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菌物学报 2018年第5期37卷 649-655页

作者：刘伟唐庆九周帅刘艳芳张劲松冯娜上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 华东理工大学药学院上海200237

龙芝2号和鹿角灵芝均为赤芝的栽培品种,且在生长发育过程中均不产生孢子。目前,尚缺乏对两者化学成分和药理活性的系统比较研究。本研究以灵芝两个无孢品种——龙芝2号和鹿角灵芝为原料,研究对比两者子实体水提物成分差异及免疫活性的... 详细信息

龙芝2号和鹿角灵芝均为赤芝的栽培品种,且在生长发育过程中均不产生孢子。目前,尚缺乏对两者化学成分和药理活性的系统比较研究。本研究以灵芝两个无孢品种——龙芝2号和鹿角灵芝为原料,研究对比两者子实体水提物成分差异及免疫活性的强弱。采用化学及仪器分析相结合的方法,分析两者水提物中的多糖得率、含量、重均分子量分布特征及核苷、蛋白质、氨基酸含量差异,并研究了灵芝两个无孢品种水提物样品刺激RAW 264.7细胞释放NO活性。结果表明,两者多糖得率及含量差异不大,但龙芝2号中重均分子量分布范围较广,多糖分子量较大,其含有3种多糖,分子量分别为2.021×10~6、1.802×10~6和4.825×10~5,而鹿角灵芝中仅含有1种多糖,分子量为1.589×10~4;两者中含有的核苷种类相似,但各核苷的含量存在差异;鹿角灵芝和龙芝2号中蛋白质含量分别为10.70%和10.32%,两者均不含有组氨酸,蛋氨酸在两者中含量均较高,分别达到2.556%和2.591%。从鹿角灵芝和龙芝2号中得到的水提物样品均具有体外刺激巨噬细胞释放NO的活性。

关键词：无孢灵芝水提物化学成分免疫活性

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蛋白质组学及其在食用菌中的研究进展

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分子植物育种 2017年第7期15卷 2656-2661页

作者：查磊赵瑞华余昌霞赵妍陈辉张津京陈明杰国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 延安大学生命科学学院延安716000

近十几年来,随着人类全基因组测序工作的顺利完成,部分生物全基因组的测序也相继完成,生命科学研究随之步入后基因组时代。蛋白质组学(Proteomics)作为后基因组学的重要组成部分得到了快速发展,而食用菌蛋白质组学研究却相对较少,并且... 详细信息

近十几年来,随着人类全基因组测序工作的顺利完成,部分生物全基因组的测序也相继完成,生命科学研究随之步入后基因组时代。蛋白质组学(Proteomics)作为后基因组学的重要组成部分得到了快速发展,而食用菌蛋白质组学研究却相对较少,并且研究内容主要集中在差异蛋白质组学方面。本综述对蛋白质组学主要的研究内容和常用技术进行了简要的介绍,并对当前蛋白质组学技术在食用菌研究中的应用情况展开综述。最后对蛋白质组学技术在食用菌中的应用及开发前景进行了展望,为蛋白质组学在食用菌中的研究提供一定的理论参考依据。

关键词：蛋白质组学食用菌研究进展

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草菇子实体蛋白酶的分离纯化及其酶学性质

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食用菌学报 2021年第6期28卷 24-30页

作者：李治平陈明杰王耀冉宋盼盼常婷婷黄波赵妍上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

将草菇(Volvariella volvacea)子实体在15℃放置36 h,按照液料比10∶1加蒸馏水提取粗蛋白酶液,经硫酸铵沉淀、DEAE FF离子层析柱和Superdex 75 Increase 10/300凝胶柱分离纯化,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定该蛋白酶纯度和相对分子质... 详细信息

将草菇(Volvariella volvacea)子实体在15℃放置36 h,按照液料比10∶1加蒸馏水提取粗蛋白酶液,经硫酸铵沉淀、DEAE FF离子层析柱和Superdex 75 Increase 10/300凝胶柱分离纯化,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定该蛋白酶纯度和相对分子质量,并确定最适反应pH、最适温度和反应动力学常数,并探讨了不同金属离子和化学试剂对该蛋白酶活性的影响。结果表明:纯化后电泳纯蛋白酶D2-S4相对分子质量约为20000,最适pH为7.0,最适反应温度为40℃,米氏常数Km为1.68 g·L^(-1),Vm为3.11μg·(mL·min)-1;与对照组相比,除Ca2+处理外,其他处理均对该蛋白酶的活性影响存在显著性差异,其中Fe^(2+)对该蛋白酶活性有增强作用,该蛋白酶对苯甲基黄酰氟(phenylmethylsulfonyl fluoride,PMSF)敏感,是一种丝氨酸蛋白酶,且β-巯基乙醇对其抑制效果明显;阳离子洗涤剂十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)和曲拉通X-100对该蛋白酶活性均有抑制,而离散型洗涤剂吐温-80对该蛋白酶有增强作用。

关键词：草菇蛋白酶分离纯化

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漆酶同工酶基因在斑玉蕈生长发育过程中的表达分析

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菌物学报 2020年第6期39卷 1038-1048页

作者：陈辉郝海波赵静王倩隽加香陈明杰冯志勇张津京上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传育种重点开放实验室农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403 上海光明森源生物科技有限公司上海201408 南京农业大学生命科学学院江苏南京210014

为了探明漆酶在斑玉蕈生长发育过程中的功能,对斑玉蕈转录测序预测的13个漆酶基因序列进行分析、鉴定和构建分子系统发育树;检测了不同生长发育时期漆酶的活性和漆酶基因表达水平。研究结果显示:13个基因片段中有10个是漆酶基因。不同... 详细信息

为了探明漆酶在斑玉蕈生长发育过程中的功能,对斑玉蕈转录测序预测的13个漆酶基因序列进行分析、鉴定和构建分子系统发育树;检测了不同生长发育时期漆酶的活性和漆酶基因表达水平。研究结果显示:13个基因片段中有10个是漆酶基因。不同的漆酶同工酶之间进化关系存在明显差异,大多数漆酶与木腐菌(金针菇Flammulina filiformis和侧耳属Pleurotus)进化关系较近。对斑玉蕈不同生长发育时期的酶活检测结果显示,从斑玉蕈的菌丝恢复期到钉头期,漆酶活性逐渐升高,而在子实体形成后期酶活逐渐降低。对培养40d、60d和80d的菌丝样品以及不同生长发育时期的样品进RT-q PCR检测,结果显示在菌丝营养生长时期,大多数漆酶基因在第40–60天表达量持续增加1–3倍,而在第60–80天时表达量出现降低的情况。而在生殖生长时期,大多数漆酶基因在转色期或者原基期相对表达量达到最大值,并在子实体期出现降低,这与漆酶活性的检测具有一致性。lcc3、lcc7、lcc8和lcc9在斑玉蕈生殖生长过程中相对表达量出现了10–100倍的上调。这说明从菌丝培养到菌丝扭结形成子实体和子实体发育的过程中,不同的漆酶可能发挥着不同的作用,表达量较高的漆酶基因可能对基质降解和子实体形成起主要作用。

关键词：斑玉蕈漆酶基因子实体形成表达量

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沪农系列灵芝新品种活性成分及免疫活性对比研究

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食用菌学报 2023年第1期30卷 64-72页

作者：师小凡刘艳芳唐传红冯杰唐庆九王金艳韩伟张劲松华东理工大学药学院上海200237 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

以相同条件下栽培获得的沪农系列7个不同品种的灵芝(Ganoderma lucidum)子实体作为研究材料,分析比较其总多糖、核苷、三萜和糖醇的含量、多糖重均分子量分布特征差异以及刺激RAW 264.7巨噬细胞释放NO的活性。结果表明:不同品种灵芝总... 详细信息

以相同条件下栽培获得的沪农系列7个不同品种的灵芝(Ganoderma lucidum)子实体作为研究材料,分析比较其总多糖、核苷、三萜和糖醇的含量、多糖重均分子量分布特征差异以及刺激RAW 264.7巨噬细胞释放NO的活性。结果表明:不同品种灵芝总多糖含量在1.15%~5.11%之间,含量较高的3个品种由高到低为‘沪农芝7号’(5.11%)、‘沪农芝8号’(2.36%)、‘沪农灵芝4号’(2.07%)。不同灵芝品种粗多糖分子量分布存在差异,‘沪农灵芝4号’主要含有重均分子量为3.38×10^(6)、4.24×10^(6)、4.38×10^(3)g·mol^(-1)的三个多糖组分,‘沪农灵芝1号’主要含有重均分子量为1.01×10^(7)和8.03×10^(3)g·mol^(-1)的两类多糖组分,‘沪农芝7号’主要含有重均分子量为4.50×10^(5)、6.20×10^(3)g·mol^(-1)的两个多糖组分,其余4个品种均含有重均分子量为(4.56×10^(3)~5.47×10^(3))g·mol^(-1)的多糖组分。7个灵芝新品种子实体中均含有胞苷、尿苷、鸟苷,其中‘沪农灵芝4号’的总核苷含量最高(1456.5μg·g^(-1));总三萜的含量为2241.93~5123.54μg·g^(-1),最高的为‘沪农灵芝1号’(5123.54μg·g^(-1));不同灵芝品种的糖醇含量存在一定差异,主要含有阿拉伯糖醇和甘露糖醇,赤藓糖醇含量较低,均低于0.9 mg·g^(-1)。七种灵芝子实体的粗多糖浓度在50~500μg·mL^(-1)范围内均能增强RAW 264.7巨噬细胞NO的释放量,其中‘沪农灵芝5号’的活性最强。研究结果将为沪农系列灵芝新品种的开发利用和推广应用提供参考。

关键词：灵芝子实体活性成分多糖三萜免疫活性

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基于转录组挖掘香菇木质纤维素降解相关基因

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食用菌学报 2024年第4期31卷 33-45页

作者：刘慧杰游潇轩戈永杰尚晓冬谭琦上海海洋大学食品学院上海201200 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

对用木屑培养料(木屑组)和PDA培养基(PDA组)培养的香菇(Lentinula edodes)菌丝进行转录组测序分析,对两组样本进行主成分分析和相关性分析,对差异表达基因进行筛选和聚类分析;以PDA组为对照,对木屑组中显著差异表达的基因进行筛选以及G... 详细信息

对用木屑培养料(木屑组)和PDA培养基(PDA组)培养的香菇(Lentinula edodes)菌丝进行转录组测序分析,对两组样本进行主成分分析和相关性分析,对差异表达基因进行筛选和聚类分析;以PDA组为对照,对木屑组中显著差异表达的基因进行筛选以及GO功能富集、KEGG代谢通路分析;采用定量PCR方法验证9个差异表达基因表达情况。结果表明:培养基质造成的基因表达差异大于菌株,8个样本可分为两组(PDA组和木屑组);与PDA组相比,木屑组有677个基因的表达存在显著差异,其中445个基因(与木质纤维素降解相关的180个)上调,232个基因(与木质纤维素降解相关的38个)下调,表明木屑培养基能够显著诱导木质纤维素降解相关基因表达。GO功能富集分析结果表明,上调表达基因在氧化还原酶活性、水解酶活性、代谢过程、水解酶活性(水解O-糖基化合物)、水解酶活性(作用于糖基键)等代谢过程中显著富集。KEGG代谢通路分析结果表明,上调表达基因在溶酶体、转运蛋白、氨基糖和核苷酸糖代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、淀粉和蔗糖代谢、肽酶和抑制剂通路中显著富集;下调表达基因在MAPK信号通路-酵母、不饱和脂肪酸生物合成、二噁英降解通路中显著富集。研究结果为揭示香菇培养基质利用的分子机制和选育高效利用基质菌株提供参考。

关键词：香菇转录组分析木质纤维素基质利用

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抑制前列腺癌的食药用菌醇提物的筛选及灵芝醇提物对癌细胞的抑制机理

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菌物学报 2018年第6期37卷 782-793页

作者：汪雯翰朱丽娜张赫男杨焱庄海宁唐传红刘艳芳徐宾贾薇张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

比较了灰树花Grifola frondosa、巴氏蘑菇Agaricus blazei、猴头菌Hericium erinaceus、刺芹侧耳Pleurotus eryngii、毛头鬼伞Coprinus comatus、蛹虫草Cordyceps militaris、灵芝Ganoderma lingzhi、香菇Lentinula edodes、桑黄Sanghuangporus sanghuang和桦褐孔菌Inonotus obliquus 10种食用菌醇提物对前列腺癌LNCaP细胞增殖的影响,其中灵芝醇提物对LNCaP细胞增殖及5ɑ-还原酶活性具有良好的抑制效果,对LNCaP细胞释放PSA的抑制效果也好于其他食用菌。进一步研究灵芝醇提物对LNCaP细胞的抑制机理,结果表明,灵芝醇提物通过诱导细胞凋亡、使Caspase-3、Bax、P53活性升高,PARP、Bcl-2活性下降来实现对LNCap细胞的抑制作用。利用自噬抑制剂氯喹和自噬激活剂雷帕霉素观察细胞自噬在灵芝醇提物抗肿瘤过程中的作用,结果表明,体外激活细胞自噬对LNCaP细胞起到保护,从而减弱了灵芝醇提物的抗肿瘤作用。

关键词： LNCaP 抑制率细胞凋亡含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3 多聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶自噬

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五种食用菌多糖结构特征及其体外激活Dectin-1受体活性比较

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食用菌学报 2021年第5期28卷 87-95页

作者：刘静周帅李德顺唐庆九张劲松冯杰刘利平刘艳芳上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

制备刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)、香菇(Lentinula edodes)、毛头鬼伞(Coprinus comatus)、猴头菌(Hericium erinaceus)、灵芝(Ganoderma lingzhi)5种食用菌水提物、粗多糖和逐级醇沉多糖组分(30%醇沉组分30E,30%~75%醇沉组分30E-75E),比较食用菌水提物得率及总糖、海藻糖、阿拉伯糖醇和甘露糖醇含量,粗多糖和逐级醇沉多糖组分得率、多糖含量、重均分子量,逐级醇沉多糖组分单糖组成,以及对其体外激活Dectin-1受体的活性进行评价。结果表明:刺芹侧耳、毛头鬼伞水提物得率较高,水提物中刺芹侧耳总糖含量最高,猴头菌阿拉伯糖醇和甘露醇含量最高。五种食用菌粗多糖中,毛头鬼伞得率最高,灵芝‘龙芝2号’多糖含量最高;在20~35 min,多糖的色谱洗脱峰存在差异,灵芝仅有1个峰,猴头菌和毛头鬼伞有2个峰,香菇和刺芹侧耳则有3个峰;在35~45 min,均存在重均分子量为万级的多糖组分。五种食用菌30E中,香菇多糖得率最高,猴头菌多糖含量最高,猴头菌和灵芝‘龙芝2号’β-葡聚糖含量较高;5种食用菌30E-75E中,毛头鬼伞多糖得率最高、多糖含量较高。五种食用菌30E在20~36 min有1个色谱洗脱峰,重均分子量为1.850×10^(6)~1.272×10^(7) g·mol^(-1),多分散系数为1.035~1.284,毛头鬼伞回转半径(Rg)最小;5种食用菌30E-75E重均分子量为10^(4)~10^(6) g·mol^(-1),色谱洗脱峰存在较大差别。五种食用菌30E均主要含有葡萄糖;而其30E-75E含有的单糖种类及其比例差异较大,单糖均以葡萄糖为主,灵芝包含的单糖种类(7种)最为丰富。对于体外激活Dectin-1受体活性,灵芝‘龙芝2号’30E最强;除毛头鬼伞外,其他4种食用菌30E活性明显强于其对应的30E-75E;5种食用菌30E-75E中,‘龙芝2号’的活性最强,而香菇的无活性。

关键词：食用菌多糖重均分子量分布单糖组成免疫调节

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运用交配型基因分子标记辅助蛹虫草亲和配对

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核农学报 2017年第11期31卷 2113-2120页

作者：鲍大鹏刘敏祥汪滢杨瑞恒茅文俊何华奇国家食用菌工程技术研究中心/农业部南方食用菌资源利用重点实验室/上海市农业遗传育种重点开放实验室/上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 安徽科技学院生命科学学院安徽凤阳233100

为了建立一种分子标记辅助育种技术体系以增加蛹虫草杂交亲和性配对的比例,以4个蛹虫草菌株(GD1、JS2、SD2、中13)为供试亲本,通过无性孢子分离方法获得了8株单交配型的杂交亲本,根据蛹虫草交配型位点MAT-alpha和MAT-HMG中基因序列设计... 详细信息

为了建立一种分子标记辅助育种技术体系以增加蛹虫草杂交亲和性配对的比例,以4个蛹虫草菌株(GD1、JS2、SD2、中13)为供试亲本,通过无性孢子分离方法获得了8株单交配型的杂交亲本,根据蛹虫草交配型位点MAT-alpha和MAT-HMG中基因序列设计了分子标记并指导配制亲和性组合,最终成功获得了12个杂交菌株。在栽培试验的基础上,分析了12个杂交菌株的栽培周期、产量、活性成分含量(虫草素和腺苷)等相关性状,结果表明,蛹虫草杂交菌株存在超亲现象。本研究建立的这套以交配型基因作为分子标记辅助选育蛹虫草新品种的高效杂交育种技术体系,将有助于促进蛹虫草栽培产业的发展。

关键词：蛹虫草交配型基因分子标记杂交育种

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金针菇子实体有机溶剂提取物的生物活性

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菌物学报 2016年第2期35卷 178-187页

作者：韩乐韩伟张美彦颜梦秋马迪冯娜张劲松上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 华东理工大学药学院上海200237

分别对金针菇子实体醇提物的5个萃取分部(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分部和剩余分部)进行化学成分的定性检验,以及体外抗肿瘤活性和降血糖活性的筛选。定性检验结果表明,金针菇子实体的石油醚、氯仿和乙酸乙酯萃取分部中含有生物... 详细信息

分别对金针菇子实体醇提物的5个萃取分部(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分部和剩余分部)进行化学成分的定性检验,以及体外抗肿瘤活性和降血糖活性的筛选。定性检验结果表明,金针菇子实体的石油醚、氯仿和乙酸乙酯萃取分部中含有生物碱类、有机酸类、甾类(或三萜)、黄酮类和蒽醌类物质,正丁醇萃取分部中含有氨基酸和蛋白类、糖类、甾类(或三萜)、有机酸类和黄酮类物质,剩余分部中含有氨基酸和蛋白类、糖类、甾类(或三萜)化合物。通过药理筛选发现,金针菇子实体的石油醚、正丁醇以及剩余分部具有体外抗肿瘤作用的潜力,而氯仿和乙酸乙酯分部则具有一定的细胞毒性;各萃取分部对DPP-IV活性均具有一定的抑制作用,其中氯仿和乙酸乙酯分部的抑制作用较强。

关键词：金针菇萃取物抗肿瘤抑制二肽基肽酶活性

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