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食用菌学报 2022年第5期29卷 90-100页

作者：刘静唐传红师小凡唐庆九张劲松冯杰周帅刘艳芳上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

采用高效分子排阻色谱-多角度激光光散射-示差折光检测器联用法对不同灵芝菌株的110个(Ganoderma lucidum)子实体样品的多糖重均分子量分布进行分析,依据出峰时间和出峰数量,可将这些样品分为4组:A组有7个样品,其子实体多糖含3个组分GL... 详细信息

采用高效分子排阻色谱-多角度激光光散射-示差折光检测器联用法对不同灵芝菌株的110个(Ganoderma lucidum)子实体样品的多糖重均分子量分布进行分析,依据出峰时间和出峰数量,可将这些样品分为4组:A组有7个样品,其子实体多糖含3个组分GLP 1、GLP 2、GLP 3;B组有77个样品,其子实体多糖含1个组分GLP 3;C组有24个样品,其子实体多糖含2个组分GLP 1、GLP 3;D组有2个样品,其子实体多糖含2个组分GLP2和GLP3。GLP1、GLP2的重均分子量分别为1.85×10^(6)~5.47×10^(6)、2.16×10^(6)~5.73×10^(6) g·mol,GLP3的重均分子量约为10^(4) g·mol^(-1)。用乙醇分步沉淀法对8个代表性灵芝子实体的高分子量多糖组分(重均分子量>10^(6) g·mol^(-1))进行分离,得到纯度较高的GLP1(多糖含量80.47%~92.52%)和GLP2(多糖含量69.75%~91.71%),并对其重均分子量、单糖组成、糖苷键连接方式以及免疫活性进行比较,结果表明:GLP1和GLP2为结构不同的葡聚糖,其中GLP1是以β-(1→3)-连接为主链、以β-(1→6)-连接为支链的葡聚糖,而GLP2组分是以α-(1→4)-连接为主链、α-(1→6)-连接为支链的葡聚糖;GLP1组分与Dectin-1受体结合激活免疫的活性优于GLP 2组分。研究结果表明,针对灵芝免疫产品开发时,应更加关注灵芝子实体中高分子量多糖GLP1组分的分布和含量。

关键词：灵芝多糖重均分子量分布结构表征免疫活性

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利用转录组分析茉莉酸甲酯对金针菇原基生长的影响

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食用菌学报 2022年第3期29卷 1-9页

作者：李玉朱秋瑾李巧珍陆欢王瑞娟杨慧尚晓冬刘建雨上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部应用真菌资源与利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

按照工厂化生产模式栽培金针菇(Flammulina filiformis),搔菌后在栽培料表面喷洒茉莉酸甲酯,以喷洒蒸馏水为对照,利用转录组分析茉莉酸甲酯对金针菇原基生长的影响。结果表明:与对照组相比,茉莉酸甲酯组原基出现时间提前,原基发育更快;... 详细信息

按照工厂化生产模式栽培金针菇(Flammulina filiformis),搔菌后在栽培料表面喷洒茉莉酸甲酯,以喷洒蒸馏水为对照,利用转录组分析茉莉酸甲酯对金针菇原基生长的影响。结果表明:与对照组相比,茉莉酸甲酯组原基出现时间提前,原基发育更快;茉莉酸甲酯组与对照组的差异表达基因有413个,其中上调表达基因233个,下调表达基因180个。GO功能富集分析表明,上调的差异表达基因主要富集于苯丙烷生物合成、肉桂酸生物合成、L-苯丙氨酸代谢等过程,下调的差异表达基因主要富集于二磷酸核苷代谢、己糖代谢、单糖代谢、糖酵解等过程。KEGG代谢途径富集分析表明,差异表达基因主要富集于糖酵解/糖异生、氨基酸代谢和能量代谢等过程。

关键词：金针菇茉莉酸甲酯原基转录组分析差异表达基因功能富集分析

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不同氮含量对大球盖菇菌丝生长和碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响

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食用菌学报 2024年第2期31卷 10-18页

作者：张津京卓馨怡冀浩郝海波岳一鸿王倩肖婷婷陈辉上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部应用真菌资源与利用重点开放实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 南京农业大学生命科学学院江苏南京210014 上海海洋大学食品学院上海201499

通过研究液体培养时不同氮含量(0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%)对菌丝生长、碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响,筛选大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)菌丝生长最适氮源。结果表明:豆粕粉是大球盖菇菌丝生长最适氮源。氮含量... 详细信息

通过研究液体培养时不同氮含量(0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%)对菌丝生长、碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响,筛选大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)菌丝生长最适氮源。结果表明:豆粕粉是大球盖菇菌丝生长最适氮源。氮含量为0.6%时,菌丝生长速度最快。在实验范围内,对照(氮含量为0)的亚硝酸盐还原酶活性较高,1.2%氮含量的天冬酰胺合成酶活性较高,0.6%氮含量的谷氨酸合酶活性最高;0.6%氮含量的内切β-1,4-葡聚糖酶活性最高,β-1,3-葡聚糖酶活性较高;0.6%氮含量的谷氨酸合酶基因表达量最高,1.2%氮含量的谷氨酸脱氢酶基因表达量较高;对照的β-1,3-葡聚糖酶基因和半纤维素酶基因表达量均最高。研究结果可为大球盖菇液体菌种开发和应用提供参考。

关键词：大球盖菇氮源纤维素酶基因表达

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泛素化结合酶E2抑制剂对草菇15℃保鲜的影响

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菌物学报 2022年第12期41卷 2074-2082页

作者：龚明尹昕黄天宇郑婷婷唐利华张赫男汪滢上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 长春工业大学化学与生命科学学院吉林长春130012 江苏海洋大学食品科学与工程学院江苏连云港222005 上海海洋大学食品学院上海201306

为了改进草菇低温保鲜方法,在15℃贮藏条件下,采用泛素化结合酶E2(UBEV2)抑制剂对草菇子实体进行处理,并开展相关生理指标和基因表达检测。结果表明,使用100μmol/L的UBEV2抑制剂L345-0044维持了草菇较好的品质,提高了草菇可溶性糖的含... 详细信息

为了改进草菇低温保鲜方法,在15℃贮藏条件下,采用泛素化结合酶E2(UBEV2)抑制剂对草菇子实体进行处理,并开展相关生理指标和基因表达检测。结果表明,使用100μmol/L的UBEV2抑制剂L345-0044维持了草菇较好的品质,提高了草菇可溶性糖的含量。低温明显提升抑制剂处理下的碱性蛋白酶和中性蛋白酶活力,并证实了低温胁迫显著提高了抑制剂处理下的一种类型蛋白酶肽基赖氨酸金属内肽酶的表达。本研究证实了草菇可溶性糖和高活性的冷诱导金属内肽酶对于延长草菇的低温保鲜时间是必须的。

关键词：草菇泛素化结合酶E2 蛋白酶金属内肽酶低温保鲜

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野生白棕口蘑菌种分离及培养条件优化

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分子植物育种 2022年第12期20卷 4019-4027页

作者：陆欢王瑞娟万佳宁杨慧徐珍尚晓冬刘建雨上海市农业科学院食用菌研究所农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

本研究对从江西赣州采集的一株野生食用菌子实体经组织分离获得菌丝纯培养物,通过形态特征分析和ITS技术进行鉴定,鉴定其为口蘑属的白棕口蘑Tricholoma albobrunneum。序列上传GenBank,登录号为MT539126。本研究还通过不同培养基配方对... 详细信息

本研究对从江西赣州采集的一株野生食用菌子实体经组织分离获得菌丝纯培养物,通过形态特征分析和ITS技术进行鉴定,鉴定其为口蘑属的白棕口蘑Tricholoma albobrunneum。序列上传GenBank,登录号为MT539126。本研究还通过不同培养基配方对白棕口蘑进行分离纯化培养,并设计分析不同碳源和氮源培养基对白棕口蘑菌丝生长的影响。结果表明加入菌根泥土浸提液的4号培养基菌丝的生长速度最快,菌丝长势强,色素分泌少,得到纯化菌种。白棕口蘑菌丝生长最佳碳源为红糖,最佳氮源为酵母膏,最佳培养基组合为:马铃薯200 g,红糖20 g,酵母膏5 g,琼脂20 g,KH_(2)PO_(4)0.6 g,MgSO_(4)0.6 g,pH自然。本研究为后续白棕口蘑栽培试验提供了一定理论基础。

关键词：白棕口蘑分离纯化碳源氮源生长速度

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几种药食两用类物质对酒精性胃黏膜损伤的保护及其抑制幽门螺旋杆菌作用

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安徽农业科学 2023年第6期51卷 157-162页

作者：王雨阳杨焱吴迪李文陈万超张忠农业部南方食用菌资源利用重点实验室/国家食用菌工程技术研究中心/上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

通过体外抑制幽门螺旋杆菌和抗炎试验,考察了猴头菌、茯苓、甘草、黄芪、葛根、蒲公英、陈皮几种药食两用类物质的提取物对幽门螺旋杆菌的抑制作用以及缓解炎症的效果,结果表明:黄芪提取物、甘草提取物具有良好的体外抑制幽门螺旋杆菌... 详细信息

通过体外抑制幽门螺旋杆菌和抗炎试验,考察了猴头菌、茯苓、甘草、黄芪、葛根、蒲公英、陈皮几种药食两用类物质的提取物对幽门螺旋杆菌的抑制作用以及缓解炎症的效果,结果表明:黄芪提取物、甘草提取物具有良好的体外抑制幽门螺旋杆菌的作用;葛根提取物、甘草提取物具有较好的缓解炎症的效果。通过构建人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤模型,明确了猴头菌和茯苓的提取物对酒精损伤的人胃黏膜上皮细胞GES-1增殖具有促进作用。根据试验结果,筛选出猴头菌、茯苓、黄芪和甘草4种药食两用物质的提取物,将其按照一定比例混合,制成3种组方,考察其对大鼠急性酒精性胃黏膜损伤的保护作用,结果表明:3种组方对胃黏膜损伤均具有一定的保护作用,组方2(猴头菌43.0%、茯苓35.5%、黄芪15.9%、甘草5.6%)在0.375 g/kg时对大鼠急性酒精性胃黏膜损伤具有更好的保护作用。

关键词：药食两用胃黏膜损伤幽门螺旋杆菌抑菌抗炎

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灵芝活性成分精准检测方法的研究

灵芝活性成分精准检测方法的研究

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：张劲松唐庆九冯娜刘艳芳周帅王金艳唐传红冯杰谭贻国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌加工技术分中心上海市农业科学院食用菌研究所

灵芝是我国最重要的药用真菌,以灵芝为原料开发出的药品有180多个,保健产品有1600多个,产品年销售额超300亿元。大量的研究发现灵芝具有调节免疫、抑制肿瘤、降血糖、降血压、助睡眠、保肝等多种生物活性,这些生物活性与灵芝含有的多糖... 详细信息

灵芝是我国最重要的药用真菌,以灵芝为原料开发出的药品有180多个,保健产品有1600多个,产品年销售额超300亿元。大量的研究发现灵芝具有调节免疫、抑制肿瘤、降血糖、降血压、助睡眠、保肝等多种生物活性,这些生物活性与灵芝含有的多糖、三萜等活性化合物有关。我国的药典把灵芝的多糖和三萜作为灵芝原料质量控制的主要指标成分,灵芝三萜是许多灵芝药品和保健品的主要指标成分。然而研究发现许多标志性成分相同的产品的生物活性不同,主要原因是因为药典和保健品申报规定的多糖和三萜的检测方法没有特异性,无法区分不同的多糖和三萜,测定的结果是不同多糖和不同三萜的总的含量,这一情况严重的影响了我国灵芝相关产品有效性和质量的稳定性,因此研究灵芝中活性成分的精准检测方法对提高我国灵芝产业的总体质控水平和质量意义重大。本实验室利用HPSEC-MALLS-RI系统构建了β-葡聚糖精准检测的新方法,可以对灵芝提取物中的β-葡聚糖进行准确的定性和定量的检测;利用HPLC的技术,建立了可以一次准确定量25个三萜化合物的一测多评的检测方法,利用LC-MS/MS技术,建立了含70多个三萜数据的国内外最大的灵芝三萜质谱数据库,基于三萜质谱数据库建立了灵芝中性三萜、酸性三萜等具有不同极性和母核的精准测定方法;利用HPLC-ELSD的方法,建立了灵芝甾醇的精准检测方法;利用HPLC技术,建立了核苷类成分的精准检测方法。这些灵芝中不同化合物的精准检测方法建立和在产业上广泛的应用,必将大幅提高我国灵芝产品的质控水平和产品的品质。

关键词：灵芝多糖三萜核苷甾醇检测方法

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猴头菌子实体粉的复合酶解及其功能特性

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食用菌学报 2022年第2期29卷 54-64页

作者：马强杨焱张忠陈万超李文庞小博周靖吴迪上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海201403 上海沛元农业发展有限公司上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403

在筛选的复合酶(纤维素酶∶β-葡萄糖苷酶∶壳聚糖酶)配比(1∶1∶1)基础上,采用单因素实验研究料液比、加酶量、酶解时间、酶解温度、pH对猴头菌(Hericium erinaceus)子实体粉中多糖溶出量的影响,通过响应面法确定其最佳提取工艺参数,... 详细信息

在筛选的复合酶(纤维素酶∶β-葡萄糖苷酶∶壳聚糖酶)配比(1∶1∶1)基础上,采用单因素实验研究料液比、加酶量、酶解时间、酶解温度、pH对猴头菌(Hericium erinaceus)子实体粉中多糖溶出量的影响,通过响应面法确定其最佳提取工艺参数,并对酶解后子实体粉溶出多糖的理化性质及保护胃黏膜上皮细胞效果进行分析。结果表明:猴头菌子实体粉复合酶解的最佳工艺条件为料液比1∶4(g∶mL),复合酶添加量150 U·g^(-1)、52℃、30 min、pH 5.5,酶解后猴头菌子实体粉多糖含量可达(8.41±0.31)%,与响应面预测值8.45%接近,与未酶解子实体粉多糖含量相比提高115%。酶解后子实体粉多糖重均分子量明显降低,单糖组成中葡萄糖胺、半乳糖比例增加,葡萄糖的比例降低。胃黏膜上皮细胞损伤修复研究表明,酶解猴头菌子实体粉处理组的胃黏膜上皮细胞(GES-1)存活率可达81.30%,与未酶解子实体粉的细胞存活率相比提高约20%。表明酶解后猴头菌子实体粉多糖溶出量和保护胃黏膜作用得到提升。

关键词：猴头菌复合酶解多糖理化性质 GES-1细胞存活率

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原生质体再生技术复壮金针菇退化菌株的研究

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上海农业学报 2023年第3期39卷 10-16页

作者：张丹朱秋瑾谭琦宋春艳于海龙王瑞娟尚晓冬刘建雨上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

利用原生质体再生技术对白色金针菇退化菌株进行复壮,研究复壮后菌株与正常菌株的菌丝生长性状及工厂化栽培的农艺性状,并对复壮前后的菌株进行了基于转录组的单核苷酸多态性检测和特异表达基因分析。结果表明:原生质体再生技术是白色... 详细信息

利用原生质体再生技术对白色金针菇退化菌株进行复壮,研究复壮后菌株与正常菌株的菌丝生长性状及工厂化栽培的农艺性状,并对复壮前后的菌株进行了基于转录组的单核苷酸多态性检测和特异表达基因分析。结果表明:原生质体再生技术是白色金针菇菌种复壮的有效手段,复壮菌株的菌丝生长速率、生育期、原基形成时间、菇盖直径、菌柄长度、单瓶子实体数量以及单瓶产量可恢复至正常菌株水平。复壮菌株较退化菌株的遗传背景发生了变化,其单核苷酸多态性位点数比退化菌株多,且大部分位于基因密码子区域。复壮菌株中与细胞吞噬、能量代谢、抗氧化、细胞骨架构建以及细胞DNA甲基化修饰等相关的基因特异表达。

关键词：金针菇菌种退化复壮原生质体再生单核苷酸多态性

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高产孢灵芝新种质的创制及影响产孢基因的挖掘

高产孢灵芝新种质的创制及影响产孢基因的挖掘

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中国菌物学会2024年学术年会

作者：余香霖张赫男谭贻孟晶蒋家森张劲松唐传红上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室

本研究以主栽品种‘沪农灵芝1号’为出发菌株,利用ARTP诱变创制新菌株并结合出芝试验,筛选获得孢子粉产量较‘沪农灵芝1号’高出25%的HS34和低产孢子粉的LS170。对产孢性状存在显著差异的突变株进行基因组重测序分析。对上述两个产孢性... 详细信息

本研究以主栽品种‘沪农灵芝1号’为出发菌株,利用ARTP诱变创制新菌株并结合出芝试验,筛选获得孢子粉产量较‘沪农灵芝1号’高出25%的HS34和低产孢子粉的LS170。对产孢性状存在显著差异的突变株进行基因组重测序分析。对上述两个产孢性状表现差异大的两个新菌株和出发菌株的重测序发现,HS34 vs H1共检测出18003个SNP分别位于2305个基因上,LS170 vs H1之间共检测出52624个SNP分别位于2793个基因上。对检测出的位于编码区的非同义突变SNP基因进行GO注释和KEGG通路富集分析。HS34 vs H1共富集到523个GO术语。主要涉及膜的整体成分和固有成分的组成,影响有机环、杂环化合物、金属离子以及核酸的结合的分子功能,参与DNA整合及各种代谢过程,KEGG注释在半乳糖代谢途径通路上显著富集;LS170 vs H1共富集到869个GO术语,主要涉及Ctf18 RFC样复合物、细胞核和染色体的组成及影响各种环状化合物及金属离子的结合,参与DNA整合及各种代谢过程,KEGG注释在半乳糖代谢途径、嘌呤代谢途径、谷胱甘肽代谢途径、淀粉和蔗糖代谢途径及甘油磷脂代谢途径上显著富集。HS34的CDS区特有的InDel位点共160个,LS170的CDS区特有的InDel位点共634个。对上述三个菌株从幼嫩子实体到大量产孢成熟子实体的不同发育阶段的转录组分析发现,与幼嫩子实体相比,在成熟子实体H1、HS34、LS170中分别有433、1899、1576个差异表达基因。其中HS34上调基因数比LS170高1.68倍,下调基因无显著差异;在170个共有差异表达基因中有141个趋势一致的差异表达基因,其中包含108个上调基因,33个下调基因。对共有差异基因进行GO、KEGG富集分析与表达趋势分析确定了糖异生(戊糖葡萄糖醛酸酯相互转化)和乙醛酸盐二羧酸代谢为产孢发育供能,NADH为产孢过程中的重要能量来源;鞘糖脂的合成及糖胺聚糖的降解为产孢提供结构物质;Hop1、Wis1、Mek1、SPO5和MSH4等基因的差异表达可能影响了孢子产量。

关键词：灵芝 ARTP诱变孢子粉产量产孢相关基因

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