检索结果-内蒙古大学图书馆

介入放射学杂志 2009年第12期18卷 920-922页

作者：张庆勇王志华李晓波殷莲华李京波魏盟上海交通大学附属第六人民医院心内科 200233 复旦大学上海医学院生理与病理生理教研室

目的应用微导管介入技术建立可随访的冠状动脉微栓塞动物模型。方法10只巴马系小型猪经导管选择性的于前降支(LAD)内注入15×104个微栓塞球(直径45μm),致使冠状动脉微血管栓塞。分别测量冠脉血流储备分数(CFR)和左室射血分数(LVEF)... 详细信息

目的应用微导管介入技术建立可随访的冠状动脉微栓塞动物模型。方法10只巴马系小型猪经导管选择性的于前降支(LAD)内注入15×104个微栓塞球(直径45μm),致使冠状动脉微血管栓塞。分别测量冠脉血流储备分数(CFR)和左室射血分数(LVEF);心肌组织切片染色和超微结构变化观察;及术后1个月再行血管造影及CFR测量等检验。结果冠脉内注射微栓塞球可导致微血管完整性的破坏(CFR<2.0)及左室功能障碍(LVEF<50%)。组织切片NBT和HE染色均证实存在微血管栓塞;透射电镜微梗塞区心肌细胞水肿、纤维化明显;术后动物存活率高(n=10),且可再行经皮血管造影及CFR的测量。结论应用微导管介入技术可建立创伤小、死亡率低并可长期随访观察的小型猪冠状动脉微栓塞模型。是临床研究冠脉微血管栓塞发病机制的理想动物模型。

关键词：微栓塞血管内介入动物模型小型猪

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显性负突变存活素质粒的构建

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基础医学与临床 2009年第2期29卷 188-192页

作者：蔡文杰王铭洁张宇玲琚立华朱依纯上海理工大学医疗器械与食品学院基础医学教研室上海200093 复旦大学上海医学院生理与病理生理学系上海200032

目的构建显性负突变存活素质粒。方法从大鼠心脏微血管内皮细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,利用巢式PCR扩增存活素基因全序列,并引入酶切位点,利用重叠PCR对存活素基因进行定点突变,然后与带绿色荧光的真核表达载体pEGFP-N3进行重组,... 详细信息

目的构建显性负突变存活素质粒。方法从大鼠心脏微血管内皮细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,利用巢式PCR扩增存活素基因全序列,并引入酶切位点,利用重叠PCR对存活素基因进行定点突变,然后与带绿色荧光的真核表达载体pEGFP-N3进行重组,经测序鉴定后转染细胞,观察对细胞凋亡的影响。结果用巢式PCR扩增出含存活素基因的496 bp产物,和引入酶切位点后的452 bp产物。通过重叠PCR 3次PCR反应,得到452 bp大小的定点突变产物。重组载体经测序鉴定表明插入片段无误,转染细胞后能发出明亮的绿色荧光,Hochest染色显示细胞凋亡比空质粒对照组显著。结论成功构建了显性负突变存活素质粒。

关键词：显性负突变存活素重叠PCR

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活化大鼠肝星状细胞的蛋白质表达谱

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中华肝脏病杂志 2009年第12期17卷 921-924页

作者：季菊玲张锦生王雪晴季煜华南通大学医学院病理学教研室 226001 复旦大学上海医学院病理学系暨南大学组织移植与免疫中心

目的用在线二维纳升高效液相结合串联质谱（2D nanoLC—MS／MS）技术分析体外培养大鼠原代肝星状细胞（HSC）的蛋白质表达谱。方法分离培养大鼠原代HSC，取体外培养第10天自动活化的大鼠HSC总蛋白质，通过2D nanoLC—MS／MS对酶解所获... 详细信息

目的用在线二维纳升高效液相结合串联质谱（2D nanoLC—MS／MS）技术分析体外培养大鼠原代肝星状细胞（HSC）的蛋白质表达谱。方法分离培养大鼠原代HSC，取体外培养第10天自动活化的大鼠HSC总蛋白质，通过2D nanoLC—MS／MS对酶解所获肽段进行分离和鉴定，并对鉴定的蛋白质进行细胞定位和功能分类。结果从50μg HSC总蛋白质中鉴定出1014种蛋白质，相对分子质量范围为7832～588364；主要分布于细胞核、细胞骨架、线粒体、内质网，分别占25％、17％、13％、13％。蛋白质功能主要与核酸代谢、细胞器组装、信号传导、能量代谢等生理进程有关，分别占17％、14％、10％、9％；其中细胞骨架蛋白α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白和结蛋白是活化大鼠HSC特异性表达的蛋白质。结论本研究获得了目前较为全面的活化大鼠原代HSC的蛋白喷表达谱，为深入研究HSC的活化机制奠定了基础。

关键词：肝星状细胞蛋白质组串联质谱分析二维纳升高效液相

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环孢素A对人滋养细胞nm23-H1表达的调控作用

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中国病理生理杂志 2009年第3期25卷 493-496页

作者：侯晓帆谢可鸣李明清李大金苏州大学医学部病理生理学教研室江苏苏州215123 复旦大学上海医学院附属妇产科医院妇产科研究所上海200011

目的:探讨环孢素A(CsA)对人滋养细胞系Bewo的23号非转移性基因(nometastatic gene 23)H1型即nm23-H1表达的调控作用,为治疗滋养细胞疾病提供新的依据。方法:将Bewo细胞分为对照组(加溶媒)、环孢素组加入终浓度由10-2μmol/L-10μmol/L... 详细信息

目的:探讨环孢素A(CsA)对人滋养细胞系Bewo的23号非转移性基因(nometastatic gene 23)H1型即nm23-H1表达的调控作用,为治疗滋养细胞疾病提供新的依据。方法:将Bewo细胞分为对照组(加溶媒)、环孢素组加入终浓度由10-2μmol/L-10μmol/L环孢素A。分别于48h后用RT-PCR检测nm23-H1基因mR-NA表达水平,于72h后用Incell Western分析nm23-H1蛋白表达水平。结果:与对照组相比,nm23-H1的表达水平随环孢素A浓度10-2μmol/L-1μmol/L呈现降低趋势,其中1.0μmol/L环孢素Anm23-H1 mRNA和蛋白水平均明显降低(P<0.05,P<0.01);当浓度升高至10μmol/L时,nm23-H1则呈升高趋势。结论:低浓度环孢素A可通过降调节nm23-H1的表达,继而改善滋养细胞的侵袭力。

关键词：环孢菌素 nm23-H1 滋养细胞

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nanoLC-ESI/MS/MS在ECV304细胞蛋白质组学研究中的应用

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中国病理生理杂志 2009年第1期25卷 205-208页

作者：李菊玲曾耀英季煜华杜彬复旦大学上海医学院病理学系上海200032 南通大学医学院病理学教研室江苏南通226001 暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632 暨南大学医学院广东广州510632

目的:应用纳升液联用技术(nanoLC-ESI/MS/MS)对ECV304细胞蛋白质组学进行初步分析。方法:提取ECV304细胞总蛋白,经变性、还原、烷基化和酶解,nanoLC-ESI/MS/MS对酶解后的肽段进行分析,数据库(Swissprot)检索鉴定蛋白质,生物信息学工具... 详细信息

目的:应用纳升液联用技术(nanoLC-ESI/MS/MS)对ECV304细胞蛋白质组学进行初步分析。方法:提取ECV304细胞总蛋白,经变性、还原、烷基化和酶解,nanoLC-ESI/MS/MS对酶解后的肽段进行分析,数据库(Swissprot)检索鉴定蛋白质,生物信息学工具对所鉴定的蛋白质进行细胞定位和功能分类。结果:从8μg细胞总蛋白中鉴定了120种蛋白质,所鉴定蛋白质的分子质量(MW)范围从6 648 D至280 739 D,MW<20 kD的蛋白质占24.2%,MW>100 kD的蛋白质占5.0%;主要位于细胞质、细胞骨架、细胞核和细胞膜,分别为27.8%、19.0%、15.2%和10.1%;大多为结构蛋白质和催化活性的蛋白质,分别为36.4%和34.1%,具有信号转导活性的占11.4%;其中角蛋白8、18和vimentin等为内皮细胞特异表达的蛋白质。结论:本研究建立了nanoLC-ESI/MS/MS分析ECV304细胞的蛋白质组学方法,为内皮细胞及内皮细胞损伤机制的蛋白质组学研究奠定了实验基础。

关键词： nanoLC—ESI/MS/MS技术 ECV304细胞蛋白质组

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胱硫醚-γ-裂解酶在三种微血管内皮细胞上的表达

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中国微循环 2009年第4期13卷 227-230,F0002页

作者：蔡文杰王铭洁张宇玲金惠铭朱依纯上海理工大学医疗器械与食品学院基础医学教研室上海200093 复旦大学上海医学院生理与病理生理学系

目的鉴定微血管内皮细胞上是否表达生成硫化氢(H2S)的酶,为深入研究硫化氢的心血管作用提供新线索。方法原代培养大鼠心脏微血管内皮细胞(CMEC),设计相应引物后用RT-PCR的方法检测胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因转... 详细信息

目的鉴定微血管内皮细胞上是否表达生成硫化氢(H2S)的酶,为深入研究硫化氢的心血管作用提供新线索。方法原代培养大鼠心脏微血管内皮细胞(CMEC),设计相应引物后用RT-PCR的方法检测胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因转录情况,进一步用兔抗大鼠CSE和CBS多克隆抗体对CMEC进行蛋白水平的免疫荧光染色。此外对另两种微血管内皮细胞株RF/6A和bEnd.3也检测了H2S生成酶的表达。结果三种微血管内皮细胞都扩增出CSE基因的特异条带,而CBS基因都未扩增出相应产物。CMEC的免疫荧光染色显示CSE抗体染色为阳性,CBS抗体染色为阴性。结论首次发现了微血管内皮细胞上存在CSE的表达,提示内皮细胞可以通过生成硫化氢调节心血管活动。

关键词：硫化氢胱硫醚-γ-裂解酶微血管内皮细胞

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脑胶质瘤中FHIT、PTEN和VEGF基因表达的研究

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黑龙江医药科学 2009年第6期32卷 58-59页

作者：邵馨陶丽丽解晶心南京中医药大学附属常州市中医院病理科江苏常州213003 复旦大学上海医学院病理生理学教研室上海201100

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,预后较差,对传统放化疗不敏感[1],对周围脑组织有高度侵袭性,使得手术效果不尽人意。脆性组氨酸三联体基因(F rag ile h isti-d ine triad,FH IT)是O h ta[2]等于1996年从上皮癌细胞系中克隆出... 详细信息

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,预后较差,对传统放化疗不敏感[1],对周围脑组织有高度侵袭性,使得手术效果不尽人意。脆性组氨酸三联体基因(F rag ile h isti-d ine triad,FH IT)是O h ta[2]等于1996年从上皮癌细胞系中克隆出的一个候选抑癌基因,定位于染色体3p14.2,在人类多种肿瘤组织中该基因表达均下降。[第一段]

关键词：胶质瘤 FHIT PTEN VEGF 免疫组化

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乙型肝炎病毒感染在IgA肾病发病中的作用的进一步研究

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中国中西医结合肾病杂志 2009年第2期10卷 127-130页

作者：汪年松吴兆龙张月娥上海交通大学附属第六人民医院肾内科上海200233 复旦大学附属中山医院肾内科上海200032 复旦大学上海医学院病理学教研室上海200032

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染与IgA肾病发病的关系。方法:采用免疫组化技术检测168例IgA肾病患者肾组织中HBV抗原(HBAg),应用原位分子杂交技术和Southern印迹杂交技术检测95例IgA肾病患者肾组织中HBVDNA。结果:168例IgA肾病患者中,血... 详细信息

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染与IgA肾病发病的关系。方法:采用免疫组化技术检测168例IgA肾病患者肾组织中HBV抗原(HBAg),应用原位分子杂交技术和Southern印迹杂交技术检测95例IgA肾病患者肾组织中HBVDNA。结果:168例IgA肾病患者中,血清HBsAg阳性32例(19.05%);肾组织HBAg阳性59例(35.12%),HBAg在肾小球中阳性率为30.36%(51/168),其中HBsAg为27.98%(47/168),HBcAg为24.40%(41/168);除了肾小球,HBsAg和HBcAg肾小管上皮细胞亦有阳性沉积,分别为44例(26.19%)和48例(28.57%);Southern印迹杂交证实在95例患者肾组织中46例有整合型HBV DNA,阳性率为48.42%;原位分子杂交证实95例患者肾组织HBV DNA阳性率为52.63%(50/95),其中肾小管上皮细胞、肾小球细胞和肾间质浸润的淋巴细胞HBV DNA阳性率分别为49.47%(47/95)、45.26%(43/95)和33.68%(32/95);其中18例患者肾组织中HBV DNA同时定位于肾小管上皮细胞、肾小球系膜细胞和少数间质淋巴细胞的细胞核中。结论:除了HBV抗原、抗体复合物所致体液免疫损伤外,也要考虑肾组织直接感染HBV,并参与了IgA肾病的发病。

关键词：肾小球肾炎 IgA肾病乙型肝炎病毒抗原病毒脱氧核糖核酸病毒

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运动训练改善脑缺血大鼠梗死体积与神经行为能力的实验研究

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中国康复医学杂志 2008年第2期23卷 100-102页

作者：徐丽丽白玉龙胡永善吴毅崔晓朱大年复旦大学附属华山医院康复医学科复旦大学上海医学院康复与运动医学系上海市200040 上海长宁区天山中医院复旦大学上海医学院生理和病理生理实验室复旦大学附属华山医院康复医学科

目的:观察运动训练能否促进大鼠局部脑缺血再灌注后的神经功能恢复,并且观察早期运动训练对脑缺血再灌注后梗死体积的影响,从而探讨其促进功能恢复的机制。方法:成年雄性SD大鼠24只,随机分成运动训练组、对照组和假手术组,每组8只。大... 详细信息

目的:观察运动训练能否促进大鼠局部脑缺血再灌注后的神经功能恢复,并且观察早期运动训练对脑缺血再灌注后梗死体积的影响,从而探讨其促进功能恢复的机制。方法:成年雄性SD大鼠24只,随机分成运动训练组、对照组和假手术组,每组8只。大脑中动脉闭塞(MCAO)法造模24h后,运动训练组给予跑台训练,每天30min,连续训练2周,对照组及假手术组给予相同的抓取和固定。采用神经行为学评分评价造模情况及神经功能的恢复情况;甲苯胺蓝染色观察大鼠局部脑缺血再灌注后梗死体积的大小。结果:2周后,运动训练组的神经行为学评分明显高于对照组(P<0.05),并低于假手术组(P<0.05);运动训练组的脑梗死体积明显小于对照组(P<0.05)。结论:脑缺血再灌注后早期运动训练能够减小脑梗死体积,促进脑缺血大鼠神经功能的恢复。

关键词：脑缺血再灌注运动训练梗死体积

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甲状腺乳头状癌组织中线粒体DNA含量的变化

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复旦学报（医学版） 2008年第5期35卷 635-640页

作者：孙团起边建超朱晓丽李端树王卓颖吴毅复旦大学附属肿瘤医院头颈外科-复旦大学上海医学院肿瘤学系上海200032 复旦大学公共卫生学院流行病学教研室上海200032 复旦大学附属肿瘤医院病理科上海200032

目的探讨线粒体DNA(mtDNA)含量变化在甲状腺乳头状癌发生中的作用及其意义。方法应用Taq Man实时荧光定量聚合酶链反应检测29例甲状腺乳头状癌,14例甲状腺腺瘤,11例结节性甲状腺肿及其配对正常甲状腺组织的mtDNA含量变化,并结合甲状腺... 详细信息

目的探讨线粒体DNA(mtDNA)含量变化在甲状腺乳头状癌发生中的作用及其意义。方法应用Taq Man实时荧光定量聚合酶链反应检测29例甲状腺乳头状癌,14例甲状腺腺瘤,11例结节性甲状腺肿及其配对正常甲状腺组织的mtDNA含量变化,并结合甲状腺乳头状癌主要临床病理参数进行分析。结果(1)29例甲状腺乳头状癌中mtDNA相对含量为224.13±217.24;配对癌旁正常甲状腺组织mtDNA相对含量为88.69±44.06,两者差异显著(P<0.01)。与癌旁正常甲状腺组织相比,甲状腺乳头状癌中mtDNA含量增加、无明显变化和减少的比例为21∶2∶6。(2)25例甲状腺良性病变中mtDNA相对含量为129.48±105.27;配对瘤旁正常甲状腺组织mtDNA相对含量为89.44±29.75,两者无显著差异,但低于甲状腺乳头状癌组(P<0.05)。(3)甲状腺良性病变中,甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿的mtDNA含量差别无统计学意义。(4)甲状腺乳头状癌的mtDNA含量变化与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移等临床病理参数无关(P>0.05)。结论mtDNA含量增加与甲状腺乳头状癌发生有关,但与其临床病理参数未见相关性,是肿瘤发生的早期事件。

关键词：甲状腺肿瘤线粒体DNA含量聚合酶链反应

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