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多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会

作者：杨瑞恒鲍大鹏郭婷李燕纪光燕纪开萍谭琦国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所宏臻农业科技发展有限公司

暗褐网柄牛肝菌Phlebopus portentosus (Berk. and Broome) Boedijin是一种珍稀食用菌,在中国和泰国广被人们喜爱,它也是目前为止唯一可以栽培的牛肝菌(牛肝菌目)。在暗褐网柄牛肝菌栽培的过程中,添加覆土材料是一个必须的步骤,不添加... 详细信息

暗褐网柄牛肝菌Phlebopus portentosus (Berk. and Broome) Boedijin是一种珍稀食用菌,在中国和泰国广被人们喜爱,它也是目前为止唯一可以栽培的牛肝菌(牛肝菌目)。在暗褐网柄牛肝菌栽培的过程中,添加覆土材料是一个必须的步骤,不添加和添加无菌土都不能形成子实体,这也就说明了覆土中的微生物对暗褐网柄牛肝菌子实体的形成具有重要的作用。但是到目前为止,对于覆土材料中的微生物动态变化研究的还不够。本研究利用高通量测序Miseq平台测定了覆土材料中的16S rRNA的V3-V4区域,来揭示牛肝菌栽培过程中微生物的动态变化过程。本实验共采集了114个样品包含了覆土原始材料(OS),灭菌后培养料(上层SU和下层SD),长满菌丝后培养料(上层HU和下层HD),覆土后长满菌丝覆土(FHCS)和培养料(上层FHU和下层FHD),原基时期覆土(PCS)和培养料(上层PU和下层PD),子实体时期子实体(FB)、覆土(FCS)和培养料(上层FU和下层FD),每个样品6个重复,经过Miseq测序获得了3950816条序列,以灭菌后的样品(SU和SD)为对照,过滤数据后保留了38个样品的424200条序列,过滤掉了76个样品,仅仅剩下6个OS,6个FHCS,5个FHCU,6个PCS,5个PCU,6个FCS和4个FCU,为了保持数据的平衡,每个样品取7906条序列进行后续分析。在97%的相似度下聚类共获得了231个OTUs,所有样品中OTUs数量变化范围为128到184,细菌多样性在菌丝体时期到原基时期是一个增长的过程,随后慢慢下降。NMDS和Anosim分析显示不同时期的覆土中微生物组成有很大的差异。在所有样品中Proteobacteria、Chloroflexi、Acidobacteria、 Actinobacteria、Saccharibacteria和Bacteroidetes丰度最高,Burkholderia是丰度最高的属(OS样品除外,Chloroflexi丰度最高),Burkholderia一般被认为是双孢菇等蘑菇的致病菌,但是此结果与松茸和一些牛肝菌科物种周系土壤微生物的群落结构相似,Burkholderia在FHCS样品中百分含量为55.79%,在PCS中就下降为35.14%,随后又在FCS样品中上升至45.60%。在形成原基的过程中Acidobacterium、Rhizobium、Acidisphaera、Bradyrhizobium和Bacillus丰度升高,LefSe分析也显示Acidobacterium和Acidisphaera是原基时期的标志微生物,Bradyrhizobium、Roseiarcus和Pseudolabrys与子实体的形成有关系。进一步利用丰度前20 OTUs进行网络分析显示有23edges包含了4反作用和19正作用的edges,覆土中的细菌之间可能发生广泛的相互作用对牛肝菌的生长具有重要的作用。揭示覆土中微生物的动态变化过程有助于我们了解微生物与暗褐网柄牛肝菌菌丝伸长、原基形成和子实体形成的关系,有助于我们进行无覆土栽培流程的设计。

关键词：覆土去污染细菌多样性动态变化 Miseq

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6种市售工厂化栽培金针菇的氨基酸组成及蛋白质营养评价

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食品科学 2018年第10期39卷 263-268页

作者：吴莹莹鲍大鹏王瑞娟陈洪雨王红梅上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403 康奈尔大学农业与生命科学学院美国纽约州伊萨卡14853 上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所上海201403

为分析工厂化栽培金针菇的蛋白质营养,本研究测定6种来自不同生产企业的市售金针菇样品中粗蛋白含量及氨基酸组成,分析其中呈味氨基酸的含量,并通过计算蛋白质的氨基酸评分、化学评分、氨基酸比值系数分和必需氨基酸指数,以及预测蛋白... 详细信息

为分析工厂化栽培金针菇的蛋白质营养,本研究测定6种来自不同生产企业的市售金针菇样品中粗蛋白含量及氨基酸组成,分析其中呈味氨基酸的含量,并通过计算蛋白质的氨基酸评分、化学评分、氨基酸比值系数分和必需氨基酸指数,以及预测蛋白质校正氨基酸计分等非生物学指标,评价金针菇的蛋白质营养价值。结果表明,6种金针菇样品均含有18种水解氨基酸,其中呈味氨基酸含量比例为56.28%~57.37%。必需氨基酸含量接近WHO/FAO模式,其中蛋氨酸、赖氨酸含量丰富,限制氨基酸为缬氨酸和异亮氨酸。6种市售金针菇的氨基酸比值系数分为72.61~82.07,必需氨基酸指数均高于90,与卵清蛋白接近。上述结果表明工厂化栽培的金针菇中呈味氨基酸含量丰富,含有利于人体吸收的优质蛋白,具有较大的风味食品开发潜力,适合与谷物、肉类等进行膳食搭配以促进人体对氨基酸的平衡摄取。

关键词：金针菇氨基酸组成必需氨基酸蛋白质营养评价

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金针菇子实体多糖的提取分离纯化及降血脂活性筛选研究

金针菇子实体多糖的提取分离纯化及降血脂活性筛选研究

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多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会

作者：刘肖肖王慧敏汪雯翰贾薇上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海海洋大学食品学院

金针菇（Flammulina velutipes（Curtis） Singer）是我国最早实现工厂化栽培的食用菌品种。金针菇不仅口感鲜美嫩滑,富含蛋白质、碳水化合物、膳食纤维素和维生素等多种营养物质[1],而且具有保肝、调节免疫、抑制肿瘤和抗氧化等多种药... 详细信息

金针菇（Flammulina velutipes（Curtis） Singer）是我国最早实现工厂化栽培的食用菌品种。金针菇不仅口感鲜美嫩滑,富含蛋白质、碳水化合物、膳食纤维素和维生素等多种营养物质[1],而且具有保肝、调节免疫、抑制肿瘤和抗氧化等多种药理作用[2-4]。尽管我国的金针菇工厂化生产技术已达国际领先水平,但由于自主知识产权菌种的创新不足,目前市场上的金针菇产品同质化严重,经济附加值低,导致金针菇生产企业面临着成本投入巨大、低价恶性竞争和净利润低等问题[5]。为促进金针菇产品的进一步研发,本研究团队利用水提醇沉法从金针菇子实体中得到两种粗多糖FVP30和FVP60,并通过DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱层析对粗多糖进一步分离分别得到FVP30A、FVP30B、FVP60A和FVP60B四种多糖组分,同时利用细胞实验模型和斑马鱼实验模型对这四种组分的降血脂活性进行跟踪;实验结果表明FVP60B在400μg/mL下具有较好的降血脂活性。本研究团队进一步利用Sephacryl S-300 High Resolution凝胶柱层析对FVP60B进行分离纯化,得到FVPB1组分,其重均分子量为3.863×104Da,细胞实验和斑马鱼实验均证明了其降血脂活性。以上研究结果为金针菇子实体多糖与降血脂关系提供一定的理论支持,有效促进金针菇子实体多糖的开发与利用。

关键词：金针菇降血脂斑马鱼模型纯化多糖

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抑制前列腺癌的食药用菌醇提物的筛选及灵芝醇提物对癌细胞的抑制机理

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菌物学报 2018年第6期37卷 782-793页

作者：汪雯翰朱丽娜张赫男杨焱庄海宁唐传红刘艳芳徐宾贾薇张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

比较了灰树花Grifola frondosa、巴氏蘑菇Agaricus blazei、猴头菌Hericium erinaceus、刺芹侧耳Pleurotus eryngii、毛头鬼伞Coprinus comatus、蛹虫草Cordyceps militaris、灵芝Ganoderma lingzhi、香菇Lentinula edodes、桑黄Sanghuangporus sanghuang和桦褐孔菌Inonotus obliquus 10种食用菌醇提物对前列腺癌LNCaP细胞增殖的影响,其中灵芝醇提物对LNCaP细胞增殖及5ɑ-还原酶活性具有良好的抑制效果,对LNCaP细胞释放PSA的抑制效果也好于其他食用菌。进一步研究灵芝醇提物对LNCaP细胞的抑制机理,结果表明,灵芝醇提物通过诱导细胞凋亡、使Caspase-3、Bax、P53活性升高,PARP、Bcl-2活性下降来实现对LNCap细胞的抑制作用。利用自噬抑制剂氯喹和自噬激活剂雷帕霉素观察细胞自噬在灵芝醇提物抗肿瘤过程中的作用,结果表明,体外激活细胞自噬对LNCaP细胞起到保护,从而减弱了灵芝醇提物的抗肿瘤作用。

关键词： LNCaP 抑制率细胞凋亡含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3 多聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶自噬

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灵芝β-葡聚糖硫酸化衍生物抑制脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7产生NO的活性

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食用菌学报 2018年第2期25卷 105-112页

作者：张忠刘艳芳唐庆九周帅杨焱颜梦秋唐传红吴迪冯娜张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

采用氯磺酸法对灵芝(Ganoderma lucidum)β-葡聚糖进行硫酸化修饰,在不同反应温度下(40、50、60、70、80、90℃)得到灵芝β-葡聚糖硫酸化衍生物(SGLP1~SGLP6),随着反应温度的上升,硫酸化衍生物取代度逐渐增加,反应温度为60℃时取代度最... 详细信息

采用氯磺酸法对灵芝(Ganoderma lucidum)β-葡聚糖进行硫酸化修饰,在不同反应温度下(40、50、60、70、80、90℃)得到灵芝β-葡聚糖硫酸化衍生物(SGLP1~SGLP6),随着反应温度的上升,硫酸化衍生物取代度逐渐增加,反应温度为60℃时取代度最大为1.72,之后随着反应温度上升,取代度逐渐下降;随着反应温度的增加衍生物的重均分子量逐渐下降。灵芝β-葡聚糖衍生物的溶解度为0.901~1.102g/100mL,与硫酸化前相比溶解度提高约50倍。灵芝β-葡聚糖硫酸化衍生物具有抗炎作用,对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞释放NO有一定程度的抑制作用,并呈浓度依赖性,且随着取代度增加,抑制率增高;对LPS刺激RAW264.7细胞的吞噬活性也具有显著的抑制作用,且随着取代度增加对细胞吞噬活性的抑制作用增加;取代度相近时,重均分子量较大的硫酸化衍生物对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞释放NO的抑制率较高以及对细胞吞噬活性的抑制作用也较强,说明硫酸化多糖的体外抗炎活性与其硫酸化衍生物的取代度和重均分子量相关。

关键词：灵芝β-葡聚糖硫酸化巨噬细胞抗炎

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猴头菌融合育种原生质体制备与再生条件优化

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北方园艺 2018年第9期 159-165页

作者：杨珊张赫男李巧珍吴迪陈明杰杨焱农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

以猴头菌0605为试材,采用单因素试验和正交实验,研究了酶系统、酶解时间、酶解温度、菌龄、恒温摇床转速单因素对其原生质体制备与再生的影响。结果表明:原生质体制备和再生的最佳条件为菌龄10 d的菌丝体,在酶系统2.0%溶壁酶+0.5%崩溃... 详细信息

以猴头菌0605为试材,采用单因素试验和正交实验,研究了酶系统、酶解时间、酶解温度、菌龄、恒温摇床转速单因素对其原生质体制备与再生的影响。结果表明:原生质体制备和再生的最佳条件为菌龄10 d的菌丝体,在酶系统2.0%溶壁酶+0.5%崩溃酶作用下,32℃酶解2.5 h,恒温摇床转速为120 r·min-1。该试验在最佳条件下获得的猴头菌原生质体数量与再生率均较高,为进一步开展猴头菌原生质体融合育种奠定基础。

关键词：猴头菌原生质体制备再生率

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复合有机氮源对灵芝三萜液态深层发酵的影响

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菌物学报 2018年第12期37卷 1761-1770页

作者：翟双星冯杰唐庆九冯娜杨焱刘艳芳唐传红周帅张劲松上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌加工分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海师范大学生命与环境科学学院上海200234

以灵芝为材料,在前期研究基础上,以不同酵母粉作为氮源,研究复合有机氮源对灵芝三萜液态深层发酵的影响。首先,由单因素实验考察3种不同的酵母粉对灵芝菌丝体合成灵芝三萜的影响,确定酵母粉的最适宜浓度范围。在此基础上,根据中心组合... 详细信息

以灵芝为材料,在前期研究基础上,以不同酵母粉作为氮源,研究复合有机氮源对灵芝三萜液态深层发酵的影响。首先,由单因素实验考察3种不同的酵母粉对灵芝菌丝体合成灵芝三萜的影响,确定酵母粉的最适宜浓度范围。在此基础上,根据中心组合实验设计,对3种酵母粉分别采用2种复合和3种复合的方式,优化复合有机氮源的最佳组合配比。结果表明:当基础培养基中添加6.6g/L的酵母粉N-1与6.6g/L的酵母粉N-2时,灵芝三萜产量可达0.478g/L(理论产量为0.485g/L),比添加单一酵母粉N-1、N-2、N-3分别提高了21%、139%、103%,其氮源用量为两种组合时最低。当基础培养基中酵母粉N-1、N-2与N-3添加量分别为5.07g/L、3.78g/L、7.63g/L时,灵芝三萜产量达0.514g/L(理论产量为0.510g/L),比单因素对照组分别提高了30%、157%和74%。本研究优化的复合氮源添加方式可明显提高灵芝菌丝体液态深层发酵生产灵芝三萜的产量,为其规模化液态深层发酵的生产提供科学数据。

关键词：酵母粉有机氮源灵芝三萜中心组合

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甜味剂莱鲍迪苷D的高效生物催化合成

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食品与发酵工业 2018年第4期44卷 1-7页

作者：费理文王勇上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 中科院上海生命科学研究院植物生理生态研究所上海200032

采用来自水稻的UDP-糖基转移酶EUGT11并结合染色体改造构建了大肠杆菌工程菌,用于全细胞催化莱鲍迪苷A(Rebaudioside A,RA)生产莱鲍迪苷D(Rebaudioside D,RD)。为了增加宿主细胞内源性糖配体葡萄糖尿苷二磷酸(uridine diphosphate gluco... 详细信息

采用来自水稻的UDP-糖基转移酶EUGT11并结合染色体改造构建了大肠杆菌工程菌,用于全细胞催化莱鲍迪苷A(Rebaudioside A,RA)生产莱鲍迪苷D(Rebaudioside D,RD)。为了增加宿主细胞内源性糖配体葡萄糖尿苷二磷酸(uridine diphosphate glucose,UDPG)的供给以满足糖基化反应需要,以大肠杆菌BL21(DE3)为出发菌对UDPG代谢通径进行改造,获得了一系列改造菌株SG1、SG2、SG3和SG4。其中以SG4为宿主过表达可高效催化RA合成RD的糖基转移酶EUGT11进行全细胞催化,RD产量高。随后以此工程菌为对象,对可能影响RD催化合成的条件进行了研究,结果表明50 m L培养菌液离心所收集新鲜菌体可在100 mmol/L pH 8.0磷酸钠缓冲液、80 mmol/L柠檬酸钠、体积分数0.1%Triton X100、500 g/L蔗糖、5 mmol/L Zn Cl2、42℃转化1 d的条件下催化1 mmol/L RA底物生成1112.21 mg/L RD,转化率可达98.5%。

关键词：甜叶菊莱鲍迪苷A(Rebaudioside A,RA) 莱鲍迪苷D(Rebaudioside D,RD) 重组大肠杆菌全细胞催化

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5种市售工厂化栽培杏鲍菇的氨基酸组成及蛋白质营养分析

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上海农业学报 2019年第4期35卷 9-15页

作者：陈洪雨鲍大鹏康前进龚二生王莹万佳宁李燕吴莹莹上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海201403 上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室上海200240 沈阳农业大学食品学院沈阳110866

为比较来自不同企业杏鲍菇产品的氨基酸特征,分析其蛋白质营养价值,测定了5种上海市售工厂化栽培杏鲍菇的氨基酸组成,通过主成分分析(PCA)区分必需氨基酸(IAA)特征,并基于现行国际模式谱,采用系统的模型评价了其蛋白质品质.结果表明:参... 详细信息

为比较来自不同企业杏鲍菇产品的氨基酸特征,分析其蛋白质营养价值,测定了5种上海市售工厂化栽培杏鲍菇的氨基酸组成,通过主成分分析(PCA)区分必需氨基酸(IAA)特征,并基于现行国际模式谱,采用系统的模型评价了其蛋白质品质.结果表明:参试杏鲍菇的平均粗蛋白含量为22.8 g/(100 g)DW,平均IAA总量为589.55 mg/g ***很好地区分了各产品,获得的PC1和PC2一共解释了92.49%的IAA差异.杏鲍菇蛋白含有18种常见氨基酸,包括全部8种IAA,其中甲硫氨酸含量最高(22.28 mg/g DW).除第一限制性氨基酸色氨酸外,其余IAA的氨基酸评分和美国科学院模式评分均超过100.杏鲍菇蛋白的氨基酸平衡性有限(氨基酸比值系数0.37-3.35,必需氨基酸指数113.89-142.89),低于鸡蛋蛋白,其IAA分布与肉禽、谷类食品具有互补性.

关键词：杏鲍菇蛋白质氨基酸组成必需氨基酸营养评价

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灵芝子实体中三萜类物质抗氧化活性的谱效关系

灵芝子实体中三萜类物质抗氧化活性的谱效关系

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多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会

作者：杨妍张劲松汪雯翰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验上海海洋大学食品学院

灵芝(Ganoderma lingzhi)为担子菌门、伞菌纲、多孔菌科灵芝真菌,是我国重要的药用真菌之一,已有2000多年的记载和利用历史。灵芝的抗氧化清除自由基作用一直是受到学术界关注的研究课题,自由基是细胞代谢过程中产生的活性物质,自由基... 详细信息

灵芝(Ganoderma lingzhi)为担子菌门、伞菌纲、多孔菌科灵芝真菌,是我国重要的药用真菌之一,已有2000多年的记载和利用历史。灵芝的抗氧化清除自由基作用一直是受到学术界关注的研究课题,自由基是细胞代谢过程中产生的活性物质,自由基可以造成Aβ(Amyloidβ-protein,Aβ)沉积及微管相关蛋白tau蛋白(microtubule-associated protein tau,tau)的磷酸化,会进一步使AD(Alzheimer's disease,AD)大脑中的氧化还原反应失衡,而过多的Aβ沉积及Tau蛋白高度磷酸化则造成严重脑部损伤。目的研究灵芝三萜特征图谱和抗氧化活性的相关性,探讨灵芝三萜抗氧化活性的物质基础,并筛选活性色谱峰。方法在以HPLC法建立灵芝指纹图谱分析方法的基础上,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, DPPH)法测定灵芝样品抗氧化活性,运用偏最小二乘回归分析,将灵芝醇提物抗氧化活性与指纹图谱共有峰的峰面积相关联,并结合三萜标准品在HPLC上进样,匹配活性色谱峰,研究灵芝抗氧化作用的物质基础及谱效关系。结果从27个匹配特征峰中筛选出S9、S10与灵芝清除DPPH自由基能力呈显著正相关,并通过与对照品比对确定了S9为灵芝酸B、S10为灵芝酸LM2。结论灵芝抗氧化活性指纹图谱在乙醇提取物基础上建立,不但可系统表征该灵芝复方成分-药效的相关性,也可准确追踪并分离药理活性部位,为灵芝药材资源的质量控制及进一步开发利用奠定基础。

关键词：灵芝高效液相色谱指纹图谱 DPPH清除活性谱效关系

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