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遗传学报 2004年第3期31卷 217-220页

作者：顾鸣敏袁文涛杨珏琴张静熊晓燕姚芳娟陆振虞王铸钢黄薇范丽安上海第二医科大学医学遗传学教研室上海200025 国家人类基因组南方研究中心上海201203 上海第二医科大学免疫学教研室上海200025 上海市免疫学研究所上海200025

为了寻找中国人群强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的易感基因位点,采用全基因组扫描法对9个强直性脊柱炎家系进行基因分型、参数连锁分析和非参数连锁分析.在参数连锁分析中,D6S276位点的最大LOD值为3.8821(θ=0.0),精细分析... 详细信息

为了寻找中国人群强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的易感基因位点,采用全基因组扫描法对9个强直性脊柱炎家系进行基因分型、参数连锁分析和非参数连锁分析.在参数连锁分析中,D6S276位点的最大LOD值为3.8821(θ=0.0),精细分析显示距D6S276位点附近的D6S1691和D6S1618的LOD值分别为1.5717(θ=0.1)及2.0056(θ=0.1).在非参数连锁分析中,位于D6S276附近的LOD值高达5.0623,非参数连锁分析的NPL值为3.7561,最小P值为0.000233.上述结果提示,D6S276与强直性脊柱炎之间存在较强的连锁关系,D6S1691-D6S276-D6S1618区域可能存在强直性脊柱炎的易感基因位点.此外,D3S1292、D4S1535和D18S64的最大LOD值分别为1.2768(θ=0.2)、1.1246(θ=0.2)和1.1851(θ=0.1),提示这些标记与AS之间存在一定的连锁关系.

关键词：强直性脊柱炎全基因组扫描连锁分析易感基因位点

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自异体皮混合移植成活机制中角质形成细胞及细胞因子作用的实验研究

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中华烧伤杂志 2004年第6期20卷 336-339页

作者：青春曹颖平史济湘周洪陶箭郑泽铣陆树良廖镇江周光炎上海第二医科大学瑞金医院上海市烧伤研究所 200025 上海第二医科大学免疫学教研室

目的　观察细胞因子及角质形成细胞在自异体皮混合移植成活机制中的作用。　方法建立自异体皮混合移植大鼠模型和人体表皮细胞淋巴细胞混合培养 (MELC)模型 ,检测大鼠移植术后血清及创面局部组织标本培养上清液中白细胞介素 (IL)1 0... 详细信息

目的　观察细胞因子及角质形成细胞在自异体皮混合移植成活机制中的作用。　方法建立自异体皮混合移植大鼠模型和人体表皮细胞淋巴细胞混合培养 (MELC)模型 ,检测大鼠移植术后血清及创面局部组织标本培养上清液中白细胞介素 (IL)1 0的水平 ,观察体外表皮细胞在诱导免疫抑制中的作用。　结果　术后 7d,移植大鼠血清IL 1 0含量为 (2 5 .89± 2 .82 )ng/L,明显高于正常大鼠的 (1 4 .2 0± 2 .4 3)ng/L(P <0.0 5 )。术后 4～ 1 4d,大鼠组织标本培养上清液中IL 1 0含量显著不同(P <0.0 5或 0 .0 1 ) ;术后 2 1、2 8d与正常大鼠比较 ,差异无显著性意义 (P >0.0 5 )。自体表皮细胞、角质形成细胞在MELC体系中的抑制作用与其剂量相关。自体角质形成细胞加入到MELC中 ,辅助性T淋巴细胞 (Th)1分泌的细胞因子谱主要通过IL 1 0介导而抑制Th2细胞因子谱的分泌 ;当加入抗IL 1 0单克隆抗体后该抑制作用消失。　结论　自异体皮混合移植后 ,嵌入自体皮片中的角质形成细胞通过激活Th2使局部IL 1 0水平升高 ,这可能是移植成活的重要原因之一。

关键词：角质形成细胞混合移植异体皮 IL-10 术后细胞因子大鼠表皮细胞辅助性T淋巴细胞混合培养

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多座位标记单倍型与强直性脊柱炎的关联研究

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中华医学遗传学杂志 2004年第4期21卷 312-315页

作者：顾鸣敏袁文涛杨珏琴张静熊晓燕姚芳娟陆振虞王铸钢黄薇范丽安 200025 上海第二医科大学医学遗传学教研室国家人类基因组南方研究中心 200025 上海第二医科大学免疫学教研室暨上海市免疫学研究所

目的研究5个强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)家系在HLA附近的多座位标记单倍型与AS之间的关联关系.方法选择位于HLA区域D6S276两侧的11个微卫星标记作精细连锁分析,采用Cyrillic软件作单倍型分析.结果精细连锁分析显示D6S276... 详细信息

目的研究5个强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)家系在HLA附近的多座位标记单倍型与AS之间的关联关系.方法选择位于HLA区域D6S276两侧的11个微卫星标记作精细连锁分析,采用Cyrillic软件作单倍型分析.结果精细连锁分析显示D6S276的最大Lod值达3.8821,位于该标记两侧的D6S1691和D6S1618的Lod值均大于1.50;单倍型分析显示5个家系的重组与交换频率达14.0%,其中D6S1691、D6S276、D6S1618与AS紧密关联.结论 D6S1691-D6S276-D6S1618区域可能存在AS的易感基因位点,家系中与AS紧密关联的单倍型可作为症状前诊断的重要依据.

关键词：强直性脊柱炎多座位标记连锁分析单倍型分析

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肾组织粘附分子及树突状细胞与IgA肾病小管间质病变的关系

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肾脏病与透析肾移植杂志 2004年第6期13卷 530-533页

作者：周同孙桂芝李晓吴开胤张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海第二医科大学细胞生物学教研室上海200025

目的 :观察粘附分子P 选择素与树突状细胞 (DC)在IgA肾病 (IgAN)患者肾组织中的表达与分布 ,探讨P 选择素及DC与肾小管间质病变以及肾功能损害的关系。　方法 :选择经肾活检和临床资料确诊的IgAN患者 4 5例 ,根据小管间质病变程度分为 ... 详细信息

目的 :观察粘附分子P 选择素与树突状细胞 (DC)在IgA肾病 (IgAN)患者肾组织中的表达与分布 ,探讨P 选择素及DC与肾小管间质病变以及肾功能损害的关系。　方法 :选择经肾活检和临床资料确诊的IgAN患者 4 5例 ,根据小管间质病变程度分为 3组 :轻度组 2 9例 ,中度组 10例 ,重度组 6例 ;10例正常人肾组织作为对照。采用免疫组化法观察IgAN患者肾组织中P 选择素表达 ;免疫双标记染色与荧光图像分析法 ,观察CD1a+ CD80 + DC在肾组织中的分布 ,并探讨DC与患者肾小管间质病变及肾功能损害的关系。　结果 :①P 选择素在正常肾组织中基本不表达 ,在IgAN肾组织中以肾小管上皮细胞为主广泛高表达 ,重度组肾小管间质表达明显强于轻、中度组 ,且与肾小管间质病变程度轻重显著相关。②正常人肾组织中基本未见CD1a+ CD80 + DC分布 ,IgAN肾组织中以肾小管间质为主分布明显增多 ;其在患者肾小管间质的分布于重度组明显高于轻、中度组 ,亦与肾小管间质病变程度及血肌酐显著相关。此外 ,CD1a+ CD80 + DC在患者肾小管间质分布与P 选择素表达明显相关。　结论 :P 选择素尤其DC可能参与了IgAN肾小管间质病变的免疫病理损伤机制 ,且推测DC肾炎组织迁移聚集可能与P 选择素介导有关。

关键词：肾组织粘附分子树突状细胞 IgA肾病小管间质病变

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树突状细胞在大鼠单侧输尿管梗阻后肾组织中的分布与作用

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上海第二医科大学学报 2004年第3期24卷 174-177页

作者：孙桂芝周同吴开胤李晓陈玉英胡庆沈张冬青陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科上海200025 基础医学院细胞生物学教研室基础医学院上海市免疫学研究所

目的探讨粘附分子P-选择素与树突状细胞(DC)在大鼠单侧输尿管梗阻后肾组织中的表达和分布,以及抗P-选择素单抗的抗粘附调抑作用。方法建立大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,随机将大鼠分为手术组和抗P-选择素单抗治疗组各18只,按不同梗阻... 详细信息

目的探讨粘附分子P-选择素与树突状细胞(DC)在大鼠单侧输尿管梗阻后肾组织中的表达和分布,以及抗P-选择素单抗的抗粘附调抑作用。方法建立大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,随机将大鼠分为手术组和抗P-选择素单抗治疗组各18只,按不同梗阻时间(1、3、7d)再分为3组,另设假手术组(n=6)作为对照。分别采用免疫组化LSAB法和免疫双染与荧光图像分析法,观察P-选择素及DC在肾组织中表达和分布变化。结果大鼠UUO第1d起即见P-选择素以肾小管上皮细胞为主在肾小管间质中表达上调,伴随CD1a^+CD80^+DC在以肾间质为主部位的浸润;第3 d P-选择素明显表达,且CD1a^+CD80^+DC显著增多;至第7 d P-选择素表达遂下调,而CD1a^+CD80^+DC在肾间质分布聚集达峰,出现了明显的肾小管间质病理损伤经抗P-选择素单抗处理后,大鼠肾组织P-选择素表达受到抑制,CD1a^+CD80^+DC分布聚集减少,且肾小管间质病理损伤减轻。结论提示树突状细胞参与了肾小管间质纤维化早期病理损伤过程,其肾组织迁移聚集可能与P-选择素早期介导有关,抗P-选择素单抗对此具有抗粘附调抑和肾脏保护作用。

关键词：树突状细胞大鼠单侧输尿管梗阻肾组织粘附分子 P-选择素病理损伤

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黏附分子P-选择素与树突状细胞在人肾小管间质病变中的作用

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上海第二医科大学学报 2004年第7期24卷 501-504页

作者：周同孙桂芝李晓吴开胤张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科上海200025 基础医学院上海市免疫学研究所基础医学院细胞生物学教研室

目的观察黏附分子P-选择素与树突状细胞(DC)在人肾炎肾组织中的表达与分布,探讨P-选择素和DC与肾小管间质病变以及肾功能损害的关系。方法选择经肾活检和临床资料确诊的不同类型肾炎患者133例,根据小管间质病变分为三组:轻度组63例,... 详细信息

目的观察黏附分子P-选择素与树突状细胞(DC)在人肾炎肾组织中的表达与分布,探讨P-选择素和DC与肾小管间质病变以及肾功能损害的关系。方法选择经肾活检和临床资料确诊的不同类型肾炎患者133例,根据小管间质病变分为三组:轻度组63例,中度组44例,重度组26例;10例正常人肾组织作为对照。采用免疫组化法观察肾炎患者肾组织中P-选择素的表达;利用免疫双染与荧光图像分析法,观察CD1a+CD80+DC在肾组织中的分布和改变,并探讨与肾小管间质病变和肾功能损害的关系。结果肾炎患者肾组织中P-选择素表达增强,在肾小管上皮细胞表达显著高于肾小球、肾间质和肾血管;而在肾小管间质表达于重度组又明显高于轻、中度组,并与肾小管间质病变程度显著相关。CD1a+CD80+DC在肾组织中分布面积、数量和密度均显著增多,且以肾小管间质为主,分布于肾小管、肾间质和肾血管;其在肾小管间质分布于重度组也明显高于轻、中度组,并与肾小管间质病变程度以及肾功能明显相关。此外,CD1a+CD80+DC肾小管间质分布状况亦与P-选择素表达显著相关。件论黏附分子;P-选择紊可能介导DC肾炎肾组织中迁移聚集,参与了肾脏免疫病理机制,并与肾小管间质病变密切相关。

关键词：黏附分子 P-选择素树突状细胞肾小管间质病变肾组织

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树突状细胞在肾切除大鼠肾组织中分布及缬沙坦对其作用的影响

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上海第二医科大学学报 2004年第7期24卷 505-509页

作者：吴开胤周同孙桂芝张玉梅张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科上海200025 基础医学院上海市免疫学研究所基础医学院细胞生物学教研室

目的探讨树突状细胞(DC)在肾切除大鼠肾小管间质中的分布与作用及缬沙坦对DC作用的影响。方法建立慢性肾衰5/6肾切除大鼠模型,随机分为正常组(n=18)、假手术组(n=18)、模型组(n=18)和缬沙坦治疗组(n=18)。分别于建模1、4、12周,采用... 详细信息

目的探讨树突状细胞(DC)在肾切除大鼠肾小管间质中的分布与作用及缬沙坦对DC作用的影响。方法建立慢性肾衰5/6肾切除大鼠模型,随机分为正常组(n=18)、假手术组(n=18)、模型组(n=18)和缬沙坦治疗组(n=18)。分别于建模1、4、12周,采用免疫双染和荧光图像分析法观察CD1a+CD80+DC在各组大鼠肾组织中的分布变化;免疫组化法观察P-选择素和各纤维化相关指标在肾组织中的表达;Masson染色评定各组肾小管间质纤维化(TIF)程度。结果模型组CD1a+CD80+DC主要分布于肾小管、肾间质和肾血管,以肾间质最为明显;其分布数量于12周较1周、4周明显增多,且与慢性肾功能减退呈正相关;12周时,P-选择素和各纤维化相关指标以肾小管间质为主表达和TIF程度明显增加,并与CD1a+CD80+DC分布数量呈正相关;经缬沙坦治疗后,CD1a+CD80+DC分布减少,P-选择素和各纤维化相关指标表达下降,TIF程度减轻及肾功能改善。结论 DC可能启动或参与了肾小管间质纤维化形成,并与肾功能损害程度密切相关,缬沙坦对此具有明显的抑制和肾脏保护作用。

关键词：树突状细胞肾切除术大鼠 DC 肾组织缬沙坦肾功能肾血管

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强直性脊柱炎易感基因定位的比较研究

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诊断学理论与实践 2004年第5期3卷 361-364页

作者：顾鸣敏袁文涛杨珏琴范丽安黄薇王铸钢上海第二医科大学医学遗传学教研室上海200025 国家人类基因组南方研究中心遗传学部上海201202 上海市免疫学研究所免疫遗传室上海200025

目的:比较分析中国人群与欧美人群在强直性脊柱炎(AS)易感基因定位方面的异同点.方法:采用全基因组扫描法对中国9个AS家系101份DNA样本进行基因分型和连锁分析;采用比较分析法对国外3个课题组殚的基因定位数据作统计学处理.结果:两群均... 详细信息

目的:比较分析中国人群与欧美人群在强直性脊柱炎(AS)易感基因定位方面的异同点.方法:采用全基因组扫描法对中国9个AS家系101份DNA样本进行基因分型和连锁分析;采用比较分析法对国外3个课题组殚的基因定位数据作统计学处理.结果:两群均在HLA区域尤其是D6S276附近存在连锁遗传标记;除HLA区域外,中国人群在D3S1292(3q)、D4S1535(4q)和D18S64(18q)处可能存在与AS相连锁的标记,而欧美人群在D1S255(1p)、D3S1300(3p)、D6S441(6q)、D9S1862(9q)、D11S4094(11q)、D16S515(16q)和D19S420(19q)等处存在与AS相连锁的标记.结论:中国人群与欧美人群在HLA区域肯定存在1个或1个以上易感基因或标记;此外,不同人群在非HLA区域的不同部位还存在多个AS易感基因或标记.总之,多个易感基因的协同作用是AS发生的遗传基础.

关键词：强直性脊柱炎全基因组扫描连锁分析比较分析

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P-选择素与树突状细胞在IgA肾病肾小管间质病变中变化的临床意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第10期24卷 764-764页

作者：周同孙桂芝李晓吴开胤张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科 200025 上海第二医科大学上海市免疫学研究所 200025 上海第二医科大学细胞生物学教研室 200025

IgA肾病病理改变中广泛存在或伴随着肾小管间质损害,黏附分子介导的炎细胞浸润是肾小管间质免疫炎症反应重要前提.树突状细胞(DC)是功能最强的专职抗原递呈细胞,其炎症组织迁移依赖于黏附分子P-、E-选择素介导.为此我们探讨了IgA肾病患... 详细信息

IgA肾病病理改变中广泛存在或伴随着肾小管间质损害,黏附分子介导的炎细胞浸润是肾小管间质免疫炎症反应重要前提.树突状细胞(DC)是功能最强的专职抗原递呈细胞,其炎症组织迁移依赖于黏附分子P-、E-选择素介导.为此我们探讨了IgA肾病患者肾组织中P-选择素表达和DC分布变化,以及与肾小管间质病变之间的关系。

关键词： IgA肾病肾小管间质病变 P-选择素树突状细胞黏附分子临床意义介导表达依赖变化

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用竞争结合法检测HLAⅠ类分子抗原呈递能力

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第12期23卷 982-984页

作者：蒋黎华史桂英石学耕范丽安上海第二医科大学上海市免疫学研究所200025 上海第二医科大学细胞生物学教研室

目的　建立弱酸处理后荧光素标记肽竞争结合法分析MHCⅠ类分子抗原呈递能力的方法 ,并评估其实用性。方法　pH2 .7～ 3.1的柠檬酸缓冲液对B淋巴母细胞进行短时处理后 ,即用IMDM培养液中和pH ,然后加入β2微球蛋白、荧光素标记的 9肽及... 详细信息

目的　建立弱酸处理后荧光素标记肽竞争结合法分析MHCⅠ类分子抗原呈递能力的方法 ,并评估其实用性。方法　pH2 .7～ 3.1的柠檬酸缓冲液对B淋巴母细胞进行短时处理后 ,即用IMDM培养液中和pH ,然后加入β2微球蛋白、荧光素标记的 9肽及竞争肽共同孵育 ,FACs检测细胞表面的平均荧光强度 ,以达到 5 0 %抑制所需的竞争肽浓度作为衡量竞争肽与MHC分子结合能力的指标。结果　通过不同pH的柠檬酸缓冲液处理、处理后不同时间加 β2微球蛋白和 /或荧光素标记肽、加入不同稀释度的竞争肽等角度 ,对方法进行评估 ,结果显示本方法操作简便、结果可靠、非特异性吸附小。结论　在排除其它MHCⅠ类分子的干扰后 ,本方法适合在国情条件下广泛开展MHCⅠ类分子抗原呈递能力及T细胞肽表位筛选等研究。

关键词：竞争结合法检测 HLAⅠ类分子抗原呈递能力

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