检索结果-内蒙古大学图书馆

合成生物学 2023年第4期4卷 738-755页

作者：林继聪邹根刘宏民魏勇军郑州大学药学院郑州大学药物研究院郑州大学合成生物学实验室药物关键制备技术教育部重点实验室河南郑州450001 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403

丝状真菌能够合成抗生素、色素、酶制剂、激素等多种天然产物,广泛应用于医药、化工、农业和基础生物学研究等领域。丝状真菌遗传背景复杂,阻碍了对其的进一步开发利用。基因组编辑是基于核酸酶对基因组位点特异性序列进行靶向切割,产... 详细信息

丝状真菌能够合成抗生素、色素、酶制剂、激素等多种天然产物,广泛应用于医药、化工、农业和基础生物学研究等领域。丝状真菌遗传背景复杂,阻碍了对其的进一步开发利用。基因组编辑是基于核酸酶对基因组位点特异性序列进行靶向切割,产生双链断裂,从而通过非同源末端连接或同源重组进行修复的技术。其中,CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)系统是目前使用最普遍的基因组编辑技术,已在丝状真菌遗传育种、基因改造和多种天然产物合成等方面进行了大量应用。本文总结了丝状真菌CRISPR/Cas的技术原理、元件表达、递送方式及该系统在次级代谢产物等研究中的应用。对于脱靶效应以及转化率低的问题,本文讨论了可能的解决方法。在此基础上,展望了基于CRISPR/Cas的基因组编辑技术在真菌基因功能表征、天然产物合成代谢途径解析与重构、高效丝状真菌底盘细胞构建、天然产物合成等方面的应用。

关键词：丝状真菌 CRISPR/Cas系统次级代谢产物基因敲除异源表达

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猴头菌子实体粉的复合酶解及其功能特性

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食用菌学报 2022年第2期29卷 54-64页

作者：马强杨焱张忠陈万超李文庞小博周靖吴迪上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海201403 上海沛元农业发展有限公司上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403

在筛选的复合酶(纤维素酶∶β-葡萄糖苷酶∶壳聚糖酶)配比(1∶1∶1)基础上,采用单因素实验研究料液比、加酶量、酶解时间、酶解温度、pH对猴头菌(Hericium erinaceus)子实体粉中多糖溶出量的影响,通过响应面法确定其最佳提取工艺参数,... 详细信息

在筛选的复合酶(纤维素酶∶β-葡萄糖苷酶∶壳聚糖酶)配比(1∶1∶1)基础上,采用单因素实验研究料液比、加酶量、酶解时间、酶解温度、pH对猴头菌(Hericium erinaceus)子实体粉中多糖溶出量的影响,通过响应面法确定其最佳提取工艺参数,并对酶解后子实体粉溶出多糖的理化性质及保护胃黏膜上皮细胞效果进行分析。结果表明:猴头菌子实体粉复合酶解的最佳工艺条件为料液比1∶4(g∶mL),复合酶添加量150 U·g^(-1)、52℃、30 min、pH 5.5,酶解后猴头菌子实体粉多糖含量可达(8.41±0.31)%,与响应面预测值8.45%接近,与未酶解子实体粉多糖含量相比提高115%。酶解后子实体粉多糖重均分子量明显降低,单糖组成中葡萄糖胺、半乳糖比例增加,葡萄糖的比例降低。胃黏膜上皮细胞损伤修复研究表明,酶解猴头菌子实体粉处理组的胃黏膜上皮细胞(GES-1)存活率可达81.30%,与未酶解子实体粉的细胞存活率相比提高约20%。表明酶解后猴头菌子实体粉多糖溶出量和保护胃黏膜作用得到提升。

关键词：猴头菌复合酶解多糖理化性质 GES-1细胞存活率

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基于多糖品质提升的猴头菌全产业链开发利用关键技术

基于多糖品质提升的猴头菌全产业链开发利用关键技术

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：杨焱吴迪李巧珍张赫男张忠陈万超李文上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心

猴头菌是以养胃著称的药食两用菌,因其既可入药也可做食品而成为深加工利用最为广泛的食用菌。多糖是猴头菌中的主要功效成分,作者团队围绕猴头菌多糖品质提升的开发利用,系统进行了高多糖品种选育与分子机制发掘、高效加工技术创新和...

猴头菌是以养胃著称的药食两用菌,因其既可入药也可做食品而成为深加工利用最为广泛的食用菌。多糖是猴头菌中的主要功效成分,作者团队围绕猴头菌多糖品质提升的开发利用,系统进行了高多糖品种选育与分子机制发掘、高效加工技术创新和产品创制,并实现产业化应用,提升了猴头菌种源质量和产业发展水平。建立了猴头菌核心种质资源库,优选出高多糖野生型亲本菌株,经ARTP诱变选育获得多糖含量高、抗逆性强的猴头菌新品种,子实体多糖含量提高20%以上。基于猴头菌全基因组和诱变高多糖菌株的差异组学分析,对亲本菌株与诱变高产多糖菌株进行差异组学分析,利用生物信息学技术和基因靶向验证,挖掘到与猴头菌多糖合成密切相关的关键基因14个,并证实碳水化合物代谢通路中变化的蛋白可促进葡萄糖-6-磷酸酶的产生,为多糖合成提供中间体,解析了诱变高产多糖的分析机制;挖掘出RAS-cAMP-PKA通路下调可促进β-葡聚糖高产的机制,为β-葡聚糖定向调控提供了重要理论依据。针对猴头菌多糖分离纯化过程繁琐、得率低、成本高的技术缺陷,开创了沸水提取、低温冻融协同梯度乙醇沉淀的分离制备技术,分离纯化出高纯度猴头菌β-葡聚糖,含量达到96.80%,结构鉴定表明其以β-1,3连接为主链、1,6-连接为支链的葡聚糖,分子量2390kDa;该β葡聚糖可诱导淋巴细胞增殖和增强THP-1巨噬细胞分泌细胞因子IL-6,TNF-α和IL-1β的水平,显示出良好的体外免疫活性。通过超声降解技术,使大分子猴头菌β葡聚糖的特性粘度从原来的1231.99 L/kg降至97.72 L/kg,溶解度提高300%,获得更易吸收利用的多糖组分。对明确结构的猴头菌β-葡聚糖H6PC20和α-岩藻半乳聚糖HPB-3保护大鼠胃粘膜损伤的作用及机制进行了系统研究,阐明猴头菌多糖对胃粘膜损伤保护作用主要是通过激活胃粘膜的修复防御系统,提高防御修复因子EGF、bFGF、PGE2,降低炎症反应和减轻氧化损伤方面发挥功效作用。大分子β-葡聚糖保护胃粘膜的机制是通过增强防御因子分泌,激活机体防御和修复系统;而低分子量α-岩藻半乳聚糖通过抗炎作用发挥保护效果,为猴头菌多糖的定向开发利用提供了理论支撑。创新复合酶解技术,将子实体多糖释放率提高130%;创制了猴头菌复合酶解粉产品,保护胃粘膜活性提高80%,促进了猴头菌食品化产品的品质提升。开发了系列猴头菌营养健康食品,促进了其全产业链提质增效。

关键词：

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香菇菌渣多糖的高压复合酶提取及其抗炎活性研究

香菇菌渣多糖的高压复合酶提取及其抗炎活性研究

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中国食品科学技术学会第二十届年会

作者：张忠吴迪颜梦秋李文陈万超刘艳芳张劲松杨焱上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心

我国香菇产业的快速发展导致大量废弃菌渣的产生,给生态环境带来了巨大压力。因此,研究废弃菌渣的综合利用具有重要意义。本研究采用复合酶和高压预处理相结合的方法从香菇菌渣中提取多糖。利用单因素和响应面优化得到最佳提取条件为:... 详细信息

我国香菇产业的快速发展导致大量废弃菌渣的产生,给生态环境带来了巨大压力。因此,研究废弃菌渣的综合利用具有重要意义。本研究采用复合酶和高压预处理相结合的方法从香菇菌渣中提取多糖。利用单因素和响应面优化得到最佳提取条件为:复合酶（纤维素、木聚糖酶、β-葡聚糖酶）的比例为3:2:1;酶的总量为660 U·g;液料比,20 mL/g;温度,45℃;时间,6 h;粗提物再经过醇沉透析后所得香菇菌渣粗多糖（LE-UE）的产率为5.98%,含量为51.60%。LE-UE通过抑制NO的释放和炎性细胞因子的分泌,显著改善LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7的炎症损伤。动物实验表明,LE-UE可通过调节氧化应激水平显著改善溃疡性结肠炎小鼠的组织病理学损伤和炎症,并通过下调mRNA表达和蛋白质水平减少炎性细胞因子的释放。因此,LE-UE具有显著的抗炎活性,可作为一种新型的抗炎药用于治疗。该研究为香菇废弃菌渣的高值化利用提供了科学依据,也为开发用于溃疡性结肠炎治疗的功能性食品和新型抗炎剂提供了理论依据。

关键词：香菇菌渣多糖抗炎活性高压复合酶

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灵芝液态发酵中溶氧调控三萜合成及活性研究

灵芝液态发酵中溶氧调控三萜合成及活性研究

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中国菌物学会2024年学术年会

作者：冯杰姜幸怡刘艳芳唐传红颜梦秋张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

灵芝是我国珍贵的食药两用真菌,其三萜类物质具有显著的药理活性。液态发酵是获取灵芝三萜的有效途径,其中溶氧浓度是影响三萜合成的关键因素。本研究探究了溶氧调控对灵芝三萜合成的影响,并建立了基于溶氧调控的高效液态发酵技术体系... 详细信息

灵芝是我国珍贵的食药两用真菌,其三萜类物质具有显著的药理活性。液态发酵是获取灵芝三萜的有效途径,其中溶氧浓度是影响三萜合成的关键因素。本研究探究了溶氧调控对灵芝三萜合成的影响,并建立了基于溶氧调控的高效液态发酵技术体系。首先,通过振荡-静置两阶段培养方式,发现5 L发酵罐中,当通气量为1.5 vvm(相对溶氧浓度约10.5%)时,三萜含量最高达30.04 mg/g,较5.69%溶氧浓度时增加了4.4倍。空间代谢组学分析显示,溶氧条件影响糖类代谢和三萜合成途径,特别是异戊烯基焦磷酸(IPP)参与的三萜生物合成途径。其次,为了提升三萜合成效率和产量,本研究开发了振荡-静置循环培养法。通过人工神经网络和遗传算法优化,确定最佳循环培养组合为振荡2.8 d-静置7.3d-振荡0.2 d-静置0.3 d。在此条件下,灵芝三萜含量达到20.82 mg/g,产量达129.09 mg/L,较传统方法提高了324.78%,且培养周期缩短至10.6 d。再次,在3 L、5 L和50 L规模的发酵罐中验证了振荡-静置循环培养法的放大效果。结果表明,在最佳溶氧条件下(通气量1.5 vvm、转速150 r/min),各规模发酵罐中三萜产量分别为217.92 mg/L、221.43 mg/L和197.07 mg/L,较摇瓶水平分别提高了68.81%、71.53%和52.66%。最后,振荡-静置循环培养发酵产物的抗氧化和抗肿瘤作用研究表明,不同规模培养菌丝体均展现显著抗氧化和抗肿瘤活性。抗氧化活性随浓度升高而稳定,抗肿瘤活性在6.25μg/mL浓度下显著抑制L1210细胞,对K562细胞抑制效果略低。50 L发酵规模下菌丝体醇提物在体内实验中显著抑制肿瘤生长,125μg/mL浓度下效果最佳。此外,该提取物在31.2μg/mL浓度下促进肿瘤细胞凋亡能力优于阳性对照索拉非尼。

关键词：灵芝三萜液态发酵溶氧振荡-静置循环培养生物活性

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灵芝三萜结构和生物活性及高产三萜菌株的研究进展

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食用菌学报 2023年第5期30卷 103-112页

作者：杨宝珠唐传红谭贻徐爱国张赫男冯杰吴友根张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 海南大学园艺学院海南海口570228 西藏自治区高原生物研究所西藏拉萨850000 海南大学三亚南繁研究院海南三亚572025 海南大学热带作物学院海南海口570228

灵芝(Ganoderma spp.)是著名的药用真菌,含有多种活性化合物,灵芝三萜是其主要的活性代谢成分之一,具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖等功能。笔者总结了灵芝三萜的分离纯化、结构、生物活性及高产三萜育种工作的研究进展,并对今后灵芝的研... 详细信息

灵芝(Ganoderma spp.)是著名的药用真菌,含有多种活性化合物,灵芝三萜是其主要的活性代谢成分之一,具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖等功能。笔者总结了灵芝三萜的分离纯化、结构、生物活性及高产三萜育种工作的研究进展,并对今后灵芝的研究工作进行展望,以期为灵芝三萜的开发利用提供参考。

关键词：灵芝灵芝三萜生物活性菌株选育

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前体物和原位萃取剂对樟芝发酵产Antrodin A和Antrodin C的影响

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食用菌学报 2022年第1期29卷 73-79页

作者：白旭汪雯翰张劲松琚建伟张守兵丁保安张亚平贾薇石河子大学生命科学学院新疆石河子832003 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403 上海彤颜实业有限公司上海201417

在樟芝(Taiwanofungus camphoratus)液态发酵培养基中添加不同前体物(柠檬酸、顺丁烯二酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸、肌醇、酪氨酸)和原位萃取剂(大豆油、花生油、菜籽油、玉米胚芽油、橄榄油),测定其对樟芝发酵产Antrodin A和Antrodin C的... 详细信息

在樟芝(Taiwanofungus camphoratus)液态发酵培养基中添加不同前体物(柠檬酸、顺丁烯二酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸、肌醇、酪氨酸)和原位萃取剂(大豆油、花生油、菜籽油、玉米胚芽油、橄榄油),测定其对樟芝发酵产Antrodin A和Antrodin C的影响。结果表明:无论是否添加前体物,发酵产物中均未检测到Antrodin A,添加0.1 g·L^(-1)的柠檬酸、顺丁烯二酸和谷氨酰胺抑制Antrodin C的产生,而添加0.1 g·L^(-1)的苯丙氨酸、肌醇、酪氨酸对Antrodin C的产量没有显著影响;添加原位萃取剂能显著促进Antrodin A的产生,而对于Antrodin C的产量,除添加玉米胚芽油的处理外,添加大豆油、花生油、菜籽油和橄榄油均使Antrodin C产量降低;同时添加原位萃取剂(大豆油)和0.1 mg·L^(-1)苯丙氨酸,Antrodin A产量达268.30 mg·L^(-1);同时添加原位萃取剂(大豆油)和0.1 mg·L^(-1)肌醇,Antrodin C产量达475.00 mg·L^(-1)。

关键词：樟芝 Antrodin A Antrodin C 原位萃取

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糖谱法分析灵芝子实体多糖特征及谱效关系研究

糖谱法分析灵芝子实体多糖特征及谱效关系研究

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：刘艳芳刘静冯杰张劲松唐庆九唐传红周帅上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心

灵芝(Ganoderma spp.)是一种药用真菌,因具有广泛的药理作用和极低的毒性,已被大量应用于功能食品和中药产品中。多糖是其发挥免疫调节功能的主要成分,常作为灵芝类产品的质控指标。但由于灵芝来源多样、多糖结构复杂、缺失标志性活性... 详细信息

灵芝(Ganoderma spp.)是一种药用真菌,因具有广泛的药理作用和极低的毒性,已被大量应用于功能食品和中药产品中。多糖是其发挥免疫调节功能的主要成分,常作为灵芝类产品的质控指标。但由于灵芝来源多样、多糖结构复杂、缺失标志性活性多糖组分等问题,导致其质量控制体系还不成熟。本研究针对收集得到的100多份赤芝(Ganoderma lucidum)子实体水提粗多糖的分子量分布特征进行了系统分析,发现其主要由分子量为2.97×10～6～5.47×10～6 g/mol(GLP1)、2.15×10～6～5.73×10～6 g/mol(GLP2)和1.75×10～3～1.14×10～4 g/mol(GLP3)的三类多糖组分组成,其中GLP3为所有菌株的共有组分,而GLP1和GLP2在不同菌株中分布不同。对GLP1和GLP2进行了纯化和结构鉴定,明确GLP1是以β-(1→3)-连接为主链、以β-(1→6)-连接为支链的葡聚糖,而GLP2组分是以α-(1→4)-连接为主链、α-(1→6)-连接为支链的葡聚糖,GLP1组分与Dectin-1受体结合激活免疫的活性优于GLP2。不同菌株灵芝的低分子量组分(GLP3)是以葡萄糖为主并含有不同比例甘露糖和半乳糖的杂多糖,不同菌株GLP3组分诱导巨噬细胞释放NO、TNF-α和IL-6细胞因子的活性有差异。为了揭示GLP3组分特征与活性的关系,明确活性多糖的特征识别峰,本研究建立了低分子量灵芝多糖的指纹图谱和谱效关系模型。通过分析多糖分子量分布、单糖组成以及部分酸水解产物与多糖活性的相关性,发现重均分子量在4.27×10～3～5.27×10～3g/mol和1×10～4～1.14×10～4g/mol之间的两个峰与多糖的免疫活性关联度更高;多元线性回归分析表明多糖中的半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸摩尔百分比与该组分刺激巨噬细胞释放NO的量呈正相关性,而岩藻糖与之相反。偏最小二乘回归分析表明部分酸水解产物图谱中的P2、P3、P8、P10组分与多糖的免疫活性密切相关,是多糖发挥免疫功能的主要物质基础。基于本研究中谱效关系模型识别的特征峰可为灵芝多糖及其产品免疫活性的评价提供参考。

关键词：灵芝多糖结构特征免疫活性指纹图谱谱效关系

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不同碳氮源对香菇液体菌种生长的影响

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上海农业学报 2024年第1期40卷 40-46页

作者：王宇星董浩然章炉军李玉李巧珍谭琦赵勇周峰上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 山东御苑生物科技有限公司临沂276000

以香菇‘沪香F2’为试验材料,探究了9种碳源配方和10种氮源配方对菌丝在固体培养基上生长速度、在液体培养基中菌丝生物量和发酵固形物体积比以及发酵完成时接种后菌丝在木屑试管中生长速度的影响。结果表明:在固体培养基上,以糖蜜为碳... 详细信息

以香菇‘沪香F2’为试验材料,探究了9种碳源配方和10种氮源配方对菌丝在固体培养基上生长速度、在液体培养基中菌丝生物量和发酵固形物体积比以及发酵完成时接种后菌丝在木屑试管中生长速度的影响。结果表明:在固体培养基上,以糖蜜为碳源时,菌丝生长速度最快,达6.10 mm∕d,以木糖为碳源时,菌丝生长速度最慢,仅3.84 mm∕d;以麸皮为氮源时,菌丝生长速度为4.01 mm∕d,以尿素为氮源时,菌丝生长速度最慢,仅3.19 mm∕d。在液体培养基中,以糖蜜为主要碳源时,菌丝生物量达8.04 g∕L,发酵固形物体积比达98.69%;以麸皮为主要氮源时,菌丝生物量达7.90 g∕L,发酵固形物体积比达96.57%。相关性分析发现,在不同碳源的固体培养基上,菌丝生长速度与菌丝生物量呈显著正相关;在不同氮源的液体培养基中,菌丝生物量与发酵固形物体积比呈显著正相关;不同碳氮源的菌丝生物量与菌丝接种后在木屑试管中的生长速度呈显著正相关。综上,糖蜜和麸皮是香菇液体菌种最佳的碳氮源组合。该研究结果可为工厂化香菇液体菌种原材料的选择提供参考。

关键词：香菇液体菌种菌丝生长速度菌丝生物量发酵固形物体积比

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使用不同培养水质对金针菇生长情况的影响

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农业科学 2023年第11期13卷 1024-1032页

作者：王华郭力刚王瑞娟陆欢河北光明九道菇生物科技有限公司河北邢台上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部国家食用菌种质资源库(上海)国家食用菌工程技术研究中心上海

本试验以自然井水和自来水为培养水质,探究不同水质对工厂化生产金针菇的菌丝生长情况和实体生长情况及产量等性状的影响。结果表明,使用自然井水为培养水质时,成熟采收期的产量低于以自来水为培养水质的金针菇,且子实体的菌柄较软,缺... 详细信息

本试验以自然井水和自来水为培养水质,探究不同水质对工厂化生产金针菇的菌丝生长情况和实体生长情况及产量等性状的影响。结果表明,使用自然井水为培养水质时,成熟采收期的产量低于以自来水为培养水质的金针菇,且子实体的菌柄较软,缺乏活力,但水分含量高于以自来水为培养水质的金针菇。

关键词：金针菇水质生长情况

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