检索结果-内蒙古大学图书馆

食品工业科技 2014年第18期35卷 362-365页

作者：王丽宁赵妍奚丽萍陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传育种重点开放实验室农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

基因组重排(genome shuffling)是一种快速提高细胞表型的新颖的全基因组工程方法,它是基于多亲本的原生质体递归融合,提供了在缺少基因组序列数据或网络信息情况下的全基因组重组的优势。文中介绍了基因组重排的原理、优点及过程,概述... 详细信息

基因组重排(genome shuffling)是一种快速提高细胞表型的新颖的全基因组工程方法,它是基于多亲本的原生质体递归融合,提供了在缺少基因组序列数据或网络信息情况下的全基因组重组的优势。文中介绍了基因组重排的原理、优点及过程,概述了基因组重排在真菌育种中的应用,并展望了该技术的前景。

关键词：基因组重排递归原生质体融合真菌育种

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灵芝菌丝体中灵芝酸T、R和S的HPLC测定方法的建立和应用

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食品工业科技 2014年第16期35卷 71-75页

作者：赵娜冯娜贾薇冯杰刘艳芳张劲松国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品科学与工程上海201306

采用YMCC,8柱（250min×4．6mm，5μm），以0．5％冰醋酸溶液（A）-甲醇（B）为流动相梯度洗脱（0—20min，85％B→100％B；20—30min，100％B），检测波长在245nm，流速1mL／min，柱温为30℃的条件下，用HPLC考察灵芝酸T、灵芝酸S... 详细信息

采用YMCC,8柱（250min×4．6mm，5μm），以0．5％冰醋酸溶液（A）-甲醇（B）为流动相梯度洗脱（0—20min，85％B→100％B；20—30min，100％B），检测波长在245nm，流速1mL／min，柱温为30℃的条件下，用HPLC考察灵芝酸T、灵芝酸S、灵芝酸R在不同灵芝菌丝体中的含量差异。结果表明，不同种类的灵芝菌丝体中三种灵芝酸成分的含量存在显著的差异，p=0．0003，而且此方法操作简便，稳定性和重复性良好，适用于同时快速检测灵芝菌丝体中三种灵芝酸含量。

关键词：灵芝菌丝体灵芝酸T 灵芝酸S 灵芝酸R

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低温胁迫对草菇菌丝体糖原磷酸化酶基因表达的影响

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食用菌学报 2014年第4期21卷 1-9页

作者：赵妍汪虹李正鹏禄连静陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海市农业科学院农业科技信息研究所上海201403

在0℃低温胁迫下比较低温敏感型草菇(Volvariella volvacea)菌株V23和耐低温型菌株VH3糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase)pyg基因的表达情况。以α-微管蛋白为内参基因,采用实时荧光定量PCR技术测定pyg基因的表达,结果表明:低温处理4... 详细信息

在0℃低温胁迫下比较低温敏感型草菇(Volvariella volvacea)菌株V23和耐低温型菌株VH3糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase)pyg基因的表达情况。以α-微管蛋白为内参基因,采用实时荧光定量PCR技术测定pyg基因的表达,结果表明:低温处理4h时,V23的pyg基因相对表达量仅为0h的0.49倍,低温处理6h时有所回升,但仍低于处理0h的水平。VH3的pyg基因相对表达量从低温处理2h时急剧下降,至低温处理8h时达到最低值,仅为0h的0.28倍。随着低温处理时间的延长,pyg基因的相对表达量在V23和VH3中均呈下降趋势,相同的低温处理时间下,该基因在菌株V23中的下降幅度小于VH3中。

关键词：草菇低温胁迫糖原磷酸化酶基因实时荧光定量PCR

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不同品种猴头菌子实体粗多糖含量及体外免疫活性比较

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食用菌学报 2014年第2期21卷 54-56,F0003页

作者：李玉李巧珍吴迪于海龙唐传红周峰李正鹏杨焱上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

对10株猴头菌(Hericium erinaceus)菌株栽培获得的子实体多糖含量和体外免疫活性进行比较。结果表明:不同的猴头菌菌株在同样条件下栽培所获子实体在粗多糖含量和体外刺激RAW264.7产生NO的能力上有明显差异,其中H5粗多糖含量最高且体外... 详细信息

对10株猴头菌(Hericium erinaceus)菌株栽培获得的子实体多糖含量和体外免疫活性进行比较。结果表明:不同的猴头菌菌株在同样条件下栽培所获子实体在粗多糖含量和体外刺激RAW264.7产生NO的能力上有明显差异,其中H5粗多糖含量最高且体外刺激RAW264.7的活性也最强。

关键词：猴头菌菌株子实体多糖巨噬细胞

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光照对刺芹侧耳子实体形态和产量的影响

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食用菌学报 2014年第2期21卷 32-35页

作者：李巧珍杨焱周峰李玉郭力刚鲍大鹏李正鹏上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

通过观察光照对工厂化栽培刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)子实体形态和产量的影响表明,7种不同波长光源中蓝光对刺芹侧耳子实体发育最有利,蓝光照射所获得的子实体个体较大、外观形态好(菌盖较大、较厚)、商品价值高;进一步研究了蓝光光... 详细信息

通过观察光照对工厂化栽培刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)子实体形态和产量的影响表明,7种不同波长光源中蓝光对刺芹侧耳子实体发育最有利,蓝光照射所获得的子实体个体较大、外观形态好(菌盖较大、较厚)、商品价值高;进一步研究了蓝光光照强度及光照时间对刺芹侧耳子实体生长的影响表明,采用3根LED条形灯照射所获得的刺芹侧耳外观形态及单瓶总产量均较好;光照时间为6h即可获得外观形态较好、单瓶总产量较高的菇,但照射18h得到的菇个体较大。

关键词：刺芹侧耳光照产量形态

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农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化

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微生物学通报 2014年第9期41卷 1793-1799页

作者：孙运奇陈辉张津京陈明杰冯志勇汪虹南京农业大学生命科学学院江苏南京210095 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

【目的】将农杆菌介导的转化应用于重要的工厂化栽培食用菌斑玉蕈中,建立稳定的农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化技术。【方法】将构建的双元载体pYN6982转入农杆菌LBA4404菌株中,以斑玉蕈SIEF3133菌株打碎的双核菌丝为受体材料,利用根癌农... 详细信息

【目的】将农杆菌介导的转化应用于重要的工厂化栽培食用菌斑玉蕈中,建立稳定的农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化技术。【方法】将构建的双元载体pYN6982转入农杆菌LBA4404菌株中,以斑玉蕈SIEF3133菌株打碎的双核菌丝为受体材料,利用根癌农杆菌介导的转化方法进行斑玉蕈转化试验。【结果】经潮霉素抗性筛选、PCR鉴定以及有丝分裂稳定性试验验证,表明潮霉素磷酸转移酶基因(hph)已经整合到斑玉蕈的基因组中;转基因斑玉蕈菌丝在荧光显微镜下可以观测到绿色荧光,表明增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)已经在转基因斑玉蕈菌株中获得了表达;通过PCR检测,随机挑选的8个转基因斑玉蕈菌株中有2个可以扩增出载体转移DNA(T-DNA)边界重复序列外的卡那霉素基因(kan)序列。【结论】获得了稳定遗传和表达的斑玉蕈转基因菌株,建立了农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化方法。农杆菌介导的斑玉蕈遗传转化中,存在载体T-DNA边界重复序列之外的DNA序列转移到转基因斑玉蕈中的现象,有待进一步研究。

关键词：斑玉蕈农杆菌 EGFP 遗传转化

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草菇不同菌株木聚糖酶xyn基因的表达及其酶活性分析

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菌物学报 2014年第5期33卷 1074-1083页

作者：王孟兰赵妍陈明杰汪虹国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 南京农业大学生命科学学院江苏南京210095

木聚糖酶是半纤维素酶系的重要组成部分,能够分解水稻、小麦等农作物秸秆中的半纤维素。研究探讨木聚糖酶相关基因及其功能,为进一步探讨木聚糖酶与草菇生物转化率之间的关系提供理论依据。首先通过生物信息学手段构建了草菇2个木聚糖... 详细信息

木聚糖酶是半纤维素酶系的重要组成部分,能够分解水稻、小麦等农作物秸秆中的半纤维素。研究探讨木聚糖酶相关基因及其功能,为进一步探讨木聚糖酶与草菇生物转化率之间的关系提供理论依据。首先通过生物信息学手段构建了草菇2个木聚糖酶基因xyn1和xynII编码氨基酸序列的系统进化树,然后从生物转化率不同的草菇菌株分别提取各自的RNA,反转录为cDNA后,采用实时荧光定量PCR技术分析了xyn1和xynII基因的转录表达情况;最后应用DNS法对这些菌株中的木聚糖酶活性进行了测定。研究结果表明,xyn1编码的氨基酸序列与草腐菌相似性较高,而xynII编码的氨基酸序列与木腐菌遗传差异较小。在木聚糖酶活性测定和实时荧光定量PCR结果中,不同菌株的木聚糖酶活性趋势与xynII的转录表达趋势相似,均呈现依次递减。草菇的木聚糖酶活性与其生物转化率之间存在正相关性,推测草菇不同菌株木聚糖酶活性差异可能表现在转录水平上的差异。

关键词：草菇木聚糖酶实时荧光定量PCR 系统进化树

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低温胁迫下草菇甘油‐3‐磷酸酰基转移酶基因表达变化的研究

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菌物学报 2014年第2期33卷 334-340页

作者：姜威赵妍汪虹冯爱萍陈明杰南京农业大学生命科学学院江苏南京210095 上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传育种重点开放实验室农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403

以草菇低温敏感型V23菌株与耐低温型VH3菌株为试验材料,将二者菌丝体置于冰浴中进行不同时间的低温胁迫处理。首先提取RNA,反转录为cDNA,然后构建含有微管蛋白(tubulin,TUB)基因片段和甘油‐3‐磷酸酰基转移酶(glycerol‐3‐phosphate a... 详细信息

以草菇低温敏感型V23菌株与耐低温型VH3菌株为试验材料,将二者菌丝体置于冰浴中进行不同时间的低温胁迫处理。首先提取RNA,反转录为cDNA,然后构建含有微管蛋白(tubulin,TUB)基因片段和甘油‐3‐磷酸酰基转移酶(glycerol‐3‐phosphate acyltransferase,GPAT)基因片段的质粒,最终对GPAT基因在低温胁迫不同处理时间下的表达进行定量。结果表明,耐低温型的VH3菌株,在低温处理2h时,GPAT基因相对表达量上升,4h,表达量下降,6h上升,之后逐渐下降。低温敏感型V23菌株,在低温处理2h时,表达量下降,4h,表达量上升,此后逐渐下降;除低温处理4h外,V23菌株的GPAT基因表达量始终低于VH3菌株,初步推测GPAT基因的高表达与草菇的耐低温能力相关。

关键词：草菇低温甘油-3-磷酸酰基转移酶基因实时荧光定量PCR

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草菇β-木糖苷酶活性及其编码基因xyl的转录表达研究

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食品工业科技 2014年第24期35卷 203-207页

作者：王孟兰赵妍黄建春陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 南京农业大学生命科学学院江苏南京210095

本研究首先对草菇β-木糖苷酶编码序列Xyl进行了生物信息学分析,然后以对硝基木糖苷为底物测定了不同菌株中的木糖苷酶活性,并进一步比较了木糖苷酶基因xyl在草菇不同菌株中的相对表达量。结果表明:Xyl属于糖苷水解酶第43家族,由534个... 详细信息

本研究首先对草菇β-木糖苷酶编码序列Xyl进行了生物信息学分析,然后以对硝基木糖苷为底物测定了不同菌株中的木糖苷酶活性,并进一步比较了木糖苷酶基因xyl在草菇不同菌株中的相对表达量。结果表明:Xyl属于糖苷水解酶第43家族,由534个氨基酸残基组成,预测分子量为58.82ku,等电点为4.99;系统进化树分析表明,Xyl的氨基酸序列与木腐菌相似性较高,最高值达到61%,且草菇与木腐菌黄孢原毛平革、毛韧革菌等亲缘关系较近,但与同为草腐菌的灰盖鬼伞遗传距离较远;草菇不同菌株的β-木糖苷酶活性测定结果显示,Vb1的β-木糖苷酶活性最高,0229的β-木糖苷酶活性与A8之间无显著性差异;Real-time PCR结果显示,Vb1的xyl基因相对表达量也最高,三个菌株的xyl基因相对表达量依次为Vb1>A8>0229。

关键词：草菇 β-木糖苷酶实时荧光定量PCR 生物信息学

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香菇尿嘧啶营养缺陷型菌株的筛选与分子验证

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上海农业学报 2014年第3期30卷 6-9页

作者：王连会茅文俊鲍大鹏上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

筛选出对5'-FOA敏感性较高的香菇‘L26'菌株,采用原生质体紫外诱变技术,获得‘L26'菌株18株尿嘧啶营养缺陷型突变菌株。分子验证表明:其中8株菌株的尿嘧啶合成代谢路径发生了基因突变。6个菌株的pyrF基因发生突变,2个菌株的... 详细信息

筛选出对5'-FOA敏感性较高的香菇‘L26'菌株,采用原生质体紫外诱变技术,获得‘L26'菌株18株尿嘧啶营养缺陷型突变菌株。分子验证表明:其中8株菌株的尿嘧啶合成代谢路径发生了基因突变。6个菌株的pyrF基因发生突变,2个菌株的pyrG基因发生突变。

关键词：香菇尿嘧啶营养缺陷型 5’-氟乳清酸

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