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食用菌学报 2021年第6期28卷 126-134页

作者：刘怡刘红丽程秀峰张金超薛蓓刘振东汪雯翰西藏农牧学院西藏林芝860000 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

通过alamarBlueTM实验比较西藏林芝桦褐孔菌(Inonotus obliquus)与俄罗斯桦褐孔菌乙醇提取物对非小细胞肺癌A549和SPCA-1细胞增殖的抑制作用。运用硅胶柱、MCI GELCHP 20P树脂、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱等对西藏林芝桦褐孔菌乙醇提... 详细信息

通过alamarBlueTM实验比较西藏林芝桦褐孔菌(Inonotus obliquus)与俄罗斯桦褐孔菌乙醇提取物对非小细胞肺癌A549和SPCA-1细胞增殖的抑制作用。运用硅胶柱、MCI GELCHP 20P树脂、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱等对西藏林芝桦褐孔菌乙醇提取物的乙酸乙酯分部进行分离;对分离的化合物进行结构鉴定,并测定其对A549和SPCA-1细胞增殖的抑制作用。结果表明:与俄罗斯桦褐孔菌乙醇提取物相比,西藏林芝桦褐孔菌乙醇提取物对A549和SPCA-1细胞增殖具有更好的抑制作用。从西藏林芝桦褐孔菌乙醇提取物中分离到10个化合物,分别鉴定为桦褐孔菌醇(H-1)、乌索酸(H-2)、白桦脂醇(H-3)、香草酸(H-4)、丁香酸(H-5)、反式咖啡酸白桦醇脂(H-6)、原儿茶酸(H-7)、没食子酸(H-8)、褐孔菌烷B(H-9)和桦褐孔菌醇A(H-10),其中化合物H-1对A549细胞增殖的抑制效果最好,在300μmol·L^(-1)时抑制率为57.5%;H-2对SPCA-1细胞增殖的抑制效果最好,在300μmol·L^(-1)时抑制率为73.4%。

关键词：桦褐孔菌桦褐孔菌醇乌索酸非小细胞肺癌

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草菇子实体蛋白酶的分离纯化及其酶学性质

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食用菌学报 2021年第6期28卷 24-30页

作者：李治平陈明杰王耀冉宋盼盼常婷婷黄波赵妍上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

将草菇(Volvariella volvacea)子实体在15℃放置36 h,按照液料比10∶1加蒸馏水提取粗蛋白酶液,经硫酸铵沉淀、DEAE FF离子层析柱和Superdex 75 Increase 10/300凝胶柱分离纯化,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定该蛋白酶纯度和相对分子质... 详细信息

将草菇(Volvariella volvacea)子实体在15℃放置36 h,按照液料比10∶1加蒸馏水提取粗蛋白酶液,经硫酸铵沉淀、DEAE FF离子层析柱和Superdex 75 Increase 10/300凝胶柱分离纯化,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定该蛋白酶纯度和相对分子质量,并确定最适反应pH、最适温度和反应动力学常数,并探讨了不同金属离子和化学试剂对该蛋白酶活性的影响。结果表明:纯化后电泳纯蛋白酶D2-S4相对分子质量约为20000,最适pH为7.0,最适反应温度为40℃,米氏常数Km为1.68 g·L^(-1),Vm为3.11μg·(mL·min)-1;与对照组相比,除Ca2+处理外,其他处理均对该蛋白酶的活性影响存在显著性差异,其中Fe^(2+)对该蛋白酶活性有增强作用,该蛋白酶对苯甲基黄酰氟(phenylmethylsulfonyl fluoride,PMSF)敏感,是一种丝氨酸蛋白酶,且β-巯基乙醇对其抑制效果明显;阳离子洗涤剂十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)和曲拉通X-100对该蛋白酶活性均有抑制,而离散型洗涤剂吐温-80对该蛋白酶有增强作用。

关键词：草菇蛋白酶分离纯化

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高速逆流色谱法制备灵芝萜烯酮醇

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菌物学报 2021年第5期40卷 1190-1199页

作者：彭小芳田振韩伟王晨光冯娜张劲松上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研究分中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237 上海百信生物科技有限公司上海201403 上海海洋大学上海201306

本研究建立一种从灵芝子实体提取物中快速制备灵芝萜烯酮醇的方法。以沪农灵芝1号子实体为原料,经乙醇提取、D101大孔树脂富集后,再经一次正相色谱柱层析,获得富含灵芝萜烯酮醇的流分。采用高速逆流色谱法对该流分进行分离,优化分离条件... 详细信息

本研究建立一种从灵芝子实体提取物中快速制备灵芝萜烯酮醇的方法。以沪农灵芝1号子实体为原料,经乙醇提取、D101大孔树脂富集后,再经一次正相色谱柱层析,获得富含灵芝萜烯酮醇的流分。采用高速逆流色谱法对该流分进行分离,优化分离条件,获得的最佳条件为:溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(V/V/V/V,12:24:18:9),流速2.0mL/min,转速900r/min,上样量500mg,一次上样可得到纯度为90.9%的灵芝萜烯酮醇52.1mg,得率达到10.4%。该方法具有操作简单、污染小、成本低、得率和纯度高的特点,是规模化制备灵芝萜烯酮醇的一种新方法。

关键词：灵芝活性三萜快速制备

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基于UPLC-MS/MS定量检测法优化灵芝三萜热回流提取工艺的研究

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菌物学报 2021年第9期40卷 2480-2494页

作者：彭小芳程池露唐庆九张劲松唐传红王晨光冯娜韩伟华东理工大学药学院制药工程与过程化学教育部工程研究中心上海市新药设计重点实验室上海200237 上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

基于超高效液相-三重四级杆质谱联用(UPLC-MS/MS)定量检测法优化出一种灵芝三萜热回流提取的工艺。通过本实验建立的灵芝三萜UPLC-MS/MS精确方法检测不同来源的7个栽培品种灵芝子实体中19个三萜化合物的含量,筛选出三萜含量较高的sd-2... 详细信息

基于超高效液相-三重四级杆质谱联用(UPLC-MS/MS)定量检测法优化出一种灵芝三萜热回流提取的工艺。通过本实验建立的灵芝三萜UPLC-MS/MS精确方法检测不同来源的7个栽培品种灵芝子实体中19个三萜化合物的含量,筛选出三萜含量较高的sd-2灵芝子实体作为提取原料,以三萜含量和提取物得率为指标,通过单因素和响应面实验对灵芝三萜的热回流工艺进行优化,获得的最佳条件为:乙醇浓度75%、提取时间2.5h、液料比14:1、提取次数2次。对获得的最佳提取工艺进行中试实验,灵芝子实体乙醇提取物的得率为6.10%,三萜含量为11.8591mg/g。研究结果可为灵芝三萜的工业大规模提取提供理论依据,为灵芝高附加值产品的开发利用提供技术支撑。

关键词：三萜类化合物液质联用分析中试提取响应面优化

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五种食用菌多糖结构特征及其体外激活Dectin-1受体活性比较

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食用菌学报 2021年第5期28卷 87-95页

作者：刘静周帅李德顺唐庆九张劲松冯杰刘利平刘艳芳上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

制备刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)、香菇(Lentinula edodes)、毛头鬼伞(Coprinus comatus)、猴头菌(Hericium erinaceus)、灵芝(Ganoderma lingzhi)5种食用菌水提物、粗多糖和逐级醇沉多糖组分(30%醇沉组分30E,30%~75%醇沉组分30E-75E),比较食用菌水提物得率及总糖、海藻糖、阿拉伯糖醇和甘露糖醇含量,粗多糖和逐级醇沉多糖组分得率、多糖含量、重均分子量,逐级醇沉多糖组分单糖组成,以及对其体外激活Dectin-1受体的活性进行评价。结果表明:刺芹侧耳、毛头鬼伞水提物得率较高,水提物中刺芹侧耳总糖含量最高,猴头菌阿拉伯糖醇和甘露醇含量最高。五种食用菌粗多糖中,毛头鬼伞得率最高,灵芝‘龙芝2号’多糖含量最高;在20~35 min,多糖的色谱洗脱峰存在差异,灵芝仅有1个峰,猴头菌和毛头鬼伞有2个峰,香菇和刺芹侧耳则有3个峰;在35~45 min,均存在重均分子量为万级的多糖组分。五种食用菌30E中,香菇多糖得率最高,猴头菌多糖含量最高,猴头菌和灵芝‘龙芝2号’β-葡聚糖含量较高;5种食用菌30E-75E中,毛头鬼伞多糖得率最高、多糖含量较高。五种食用菌30E在20~36 min有1个色谱洗脱峰,重均分子量为1.850×10^(6)~1.272×10^(7) g·mol^(-1),多分散系数为1.035~1.284,毛头鬼伞回转半径(Rg)最小;5种食用菌30E-75E重均分子量为10^(4)~10^(6) g·mol^(-1),色谱洗脱峰存在较大差别。五种食用菌30E均主要含有葡萄糖;而其30E-75E含有的单糖种类及其比例差异较大,单糖均以葡萄糖为主,灵芝包含的单糖种类(7种)最为丰富。对于体外激活Dectin-1受体活性,灵芝‘龙芝2号’30E最强;除毛头鬼伞外,其他4种食用菌30E活性明显强于其对应的30E-75E;5种食用菌30E-75E中,‘龙芝2号’的活性最强,而香菇的无活性。

关键词：食用菌多糖重均分子量分布单糖组成免疫调节

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双孢蘑菇培养料一次发酵——预湿堆置时间对麦秸秆结构及成分的影响

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食用菌学报 2021年第5期28卷 64-70页

作者：王倩肖婷婷黄建春隽加香张津京陈辉徐佳佳蔡斌强上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海联中食用菌专业合作社上海201516

为探讨双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料制作过程中预湿阶段不同堆置时间对麦秸秆温度、结构、持水量及成分的影响,将麦秸秆方捆浸泡90 s至饱和,横排堆置于场地上,分别堆置0(对照)、24、48、72、96、120 h。每组随机取3捆测量温度,采... 详细信息

为探讨双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料制作过程中预湿阶段不同堆置时间对麦秸秆温度、结构、持水量及成分的影响,将麦秸秆方捆浸泡90 s至饱和,横排堆置于场地上,分别堆置0(对照)、24、48、72、96、120 h。每组随机取3捆测量温度,采用扫描电子显微镜观察麦秸秆的内外表面结构,采用傅里叶变换红外光谱仪检测外表面的官能团信息,并测定持水量以及可溶性糖、半纤维素、纤维素和木质素含量。结果表明:麦秸秆堆置0~72 h温度由16.6℃(0 h)升高至64.5℃(72 h);堆置24~48 h蜡质晶体明显减少,堆置48 h后麦秸秆内表面结构开始打开;堆置24~120 h Si-O伸缩振动峰和多糖类的C-O伸缩振动峰强度降低,表明麦秸秆外表面蜡质层、多糖类物质变少;麦秸秆持水量由堆置0 h的565.2%增加至72 h的701.8%,在堆置24 h后可溶性糖含量迅速下降,在堆置24~72 h期间木质纤维素组分没有变化;堆置96 h时,麦秸秆方捆温度达到69.3℃,与堆置0 h相比麦秸秆中半纤维素含量降低了16.9%;堆置120 h,麦秸秆方捆的温度降低至65.5℃,麦秸秆结构破坏明显,木质纤维素骨架暴露,与堆置0 h相比纤维素和木质素含量分别下降了11.7%和13.6%。

关键词：双孢蘑菇麦秸秆堆置结构成分

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4℃处理下草菇生理指标与耐低温胁迫相关性研究

4℃处理下草菇生理指标与耐低温胁迫相关性研究

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：郑婷婷万佳宁龚明石胜茸杨瑞恒王瑞娟汪滢上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海海洋大学食品学院

为了研究生理指标与草菇耐低温胁迫相关性,对经4℃筛选的3个菌株(VC1、VC3、VC4菌株)以及草菇V23菌株进行菌株鉴定、系统分类、生长形态、生长速率试验,并测定菌丝4℃处理下的生理指标。结果表明:VC1、VC3和VC4分别为云芝Trametes versi... 详细信息

为了研究生理指标与草菇耐低温胁迫相关性,对经4℃筛选的3个菌株(VC1、VC3、VC4菌株)以及草菇V23菌株进行菌株鉴定、系统分类、生长形态、生长速率试验,并测定菌丝4℃处理下的生理指标。结果表明:VC1、VC3和VC4分别为云芝Trametes versicolor、乳白原毛平革菌Phanerochaete sordida、毛栓菌Trametes hirsuta,其中VC系列与草菇V23分别位于同一腐生担子菌演化支的木腐和草腐类群。VC系列均能够在4℃生长,其中VC1长势最好;VC1和草菇V23在15-32℃的生长形态和生长速率最为相似。4℃处理0-32h只有VC1表现出较低的β-葡萄糖苷酶抑制活力,而V23则表现出明显的波动。组平均距离分析表明VC1和V23的β-葡萄糖苷酶序列的相似性最高。与下降的VC1总糖含量相比,4℃处理下的V23总糖含量显著上升;V23多糖含量下降比例高达20.97%,远高于VC1的14.69%。这就暗示4℃处理下V23较高的β-葡萄糖苷酶活力促进细胞壁多糖降解成单糖,导致了总糖含量的上升。以上结果提示β-葡萄糖苷酶的活力和总糖含量可能与草菇耐低温胁迫负相关。

关键词：草菇耐低温菌株生长形态 β-葡萄糖苷酶总糖

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常压室温等离子体诱变选育高产多糖灵芝新菌株

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食用菌学报 2021年第2期28卷 36-41页

作者：李塬张赫男谭贻刘艳芳冯杰张越野唐传红张劲松上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

以灵芝(Ganoderma lucidum)菌株G0157为出发菌株,利用常压室温等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)对其原生质体进行诱变处理,获得640个再生菌株,通过拮抗实验鉴定获得103个诱变菌株。测定诱变菌株的菌丝体多糖含量和... 详细信息

以灵芝(Ganoderma lucidum)菌株G0157为出发菌株,利用常压室温等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)对其原生质体进行诱变处理,获得640个再生菌株,通过拮抗实验鉴定获得103个诱变菌株。测定诱变菌株的菌丝体多糖含量和生物量并计算多糖产量,与出发菌株相比,诱变菌株A-434的多糖含量提高46.14%,诱变菌株A-246和A-434的多糖产量提高268.57%和63.07%。继代培养、拮抗实验和RAPD分析结果表明,诱变菌株A-246和A-434的遗传稳定性良好。

关键词：常压室温等离子体灵芝原生质体菌丝体生物量多糖含量多糖产量

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基于转录组分析高温对六妹羊肚菌菌丝体基因表达的影响

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食用菌学报 2025年第3期 38-50页

作者：胡鑫钰翟梦丹陈泽威李汪麒黄凯文张宇辰王震黄淮学院生物与食品工程学院上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点实验室

研究高温（33℃）胁迫对六妹羊肚菌（Morchella sextelata）菌丝体基因表达的影响，通过转录组测序，筛选高温组差异表达基因，随机选取5个差异表达基因，利用实时荧光定量PCR对转录组数据进行验证，并通过Pearson系数分析实时荧光定量... 详细信息

研究高温（33℃）胁迫对六妹羊肚菌（Morchella sextelata）菌丝体基因表达的影响，通过转录组测序，筛选高温组差异表达基因，随机选取5个差异表达基因，利用实时荧光定量PCR对转录组数据进行验证，并通过Pearson系数分析实时荧光定量PCR结果与转录组数据的相关性，对差异表达基因进行GO功能和KEGG代谢途径富集分析，根据筛选出的代谢途径，进行基因集的富集分析，筛选参与菌丝体响应高温胁迫的关键基因。结果表明：与对照组相比，高温组有2 112个差异表达基因，其中799个基因上调表达，1 313个基因下调表达；5个差异表达基因的实时荧光定量PCR检测结果与转录组测序结果显著正相关（R2=0.88）;GO功能分析结果表明，差异表达基因主要显著富集在DNA复制、脂质代谢等生物过程，膜组分等细胞组分，DNA结合、药物结合等分子功能；KEGG代谢途径分析结果表明，差异表达基因富集在错配修复、ABC转运蛋白、淀粉和蔗糖代谢、丙酮酸代谢、氨基酸的生物合成、双组分系统、RNA降解、碳代谢等代谢途径；与高温胁迫相关的10个关键差异表达基因包括DNA解旋酶、分子伴侣蛋白、丙酮酸激酶、苹果酸-乳酸酶、ATP结合蛋白、多药耐药性外排泵蛋白、磷酸连接酶、组氨酸激酶、转酮醇酶和果糖-6-磷酸酮醇酶基因。研究结果为解析六妹羊肚菌响应高温胁迫的分子机制提供参考。

关键词：六妹羊肚菌高温胁迫转录组测序基因表达

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筛选高抗氧化能力的灵芝诱变菌株

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食用菌学报 2021年第3期28卷 47-54页

作者：张越野张赫男谭贻冯杰唐庆九唐传红张劲松上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

利用DPPH(1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除实验,从经常压室温等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)诱变获得的103个灵芝(Ganoderma lucidum)诱变菌株中初步筛选出14个抗氧化能力强的优良菌株,以DPPH自由基清除率、铁... 详细信息

利用DPPH(1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除实验,从经常压室温等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)诱变获得的103个灵芝(Ganoderma lucidum)诱变菌株中初步筛选出14个抗氧化能力强的优良菌株,以DPPH自由基清除率、铁离子还原能力及ABTS自由基清除能力为指标对其抗氧化能力进行进一步评价,并分析了菌丝体水提物中多糖、多酚含量与抗氧化能力间的相关性。结果表明:诱变菌株A14、A19的DPPH自由基清除率、铁离子还原能力、ABTS自由基清除能力较出发菌株G0157均显著提高,显示出较强的抗氧化活性;菌丝体水提物的抗氧化活性与其多酚含量显著相关,表明多酚是灵芝菌丝体水提物发挥抗氧化作用的主要活性物质。

关键词： ARTP 灵芝多糖多酚抗氧化活性

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