检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2006年第1期46卷 162-165页

作者：何丽鸿赵勇陈明杰潘迎捷南京农业大学生命科学院微生物学系南京210095 上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106

采用化学裂解和酶解相结合的方法,选择加入PVPP的高盐缓冲液作为细胞裂解的反应体系,并以PEG-8000进行DNA沉淀,从高有机含量的堆肥样品中进行微生物总DNA的提取。结果表明,从4种性质不同的堆肥中均获得了高质量的微生物总DNA,所得的DNA... 详细信息

采用化学裂解和酶解相结合的方法,选择加入PVPP的高盐缓冲液作为细胞裂解的反应体系,并以PEG-8000进行DNA沉淀,从高有机含量的堆肥样品中进行微生物总DNA的提取。结果表明,从4种性质不同的堆肥中均获得了高质量的微生物总DNA,所得的DNA分子片段在23kb左右;每克干重堆肥的总DNA提取量为63.54±12.08μg^106.50±28.36μg,A260/A280大于1.6,A260/A230大于1.8,不用经过纯化可以直接进行PCR扩增和限制性酶切;以该DNA为模板进行微生物区系的DGGE分析,显示了丰富的微生物多样性。该方法减少了通常环境样品DNA提取过程中的纯化步骤,减少了DNA的损失,为从事微生物分子生态学,尤其是那些针对高有机含量以及获取极为不易的环境样品的研究而言是十分有益的。

关键词：堆肥 DNA的高效提取高有机含量 DGGE

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用ITS和ISSR分子标记技术鉴别香菇生产用种

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菌物学报 2006年第1期25卷 94-100页

作者：秦莲花宋春艳谭琦陈明杰潘迎捷南京农业大学生命科学学院南京210095 上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106

通过选用香菇生产中存在名称争议或者名称相近或者同一名称但长期在不同地区栽培的12株香菇生产菌株,以及用于种水平对比的豹皮香菇Lentinuslepideus和虎皮香菇Lentinustigrinus的4个菌株,共16个菌株作为供试材料,进行ITS和ISSR遗传分析... 详细信息

通过选用香菇生产中存在名称争议或者名称相近或者同一名称但长期在不同地区栽培的12株香菇生产菌株,以及用于种水平对比的豹皮香菇Lentinuslepideus和虎皮香菇Lentinustigrinus的4个菌株,共16个菌株作为供试材料,进行ITS和ISSR遗传分析,并用RAPD技术验证试验结果。结果证明,不同种的ITS长度存在差异,再次证明ITS可以有效区别种之间的菌株;在ISSR的菌株水平分析中,香菇种内材料拥有两个共同的条带,与其他两种菌株的带型图谱有着明显差异,其中5对材料的带型图谱极为相近。RAPD验证结果与上述结果相近。由此可见,结合ITS与ISSR技术是可以用作香菇生产菌株鉴别的,这为ITS和ISSR分子标记技术推广应用于香菇生产菌株的快速准确鉴别提供了技术依据。

关键词：食用菌快速鉴定 PCR技术

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低温胁迫下香菇基因表达差异研究

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应用与环境生物学报 2006年第5期12卷 614-617页

作者：冯志勇米朔甫陈明杰赵明文李军辉潘迎捷南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 上海丰科生物科技股份有限公司上海201401 上海市农业科学院食用菌研究所/上海市农业遗传重点实验室上海201106

香菇为变温结实型担子菌，为探讨低温胁迫诱导香菇子实体形成的分子机理，应用mRNA差异显示技术对低温胁迫下香菇菌丝体基因表达差异进行了比较．电泳差异展示结果表明，低温胁迫前后基因表达在数量水平和质量水平上都存在显著差异，数... 详细信息

香菇为变温结实型担子菌，为探讨低温胁迫诱导香菇子实体形成的分子机理，应用mRNA差异显示技术对低温胁迫下香菇菌丝体基因表达差异进行了比较．电泳差异展示结果表明，低温胁迫前后基因表达在数量水平和质量水平上都存在显著差异，数量水平的差异表现为低温胁迫过程中表达序列标签（expressed sequence tags，ESTs）增强表达或减弱表达；质量水平上的差异表现为低温胁迫使部分ESTs特异诱导表达或沉默表达．差异ESTs的类型比较和多态性分析发现，低温胁迫处理6～12h可能是诱发香菇原基发生的关键时段．本文还对显著差异表达的基因片段进行序列分析和Northern杂交验证，初步讨论了低温胁迫时间在调控香菇子实体发生中的作用．

关键词：香菇低温胁迫 mRNA差异显示基因表达序列标签(ESTs)

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香菇低温胁迫应答基因的克隆及其表达分析

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农业生物技术学报 2006年第3期14卷 381-386页

作者：冯志勇米朔甫赵明文陈明杰李军辉谭琦潘迎捷南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室上海丰科生物科技股份有限公司上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传重点实验室

用RT-PCR和RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术相结合,从香菇(Lentinulaedodes)苏香菌株中得到了1个与低温胁迫相关的全长2432bp的cDNA,该基因含1个1962bp的开放式阅读框,基因组序列分析发现该基因有11个内含子。经数据库同源查找... 详细信息

用RT-PCR和RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术相结合,从香菇(Lentinulaedodes)苏香菌株中得到了1个与低温胁迫相关的全长2432bp的cDNA,该基因含1个1962bp的开放式阅读框,基因组序列分析发现该基因有11个内含子。经数据库同源查找及序列比较,发现该基因编码的氨基酸与青霉菌(Penicilliumnordicum)的聚酮合酶和酿酒酵母(Saccha-romycescerevisiae)的α-氨基己二酸还原酶分别具有30%、22%的同源性和46%、40%的相似性。表达谱分析表明,当低温胁迫的温差为5℃时,该基因即开始表达,但mRNA丰度较低;温差达到10℃时,mRNA达到最大表达量;低温胁迫处理后,该基因在菌丝转色前的表达丰度低于转色后的丰度。将该基因初步命名为ICS(geneinducedundercoldstress,GenBank登录号为DQ211659),并初步推测该基因可能参与了低温胁迫的信号传导,低温胁迫信号在影响氮代谢后进而诱发子实体的形成。

关键词：香菇低温胁迫快速分离cDNA末端(RACE) 基因克隆表达谱

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ERIC技术在紫木耳亲缘关系鉴定上的应用研究

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菌物学报 2005年第1期24卷 53-60页

作者：温亚丽曹晖潘迎捷南京农业大学生命科学学院微生物系上海市农业科学院食用菌研究所农业部食用菌遗传育种重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201106 上海市农业科学院食用菌研究所农业部食用菌遗传育种重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室

为了研究紫木耳与黑木耳和毛木耳之间的亲缘关系,利用ERIC分子标记、Southern杂交技术和形态学分类法,对紫木耳、黑木耳和毛木耳三者进行了详细的研究。在相似性系数为75%的水平上,由ERIC所得的聚类图将7个菌株分为2组,即黑木耳自成一组... 详细信息

为了研究紫木耳与黑木耳和毛木耳之间的亲缘关系,利用ERIC分子标记、Southern杂交技术和形态学分类法,对紫木耳、黑木耳和毛木耳三者进行了详细的研究。在相似性系数为75%的水平上,由ERIC所得的聚类图将7个菌株分为2组,即黑木耳自成一组,毛木耳和紫木耳为一组,两者相似性系数为77%。Southern杂交实验证明毛木耳和紫木耳之间存在较高的同源性。子实体的形态学特征表明紫木耳与毛木耳的亲缘关系较之黑木耳更为密切,同时进一步说明ERIC分子标记是准确可信的。本研究探讨了紫木耳的分类地位,认为在基因组进化上,紫木耳与毛木耳的关系较之黑木耳更为密切。

关键词：毛木耳黑木耳亲缘关系相似性系数分子标记子实体同源性 Southern杂交形态学鉴定

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毛木耳漆酶纯化及其部分漆酶特性的研究

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菌物学报 2005年第1期24卷 61-70页

作者：杨建明张小敏邢增涛陈明杰曹晖谭琦潘迎捷南京农业大学生命科学学院农业部食用菌遗传育种重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106 农业部食用菌遗传育种重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所安徽技术师范学院

对毛木耳AuriculariapolytrichaAP4的粗酶液进行PAGE电泳后发现含有三种漆酶同工酶,并且通过运用NativeSDS-PAGE获得三种漆酶的分子量大小分别约为:LacA(110kD);LacB(84kD);LacC(65kD)。对漆酶粗酶液通过硫酸铵分级沉淀和离子交换柱层... 详细信息

对毛木耳AuriculariapolytrichaAP4的粗酶液进行PAGE电泳后发现含有三种漆酶同工酶,并且通过运用NativeSDS-PAGE获得三种漆酶的分子量大小分别约为:LacA(110kD);LacB(84kD);LacC(65kD)。对漆酶粗酶液通过硫酸铵分级沉淀和离子交换柱层析进行纯化,用SDS-PAGE证明获得纯化的单一漆酶LacB。LacB漆酶的反应的最适温度为30℃,最适pH为3.0。此酶氧化ABTS的Km值为6.64×10-mmol/L,金属离子对酶活的影响很大,其中5Ca2+,Mg2+,Zn2+,Na2+,Ag2+对漆酶LacB有明显的激活作用;Co2+,Hg2+,Fe3+,Fe2+,Ba2+等对酶活有明显的抑制作用。LacB和其它真菌漆酶一样具有底物专一性不强的特点,并且LacB对RB亮兰染料有很好的脱色作用。

关键词：真菌漆酶纯化最适pH 最适温度酶活 PAGE电泳 SDS-PAGE 离子交换柱层析抑制作用激活作用

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豫北地区白灵菇高产优质栽培技术

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食用菌 2005年第5期27卷 37-39页

作者：王志强郑瑞谦郭倩李翠梅上海市农业科学院食用菌研究所农业部食用菌遗传育种重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海201106 河南省濮阳市科龙生物工程有限公司

在豫北地区,有着极为丰富的栽培资源和农村富余劳动力,地理环境和气候也较适宜白灵菇的栽培,近几年栽培规模也发展十分迅猛.但栽培技术上仍存在较多问题,制约了广大栽培户经济效益的进一步提高,急需不断完善.笔者通过近几年在该地区的... 详细信息

在豫北地区,有着极为丰富的栽培资源和农村富余劳动力,地理环境和气候也较适宜白灵菇的栽培,近几年栽培规模也发展十分迅猛.但栽培技术上仍存在较多问题,制约了广大栽培户经济效益的进一步提高,急需不断完善.笔者通过近几年在该地区的示范栽培,总结出一套从制菌包到最后采收的一系列高产栽培措施,并对目前豫北地区白灵菇栽培中主要的常见问题总结出了一些相应的解决技术措施,供广大菇农参考.

关键词：高产优质栽培技术豫北地区白灵菇农村富余劳动力高产栽培措施地理环境栽培规模经济效益示范栽培

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活化处理双孢蘑菇液氮菌种对产量的影响

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食用菌学报 2005年第4期12卷 50-52页

作者：蔡令仪郭倩曹晖陈明杰汪虹杨刚冯爱萍贺冬梅楚鹰农业部食用菌遗传育种重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106

分别采用液氮和4℃冰箱保藏双孢蘑菇(Agaricus bisporus)菌种,并对液氮菌种进行活化处理,通过栽培试验比较各处理对双孢蘑菇产量的影响。结果表明,液氮法保藏双孢蘑菇菌种的产量较理想;液氮菌种经活化处理后的产量明显提高。

关键词：菌种保藏双孢蘑菇液氮保藏冰箱保藏活化处理

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秀珍菇保鲜技术研究

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食品科学 2005年第2期26卷 231-233页

作者：姚亚平冯志勇郭倩陕西省农业工程勘察设计院陕西西安710068 上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201106 上海市农业科学院食用菌研究所上海201106

比较了秀珍菇低温保鲜、自发气调保鲜、低温真空保鲜效果。结果表明,低温真空保鲜效果最佳,能有效地延缓秀珍菇变色、变味,抑制菌柄气生菌丝发生,减少水分损失,可以使秀珍菇保鲜期限超过9d。

关键词：秀珍菇低温保鲜自发气调保鲜低温真空保鲜

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应用血球计数板检测灵芝破壁孢子粉破壁率的研究

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食用菌学报 2005年第2期12卷 37-40页

作者：尚晓冬 ,李明容 ,王南 ,谭琦农业部食用菌产品质量监督检验测试中心(上海) 农业部食用菌遗传育种重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106

灵芝孢子粉称样量与孢子计数(血球计数板法)的回归分析结果表明,两者显著相关。在此基础上建立了灵芝破壁孢子粉破壁率的检测方法。破壁率48.9%的标准样品,日内相对标准偏差(RSD,n=14)为10.34%,回收率(mean±SD,n=14)为94.9%±9... 详细信息

灵芝孢子粉称样量与孢子计数(血球计数板法)的回归分析结果表明,两者显著相关。在此基础上建立了灵芝破壁孢子粉破壁率的检测方法。破壁率48.9%的标准样品,日内相对标准偏差(RSD,n=14)为10.34%,回收率(mean±SD,n=14)为94.9%±9.81%;破壁率68.8%、80.0%和90.6%的标准样品,日内相对标准偏差(RSD,n=10)分别为4.14%、3.43%和2.22%,回收率分别为101.2%±4.2%、98.76%±3.39%和99.73%±2.21%(mean±SD,n=10)。

关键词：灵芝破壁孢子粉破壁率血球计数板

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