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食用菌学报 2019年第4期26卷 50-56页

作者：隽加香肖婷婷王倩宋晓霞沈新芬高飞陈明杰黄建春上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海市金山区农业技术推广中心上海201599 江苏裕灌现代农业科技有限公司江苏灌南222500

为了解双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料不同发酵阶段的细菌菌群组成,并对细菌菌群功能进行预测,采用近红外分析仪分别测定3个发酵阶段双孢蘑菇培养料中纤维素、半纤维素和木质素的含量,同时选用细菌16S rRNA基因V3-V4特异性引物分别... 详细信息

为了解双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料不同发酵阶段的细菌菌群组成,并对细菌菌群功能进行预测,采用近红外分析仪分别测定3个发酵阶段双孢蘑菇培养料中纤维素、半纤维素和木质素的含量,同时选用细菌16S rRNA基因V3-V4特异性引物分别对3个发酵阶段的培养料进行PCR扩增、建库和测序。采用QIIME软件对获得的序列进行归并和可操作分类单元(operational taxonomic unit,OTU)划分,分别对每个样本计算Chao1、ACE、Shannon和Simpson指数,并获取各样本在门、属分类水平上的组成和丰度分布表,使用R软件计算各样本共有OTU的数量,绘制样本在门、属分类水平的组成柱状图,通过Galaxy在线平台,提交属水平的相对丰度矩阵进行LEfSe分析,对未加权的UniFrac距离矩阵进行非度量多维尺度(nonmetric multidimensional scaling,NMDS)分析,通过PICRUSt软件将基因测序数据与代谢功能已知的微生物参考基因组数据库相比,预测细菌菌群代谢功能。结果表明:随着发酵次数的增加纤维素和半纤维素含量均呈下降趋势,而木质素含量二次发酵料高于一次料和三次料;3个阶段发酵培养料共有OTU数量为419个,其中一、二、三次发酵阶段独有的OTU数量分别为420、761和750个;二次料和三次料的细菌群落的丰富度和多样性均高于一次料;3个阶段中丰度高的门为异常球菌-栖热菌门(Deinococcus-Thermus)、绿弯菌门(Chloroflexi)、变形杆菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria);在一次料中栖热菌属(Thermus)丰度较高,在二次料中假黄单胞菌属(Pseudoxanthomonas)和高温多孢菌属(Thermopolyspora)丰度较高,在三次料中假黄单胞菌属和螯台球菌属(Chelatococcus)丰度较高;一次料与二、三次料样本之间的细菌群落结构差异较大;二次料与三次料样本之间的细菌群落结构相似度高;3个阶段代谢通路排在前两位的均为氨基酸代谢和碳水化合物代谢。

关键词：双孢蘑菇培养料发酵阶段高通量测序功能预测

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微生物多样性分析技术应用于食用菌发酵培养料分析的进展

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食用菌学报 2019年第3期26卷 148-156页

作者：赵妍刘顺杰张亚茹孙育红黄建春余昌霞陈明杰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306 上海市浦东新区农业技术推广中心上海200120

食用菌培养料的腐熟是由多种微生物共同作用而实现的,在这个过程中营养成分降解程度的差异,在一定程度上会影响后期的生产过程及产量。物种多样性差异反映了生态群落的功能和动态变化,因此分析发酵培养料制备过程中微生物多样性的变化... 详细信息

食用菌培养料的腐熟是由多种微生物共同作用而实现的,在这个过程中营养成分降解程度的差异,在一定程度上会影响后期的生产过程及产量。物种多样性差异反映了生态群落的功能和动态变化,因此分析发酵培养料制备过程中微生物多样性的变化对生产优质的培养料,使食用菌获得高产量尤为重要。本文梳理了食用菌发酵培养料微生物多样性分析的研究方法,简述了各种方法的原理并综述了其在相关研究中的应用,最后总结了不同方法的优缺点,以期为未来选用适宜的方法进行研究及开发复合菌制剂提供参考。

关键词：食用菌发酵培养料微生物多样性

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金针菇子实体多糖FVPB2对小鼠T淋巴细胞和巨噬细胞的免疫调节作用

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菌物学报 2019年第6期38卷 982-992页

作者：余冬生吴莹莹冯婷张劲松张赫男吴迪杨焱刘肖肖刘振东贾薇汪雯翰上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验上海201403 西藏农牧学院食品科学学院西藏林芝860000 深圳市国创纳米抗体技术有限公司广东深圳518057 吉林农业大学中药材学院吉林长春130118

从金针菇子实体中分离纯化得到均一多糖FVPB2,其分子量为15kDa,是由葡萄糖、半乳糖、岩藻糖和甘露糖组成的吡喃型杂多糖,利用C57BL/6小鼠脾淋巴细胞和骨髓巨噬细胞研究FVPB2对免疫功能的影响,体外免疫实验表明,FVPB2能促进T淋巴细胞激... 详细信息

从金针菇子实体中分离纯化得到均一多糖FVPB2,其分子量为15kDa,是由葡萄糖、半乳糖、岩藻糖和甘露糖组成的吡喃型杂多糖,利用C57BL/6小鼠脾淋巴细胞和骨髓巨噬细胞研究FVPB2对免疫功能的影响,体外免疫实验表明,FVPB2能促进T淋巴细胞激活并分泌肿瘤坏死因子和干扰素γ细胞因子,同时还能够促进巨噬细胞产生一氧化氮,分泌白介素-1β、白介素-6和肿瘤坏死因子-α细胞因子。本研究以首次从金针菇子实体中获得均一多糖FVPB2为研究对象,观察其对T细胞和巨噬细胞的免疫调节活性,研究结果表明其具有良好的免疫调节活性和潜在的生物学功能。

关键词：吡喃型杂多糖脾淋巴细胞腿骨骨髓巨噬细胞细胞因子

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猴头菌子实体粉的复合酶解及其功能特性

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食用菌学报 2022年第2期29卷 54-64页

作者：马强杨焱张忠陈万超李文庞小博周靖吴迪上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海201403 上海沛元农业发展有限公司上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403

在筛选的复合酶(纤维素酶∶β-葡萄糖苷酶∶壳聚糖酶)配比(1∶1∶1)基础上,采用单因素实验研究料液比、加酶量、酶解时间、酶解温度、pH对猴头菌(Hericium erinaceus)子实体粉中多糖溶出量的影响,通过响应面法确定其最佳提取工艺参数,... 详细信息

在筛选的复合酶(纤维素酶∶β-葡萄糖苷酶∶壳聚糖酶)配比(1∶1∶1)基础上,采用单因素实验研究料液比、加酶量、酶解时间、酶解温度、pH对猴头菌(Hericium erinaceus)子实体粉中多糖溶出量的影响,通过响应面法确定其最佳提取工艺参数,并对酶解后子实体粉溶出多糖的理化性质及保护胃黏膜上皮细胞效果进行分析。结果表明:猴头菌子实体粉复合酶解的最佳工艺条件为料液比1∶4(g∶mL),复合酶添加量150 U·g^(-1)、52℃、30 min、pH 5.5,酶解后猴头菌子实体粉多糖含量可达(8.41±0.31)%,与响应面预测值8.45%接近,与未酶解子实体粉多糖含量相比提高115%。酶解后子实体粉多糖重均分子量明显降低,单糖组成中葡萄糖胺、半乳糖比例增加,葡萄糖的比例降低。胃黏膜上皮细胞损伤修复研究表明,酶解猴头菌子实体粉处理组的胃黏膜上皮细胞(GES-1)存活率可达81.30%,与未酶解子实体粉的细胞存活率相比提高约20%。表明酶解后猴头菌子实体粉多糖溶出量和保护胃黏膜作用得到提升。

关键词：猴头菌复合酶解多糖理化性质 GES-1细胞存活率

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樟芝发酵液不同萃取物体外生物活性

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食用菌学报 2013年第3期20卷 26-30页

作者：白岩岩贾薇张劲松张忠冯娜颜梦秋朱丽娜章慧贾新成王明道上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 河南农业大学生命科学学院河南郑州450000

分别采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等有机溶剂对樟芝(Taiwanofungus camphoratus)发酵滤液进行萃取,萃取液在旋转蒸发仪上挥干,用少量的甲醇将其洗出自然挥干,进而研究樟芝发酵液不同萃取相的体外生物活性,结果表明:石油醚、氯仿... 详细信息

分别采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等有机溶剂对樟芝(Taiwanofungus camphoratus)发酵滤液进行萃取,萃取液在旋转蒸发仪上挥干,用少量的甲醇将其洗出自然挥干,进而研究樟芝发酵液不同萃取相的体外生物活性,结果表明:石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取物对人慢性粒细胞白血病细胞株K562的抑制作用明显,在5μg/mL(溶解于DMSO)的低浓度下即可达到60%以上(抑制率分别是74%、72%和66%),随着浓度的升高其作用高于5-Fu(抑制率68%);同样对于人前列腺癌LNCaP细胞,这三种萃取物的抑制作用也很明显,在25μg/mL下,三者的抑制率分别是72%、73%和69%,明显高于对照组5-Fu(抑制率66%);而对于RAW264.7巨噬细胞释放NO产量的刺激作用,只有正丁醇相在100、200、500μg/mL三种浓度下释放量分别达到12.12、13.75和14.32μmol/106 cells,明显高于对照组PBS(NO释放量为9.52μmol/106cells);对PC12神经细胞的修复作用,同损伤组相比,4种萃取物(除了25μg/mL浓度下正丁醇相)均有明显的功效,但是其作用浓度依赖性较小,在5μg/mL的低浓度下,几种萃取物的吸光度值分别是1.25、1.16、1.35和1.51,明显高于叠氮钠损伤组,显示了良好的修复作用。

关键词：樟芝发酵液萃取生物活性

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不同产地紫芝子实体中活性成分的测定分析

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食用菌学报 2017年第1期24卷 72-76页

作者：刘艳芳应一君唐庆九韩伟杨焱周帅张忠冯娜吴迪张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 华东理工大学药学院上海200237

对来自浙江省、老挝和福建省的紫芝(Ganoderma sinense)(编号分别为GS-ZJ、GS-LW、GS-FJ)子实体中水溶性多糖、β-葡聚糖、海藻糖、糖醇、核苷和三萜等多种活性成分的含量进行测定。结果表明:GS-ZJ和GS-LW中水溶性多糖的含量差异不显著... 详细信息

对来自浙江省、老挝和福建省的紫芝(Ganoderma sinense)(编号分别为GS-ZJ、GS-LW、GS-FJ)子实体中水溶性多糖、β-葡聚糖、海藻糖、糖醇、核苷和三萜等多种活性成分的含量进行测定。结果表明:GS-ZJ和GS-LW中水溶性多糖的含量差异不显著,分别为1.27%和1.20%,GS-FJ中水溶性多糖含量相对较低,为0.95%,三者β-葡聚糖含量差异不显著,均在16%左右;GS-FJ中含有的海藻糖和糖醇含量较高,其中甘露醇含量达到4037.7μg/g,远高于另外两种紫芝子实体;核苷类成分比较结果显示,GS-FJ含量最高,其次为GSZJ,GS-LW在种类和含量上均较少;但是GS-LW中三萜种类较丰富,其总三萜含量为538.8μg/g,远高于另外两种紫芝。

关键词：紫芝多糖三萜

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三相分离法制备金针菇提取物中多糖的理化性质及体外活性

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食用菌学报 2022年第5期29卷 73-80页

作者：贾薇余冬生余养朝冯占胡明张劲松汪雯翰上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海201403 上海药明巨诺生物医药研发有限公司上海201210 江苏华绿生物科技股份有限公司江苏宿迁223700

采用三相分离法制备金针菇(Flammulina filiformis)提取物,以乙醇沉淀法为对照,考察提取物得率、蛋白含量、多糖含量、单糖组成、多糖重均分子量分布及体外抗氧化和免疫活性。结果表明:与乙醇沉淀法制备的提取物(FVP 70)相比,三相分离... 详细信息

采用三相分离法制备金针菇(Flammulina filiformis)提取物,以乙醇沉淀法为对照,考察提取物得率、蛋白含量、多糖含量、单糖组成、多糖重均分子量分布及体外抗氧化和免疫活性。结果表明:与乙醇沉淀法制备的提取物(FVP 70)相比,三相分离法制备的提取物(TTPFVP)得率显著降低,但其中多糖含量极显著增加;TTPFVP由摩尔比为2.6∶10.8∶13.3∶1.0∶4.7∶0.1的岩藻糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成,主要含有重均分子量为2.36×10^(7)和4.77×10^(5)的两个多糖组分,FVP 70由摩尔比为6.2∶1.0∶23.3∶25.7∶4.2∶11.3∶0.3的岩藻糖、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成,主要含有一个重均分子量为3.31×10^(5)的多糖组分;TTPFVP的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、Fe离子还原能力及刺激RAW264.7释放NO的作用明显优于FVP70。

关键词：金针菇三相分离法乙醇沉淀法多糖抗氧化活性免疫活性

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定向采收‘沪农灵芝1号’高三萜和水溶性多糖原料研究

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食用菌学报 2023年第1期30卷 113-122页

作者：马延梅周帅冯娜刘艳芳王金艳唐庆九韩伟张劲松华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)法和高效排阻色谱-多角度激光散射(HPSEC-MALLS)法检测灵芝(Ganoderma lucidum)‘沪农灵芝1号’不同生长期(接种后2~7个月,分别命名为P1~P6)子实体和菌基中三萜和水溶性多糖含量,并结合子实体和菌... 详细信息

采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)法和高效排阻色谱-多角度激光散射(HPSEC-MALLS)法检测灵芝(Ganoderma lucidum)‘沪农灵芝1号’不同生长期(接种后2~7个月,分别命名为P1~P6)子实体和菌基中三萜和水溶性多糖含量,并结合子实体和菌基的产量计算三萜和水溶性多糖的产量。结果表明:子实体中灵芝酸C2、G含量在P1、P2期较高,灵芝烯酸B和灵芝酸D、F、DM含量在P2期最高,灵芝酸B、A、S、T和总三萜含量在P1期最高;菌基中灵芝酸C2、A、D、DM和灵芝烯酸B含量在P1期最高,灵芝酸G含量在P 5期最高,灵芝酸B、S含量在P 6期最高,灵芝酸F含量在P 1、P 6期较高,灵芝酸T、总三萜含量在P 5、P 6期较高。子实体中灵芝酸C2、G、B、D、F、DM,灵芝烯酸B,总三萜产量在P2期最高;灵芝酸A产量在P3期最高;灵芝酸S、T产量在P1期最高。菌基中灵芝酸C2、G、B、A、D、F、DM,灵芝烯酸B产量在P1期最高;灵芝酸S、T产量在P2期最高;总三萜产量在P1、P2期较高。子实体和菌基中的水溶性多糖含量和产量均在P1期最高。研究结果将为‘沪农灵芝1号’子实体的定向采收提供科学数据和指导。

关键词：灵芝三萜多糖栽培超高效液相色谱-质谱高效排阻色谱-多角度激光散射

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CHO细胞源性二肽基肽酶Ⅳ抑制剂筛选模型的建立及食药用菌活性提取物筛选

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食用菌学报 2015年第1期22卷 55-60页

作者：张超杨焱汪雯翰樊华颜梦秋冯娜张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海海洋大学食品学院上海200234 德国夏洛特医学院实验医学临床医学和病理生物化学研究所德国柏林13353

建立中国仓鼠卵巢(CHO)细胞来源的二肽基肽酶Ⅳ(Dipeptidyl peptidase IV,DPPIV)抑制剂筛选模型并对多种食药用菌提取物及萃取物抑制DPPIV活性的效果进行研究。以H-甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺(H-Gly-pNA·HCl)为反应底物,通过发色底物... 详细信息

建立中国仓鼠卵巢(CHO)细胞来源的二肽基肽酶Ⅳ(Dipeptidyl peptidase IV,DPPIV)抑制剂筛选模型并对多种食药用菌提取物及萃取物抑制DPPIV活性的效果进行研究。以H-甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺(H-Gly-pNA·HCl)为反应底物,通过发色底物法检测CHO细胞来源DPPIV的活性,优化的筛选模型条件为:底物浓度90mmol/L、显色时间60min、孵育温度37℃、pH 7.6,阳性对照药物Ile-Pro-Ile的最佳作用浓度5mmol/L。利用此模型检测供试样品抑制CHO细胞源性DPPIV活性结果表明,鲍姆木层孔菌(Phellinus baumii)和灵芝(Ganoderma lucidum)醇提物的抑制效果明显好于其他7种食用菌;鲍姆木层孔菌及灵芝的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇等四种萃取物在10g/mL和100g/mL浓度下均具有一定抑制效果,其中鲍姆木层孔菌及灵芝的乙酸乙酯萃取物抑制效果较好。

关键词：二肽基肽酶Ⅳ抑制剂筛选模型食药用菌 Ⅱ型糖尿病

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生产用金针菇菌种退化的快速判断

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食用菌学报 2012年第1期19卷 36-38,F0003页

作者：马丹丹余昌霞陈辉赵楚楚于海龙曹晖上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 南京农业大学生命科学学院江苏南京210095

取发生不同程度菌种退化的相同来源的金针菇(Flammulina velutipes)工厂化袋栽菌株和栽培菌包,观察其在PDA平板上的分纯情况和形态特征;采用LBL液体培养基检测不同菌株对培养基的脱色情况。实验结果表明:这些退化菌株经过分离可以得到... 详细信息

取发生不同程度菌种退化的相同来源的金针菇(Flammulina velutipes)工厂化袋栽菌株和栽培菌包,观察其在PDA平板上的分纯情况和形态特征;采用LBL液体培养基检测不同菌株对培养基的脱色情况。实验结果表明:这些退化菌株经过分离可以得到不同菌落形态的分离菌株,而且对LBL液体培养基表现不同的脱色能力,退化严重的菌株脱色能力最差,说明LBL液体培养基的脱色反应结合菌种纯度的检测可以在一定程度上排除生产上的退化菌株。

关键词：金针菇菌种退化溴百里芬蓝脱色反应

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