恶性肿瘤的鉴别，特别是对一些交界性肿瘤和临床疑难病例的诊断可提供有价值的参考指标，ＤＮＡ含量和ＤＮＡ倍体特征与某些恶性肿瘤的分化状态有关。

关键词： ICM-DNA分析肿瘤 DNA含量倍体诊断

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基因免疫抗肿瘤研究进展

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癌症 2000年第6期19卷 611-613页

作者：施宗高许良中上海医科大学肿瘤医院分子病理研究室上海200032

基因免疫(Geneticimmunization)是一门新兴的分子生物学和免疫学相结合的技术,它利用基因重组技术将编码抗原的目的基因通过一定方法导入体内,并表达相应的蛋白产物,从而诱导机体产生特异性免疫应答.与基因免疫同义或相近的术语还有DNA... 详细信息

基因免疫(Geneticimmunization)是一门新兴的分子生物学和免疫学相结合的技术,它利用基因重组技术将编码抗原的目的基因通过一定方法导入体内,并表达相应的蛋白产物,从而诱导机体产生特异性免疫应答.与基因免疫同义或相近的术语还有DNA疫苗、核酸免疫、体细胞转基因免疫等.基因免疫研究目前主要活跃于感染性疾病防治领域,流感病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、结核杆菌、疟原虫等均已有DNA疫苗出现.

关键词：基因免疫治疗淋巴瘤结肠癌乳腺癌

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甲诺孕酮和屈洛昔芬对K562/A02细胞株多种耐药机制的调节

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中华血液学杂志 1999年第6期20卷 288-291页

作者：李杰许良中何开玲朱雄增郑云红夏鹏陈瑛上海医科大学肿瘤医院分子病理研究室上海医科大学有机化学合成教研室

目的研究甲诺孕酮（ＮＯＭ）和屈洛昔芬（ＤＲＯ）对Ｋ５６２／Ａ０２细胞株耐药基因ｍｄｒ１、谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴπ）、拓扑异构酶Ⅱα（ＴｏｐｏⅡα）和多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）的调节。方法应用细胞培养技术，采用ＭＴ... 详细信息

目的研究甲诺孕酮（ＮＯＭ）和屈洛昔芬（ＤＲＯ）对Ｋ５６２／Ａ０２细胞株耐药基因ｍｄｒ１、谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴπ）、拓扑异构酶Ⅱα（ＴｏｐｏⅡα）和多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）的调节。方法应用细胞培养技术，采用ＭＴＴ比色法、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应和流式细胞术分析。结果ＮＯＭ和ＤＲＯ均可明显提高Ｋ５６２／Ａ０２细胞株对阿霉素（ＡＤＭ）的敏感性，增加细胞内ＡＤＭ积累量。可显著下调ｍｄｒ１、ＧＳＴπ的ｍＲＮＡ和蛋白表达，明显上调ＴｏｐｏⅡα基因表达。Ｋ５６２敏感株的ＧＳＴπ基因表达同样被抑制。都具有明显的时间依赖性。ＭＲＰ基因表达的变化差异无统计学意义。结论ＮＯＭ和ＤＲＯ可明显逆转Ｋ５６２／Ａ０２细胞株对ＡＤＭ的耐药性。ＮＯＭ与异搏定逆转强度相似；两药对ｍｄｒ１、ＧＳＴπ和ＴｏｐｏⅡα基因表达均有明显调节作用。调节呈时间依赖性。

关键词：甲诺孕酮屈洛昔芬 K562细胞系 MDR 多药耐药

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套细胞淋巴瘤研究进展

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实用肿瘤杂志 1998年第1期13卷 2-4页

作者：许良中杨文涛上海医科大学附属肿瘤医院分子病理研究室

在不同的分类系统中，套细胞淋巴瘤有许多不同名称。Ｋｉｅｌ分类将其命名为“中心细胞性淋巴瘤”；在美国，许多血液病理学家采用Ｂｅｒａｒｄ和Ｄｏｒｆｍａｎ的命名：即中间淋巴细胞性淋巴瘤；Ｗｅｉｓｅｎｂｕｒｇｅｒ将正常生发中... 详细信息

在不同的分类系统中，套细胞淋巴瘤有许多不同名称。Ｋｉｅｌ分类将其命名为“中心细胞性淋巴瘤”；在美国，许多血液病理学家采用Ｂｅｒａｒｄ和Ｄｏｒｆｍａｎ的命名：即中间淋巴细胞性淋巴瘤；Ｗｅｉｓｅｎｂｕｒｇｅｒ将正常生发中心外套区扩大所形成的结节性肿瘤命名...

关键词：淋巴瘤套细胞淋巴瘤形态学免疫表型治疗

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bcl-2基因家族在紫杉醇介导BJAB细胞凋亡中的作用

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中华肿瘤杂志 2000年第6期22卷 453-455,I014页

作者：周晓燕许良中何开玲张太明朱伟萍李小妹金爱萍上海医科大学肿瘤医院分子病理研究室 200032 上海医科大学生物化学教研室

目的　观察抗微管新药紫杉醇对B细胞淋巴瘤细胞株BJAB是否具有凋亡诱导作用 ,并进一步研究bcl 2基因家族在此过程中的作用。方法　将不同浓度的紫杉醇作用于BJAB细胞 ,观察其作用的时间效应及剂量效应 ;在光镜和电镜下观察其形态变化 ;... 详细信息

目的　观察抗微管新药紫杉醇对B细胞淋巴瘤细胞株BJAB是否具有凋亡诱导作用 ,并进一步研究bcl 2基因家族在此过程中的作用。方法　将不同浓度的紫杉醇作用于BJAB细胞 ,观察其作用的时间效应及剂量效应 ;在光镜和电镜下观察其形态变化 ;用流式细胞仪分析细胞DNA含量的改变并做DNA片段分析 ;用免疫组织化学及半定量RT PCR法观察在紫杉醇作用过程中bcl 2基因家族的蛋白及mRNA的变化。结果　紫杉醇能抑制BJAB细胞生长 ,抑制作用首先表现为G2 /M期阻滞 ,一定时间后出现细胞凋亡 ,并显示剂量和时间效应。在这一过程中 ,bcl 2转录及蛋白表达下降 ,并出现bcl xs的转录。结论　紫杉醇可诱导BJAB细胞凋亡 ,这为其应用于B细胞淋巴瘤的治疗提供依据。bcl 2和bcl

关键词： bcl-2基因紫杉醇 BJABB细胞株细胞凋亡

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用PCR方法检测B细胞淋巴瘤克隆性IgH基因重排

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上海医科大学学报 1999年第2期26卷 141-145,145页

作者：田晓峰许良中朱伟萍张泰明李小妹金爱萍何开玲上海医科大学肿瘤医院分子病理研究室

用ＰＣＲ方法检测克隆性ＩｇＨ基因重排正在成为Ｂ细胞淋巴瘤基因诊断的有效手段。与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析法相比，前者有明显的优点：快速简便，标本用量少并可用于石蜡切片，无放射性危害等。ＰＣＲ所用引物是辨认ＩｇＨ基因可变区（... 详细信息

用ＰＣＲ方法检测克隆性ＩｇＨ基因重排正在成为Ｂ细胞淋巴瘤基因诊断的有效手段。与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析法相比，前者有明显的优点：快速简便，标本用量少并可用于石蜡切片，无放射性危害等。ＰＣＲ所用引物是辨认ＩｇＨ基因可变区（Ｖ）和连接区（Ｊ）中存在的相对保守...

关键词：淋巴瘤 B细胞淋巴瘤 IgH基因基因重排 PCR

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PCR检测恶性淋巴瘤基因重排的方法学探讨

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实用肿瘤杂志 1999年第3期14卷 180-181页

作者：田晓峰许良中何开玲朱伟萍张泰明李小妹金爱萍上海医科大学肿瘤医院分子病理研究室

恶性淋巴瘤（ＭＬ）的诊断是当今肿瘤病理学上最感棘手的问题。除形态学和免疫组织化学外，分子水平的诊断已日益显示出重要作用。ＭＬ中出现克隆性的免疫球蛋白（Ｉｇ）或Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排已为大家所熟悉，并被用于淋巴瘤... 详细信息

恶性淋巴瘤（ＭＬ）的诊断是当今肿瘤病理学上最感棘手的问题。除形态学和免疫组织化学外，分子水平的诊断已日益显示出重要作用。ＭＬ中出现克隆性的免疫球蛋白（Ｉｇ）或Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排已为大家所熟悉，并被用于淋巴瘤的辅助诊断。基因重排经典的检测方法...

关键词：恶性淋巴瘤基因重排聚合酶链反应

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102例乳腺癌中的EB病毒感染

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上海医科大学学报 1998年第3期25卷 175-178页

作者：杨文涛许良中张泰明朱伟萍李小妹金爱萍上海医科大学肿瘤医院分子病理研究室

目的探讨国人乳腺癌中ＥＢ病毒ＤＮＡ（ＥＢＶ－ＤＮＡ）的检出率及ＥＢ病毒（ＥＢＶ）基因编码蛋白的表达情况。方法（１）在１０２例乳腺癌中用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增ＥＢＶ内部重复序列ＢａｍＨＩＷ区域，并以３４例乳腺纤... 详细信息

目的探讨国人乳腺癌中ＥＢ病毒ＤＮＡ（ＥＢＶ－ＤＮＡ）的检出率及ＥＢ病毒（ＥＢＶ）基因编码蛋白的表达情况。方法（１）在１０２例乳腺癌中用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增ＥＢＶ内部重复序列ＢａｍＨＩＷ区域，并以３４例乳腺纤维腺瘤，３例管内乳头状瘤和１０例乳腺导管上皮增生作为对照组；（２）用ＡＢＣ免疫组织化学技术检测其中７３例乳腺癌中的ＥＢＶ潜在膜蛋白（ＬＭＰ）和ＥＢＶ核抗原２（ＥＢＮＡ２）。结果（１）ＰＣＲ检测显示２９例（２８．４％）乳腺癌有ＥＢＶ－ＤＮＡ，而对照组中仅２例（４．３％）纤维腺瘤有ＥＢＶ－ＤＮＡ，两组的差异在统计学上有显著意义（Ｐ＜０．００１）；（２）免疫组化技术显示ＬＭＰ和ＥＢＮＡ２阳性率分别为１３．７％和１７．８％，且阳性物质定位于肿瘤细胞，而非肿瘤中浸润的淋巴细胞。结论ＥＢＶ感染与乳腺癌的发病可能有一定关系，明确ＥＢＶ感染在乳腺癌发病机制中的作用将有十分积极的意义。

关键词：乳腺癌 EB病毒聚合酶链反应免疫组织化学

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