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中国菌物学会2018年学术年会

作者：冯娜刘伟唐庆九张劲松上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室华东理工大学药学院

层迭灵芝（Ganoderma lobatum）又名裂迭灵芝、裂叠灵芝、层迭树舌,是灵芝属树舌亚属的一种真菌,在民间有药用历史,但尚无对其化学成分和药理活性的科学研究。该种在我国主要分布于亚热带地区,目前在泰国有少量人工栽培。本研究首次对... 详细信息

层迭灵芝（Ganoderma lobatum）又名裂迭灵芝、裂叠灵芝、层迭树舌,是灵芝属树舌亚属的一种真菌,在民间有药用历史,但尚无对其化学成分和药理活性的科学研究。该种在我国主要分布于亚热带地区,目前在泰国有少量人工栽培。本研究首次对层迭灵芝中的三萜化合物进行了分离纯化和结构鉴定。将层迭灵芝子实体3.0 kg粉碎后,以1:20的料液比加入95%乙醇提取3次,合并浓缩。将浓缩获得的提取物用80%乙醇复溶制成混悬液,然后用石油醚等体积萃取3次,获得富含灵芝三萜的样品。采用C18反相色谱柱、乙腈:水梯度洗脱,通过中高压和高压制备液相,对层迭灵芝子实体中三萜类化合物进行分离纯化,并将得到的化合物通过紫外、质谱、核磁等分析方法检测,共鉴定得到7个三萜类化合物,分别为树舌环氧酸A,C,E,F,G、H和20-Hydroxy-3,12,15,23-tetraoxolanosta-7,9（11）,16-trien-26-oic acid。以上化合物均为首次从层迭灵芝中获得。以体外抑制肿瘤细胞L1210增殖实验模型来验证三萜化合物的活性。结果表明,树舌环氧酸E和树舌环氧酸G具有良好的抗肿瘤效果,其IC50值分别为135.9μg/mL和192.9μg/mL。

关键词：层迭灵芝三萜化合物结构鉴定增殖抑制

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山茶靛牛肝菌子实体结构分离鉴定体外抗肿瘤活性

山茶靛牛肝菌子实体结构分离鉴定体外抗肿瘤活性

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the 9th International Conference on Mushroom Biology and Mushroom Products(第九届世界食用菌生物学及产品大会)

作者：曾凡清冯娜张劲松丽水市农业科学研究院浙江丽水 323000 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海 201403

依次用95%乙醇和水提取山茶靛牛肝菌(Boletus pseudoregius)子实体,再用不同有机溶剂萃取95％乙醇提取物,考察山茶靛牛肝菌子实体不同有机溶剂萃取物和水提物的体外抗肿瘤活性.结果表明：石油醚萃取物对人肠癌细胞SW620和人肝肿瘤细胞He... 详细信息

依次用95%乙醇和水提取山茶靛牛肝菌(Boletus pseudoregius)子实体,再用不同有机溶剂萃取95％乙醇提取物,考察山茶靛牛肝菌子实体不同有机溶剂萃取物和水提物的体外抗肿瘤活性.结果表明：石油醚萃取物对人肠癌细胞SW620和人肝肿瘤细胞HepG-2的增殖有抑制作用,IC50分别为95.69％和26.81％;正丁醇萃取物对白血病细胞K562、人肠癌细胞SW620和人肝肿瘤细胞HepG-2的增殖都有抑制作用,IC50分别为9.65％、93.77％和23.46％;石油醚和正丁醇萃取物对人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1的增殖无抑制作用,说明其具有抗肿瘤活性;氯仿和乙酸乙酯萃取物对K562、SW620和HepG-2肿瘤细胞和WPMY-1正常细胞的增殖均有抑制作用,其中氯仿萃取物的细胞毒性最强;而水提物对以上3种肿瘤细胞抑制作用不明显,对正常细胞的增殖无抑制作用.

关键词：山茶靛牛肝菌子实体提取物抗肿瘤活性

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热激处理对草菇耐冷性的影响及对hsp100基因的诱导

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分子植物育种 2017年第8期15卷 3036-3041页

作者：赵妍杨焕玲黄金丽陈明杰王晨光任畇霏马丹丹国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403

热激蛋白是生物体抵御逆境胁迫的重要蛋白,高温胁迫是诱导热激蛋白产生的重要因素,其中Hsp100蛋白可以在高温诱导时大量产生。本研究以草菇菌株V23和VH3为试验材料,首先观察了热激处理对低温胁迫后草菇菌丝恢复生长情况的影响,然后测定... 详细信息

热激蛋白是生物体抵御逆境胁迫的重要蛋白,高温胁迫是诱导热激蛋白产生的重要因素,其中Hsp100蛋白可以在高温诱导时大量产生。本研究以草菇菌株V23和VH3为试验材料,首先观察了热激处理对低温胁迫后草菇菌丝恢复生长情况的影响,然后测定了热激处理再进行低温胁迫后草菇hsp100基因的表达量变化。研究结果显示:热激处理显著提高了草菇V23与VH3的恢复生长速度,增加了二者菌丝体中hsp100基因的表达量,有助于增强草菇对低温胁迫的耐受性。

关键词：草菇热激低温 hsp100 实时荧光定量PCR

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“沪农灵芝1号”聚酮合酶特异性分析

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食用菌学报 2017年第4期24卷 1-5,F0003页

作者：龚明鲍大鹏唐传红张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

对"沪农灵芝1号"(简称沪灵芝)(Ganoderma lucidum SH)等10个代表性的担子菌物种进行全基因组次级代谢物(secondary metabolite,SM)簇分析,结果显示沪灵芝聚酮合酶(polyketide synthases,PKS)的骨架基因以及SM簇的数量分别为5... 详细信息

对"沪农灵芝1号"(简称沪灵芝)(Ganoderma lucidum SH)等10个代表性的担子菌物种进行全基因组次级代谢物(secondary metabolite,SM)簇分析,结果显示沪灵芝聚酮合酶(polyketide synthases,PKS)的骨架基因以及SM簇的数量分别为5和3,高于其它物种,并且都位于支架的末端。通过生物信息学分析发现,PKS7和9的SM簇只在沪灵芝中分布;只有PKS7的SM簇(PKS7簇)的骨架基因具有完整的I型PKS功能模块;只有PKS7簇的骨架基因具有单拷贝直系同源性;PKS7簇的功能注释基因在不饱和脂肪酸生物合成通路中富集。这些结果表明PKS7簇为沪灵芝特异性的SM簇,可能代表了沪灵芝抗逆性强的分子特征。

关键词：灵芝比较基因组分析次级代谢 PKS 通路富集分析

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铁、锌、钙离子在三种食用菌菌丝体中的富集及对其生长的影响

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食用菌学报 2017年第2期24卷 27-33页

作者：杨慧张美彦宋春艳刘建雨徐珍尚晓冬上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

采用PDA平板和PDB液体摇瓶培养方法,比较了铁、锌和钙离子在香菇(Lentinula edodes)、金针菇(Flammulina velutipes)和刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)菌丝体中的富集及对其生长的影响。结果表明:铁、锌和钙离子可以在香菇、金针菇和刺芹... 详细信息

采用PDA平板和PDB液体摇瓶培养方法,比较了铁、锌和钙离子在香菇(Lentinula edodes)、金针菇(Flammulina velutipes)和刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)菌丝体中的富集及对其生长的影响。结果表明:铁、锌和钙离子可以在香菇、金针菇和刺芹侧耳菌丝中富集。实验范围内,铁离子促进香菇和金针菇生长的浓度均为5.6~28.0 mg/kg,当浓度超过279.3、279.3、28.0 mg/kg时抑制香菇、金针菇和刺芹侧耳菌丝生长。锌离子促进香菇生长的浓度为3.3~6.0mg/kg,当浓度超过653.8、327.0、327.0mg/kg时抑制香菇、金针菇和刺芹侧耳菌丝生长。钙离子浓度超过1721.7、8608.5、8608.5mg/L时抑制香菇、金针菇和刺芹侧耳生长。

关键词：矿物质元素菌丝生长富集

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樟芝活性化合物抗非小细胞肺癌活性及作用机制研究

樟芝活性化合物抗非小细胞肺癌活性及作用机制研究

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中国菌物学会2018年学术年会

作者：杨海芮贾薇张劲松张赫男杨焱汪雯翰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验石河子大学生命科学学院

肺癌在全球癌症死亡率中占据第一位。非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)在所有类型肺癌中所占比例最大。目前主要用于治疗NSCLC的方法是化疗法,然而,临床使用的化疗药物普遍具有较大的毒副作用,且容易产生耐药性。食药... 详细信息

肺癌在全球癌症死亡率中占据第一位。非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)在所有类型肺癌中所占比例最大。目前主要用于治疗NSCLC的方法是化疗法,然而,临床使用的化疗药物普遍具有较大的毒副作用,且容易产生耐药性。食药用真菌在东方有着独特的经济和医药价值,其天然组分的活性研究更是深得广大研究学者的青睐。因此,从食药用真菌中提取高效低毒的抗肿瘤活性先导化合物,用以研发新药将是生物医药界学者们研究的热点和难点。樟芝是原产于我国台湾的一种珍稀药用菌,具有多种生理活性,尤其是它卓越的抗肿瘤活性。樟芝中的明星分子,安卓喹诺儿,对NSCLC有很好的抑制作用,目前已进入FDA批准的NSCLC二期临床实验。然而,安卓喹诺儿主要来源于樟芝子实体,由于樟芝依赖生长的牛樟树是珍稀保护树种,且子实体生长极其缓慢,使得其研究成本居高不下,不利于科研的顺利进展。液态深层发酵具有原料来源广泛、成本低廉、生长过程短、操作易控制等优点,从液态发酵产物中分离纯化得到与安卓喹诺儿类似的活性物质,就成为十分值得开发的途径。本研究首先以樟芝液态发酵产物的粗提物为材料,研究其对NSCLC的抑制作用,发现其对NSCLC有较好的抑制作用,可引起S期细胞周期阻滞,诱导细胞发生凋亡。然而,粗提物是混合物,包含着许多成分不明的活性物质,很难从中发现发挥主要作用的活性单体物质。因此,后续研究采用实验室前期分离得到的两种单体化合物By-1和Antrodin C进行抗肺癌活性评价,并进一步探究其作用机制。其中,By-1主要来源于发酵液,Antrodin C主要来源于发酵菌丝体。通过对细胞迁移、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡及凋亡相关蛋白、细胞自噬等检测来评价By-1和Antrodin C的抗肺癌活性,并探究自噬和凋亡的交互式调控是否参与抗肺癌活性中,进一步探究作用的信号通路。实验发现,By-1和Antrodin C均对非小细胞肺癌SPCA-1细胞株有较好的抑制作用,其作用机制主要是由于引起S期细胞周期阻滞,上调P53蛋白,P53参与ROS和Bcl-2介导的线粒体细胞凋亡途径,进一步引起Caspase家族的级联反应,促进凋亡执行因子Caspase-3的释放,进而诱导细胞凋亡。通过检测自噬性结构,自噬流的发生以及自噬标记蛋白LC3 II表达和LC3 I向LC3 II转变,发现By-1和Antrodin C可诱导SPCA-1细胞发生自噬。并进一步发现自噬发生是通过下调Akt/mTOR通路来介导的。通过自噬抑制剂和自噬激活剂处理细胞,对细胞增殖的检测,发现自噬在By-1和Antrodin C的抗肺癌活性中起保护性作用。将促凋亡化合物和抑制自噬化合物联用,将明显增加对肿瘤细胞的抑制能力,这可能为NSCLC治疗提供一条新思路。肺癌细胞中存在多种类型的基因突变,其中EGFR突变占到了总突变类型的一半以上。有数据表明,对EGFR突变型肺癌,采用靶向性治疗的方法,能达到更好的效果,且预后良好。通过对EGFR突变型细胞株HCC827细胞进行细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的相关检测,发现By-1和Antrodin C可以抑制该细胞增殖,将细胞阻滞在S期,并能诱导细胞发生凋亡。本研究采用不同类型的人非小细胞肺癌细胞系探究By-1和Antrodin C的抗肺癌活性及其分子机制,发现By-1和Antrodin C对NSCLC有较好的抑制作用,其作用机制是由于凋亡和自噬的交互式调控所致。由此可见,By-1和Antrodin C都有可能发展成为潜在的抗肺癌治疗的化疗药物,这也为后续的深入研究提供了理论依据。

关键词：樟芝非小细胞肺癌细胞凋亡细胞自噬

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运用交配型基因分子标记辅助蛹虫草亲和配对

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核农学报 2017年第11期31卷 2113-2120页

作者：鲍大鹏刘敏祥汪滢杨瑞恒茅文俊何华奇国家食用菌工程技术研究中心/农业部南方食用菌资源利用重点实验室/上海市农业遗传育种重点开放实验室/上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 安徽科技学院生命科学学院安徽凤阳233100

为了建立一种分子标记辅助育种技术体系以增加蛹虫草杂交亲和性配对的比例,以4个蛹虫草菌株(GD1、JS2、SD2、中13)为供试亲本,通过无性孢子分离方法获得了8株单交配型的杂交亲本,根据蛹虫草交配型位点MAT-alpha和MAT-HMG中基因序列设计... 详细信息

为了建立一种分子标记辅助育种技术体系以增加蛹虫草杂交亲和性配对的比例,以4个蛹虫草菌株(GD1、JS2、SD2、中13)为供试亲本,通过无性孢子分离方法获得了8株单交配型的杂交亲本,根据蛹虫草交配型位点MAT-alpha和MAT-HMG中基因序列设计了分子标记并指导配制亲和性组合,最终成功获得了12个杂交菌株。在栽培试验的基础上,分析了12个杂交菌株的栽培周期、产量、活性成分含量(虫草素和腺苷)等相关性状,结果表明,蛹虫草杂交菌株存在超亲现象。本研究建立的这套以交配型基因作为分子标记辅助选育蛹虫草新品种的高效杂交育种技术体系,将有助于促进蛹虫草栽培产业的发展。

关键词：蛹虫草交配型基因分子标记杂交育种

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蛋白质组学及其在食用菌中的研究进展

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分子植物育种 2017年第7期15卷 2656-2661页

作者：查磊赵瑞华余昌霞赵妍陈辉张津京陈明杰国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 延安大学生命科学学院延安716000

近十几年来,随着人类全基因组测序工作的顺利完成,部分生物全基因组的测序也相继完成,生命科学研究随之步入后基因组时代。蛋白质组学(Proteomics)作为后基因组学的重要组成部分得到了快速发展,而食用菌蛋白质组学研究却相对较少,并且... 详细信息

近十几年来,随着人类全基因组测序工作的顺利完成,部分生物全基因组的测序也相继完成,生命科学研究随之步入后基因组时代。蛋白质组学(Proteomics)作为后基因组学的重要组成部分得到了快速发展,而食用菌蛋白质组学研究却相对较少,并且研究内容主要集中在差异蛋白质组学方面。本综述对蛋白质组学主要的研究内容和常用技术进行了简要的介绍,并对当前蛋白质组学技术在食用菌研究中的应用情况展开综述。最后对蛋白质组学技术在食用菌中的应用及开发前景进行了展望,为蛋白质组学在食用菌中的研究提供一定的理论参考依据。

关键词：蛋白质组学食用菌研究进展

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翘鳞香菇研究进展

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食用菌学报 2017年第3期24卷 91-95页

作者：汪虹余昌霞曹晖陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

翘鳞香菇是新近开发的具有市场潜力的食用菌新品种。本文综述了其栽培技术、固体发酵、深层培养、药理活性和生物修复等方面的研究进展,为其进一步开发应用提供参考。

关键词：翘鳞香菇人工栽培抗菌免疫调节生物修复

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高效液相色谱法测定不同产地及品种灵芝三萜类成分的含量

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微生物学通报 2017年第1期44卷 238-244页

作者：贾红岩王亚涛张芝华冯娜刘艳芳周帅张忠张劲松唐庆九国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306 上海应用技术学院上海201418

【目的】建立同时测定灵芝子实体中灵芝酸C_2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酮三醇、灵芝酸DM、灵芝酸T、灵芝醇B、灵芝酸S、灵芝酸G、灵芝酸F、灵芝酸D、灵芝稀酸B12种三萜成分的高效液相色谱法。【方法】选用Aglient ZORBAX SB-Aq(4.6 mm&#... 详细信息

【目的】建立同时测定灵芝子实体中灵芝酸C_2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酮三醇、灵芝酸DM、灵芝酸T、灵芝醇B、灵芝酸S、灵芝酸G、灵芝酸F、灵芝酸D、灵芝稀酸B12种三萜成分的高效液相色谱法。【方法】选用Aglient ZORBAX SB-Aq(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-醋酸(0.01%)水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,分析波长252 nm,柱温30°C,对不同产地及品种的灵芝样品进行测定分析。【结果】同一产地不同品种间三萜类成分含量具有显著差异,不同产地的灵芝样品三萜成分含量也有显著差异,所建方法精密度高,稳定性和重复性好。【结论】所建方法适用于12种三萜成分的同时测定。

关键词：灵芝高效液相色谱法三萜类化合物

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