检索结果-内蒙古大学图书馆

优化反向PCR法对hTF转基因小鼠整合位点旁侧序列分析

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中国医药生物技术 2011年第3期6卷 228-232页

作者：谢俊许淼龚秀丽曲立娟颜景斌黄英上海交通大学医学院 200025 上海市儿童医院上海医学遗传研究所/卫生部医学胚胎与分子生物学重点实验室暨上海市胚胎与生殖工程重点实验室 200040

自1982年世界上首次通过转基因动物技术获得＂巨鼠＂[1]以来,转基因动物的研究发展迅速。随着多种转基因动物的成功获得,研究者设想利用动物表达外源基因,以动物个体作为一个反应器来生产有价值的蛋白质。

关键词：转基因小鼠序列分析整合位点 PCR法转基因动物技术 hTF 优化外源基因

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多发畸形患儿t（3;12;15）复杂易位核型分析一例

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中华检验医学杂志 2010年第12期33卷 1188-1189页

作者：管翌华孙恒娟任兆瑞黄英上海交通大学医学遗传研究所 200040 上海市儿童医院分子医学实验室

染色体畸变是导致自然流产、死胎和畸形儿的重要病因之一[1].细胞遗传学检查发现,最常见的染色体结构变异包括缺失（deletion）、重复（duplication）、倒位（inversion）和易位（translocation）.本研究报道1例多发畸形患儿复杂易位核... 详细信息

染色体畸变是导致自然流产、死胎和畸形儿的重要病因之一[1].细胞遗传学检查发现,最常见的染色体结构变异包括缺失（deletion）、重复（duplication）、倒位（inversion）和易位（translocation）.本研究报道1例多发畸形患儿复杂易位核型分析.

关键词：复杂易位畸形患儿核型分析多发细胞遗传学检查染色体畸变自然流产结构变异

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奶牛体外受精胚胎的性别控制研究

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中国畜牧兽医 2010年第11期37卷 119-122页

作者：李晓晨李华蔡勤曹辉黄英上海交通大学附属儿童医院上海医学遗传研究所上海200040 上海交通大学医学院上海200025 卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室暨上海市胚胎与生殖工程重点实验室上海200040

为加速母牛胚胎的生产,实现性控制胚胎产业化和体外扩繁优质品种的奶业工程发展,本研究在体外受精技术(invitro fertilization,IVF)不断成熟和完善的基础上,通过对牛非性控IVF胚胎与常规人工受精体内胚胎移植的妊娠成功率及其两者出生... 详细信息

为加速母牛胚胎的生产,实现性控制胚胎产业化和体外扩繁优质品种的奶业工程发展,本研究在体外受精技术(invitro fertilization,IVF)不断成熟和完善的基础上,通过对牛非性控IVF胚胎与常规人工受精体内胚胎移植的妊娠成功率及其两者出生后牛的性别比例进行比较分析,结果发现,两组妊娠成功率基本相同,且IVF胚胎出生的公牛比例高于体内胚;采用性控和非性控精液进行IVF试验,并对非性控IVF胚胎及性控IVF胚胎用牛Y染色体性别决定特异基因(SRY)核心序列进行分子生物学性别鉴定,结果显示,性控IVF胚胎的公牛比例显著低于普通IVF胚胎;此外,作者还比较了性控IVF与普通非性控IVF的囊胚发育率,结果显示两者并无显著差异。以上研究结果证明,体外扩繁优质良种母牛的奶业工程必须依靠性别控制体外授精技术来提高其效率和有效性。

关键词：牛体外扩繁技术体外受精胚胎移植性别控制

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极小胚胎样干细胞的生物学特性

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医学分子生物学杂志 2010年第2期7卷 155-158页

作者：陈欣黄淑帧上海市儿童医院上海交通大学医学遗传研究所上海市200040

近年来，研究者从小鼠骨髓和其他组织脏器中分离并纯化了一类数量极其稀少的极小胚胎样干细胞（very small embryonic—like stem cells，VSELs）。VSELs不仅表达多能干细胞的表面分子标记，并能向3个胚层方向分化。有学者推测，VSELs... 详细信息

近年来，研究者从小鼠骨髓和其他组织脏器中分离并纯化了一类数量极其稀少的极小胚胎样干细胞（very small embryonic—like stem cells，VSELs）。VSELs不仅表达多能干细胞的表面分子标记，并能向3个胚层方向分化。有学者推测，VSELs可能是在哺乳动物组织／器官的发育早期迁移并定居下来的，且能在特定情况下向组织特异的单潜能干细胞方向分化。据此，VSELs可能在成体组织的更新和损伤组织的再生修复过程中发挥重要作用。

关键词：极小胚胎样干细胞潜能干细胞原始生殖干细胞

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应用实时荧光定量PCR测定牛体细胞端粒长度

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中国畜牧兽医 2010年第9期37卷 154-158页

作者：吕昆林丹许淼朱怡文黄英上海交通大学医学院上海市儿童医院上海医学遗传研究所卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室上海市生殖与胚胎工程重点实验室上海200040

本研究为了验证应用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative PCR,Q-PCR)测定牛基因组端粒长度的可行性,选取18个不同来源牛耳成纤维细胞抽提基因组DNA为样本,对Q-PCR和经典的Southern印迹法进行了相关性分析。结果显示,Q-PCR测定端粒长... 详细信息

本研究为了验证应用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative PCR,Q-PCR)测定牛基因组端粒长度的可行性,选取18个不同来源牛耳成纤维细胞抽提基因组DNA为样本,对Q-PCR和经典的Southern印迹法进行了相关性分析。结果显示,Q-PCR测定端粒长度相对T/S为1.16±0.24,Southern印迹法测量端粒平均TRF值为16.99 kb±0.85 kb,两种方法获得的结果相关性分析R2=0.5612(P<0.01),因此实时荧光定量PCR是一种测定牛基因组端粒长度的可靠的方法。

关键词：荧光定量聚合酶链式反应印迹法牛体细胞端粒长度

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重组转铁蛋白的研究进展

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中国医药生物技术 2010年第6期5卷 451-454页

作者：谢俊黄英上海交通大学医学院 200025 上海市儿童医院上海医学遗传研究所 200040

转铁蛋白家族存在于脊椎和无脊椎动物中。该家族蛋白是由血清转铁蛋白、卵转铁蛋白、乳转铁蛋白、黑色素转铁蛋白、碳酸酐酶抑制因子等构成[1]。血清转铁蛋白（serum transferrin）在人、罗猴、狗、猫、兔、荷兰猪、小鼠、大鼠、奶牛、... 详细信息

转铁蛋白家族存在于脊椎和无脊椎动物中。该家族蛋白是由血清转铁蛋白、卵转铁蛋白、乳转铁蛋白、黑色素转铁蛋白、碳酸酐酶抑制因子等构成[1]。血清转铁蛋白（serum transferrin）在人、罗猴、狗、猫、兔、荷兰猪、小鼠、大鼠、奶牛、绵羊、山羊、马、火鸡、鸭、海龟和响尾蛇中均有存在，丰要由肝细胞合成，分布在胆汁、羊水、脑脊液、淋巴液、初乳和乳汁中，但血浆中含量最高（2．5g／L），

关键词：血清转铁蛋白无脊椎动物重组家族蛋白肝细胞合成抑制因子碳酸酐酶黑色素

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一种快捷可靠评价链霉菌噬菌体准ФC31整合酶功能的双荧光报告系统(英文)

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生物化学与生物物理进展 2009年第7期36卷 929-933页

作者：徐焕宇马晴雯任兆瑞巩芷娟黄淑帧曾凡一曾溢滔上海交通大学附属上海市儿童医院上海医学遗传研究所上海200040 上海交通大学医学科学院上海200025 卫生部胚胎与分子生物学重点实验室上海200040

在NIH3T3细胞中构建了一种链霉菌噬菌体准ФC31整合酶报告系统.该报告载体同时编码红色荧光蛋白和绿色荧光蛋白,与编码准ФC31整合酶的载体共转染可以反映准ФC31整合酶的活性.细胞中从红色荧光到绿色荧光的变化和百分比的变化可经流式... 详细信息

在NIH3T3细胞中构建了一种链霉菌噬菌体准ФC31整合酶报告系统.该报告载体同时编码红色荧光蛋白和绿色荧光蛋白,与编码准ФC31整合酶的载体共转染可以反映准ФC31整合酶的活性.细胞中从红色荧光到绿色荧光的变化和百分比的变化可经流式细胞仪检出.随着转染中准ФC31整合酶表达载体的比例升高,表达绿色荧光的细胞比例上升.准ФC31整合酶表达载体和报告系统载体比例在10∶1时,可达最高约90%的红绿荧光转变率.这表明该准ФC31整合酶报告系统提供了一种在细胞中快捷可靠的评价准ФC31整合酶功能的方法.

关键词： ФC31整合酶报告系统位点特异性重组 NIH3T3细胞系

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流式细胞术检测人／山羊嵌合体中人源细胞方法的建立与应用

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中华检验医学杂志 2009年第4期32卷 441-445页

作者：王娟陈美珏巩芷娟任兆瑞曾凡一黄淑帧上海交通大学医学院附属上海市儿童医院上海医学遗传研究所 200040 上海交通大学医学院医学科学研究院

目的建立应用流式细胞术检测人／山羊嵌合体中人源细胞的方法。方法通过宫内移植的方法将标记有绿色荧光蛋白（GFP）的人造血干／祖细胞（MIG细胞）移植入胎山羊腹腔内，从而获得人／山羊嵌合体模型（MIG羊）。采集MIG羊的外周血，以数... 详细信息

目的建立应用流式细胞术检测人／山羊嵌合体中人源细胞的方法。方法通过宫内移植的方法将标记有绿色荧光蛋白（GFP）的人造血干／祖细胞（MIG细胞）移植入胎山羊腹腔内，从而获得人／山羊嵌合体模型（MIG羊）。采集MIG羊的外周血，以数十种鼠抗人的抗体标记，筛选出对人源细胞特异性强而与山羊细胞无或仅有微弱交叉反应的抗体，列人流式细胞仪常规检测的首选抗体，继而在非移植山羊的外周血中加入不同比例（25％、50％、75％和100％）的人脐血细胞，用CD34^＋表面抗体标记来观察人脐血细胞和人CD34细胞的分布，以决定“门”的区域和大小；取MIG羊的肝脏，应用流式细胞术检测灌流后肝实质细胞中GFP细胞的比例及DNA含量。结果筛选出CD7、CD15、CD38、CD45、CD20、CD34、CD14和血型糖蛋白A（GPA）等8种单抗作为检测嵌合体中人源细胞的首选抗体；确定了进行流式细胞分析时“门”的大小和区域；MIG羊肝实质细胞中，GFP^＋细胞的比例为29．1％（29100／100000）；DNA含量测定结果显示MIG羊肝组织分选获得的GFP^＋细胞主要呈现2个峰，其位置与人的双峰位置相对应。结论流式细胞术是研究干细胞在体内分化、归巢和生物学特征的快速、简便、有效的方法；表面抗体以及“门”的选择对于准确检测人／山羊嵌合体中人源细胞至关重要。

关键词：流式细胞术造血干细胞移植嵌合体抗原,表面

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应用荧光实时定量PCR方法检测重组慢病毒滴度及其感染效率

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生命科学研究 2009年第5期13卷 394-398页

作者：马海燕方彧聃张敬之上海交通大学医学院上海市儿童医院上海市医学遗传研究所中国上海200040

慢病毒载体已经广泛应用于动物模型中基因治疗的研究和转基因动物的制备,而准确地测定重组慢病毒的滴度和感染效率是其关键步骤.通过荧光实时定量PCR的方法定量分析重组慢病毒的颗粒数以及病毒的活性滴度,并以GFP报告基因的方法作为对... 详细信息

慢病毒载体已经广泛应用于动物模型中基因治疗的研究和转基因动物的制备,而准确地测定重组慢病毒的滴度和感染效率是其关键步骤.通过荧光实时定量PCR的方法定量分析重组慢病毒的颗粒数以及病毒的活性滴度,并以GFP报告基因的方法作为对照来验证定量PCR方法的准确性.研究结果显示,应用荧光实时定量PCR法与GFP报告基因法测定得到的病毒活性滴度成正相关,而且前者可以更加准确地测定病毒滴度和病毒感染效率.

关键词：慢病毒载体荧光实时定量PCR 病毒滴度整合拷贝数感染效率

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遗传变异的又一来源:拷贝数变异

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生物技术通讯 2009年第3期20卷 396-398页

作者：谭琪曾凡一上海交通大学医学院上海医学遗传研究所上海交通大学附属儿童医院上海200040

人们很早就发现DNA拷贝数变异与特定染色体重组和基因组异常相关这一现象,但最近才知道它与疾病的相关联系。我们对拷贝数变异的原理、最新研究方法,及其与复杂疾病的相关性研究等进展进行了综述;总结了拷贝数变异研究所存在的问题;对... 详细信息

人们很早就发现DNA拷贝数变异与特定染色体重组和基因组异常相关这一现象,但最近才知道它与疾病的相关联系。我们对拷贝数变异的原理、最新研究方法,及其与复杂疾病的相关性研究等进展进行了综述;总结了拷贝数变异研究所存在的问题;对拷贝数变异未来的研究重点和需要解决的问题进行了展望。

关键词：拷贝数变异微阵列比较基因组杂交复杂疾病

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