检索结果-内蒙古大学图书馆

上海农业学报 2020年第1期36卷 82-87页

作者：张宏丽葛雷吴彩凤张树山张德福戴建军孙玲伟上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

以梅山猪耳缘组织为研究材料,采用组织块培养法建立了梅山猪耳成纤维细胞系,并对所建细胞系进行生物学特性研究。结果表明:所建立的梅山猪耳成纤维细胞系生长态势良好,冷冻前后的平均细胞存活率分别为95.21%、90.08%,解冻后细胞的生长... 详细信息

以梅山猪耳缘组织为研究材料,采用组织块培养法建立了梅山猪耳成纤维细胞系,并对所建细胞系进行生物学特性研究。结果表明:所建立的梅山猪耳成纤维细胞系生长态势良好,冷冻前后的平均细胞存活率分别为95.21%、90.08%,解冻后细胞的生长曲线呈“S”型;细菌、真菌和支原体3类微生物检测结果均为阴性,细胞没有受到微生物的污染;细胞中期染色体二倍体(2n=38)占主体约为92.31%,达到了建立成纤维细胞系的要求;苹果酸脱氢同工酶和乳酸脱氢同工酶电泳结果表明,该细胞系没有被其他细胞污染,细胞纯度较高;绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染耳成纤维细胞,5个细胞系的阳性率为45.23%—67.32%。经G418筛选后,各个细胞系均能有效形成单克隆集落。本研究中梅山猪成纤维细胞系的建立使梅山猪种质资源在细胞水平得到有效保存,并可为其他动物成纤维细胞系的建立以及种质资源保存提供参考。

关键词：梅山猪耳成纤维细胞生物学特性

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NS1蛋白点突变对猪流感病毒感染细胞的影响

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上海农业学报 2020年第6期36卷 60-65页

作者：刘雷程靖华石迎陶洁李本强刘惠莉上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海市农业遗传育种重点实验室上海201106

以H1N1亚型猪流感病毒A∕swine∕Shanghai∕3∕2014为模板,选择核定位序列(Nuclear localization sequence,NLS1)与核输出序列(Nuclear export sequence,NES)区域中5个保守关键氨基酸突变为丙氨酸,构建真核表达载体,分析NLS1和NES区域中影响NS1蛋白定位及细胞因子水平的氨基酸位点。结果表明:NS1L36A、NS1L141A、NS1L146A与野生型NS1蛋白相似,转染后在细胞质和细胞核中均可检测到蛋白表达。NS1R38A有少量进入细胞核,而NS1L144A蛋白主要分布在细胞质中,不进核。NS1R38A和NS1L144A表达载体转染细胞,细胞内Ⅰ型干扰素β(IFN-β)和抗病毒蛋白(OAS-1)水平升高,与野生型NS1蛋白比较差异显著。因此,NS1蛋白中第38位和第144位氨基酸的突变可以减轻其对宿主细胞抗病毒免疫应答的抑制,但这两个突变蛋白在细胞中定位和分布不同显示其作用机制可能不同。

关键词：猪流感病毒 NS1蛋白点突变免疫细胞因子

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线粒体靶向抗氧化剂MitoQ在猪卵母细胞冷冻保存中的应用

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上海农业学报 2020年第2期36卷 82-88页

作者：王文杰葛雷张树山吴彩风戴建军张德福上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

在猪卵母细胞解冻后的孵育液中添加线粒体靶向抗氧化剂MitoQ,通过检测线粒体膜电位、早期凋亡、脂质氧化、活性氧、胚胎发育水平以及相关基因表达水平等,研究MitoQ在猪卵母细胞冷冻保存中的作用.结果表明:猪卵母细胞冷冻后使用MitoQ处理... 详细信息

在猪卵母细胞解冻后的孵育液中添加线粒体靶向抗氧化剂MitoQ,通过检测线粒体膜电位、早期凋亡、脂质氧化、活性氧、胚胎发育水平以及相关基因表达水平等,研究MitoQ在猪卵母细胞冷冻保存中的作用.结果表明:猪卵母细胞冷冻后使用MitoQ处理,其线粒体膜电位(0.66±0.06)与对照组(0.47±0.05)相比显著升高,早期凋亡比率(43.00%±3.51%)与对照组(55.33%±1.45%)相比显著下降;冷冻后MitoQ处理猪卵母细胞,其活性氧水平(3.03±0.61)与脂质氧化水平(20.54±0.91)与对照组(13.13±1.52和26.78±0.54)相比显著下降;冷冻后MitoQ处理猪卵母细胞的存活率(60.33%±1.86%)、卵裂率(28.82%±1.38%)和囊胚率(4.50%±0.48%)与对照组组(47.67%±1.67%、22.07%±1.07%和2.20%±0.51%)相比显著升高;在基因表达方面,与对照组相比,冷冻后MitoQ处理组其Bcl-2、CuZnSOD和Mfn2相对表达量显著提升,DNM1、Bax和TNF-α相对表达量则显著下降.综上,在冻后孵育液中添加MitoQ能够提高线粒体功能,降低细胞氧化应激水平,抑制细胞凋亡和改善相关基因表达水平,从而提高冷冻后猪卵母细胞的体外发育能力.

关键词：猪卵母细胞 Mitoquinone 氧化应激凋亡冷冻保护

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成年克隆猪肺脏差异蛋白的鉴定与功能分析

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上海农业学报 2020年第4期36卷 65-70页

作者：张树山戴建军吴彩凤孙玲伟韩雪峻姜红菊张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海种猪工程技术研究中心上海201302

分别采集成年克隆猪和正常繁殖猪(对照)的肺脏样品,利用双向电泳-质谱体系和Western blot方法的比较蛋白质组学技术对其蛋白进行分离、鉴定和验证,并结合生物信息学手段对相关差异蛋白进行功能分析,研究体细胞核移植(即克隆)操作在蛋白... 详细信息

分别采集成年克隆猪和正常繁殖猪(对照)的肺脏样品,利用双向电泳-质谱体系和Western blot方法的比较蛋白质组学技术对其蛋白进行分离、鉴定和验证,并结合生物信息学手段对相关差异蛋白进行功能分析,研究体细胞核移植(即克隆)操作在蛋白质水平上对克隆猪肺脏发育的影响。结果表明:体细胞核移植操作对克隆猪肺脏的发育有较大影响。与对照猪相比,克隆猪肺脏蛋白共有26个差异蛋白,其中半胱天冬酶凋亡前衔接蛋白、增殖细胞核抗原和核糖-5-磷酸异构酶等22个为上调蛋白,纤维蛋白原γ链、纤维蛋白原β链和血红蛋白α亚基等4个为下调蛋白,主要涉及抗氧化活性、翻译调节和催化活性等重要功能。

关键词：猪体细胞核移植肺脏比较蛋白质组学

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关于猪冻精生产平台建设的一些探讨

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猪业科学 2020年第8期37卷 106-108页

作者：张树山韩雪峻姜红菊张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海种猪工程技术研究中心上海201302

依托种公猪站建设的冻精生产平台是整个冻精产业链的关键环节,对推动猪冻精的广泛应用,以及促进现有种公猪引种模式升级的意义尤其重大。文章就猪冻精生产平台建设的相关问题进行逐一分析探讨,旨在为冻精的商业化生产和应用提供一些实... 详细信息

依托种公猪站建设的冻精生产平台是整个冻精产业链的关键环节,对推动猪冻精的广泛应用,以及促进现有种公猪引种模式升级的意义尤其重大。文章就猪冻精生产平台建设的相关问题进行逐一分析探讨,旨在为冻精的商业化生产和应用提供一些实践支撑。

关键词：公猪冷冻精液(冻精) 生产平台

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猪冷冻精液品质影响因素分析

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猪业科学 2020年第6期37卷 64-66页

作者：张树山韩雪峻姜红菊张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海种猪工程技术研究中心上海2013021

基于猪冷冻精液品质是冻精制作流程中众多因素的合力结果。故加强各环节的操作规范性,针对影响冻精制作因素,将冻精制作流程优化,对提高冻精品质非常重要。文章就猪冻精制作流程涉及环节和影响因素逐一进行分析探讨,旨在为促进猪精液冷... 详细信息

基于猪冷冻精液品质是冻精制作流程中众多因素的合力结果。故加强各环节的操作规范性,针对影响冻精制作因素,将冻精制作流程优化,对提高冻精品质非常重要。文章就猪冻精制作流程涉及环节和影响因素逐一进行分析探讨,旨在为促进猪精液冷冻保存技术发展及冻精商业化生产提供一些实践支撑。

关键词：公猪冷冻精液(冻精) 精液品质影响因素

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抑制素免疫对崇明白山羊公羔羊生殖发育的影响

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上海农业学报 2020年第4期36卷 71-76页

作者：葛雷李垚戴建军姚惠娟张树山张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海交通大学医学院上海200025

利用重组抑制素对崇明白山羊雄性断奶羔羊(n=6)在第0天、第21天、第42天、第63天共进行4次免疫,探讨抑制素免疫对其睾丸发育、激素水平及生殖相关基因表达量的影响。结果表明:试验期间,免疫组抑制素抗体水平均显著高于对照组;在试验的... 详细信息

利用重组抑制素对崇明白山羊雄性断奶羔羊(n=6)在第0天、第21天、第42天、第63天共进行4次免疫,探讨抑制素免疫对其睾丸发育、激素水平及生殖相关基因表达量的影响。结果表明:试验期间,免疫组抑制素抗体水平均显著高于对照组;在试验的第84天阉割时,免疫组和对照组试验羊在体重[(21.87±2.19)kg vs(23.58±5.13)kg]、阴囊周长[(20.95±0.74) cm vs (21.57±1.65) cm]、睾丸质量[(56.88±4.96) g vs(62.99±4.17)g]方面无显著差异;睾丸组织石蜡切片分析表明,免疫组和对照组试验羊在睾丸组织学上没有显著差异;血清卵泡刺激素(FSH)及睾酮(T)水平在二免后7 d免疫组显著高于对照组,其余采样时间无显著差异;血清促黄体生成素(LH)水平免疫组和对照组无显著差异;qRT-PCR检测结果表明,免疫组睾丸组织染色体联会相关基因Dmrtc2表达量极显著高于对照组(3.04 vs 1.00),性腺发育相关基因SOX30基因表达量显著高于对照组(1.48 vs 1.00),雄激素受体基因AR表达量显著低于对照组(0.59 vs 1.00),而FSH受体基因FSHR、LH受体基因LHR、精子发生相关基因GPx4以及减数分裂相关基因DDX4基因表达量两组之间没有显著差异。综上所述,抑制素免疫能短暂提高崇明白山羊FSH及T水平,提高睾丸Dmrtc2、SOX30基因的相对表达量,但对体重、LH激素水平、睾丸质量、睾丸组织学形态、睾丸FSHR、LHR等基因水平无显著影响。

关键词：抑制素免疫崇明白山羊公羔羊生殖发育睾丸

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上海水牛的保种冻精技术

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上海畜牧兽医通讯 2020年第2期 30-31页

作者：汪俊跃范文华戴建军张德福孙玲伟吴彩凤李丹阳上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

采集上海水牛成年公牛精液进行冷冻保存,从而抢救性保护该品种。测定结果表明:上海水牛原精活率平均高于50%,活力平均高于45%;冻精解冻后精子活率平均高于45%,活力均高于40%。

关键词：上海水牛精液冷冻保存

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线粒体靶向抗氧化剂Mitoquinone对湖羊冻精损伤的保护作用

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畜牧兽医学报 2019年第12期50卷 2554-2559页

作者：吕松洁付丽范文华张树山吴彩凤徐皆欢戴建军张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海交通大学医学院实验动物科学部上海200025

旨在研究线粒体靶向抗氧化剂Mitoquinone(MitoQ)对湖羊冷冻精子的保护作用。本研究选择健康的成年种公羊精液,将其分成6等份。不含MitoQ者设为对照组(M0),M1、M2、M3、M4和M5组分别为含50、100、150、200和400 nmol·L^-1 MitoQ的... 详细信息

旨在研究线粒体靶向抗氧化剂Mitoquinone(MitoQ)对湖羊冷冻精子的保护作用。本研究选择健康的成年种公羊精液,将其分成6等份。不含MitoQ者设为对照组(M0),M1、M2、M3、M4和M5组分别为含50、100、150、200和400 nmol·L^-1 MitoQ的添加组。精子经冷冻解冻后检测活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性等精子质量指标,同时进行超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)等抗氧化指标检测。结果表明,当MitoQ添加的浓度为150 nmol·L^-1(M3组)时,其解冻后精子的活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性最高,分别达55.00%、52.34%、48.32%、54.51%和51.28%,其线粒体活性显著高于其他组(P<0.05)。M3组解冻后精子的SOD和GSH-Px值分别为203.90 U·mL^-1和123.62 U·L^-1,两者均显著高于M0、M1、M4和M5组(P<0.05);M3组解冻后精子的ROS和MDA值分别为298.34 U·mL^-1和4.99 nmol·L^-1,显著低于其他组(P<0.05)。当MitoQ的添加浓度提高至200(M4组)和400 nmol·L^-1(M5组)时,冻精质量开始下降,并表现为对精子的氧化损伤。在湖羊冷冻精液中,添加150 nmol·L^-1的MitoQ可显著降低精子氧化损伤,提高冻精品质,当MitoQ的添加浓度超过200 nmol·L^-1时对冷冻精子没有保护作用。

关键词：冻精湖羊 MitoQ 抗氧化

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猪冷冻精液生产技术标准与规范及相关问题解读

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猪业科学 2020年第4期37卷 98-102页

作者：张树山张德福韩雪峻姜红菊上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海祥欣畜禽有限公司/上海种猪工程技术研究中心上海2013021

业界普遍认为,高质量的技术标准或规范能引领和带动猪冷冻精液的商业化生产。文章基于三个猪冷冻精液相关的标准或规范逐条进行解读和探讨,使相关管理和技术人员能更好地学习和理解技术标准,加速猪冷冻精液的商业化进程;同时,标准制订... 详细信息

业界普遍认为,高质量的技术标准或规范能引领和带动猪冷冻精液的商业化生产。文章基于三个猪冷冻精液相关的标准或规范逐条进行解读和探讨,使相关管理和技术人员能更好地学习和理解技术标准,加速猪冷冻精液的商业化进程;同时,标准制订者也能从管理和技术人员的反馈中及时获得标准的修订意见,从而进一步提高标准的先进性和可操作性。

关键词：公猪冷冻精液(冻精) 标准商业化生产

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