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中国菌物学会2018年学术年会

作者：杨海芮贾薇张劲松张赫男杨焱汪雯翰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验石河子大学生命科学学院

肺癌在全球癌症死亡率中占据第一位。非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)在所有类型肺癌中所占比例最大。目前主要用于治疗NSCLC的方法是化疗法,然而,临床使用的化疗药物普遍具有较大的毒副作用,且容易产生耐药性。食药... 详细信息

肺癌在全球癌症死亡率中占据第一位。非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)在所有类型肺癌中所占比例最大。目前主要用于治疗NSCLC的方法是化疗法,然而,临床使用的化疗药物普遍具有较大的毒副作用,且容易产生耐药性。食药用真菌在东方有着独特的经济和医药价值,其天然组分的活性研究更是深得广大研究学者的青睐。因此,从食药用真菌中提取高效低毒的抗肿瘤活性先导化合物,用以研发新药将是生物医药界学者们研究的热点和难点。樟芝是原产于我国台湾的一种珍稀药用菌,具有多种生理活性,尤其是它卓越的抗肿瘤活性。樟芝中的明星分子,安卓喹诺儿,对NSCLC有很好的抑制作用,目前已进入FDA批准的NSCLC二期临床实验。然而,安卓喹诺儿主要来源于樟芝子实体,由于樟芝依赖生长的牛樟树是珍稀保护树种,且子实体生长极其缓慢,使得其研究成本居高不下,不利于科研的顺利进展。液态深层发酵具有原料来源广泛、成本低廉、生长过程短、操作易控制等优点,从液态发酵产物中分离纯化得到与安卓喹诺儿类似的活性物质,就成为十分值得开发的途径。本研究首先以樟芝液态发酵产物的粗提物为材料,研究其对NSCLC的抑制作用,发现其对NSCLC有较好的抑制作用,可引起S期细胞周期阻滞,诱导细胞发生凋亡。然而,粗提物是混合物,包含着许多成分不明的活性物质,很难从中发现发挥主要作用的活性单体物质。因此,后续研究采用实验室前期分离得到的两种单体化合物By-1和Antrodin C进行抗肺癌活性评价,并进一步探究其作用机制。其中,By-1主要来源于发酵液,Antrodin C主要来源于发酵菌丝体。通过对细胞迁移、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡及凋亡相关蛋白、细胞自噬等检测来评价By-1和Antrodin C的抗肺癌活性,并探究自噬和凋亡的交互式调控是否参与抗肺癌活性中,进一步探究作用的信号通路。实验发现,By-1和Antrodin C均对非小细胞肺癌SPCA-1细胞株有较好的抑制作用,其作用机制主要是由于引起S期细胞周期阻滞,上调P53蛋白,P53参与ROS和Bcl-2介导的线粒体细胞凋亡途径,进一步引起Caspase家族的级联反应,促进凋亡执行因子Caspase-3的释放,进而诱导细胞凋亡。通过检测自噬性结构,自噬流的发生以及自噬标记蛋白LC3 II表达和LC3 I向LC3 II转变,发现By-1和Antrodin C可诱导SPCA-1细胞发生自噬。并进一步发现自噬发生是通过下调Akt/mTOR通路来介导的。通过自噬抑制剂和自噬激活剂处理细胞,对细胞增殖的检测,发现自噬在By-1和Antrodin C的抗肺癌活性中起保护性作用。将促凋亡化合物和抑制自噬化合物联用,将明显增加对肿瘤细胞的抑制能力,这可能为NSCLC治疗提供一条新思路。肺癌细胞中存在多种类型的基因突变,其中EGFR突变占到了总突变类型的一半以上。有数据表明,对EGFR突变型肺癌,采用靶向性治疗的方法,能达到更好的效果,且预后良好。通过对EGFR突变型细胞株HCC827细胞进行细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的相关检测,发现By-1和Antrodin C可以抑制该细胞增殖,将细胞阻滞在S期,并能诱导细胞发生凋亡。本研究采用不同类型的人非小细胞肺癌细胞系探究By-1和Antrodin C的抗肺癌活性及其分子机制,发现By-1和Antrodin C对NSCLC有较好的抑制作用,其作用机制是由于凋亡和自噬的交互式调控所致。由此可见,By-1和Antrodin C都有可能发展成为潜在的抗肺癌治疗的化疗药物,这也为后续的深入研究提供了理论依据。

关键词：樟芝非小细胞肺癌细胞凋亡细胞自噬

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八种食药用菌子实体醇提物对乳腺癌细胞MCF-7的体外影响

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食用菌学报 2017年第2期24卷 88-92页

作者：于荣利贾薇张劲松杨焱吴迪唐传红颜梦秋庄海宁汪雯翰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

以乳腺癌细胞株MCF-7为实验对象,采用细胞增殖抑制率、细胞粘附抑制率、细胞克隆数和细胞迁移距离为评价指标,研究8种食药用菌醇提物对乳腺癌的影响。刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)、姬松茸(Agaricus blazei)和灰树花(Grifola frondosa)... 详细信息

以乳腺癌细胞株MCF-7为实验对象,采用细胞增殖抑制率、细胞粘附抑制率、细胞克隆数和细胞迁移距离为评价指标,研究8种食药用菌醇提物对乳腺癌的影响。刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)、姬松茸(Agaricus blazei)和灰树花(Grifola frondosa)的醇提物(200μg/mL)处理能显著降低MCF-7细胞的克隆形成数和细胞迁移距离,较阴性对照分别降低了64.3%、64.5%、61.6%和54.8%、54.8%、48.0%,3种醇提物对MCF-7细胞粘附数和细胞增殖的抑制率分别为48.5%、55.1%、49.3%和30.0%、34.1%、29.5%;另外5种食用菌醇提物作用效果不明显。结果初步表明,刺芹侧耳、姬松茸和灰树花的醇提物(200μg/mL)具有一定的体外抑制乳腺癌活性。

关键词： MCF-7细胞细胞增殖粘附能力细胞迁移细胞克隆

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刺芹侧耳栽培过程中游离氨基酸含量的变化

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北方园艺 2017年第9期 125-129页

作者：李巧珍尚晓冬宋春艳李正鹏李燕鲍大鹏上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

以刺芹侧耳不同生长发育期的基质菌丝体和子实体为试材,采用氨基酸自动分析仪对刺芹侧耳栽培过程中基质菌丝体和子实体的游离氨基酸含量的动态变化进行了研究,以期掌握刺芹侧耳整个栽培周期中基质菌丝体和子实体中氨基酸含量的变化动态... 详细信息

以刺芹侧耳不同生长发育期的基质菌丝体和子实体为试材,采用氨基酸自动分析仪对刺芹侧耳栽培过程中基质菌丝体和子实体的游离氨基酸含量的动态变化进行了研究,以期掌握刺芹侧耳整个栽培周期中基质菌丝体和子实体中氨基酸含量的变化动态,为进一步探索刺芹侧耳栽培过程中菌丝吸收利用氮后合成的有机氮载体以及转运和传递方式奠定基础。结果表明:基质菌丝体中总游离氨基酸含量在发菌阶段显著上升,在后熟阶段及搔菌处理时期,总游离氨基酸含量变化不显著;子实体生长阶段,基质菌丝体中总游离氨基酸含量逐渐下降。基质菌丝体中含量最丰富的氨基酸为精氨酸(Arg),现原基时含量达到最高值为7 082.30μg·g^(-1)(占比65.86%),从现原基到子实体成熟过程中基质菌丝体中Arg含量逐渐下降,最终为1 741.31μg·g^(-1)(占比40.67%)。由此推测Arg在刺芹侧耳生长过程中的氮素营养转运中起到重要作用。

关键词：刺芹侧耳基质菌丝体子实体游离氨基酸

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无需覆土的蘑菇属食用菌——中国美味蘑菇

无需覆土的蘑菇属食用菌——中国美味蘑菇

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中国菌物学会2018年学术年会

作者：李传华刘培培赵春生李泰辉陈明杰农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所新疆石河子大学生命科学学院新疆巴州科技局

采集于新疆的"中国美味蘑菇"是一种个体巨大的野生蘑菇,迄今未有人工栽培报道。本文已成功对其进行驯化栽培并完成了它的生物学特性研究,可为今后商业化栽培提供科学依据。结果表明,中国美味蘑菇菌丝生长的最佳碳源是葡萄糖,... 详细信息

采集于新疆的"中国美味蘑菇"是一种个体巨大的野生蘑菇,迄今未有人工栽培报道。本文已成功对其进行驯化栽培并完成了它的生物学特性研究,可为今后商业化栽培提供科学依据。结果表明,中国美味蘑菇菌丝生长的最佳碳源是葡萄糖,最佳氮源是大豆蛋白胨;菌丝生长最适温度是25℃,最适pH值为6。该种蘑菇可利用稻草、麦杆、芦苇等基质进行栽培;它还有一重要的特点就是出菇可不需覆土,而覆土则为一般栽培的蘑菇属种类生产中的必须环节。初步驯化表明,该种蘑菇以芦苇为基质比以稻草为基质的生物学效率高15.01%。

关键词：新疆驯化栽培生物学特性营养成分

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沼渣栽培鸡腿菇初探

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北方园艺 2017年第1期 155-157页

作者：于海龙尚晓冬谭琦宋春艳章炉军张美彦上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

以沼气发酵的废弃物沼渣为试材,部分代替鸡腿菇栽培常用栽培料中的玉米芯进行栽培试验,分别考察菌丝生长速度、生长周期、产量以及生物转化率。结果表明:以配方3(60%沼渣,20%玉米芯,13%麸皮,5%玉米粉,2%石膏,含水量63%~65%)栽培鸡腿菇,... 详细信息

以沼气发酵的废弃物沼渣为试材,部分代替鸡腿菇栽培常用栽培料中的玉米芯进行栽培试验,分别考察菌丝生长速度、生长周期、产量以及生物转化率。结果表明:以配方3(60%沼渣,20%玉米芯,13%麸皮,5%玉米粉,2%石膏,含水量63%~65%)栽培鸡腿菇,菌丝生长速度较快,生产周期短,产量和生物转化率最高,并且子实体中镉、汞、铅、砷的含量远低于国家对食用菌中重金属含量的要求,效果理想,可以在规模沼气发酵的地区推广、示范。

关键词：沼渣鸡腿菇栽培

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两个香菇菌株的挥发性物质比较

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食用菌学报 2017年第4期24卷 65-70页

作者：余昌霞汪虹赵妍陈明杰宋晓霞李正鹏奚莉萍张美彦王晨光上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403

采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术(SPME-GC-MS)对L808和ww808(子实体无香菇香味)两个香菇菌株(Lentinula edodes)的菌丝体和子实体挥发性成分进行分析。挥发性成分主要包括含硫化合物、八碳化合物、醛类化合物、酯类化合物、... 详细信息

采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术(SPME-GC-MS)对L808和ww808(子实体无香菇香味)两个香菇菌株(Lentinula edodes)的菌丝体和子实体挥发性成分进行分析。挥发性成分主要包括含硫化合物、八碳化合物、醛类化合物、酯类化合物、醇类化合物、酮类化合物、酸类化合物、芳香和烯烃化合物和杂环化合物八种。剔除其中相对质量分数低于0.5%的部分,检出挥发性成分79种,其中,L808和ww808的菌丝体中挥发性成分分别有54和43种,主要是醛类化合物、芳香和烯烃化合物及含硫化合物;子实体中挥发性成分分别有36和38种,主要是含硫化合物(通常认为的主要香味物质),其中ww808的含硫化合物含量是L808的64.61%。

关键词：香菇挥发性物质 SPME-GC-MS

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农杆菌介导的Cas9基因转化金针菇的研究

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食用菌学报 2017年第3期24卷 25-29页

作者：刘建雨刘建辉张丹徐珍王瑞娟杨慧于海龙尚晓冬上海市农业科学院食用菌研究所农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室

将酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)Cas9序列(SpCas9序列,Addgene#43802)根据金针菇(Flammulina velutipes)的密码子偏好性进行优化,并构建FvCas9双元表达载体,利用农杆菌介导法转化金针菇单核体Dan3,经抗性培养基筛选以及潮霉素和C... 详细信息

将酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)Cas9序列(SpCas9序列,Addgene#43802)根据金针菇(Flammulina velutipes)的密码子偏好性进行优化,并构建FvCas9双元表达载体,利用农杆菌介导法转化金针菇单核体Dan3,经抗性培养基筛选以及潮霉素和Cas9基因PCR扩增验证,结果显示Cas9基因已经成功转入金针菇菌丝体中,转化率为6.84%。

关键词：金针菇农杆菌介导法 CRISPR/Cas9系统 Cas9

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不同日常食用加工方法对灵芝中活性成分利用的比较

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食用菌学报 2017年第2期24卷 83-87页

作者：冯娜颜梦秋王晨光刘艳芳张劲松冯杰王亚涛唐庆九上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403

为阐明日常的食用加工方法是否能充分利用灵芝(Ganoderma lingzhi)中的活性成分,用苯酚硫酸法和HPLC法分别检测龙芝二号子实体片经水煮、焖烧、水泡、酒浸四种加工处理的提取液中灵芝多糖和灵芝三萜含量,结果水煮、焖烧、水泡40min后多... 详细信息

为阐明日常的食用加工方法是否能充分利用灵芝(Ganoderma lingzhi)中的活性成分,用苯酚硫酸法和HPLC法分别检测龙芝二号子实体片经水煮、焖烧、水泡、酒浸四种加工处理的提取液中灵芝多糖和灵芝三萜含量,结果水煮、焖烧、水泡40min后多糖基本全部溶出,三萜溶出率分别为85.5%、83.1%、51.1%;50%的白酒浸泡7d后三萜溶出率为95.0%,而多糖溶出率仅为0.31%;用这些方法比较龙芝二号与菌草灵芝的处理结果,结果多糖和三萜溶出效果基本相同;通过比较,焖烧40min能使灵芝片中有效成分大部分溶出。

关键词：灵芝三萜多糖

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不同灵芝孢子粉产品的多糖成分比较

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食用菌学报 2017年第4期24卷 59-64页

作者：张芝华俞苓刘艳芳张劲松周帅冯娜唐庆九上海应用技术大学香料香精技术与工程学院上海201418 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

五种市售的灵芝(Ganoderma lingzhi)孢子粉产品被用于评价其多糖含量和成分,采用苯酚-硫酸法测定五种灵芝孢子粉产品的多糖含量、高效液相色谱分析其多糖指纹图谱、离子色谱分析灵芝孢子粉多糖的单糖组成。根据结果,不同来源的灵芝孢子... 详细信息

五种市售的灵芝(Ganoderma lingzhi)孢子粉产品被用于评价其多糖含量和成分,采用苯酚-硫酸法测定五种灵芝孢子粉产品的多糖含量、高效液相色谱分析其多糖指纹图谱、离子色谱分析灵芝孢子粉多糖的单糖组成。根据结果,不同来源的灵芝孢子粉总糖含量在2.05%~8.82%之间、多糖含量在1.05%~1.87%之间,而且多糖的种类及其水解后单糖组成也有明显的差异,结果表明市售灵芝孢子粉产品的多糖有显著不同。

关键词：灵芝孢子粉多糖单糖组分

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斑玉蕈β-葡萄糖苷酶基因的序列分析及皂苷对基因表达的影响

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食用菌学报 2017年第1期24卷 1-6页

作者：陈辉冯志勇冯川陈明杰汪虹王倩宋晓霞赵妍叶明张津京上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 合肥工业大学食品科学与工程学院安徽合肥230009

通过转录组测序获得了斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)SIEF3133菌株的β-葡萄糖苷酶基因的cDNA序列(命名为bgl1),采用荧光定量PCR检测bgl1的相对表达量。当PDB中加入0.05g/L的皂苷溶液,菌丝培养4~6d时,bgl1相对表达量降低了1/2左右(相比对... 详细信息

通过转录组测序获得了斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)SIEF3133菌株的β-葡萄糖苷酶基因的cDNA序列(命名为bgl1),采用荧光定量PCR检测bgl1的相对表达量。当PDB中加入0.05g/L的皂苷溶液,菌丝培养4~6d时,bgl1相对表达量降低了1/2左右(相比对照),8d开始升高,第10天为对照组的1.8倍;向工厂化生产用的栽培瓶(接种培养85d后搔菌处理)中添加0.05g/L的皂苷溶液15mL,可缩短子实体采收时间约3d(与对照组相比),在此过程中bgl1相对表达量在第5天时最低,20d时超过对照组,5d时为对照组的1.66倍。

关键词：斑玉蕈皂苷 β-葡萄糖苷酶基因表达

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