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食用菌学报 2019年第4期26卷 16-22页

作者：李菲章炉军姜宁刘建雨于海龙尚晓冬宋春艳谭琦上海海洋大学食品学院上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

通过比对分析多种导致真菌内源萎锈灵抗性的琥珀酸脱氢酶B亚基(SdhB)氨基酸序列的突变位点,将香菇(Lentinula edodes)SdhB氨基酸序列第243位的组氨酸替换为亮氨酸,构建了香菇萎锈灵抗性同源筛选标记载体,以农杆菌介导转化小米粒培养的... 详细信息

通过比对分析多种导致真菌内源萎锈灵抗性的琥珀酸脱氢酶B亚基(SdhB)氨基酸序列的突变位点,将香菇(Lentinula edodes)SdhB氨基酸序列第243位的组氨酸替换为亮氨酸,构建了香菇萎锈灵抗性同源筛选标记载体,以农杆菌介导转化小米粒培养的香菇菌丝。转化子经5次传代后,PCR扩增验证插入片段,并观察绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况。结果显示:香菇单核体和双核体菌株经转化后,均能筛选到具有萎锈灵抗性的转化子,单核体菌株的转化率为34%,显著高于双核体菌株(4%);单核体转化子中的同源筛选标记及报告基因稳定性较好。本研究构建的萎锈灵抗性同源筛选标记可有效地在香菇遗传转化体系中应用。

关键词：香菇萎锈灵抗性基因同源筛选标记农杆菌转化绿色荧光蛋白

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斑玉蕈工厂化栽培中的致病微生物

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菌物学报 2019年第9期38卷 1407-1419页

作者：姚威威鲍大鹏陈洪雨李金鑫李燕周陈力李晓玲吴莹莹长春工业大学化学与生命科学学院吉林长春130012 国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海丰科生物科技股份有限公司上海201403

斑玉蕈Hypsizygusmarmoreus是我国重要的工厂化栽培食用菌之一,在栽培过程中发生污染将为生产企业带来经济损失。为对实际生产中的斑玉蕈病害进行溯源和防控,本研究采集了一家大型生产企业在3个不同省市产地发生污染的菌种或子实体样品... 详细信息

斑玉蕈Hypsizygusmarmoreus是我国重要的工厂化栽培食用菌之一,在栽培过程中发生污染将为生产企业带来经济损失。为对实际生产中的斑玉蕈病害进行溯源和防控,本研究采集了一家大型生产企业在3个不同省市产地发生污染的菌种或子实体样品,结合分子测序和形态特征观察对分离到的微生物进行鉴定,并通过平板对峙实验分析了菌株对斑玉蕈菌丝生长的影响。从样品中共分离得到了11株可疑致病微生物,包含10株细菌和1株真菌,分布于3个科7个属,优势科为肠杆菌科Enterobacteriaceae,优势属为芽胞菌属Bacillus,其中2株细菌可能分别为芽孢杆菌属和肠杆菌属Enterobacter新种。对峙实验显示7株细菌和1株真菌对相应宿主斑玉蕈菌株的菌丝生长有明显的抑制作用。结合生产过程,提出培养料的配制、灭菌和出菇管理阶段是斑玉蕈栽培中预防病害的3个关键控制点。在秋冬季气温较低时适当延长培养料的灭菌升温时间,在夏季菇房需要设备降温时加强对出菇过程中栽培环境尤其是水体的严格管理,有助于降低斑玉蕈工厂化栽培的病害发生率。

关键词：斑玉蕈病原微生物工厂化栽培分类鉴定污染防控

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金针菇切根多糖FVP60B的降脂作用研究

金针菇切根多糖FVP60B的降脂作用研究

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中国食品科学技术学会第十七届年会

作者：王慧敏刘肖肖张赫男汪雯翰贾薇上海海洋大学食品学院上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

高脂血症是动脉粥样硬化、冠心病、脑卒中、中风、心肌梗死等众多疾病的重要危险因素。从金针菇切根中分离纯化得到了分子质量为2.044×10～4 Ku,单糖组成为岩藻糖:半乳糖:葡萄糖:木糖:甘露糖=1.5:3:13:1:2的吡喃型杂多糖FVP60B,并... 详细信息

高脂血症是动脉粥样硬化、冠心病、脑卒中、中风、心肌梗死等众多疾病的重要危险因素。从金针菇切根中分离纯化得到了分子质量为2.044×10～4 Ku,单糖组成为岩藻糖:半乳糖:葡萄糖:木糖:甘露糖=1.5:3:13:1:2的吡喃型杂多糖FVP60B,并利用甲基化分析、紫外可见光谱和红外光谱分析以及核磁共振等手段对其进行了结构解析,并研究该多糖对巨噬细胞RAW264.7和斑马鱼的降脂作用。通过氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞RAW264.7脂质细胞积累模型和高脂饮食诱导的斑马鱼幼鱼高脂模型等研究该多糖的降脂作用。结果表明FVP60B能明显减少脂质积累细胞内的脂滴数量,并且能够显著抑制斑马鱼幼鱼体内的脂质积累。金针菇切根多糖FVP60B具有良好的降脂活性,具有降脂食品添加剂或者保健品的开发潜力。

关键词：金针菇多糖脂质积累细胞斑马鱼降脂活性

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大孔吸附树脂联用KB-2微球柱层析法分离纯化虫草素的工艺优化

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食用菌学报 2019年第2期26卷 65-71页

作者：周靖吐尔尼散·吐地张忠张冕刘艳芳周帅王晨光唐庆九上海百信生物科技有限公司国家食用菌工程技术研究中心中试基地上海201403 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 中国药科大学江苏南京211198

通过比较19种大孔吸附树脂对虫草素的解吸附率并联用KB-2微球柱层析法优选出一种简单快捷分离纯化蛹虫草(Cordyceps militaris)培养基中虫草素的制备工艺。结果表明,经大孔吸附树脂XDA-8D吸附后,再用体积分数30%的乙醇解吸附,虫草素纯... 详细信息

通过比较19种大孔吸附树脂对虫草素的解吸附率并联用KB-2微球柱层析法优选出一种简单快捷分离纯化蛹虫草(Cordyceps militaris)培养基中虫草素的制备工艺。结果表明,经大孔吸附树脂XDA-8D吸附后,再用体积分数30%的乙醇解吸附,虫草素纯度从原料中的0.4%达到了10.53%;联用KB-2微球柱层析法分离虫草素,可将纯度提升至66.94%,其优化后的参数为:上样流速1.0 mL/min,上样浓度0.5 mg/mL,用300 mL(2VB)水和体积分数10%的乙醇450 mL(3VB)除杂,30%乙醇1500 mL(10VB)洗脱得到虫草素。

关键词：蛹虫草大孔树脂微球虫草素

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ARTP诱变灵芝菌株筛选高抗氧化能力新菌株研究

ARTP诱变灵芝菌株筛选高抗氧化能力新菌株研究

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中国食品科学技术学会第十七届年会

作者：张越野唐传红谭贻冯娜刘艳芳唐庆九张劲松上海海洋大学食品学院上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

灵芝（Ganoderma lucidum）为担子菌纲、多孔菌目、灵芝科、灵芝属真菌,被《神农本草经》和《本草纲目》等列为上品,是滋补强身、扶正培本的珍贵药品,有久服轻身延年之功效。现代医学研究已证明灵芝具有抗肿瘤、调节免疫、保肝、镇静安... 详细信息

灵芝（Ganoderma lucidum）为担子菌纲、多孔菌目、灵芝科、灵芝属真菌,被《神农本草经》和《本草纲目》等列为上品,是滋补强身、扶正培本的珍贵药品,有久服轻身延年之功效。现代医学研究已证明灵芝具有抗肿瘤、调节免疫、保肝、镇静安神、降血压、抗氧化等多种功效,这些功效可能与灵芝中的活性物质有关,比如多糖、多酚类化合物。本课题研究ARTP（常压室温等离子体）诱变技术对灵芝发酵菌丝体抗氧化活性的影响以及相关次级代谢产物的变化。将ARTP诱变所得20个诱变菌株进行液体发酵培养,测定各菌株多糖、多酚含量并结合二苯基三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率、FRAP法、TEAC法对其代谢产物及抗氧化活性进行评价分析。结果表明,各灵芝诱变菌株的不同抗氧化活性与多酚含量存在显著正相关,且灵芝诱变菌株中A14、A19表现出最为显著的强抗氧化活性,DPPH自由基清除率、FRAP值、TEAC值分别较出发菌株G0157分别提高了139.67%,134.59%,203.8%,196.48%,147.3%,140.15%,且菌株A14,A19醇沉所得多糖组分中G1420,G1920,G1975具有明显抗氧化活性。

关键词：灵芝 ARTP 多糖多酚抗氧化活性

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不同玉米芯含量对培养料中酶活和木耳产量及其子实体中氨基酸含量的影响

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食用菌学报 2019年第2期26卷 45-53页

作者：陈辉王倩汪虹赵静郝海波隽加香陈明杰张津京上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海光明森源生物科技有限公司上海201408

探讨玉米芯含量不同对木耳(Auricularia auricula-judae)培养料中木质素酶和纤维素酶以及子实体产量和氨基酸含量的影响,设置培养料中玉米芯含量分别为10%、30%、50%和70%,在菌丝生长满袋后(菌丝期)和子实体期(第4潮耳出菇期)分别从菌... 详细信息

探讨玉米芯含量不同对木耳(Auricularia auricula-judae)培养料中木质素酶和纤维素酶以及子实体产量和氨基酸含量的影响,设置培养料中玉米芯含量分别为10%、30%、50%和70%,在菌丝生长满袋后(菌丝期)和子实体期(第4潮耳出菇期)分别从菌袋的上中下3个部位取培养料混合,测定酶活及木质素和纤维素含量;采收子实体统计4潮菇的产量并测定子实体中氨基酸含量。结果表明:当培养料中玉米芯含量为50%时,菌丝生长速度最快。在菌丝期,当培养料中玉米芯含量为70%时木质素过氧化物酶活性最高,当玉米芯含量为50%时锰过氧化物酶活性最高,漆酶活性随玉米芯含量的增加而降低;羧甲基纤维素酶在4个配方中活性均较高,其中当玉米芯含量为30%时酶活性最高;随玉米芯含量的增加,N-乙酰β-D-葡萄糖苷酶活性升高,β-1,3-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶和内切β-1,4-葡聚糖酶活性呈先升高后降低的趋势,当玉米芯含量为50%时酶活性达到最高。在子实体期,除木质素过氧化物酶和漆酶外,其余几种酶随玉米芯含量的增加,活性的变化规律均与菌丝期不同。在菌丝期,随玉米芯含量增加,培养料中的木质素含量逐渐减少,纤维素含量逐渐增加;在子实体期,随玉米芯含量增加,培养料中的木质素和纤维素含量均先减少后增加,当培养料中玉米芯含量为50%时含量最低。当培养料中玉米芯含量为50%时子实体每袋总单产和总产量均最高;当玉米芯含量为30%时,子实体中氨基酸及其衍生物含量最高,其中包括人体必需的8种氨基酸。因此培养料中添加玉米芯可以提高与木质素、纤维素降解相关的酶活性,但是不同的酶在不同含量玉米芯的培养料中分泌规律存在差异。

关键词：木耳玉米芯产量酶活氨基酸

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利用不同培养料栽培的草菇子实体挥发性风味成分分析

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食用菌学报 2019年第2期26卷 37-44页

作者：余昌霞赵妍陈明杰汪虹李正鹏潘桂芳冯爱萍上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 安顺学院农学院贵州安顺561000

采用顶空固相微萃取(head space solid phase micro-extraction,HS-SPME)和气相色谱质谱(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)技术分析稻草、废棉、棉籽壳、金针菇(Flammulina velutiper)菌渣、刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)菌渣5种不同培养料栽培的草菇(Volvariella volvacea)子实体挥发性风味成分,利用相对气味活度值(relative odor activity value,ROAV)评价挥发性风味成分对草菇子实体总体风味的贡献,并采用主成分分析法明确了对不同培养料栽培的草菇香气影响较大的挥发性香味成分,通过综合评价指数(general evaluation indexes, GEI)对不同培养料栽培的草菇子实体香气进行评价,采用感官评定法验证分析草菇挥发性风味成分评价模型的准确性。结果表明:不同培养料栽培的草菇子实体中共检测出38种挥发性化合物,其中共有的化合物为26种,主要是芳香族和烯烃类、醛类化合物,其次是醇类化合物、酮类化合物。通过对主要挥发性风味物质的主成分分析发现,异戊醛、己醛、1-辛烯-3-醇、甲硫醇、2-戊基呋喃、二甲基硫醚对草菇子实体香气影响较大。GEI评价结果表明不同培养料栽培的草菇子实体香气差异显著,用刺芹侧耳菌渣栽培的草菇香气品质最优,金针菇菌渣栽培的草菇香气品质最差,感官评定结果与构建的挥发性风味成分评价模型结果一致。

关键词：草菇培养料挥发性风味成分相对气味活度值主成分分析

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高效液相色谱法测定葛仙米水溶性多糖含量

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上海农业学报 2020年第1期36卷 105-110页

作者：苏攀峰唐庆九陈盛赵立彬王玉兰刘艳芳周帅许剑锋上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心上海201306 湖南炎帝生物工程有限公司株洲412000

通过建立高效液相法(HPLC)测定葛仙米水溶性多糖含量的方法,对HPLC测定葛仙米水溶性多糖含量的方法学进行考察。以纯化的葛仙米多糖为标准品,应用HPLC对经过不同预处理的葛仙米水溶性多糖进行含量测定。结果表明:选择柱型为TSKgel G6000... 详细信息

通过建立高效液相法(HPLC)测定葛仙米水溶性多糖含量的方法,对HPLC测定葛仙米水溶性多糖含量的方法学进行考察。以纯化的葛仙米多糖为标准品,应用HPLC对经过不同预处理的葛仙米水溶性多糖进行含量测定。结果表明:选择柱型为TSKgel G6000 PWXL液相色谱分析柱的效果较好,标准品的定量上、下限分别为10mg/mL和0.078625mg/mL;标准溶液浓度(Y)在0.15625~5mg/mL范围内,峰面积与进样量(X)呈良好的线性关系,线性方程Y=1995695.548X-170.597、R^2=0.999;精密度、重复性和稳定性的RSD分别为1.59%、1.13%、2.56%,平均加样回收率为97.8%、RSD为1.72%,说明该方法灵敏度高、重复性和稳定性较好,试验结果可靠,所建方法适用于葛仙米水溶性多糖含量的测定。

关键词：葛仙米水溶性多糖高效液相色谱法含量

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灵芝酸A对前列腺癌LNCaP细胞的生长抑制作用及机制

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菌物学报 2019年第5期38卷 717-727页

作者：徐宾贾薇王忠张赫男吴迪唐传红杨焱刘振东张劲松汪雯翰上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海交通大学附属第六人民医院南院泌尿外科上海201400 西藏农牧学院西藏林芝860000

本研究利用alamarBlue~?测定细胞活力法、流式细胞术(annxin V-FITC)/PI双染色测定细胞凋亡法和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定5α-还原酶活性法评价灵芝酸A对前列腺癌的体外抗肿瘤活性,并进一步利用... 详细信息

本研究利用alamarBlue~?测定细胞活力法、流式细胞术(annxin V-FITC)/PI双染色测定细胞凋亡法和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定5α-还原酶活性法评价灵芝酸A对前列腺癌的体外抗肿瘤活性,并进一步利用流式细胞术2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichlorofluorescindiacetate,H2DCFDA)染色测定ROS释放量法、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质免疫印迹(western blot,WB)检测雄激素受体(androgen receptor,AR)基因和凋亡相关基因表达的方法,探讨其作用机理。研究结果表明灵芝酸A可通过抑制5α-还原酶活性,抑制睾酮诱导的前列腺癌LNCaP细胞增殖,诱发细胞早期凋亡来发挥抗肿瘤活性;进一步研究表明,灵芝酸A降低前列腺癌细胞中AR的表达,并通过引发细胞线粒体功能障碍释放过量活性氧(reactive oxygen species,ROS)诱发细胞凋亡,而qPCR和WB的数据进一步表明细胞线粒体功能障碍与抑癌基因caspase-3、bad和aifm1的高表达密切相关。

关键词：灵芝酸A LNCaP细胞细胞凋亡活性氧雄激素受体作用机理

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银杏葡萄酒香气成分的萃取条件优化及其香气物质的测定

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食品与生物技术学报 2019年第5期38卷 124-131页

作者：冯涛桑敏庄海宁孙敏徐志民王旭增上海应用技术大学香料香精技术与工程学院上海201418 上海市农业科学院食用菌研究所/国家食用菌工程技术研究中心上海201403 路易斯安那州立大学营养与食品科学学院 LA70803美国

香气物质的组成是影响葡萄酒品质的重要因素,作者利用响应面法优化顶空固相微萃取银杏葡萄酒中香气物质的条件,使气相色谱法检测香气物质的结果更精确。在单因素实验基础上,运用Box-Benhnken中心组合试验设计响应面分析。同时采用气质... 详细信息

香气物质的组成是影响葡萄酒品质的重要因素,作者利用响应面法优化顶空固相微萃取银杏葡萄酒中香气物质的条件,使气相色谱法检测香气物质的结果更精确。在单因素实验基础上,运用Box-Benhnken中心组合试验设计响应面分析。同时采用气质联用技术测定银杏葡萄酒中的挥发性成分组成。结果表明:顶空固相微萃取银杏葡萄酒香气的最佳条件为:萃取温度55℃、萃取时间42 min、取样量6 mL。以此优化条件并结合GC-MS分析测得银杏葡萄酒香气成分31种,其中包括酯类15种、酸3种、醇8种、羰基类化合物4种以及酚类1种,其中酯类物质含量最高且种类最多。经计算香气活性值(OAV),有23种化合物的OAV值大于1,说明大多数检测到的物质都对酒的风味产生贡献作用,尤其是异戊醇、苯乙醇、乙酸乙酯、乙酸异戊酯、己酸乙酯、庚酸乙酯以及乙醛等。

关键词：银杏葡萄酒挥发性成分优化顶空固相微萃取(HS-SPME) 气质联用(GC-MS)

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