谷氨酰胺合成酶(GS)是真菌氮素同化代谢和谷氨酸合成中的关键酶,采用3’RACE和5’RACE实验技术,克隆获得刺芹侧耳(杏鲍菇)谷氨酰胺合成酶编码基因(PE‐GS)全长序列,长度为1 271bp,具有4个内含子和5个外显子,编码353个氨基酸残基。系统进化树分析表明,刺芹侧耳PE‐GS与糙皮侧耳GS在分子进化关系上相近。通过real time RT‐PCR方法对PE‐GS基因在刺芹侧耳基质菌丝体和子实体中的表达情况进行了分析,结果表明,刺芹侧耳PE‐GS基因在子实体具有较高的表达水平,这暗示刺芹侧耳PE‐GS基因在子实体的氮素代谢中可能承担重要功能。
采用磷酸盐法对灵芝(Ganoderma lucidum)β-葡聚糖进行磷酸化修饰,在不同反应温度下(60、70、80、90、100℃)得到灵芝β-葡聚糖磷酸化衍生物(PGLP1~5),随着反应温度的上升,衍生物取代度(degree of substitution,DS)逐渐增大,重均分子量(...
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采用磷酸盐法对灵芝(Ganoderma lucidum)β-葡聚糖进行磷酸化修饰,在不同反应温度下(60、70、80、90、100℃)得到灵芝β-葡聚糖磷酸化衍生物(PGLP1~5),随着反应温度的上升,衍生物取代度(degree of substitution,DS)逐渐增大,重均分子量(average molecular weight,Mw)逐渐下降,反应温度为100℃时取代度最大为1.02。灵芝β-葡聚糖磷酸化衍生物体外对肿瘤细胞K562和L1210的增殖均有抑制作用,随着取代度增加,抑制率增高,且呈浓度依赖性;取代度最大的磷酸化衍生物PGLP5(DS=1.02,Mw=0.8×10^4)在200μg·mL^-1浓度下,对K562和L1210细胞增殖的抑制率分别为58.74%和50.05%,其IC50值分别为99.61μg·mL^-1和187.52μg·mL^-1。研究结果表明,灵芝β-葡聚糖磷酸化衍生物具有体外抗肿瘤活性,且抗肿瘤活性强弱与其取代度大小有关,取代度越大,抗肿瘤活性越强。
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