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多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会

作者：刘肖肖王慧敏汪雯翰贾薇上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海海洋大学食品学院

金针菇（Flammulina velutipes（Curtis） Singer）是我国最早实现工厂化栽培的食用菌品种。金针菇不仅口感鲜美嫩滑,富含蛋白质、碳水化合物、膳食纤维素和维生素等多种营养物质[1],而且具有保肝、调节免疫、抑制肿瘤和抗氧化等多种药... 详细信息

金针菇（Flammulina velutipes（Curtis） Singer）是我国最早实现工厂化栽培的食用菌品种。金针菇不仅口感鲜美嫩滑,富含蛋白质、碳水化合物、膳食纤维素和维生素等多种营养物质[1],而且具有保肝、调节免疫、抑制肿瘤和抗氧化等多种药理作用[2-4]。尽管我国的金针菇工厂化生产技术已达国际领先水平,但由于自主知识产权菌种的创新不足,目前市场上的金针菇产品同质化严重,经济附加值低,导致金针菇生产企业面临着成本投入巨大、低价恶性竞争和净利润低等问题[5]。为促进金针菇产品的进一步研发,本研究团队利用水提醇沉法从金针菇子实体中得到两种粗多糖FVP30和FVP60,并通过DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱层析对粗多糖进一步分离分别得到FVP30A、FVP30B、FVP60A和FVP60B四种多糖组分,同时利用细胞实验模型和斑马鱼实验模型对这四种组分的降血脂活性进行跟踪;实验结果表明FVP60B在400μg/mL下具有较好的降血脂活性。本研究团队进一步利用Sephacryl S-300 High Resolution凝胶柱层析对FVP60B进行分离纯化,得到FVPB1组分,其重均分子量为3.863×104Da,细胞实验和斑马鱼实验均证明了其降血脂活性。以上研究结果为金针菇子实体多糖与降血脂关系提供一定的理论支持,有效促进金针菇子实体多糖的开发与利用。

关键词：金针菇降血脂斑马鱼模型纯化多糖

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基于SRAP、ISSR和RAPD分析灵芝G0130菌株单核体多态性

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工业微生物 2014年第4期44卷 39-45页

作者：徐凯唐传红王天娇杨炎唐庆九刘艳芳张劲松国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室江苏南京210095

旨在探讨灵芝原生质体单核体间遗传多态性，为育种材料的筛选提供分子水平依据。采用原生质体单核化获得灵芝Ganoderma lueidum36株单核体，从筛选出的12组SRAP引物，13条ISSR引物和13条RAPD引物对供试菌株的多态性综合分析结果显示，... 详细信息

旨在探讨灵芝原生质体单核体间遗传多态性，为育种材料的筛选提供分子水平依据。采用原生质体单核化获得灵芝Ganoderma lueidum36株单核体，从筛选出的12组SRAP引物，13条ISSR引物和13条RAPD引物对供试菌株的多态性综合分析结果显示，共扩增出320个条带，其中265条表现出多态性，多态位点百分率为82．81％；根据扩增结果采用软件NTsys2．10e计算菌株间的遗传相似系数（GS值）并进行聚类分析，37个菌株间GS值的变化范围为0．3741—0．9852；130—29、130．33和130-53等7株相同交配型单核体聚为一类，其余29株单核体与出发菌株G0130聚为一类，但并非严格按照交配型聚类，且单核体表现出发菌株全部或部分带型，同时也表现其所不具有的带型。研究表明，SRAP、ISSR和RAPD标记可以用于灵芝单核体多态性研究，并可为交配型鉴定提供参考，这将为育种材料的筛选提供帮助，减少育种工作量和风险。

关键词：灵芝单核体分子标记育种

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猴头菌多糖合成关键基因A6180的克隆和异源表达

猴头菌多糖合成关键基因A6180的克隆和异源表达

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中国食品科学技术学会第十七届年会

作者：任鄄宝邹根张赫男吴迪张忠李文杨焱上海海洋大学食品学院上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室

猴头菌（Hericium erinaceu）是我国著名的珍贵食药兼用菌,其主要的生物活性成分是猴头菌多糖,具有免疫调节、抗癌、降血脂和保护胃黏膜等多种功效。基于猴头菌三代全基因组测序和多糖的差异多组学分析结果,对一株高产多糖的猴头菇突变... 详细信息

猴头菌（Hericium erinaceu）是我国著名的珍贵食药兼用菌,其主要的生物活性成分是猴头菌多糖,具有免疫调节、抗癌、降血脂和保护胃黏膜等多种功效。基于猴头菌三代全基因组测序和多糖的差异多组学分析结果,对一株高产多糖的猴头菇突变株的关键基因进行挖掘,发现编码UDP-葡萄糖-4-差向异构酶基因A6180在突变株中显著上调,可能和猴头菇多糖高产有关。为了验证该基因在多糖合成过程中的关键功能,在对其编码序列进行密码子优化后,分别在大肠杆菌和酿酒酵母中进行异源过表达来验证其酶学性质及生物学功能,为在猴头菌中进行过表达获得高产多糖菌株奠定基础。在大肠杆菌中异源表达的重组蛋白经过纯化后进行对其酶学特性进行测定,可以高效地将UDP-葡萄糖转化成UDP-半乳糖,相关酶活达（1.107±0.07） U/mg,证实了此目的基因发挥着UDP-葡萄糖-4-差向异构酶活性。同时在酿酒酵母中的异源表达的结果也初步验证了该基因对猴头菇活性多糖结构和功能有着关键作用。本研究利用分子生物学技术进行高产多糖优势菌株关键基因进行功能表征,为猴头菇生物活性多糖合成途径的解析奠定基础。

关键词：猴头菌活性多糖异源表达 UDP-葡萄糖-4-差向异构酶

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灵芝子实体中三萜类物质抗氧化活性的谱效关系

灵芝子实体中三萜类物质抗氧化活性的谱效关系

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多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会

作者：杨妍张劲松汪雯翰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验上海海洋大学食品学院

灵芝(Ganoderma lingzhi)为担子菌门、伞菌纲、多孔菌科灵芝真菌,是我国重要的药用真菌之一,已有2000多年的记载和利用历史。灵芝的抗氧化清除自由基作用一直是受到学术界关注的研究课题,自由基是细胞代谢过程中产生的活性物质,自由基... 详细信息

灵芝(Ganoderma lingzhi)为担子菌门、伞菌纲、多孔菌科灵芝真菌,是我国重要的药用真菌之一,已有2000多年的记载和利用历史。灵芝的抗氧化清除自由基作用一直是受到学术界关注的研究课题,自由基是细胞代谢过程中产生的活性物质,自由基可以造成Aβ(Amyloidβ-protein,Aβ)沉积及微管相关蛋白tau蛋白(microtubule-associated protein tau,tau)的磷酸化,会进一步使AD(Alzheimer's disease,AD)大脑中的氧化还原反应失衡,而过多的Aβ沉积及Tau蛋白高度磷酸化则造成严重脑部损伤。目的研究灵芝三萜特征图谱和抗氧化活性的相关性,探讨灵芝三萜抗氧化活性的物质基础,并筛选活性色谱峰。方法在以HPLC法建立灵芝指纹图谱分析方法的基础上,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, DPPH)法测定灵芝样品抗氧化活性,运用偏最小二乘回归分析,将灵芝醇提物抗氧化活性与指纹图谱共有峰的峰面积相关联,并结合三萜标准品在HPLC上进样,匹配活性色谱峰,研究灵芝抗氧化作用的物质基础及谱效关系。结果从27个匹配特征峰中筛选出S9、S10与灵芝清除DPPH自由基能力呈显著正相关,并通过与对照品比对确定了S9为灵芝酸B、S10为灵芝酸LM2。结论灵芝抗氧化活性指纹图谱在乙醇提取物基础上建立,不但可系统表征该灵芝复方成分-药效的相关性,也可准确追踪并分离药理活性部位,为灵芝药材资源的质量控制及进一步开发利用奠定基础。

关键词：灵芝高效液相色谱指纹图谱 DPPH清除活性谱效关系

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香菇菌棒工厂化生产及其问题浅析

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食用菌 2017年第3期39卷 3-4页

作者：李玉张振宇尚晓冬宋春艳李正鹏谭琦周峰上海市农业科学院食用菌研究所/农业部南方食用菌资源利用重点实验室/国家食用菌工程技术研究中心/国家食用菌加工技术研发分中心/农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室/上海市农业遗传育种重点开放实验室上海奉贤201403 山东七河生物科技股份有限公司山东淄博255100

近几年在国家政策的推动下,香菇产业转型升级,不少企业投资建设香菇菌棒工厂化生产车间。在扼要介绍香菇菌棒工厂化生产技术要点的基础上,分析其运作难点,建议香菇菌棒工厂化生产企业选址前要重点考虑当地气候条件,已经投资建设的企业... 详细信息

近几年在国家政策的推动下,香菇产业转型升级,不少企业投资建设香菇菌棒工厂化生产车间。在扼要介绍香菇菌棒工厂化生产技术要点的基础上,分析其运作难点,建议香菇菌棒工厂化生产企业选址前要重点考虑当地气候条件,已经投资建设的企业要配套其他品种或开拓出口市场提高设施设备利用率。

关键词：香菇菌棒生产工厂化

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高效液相色谱法测定葛仙米水溶性多糖含量

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上海农业学报 2020年第1期36卷 105-110页

作者：苏攀峰唐庆九陈盛赵立彬王玉兰刘艳芳周帅许剑锋上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心上海201306 湖南炎帝生物工程有限公司株洲412000

通过建立高效液相法(HPLC)测定葛仙米水溶性多糖含量的方法,对HPLC测定葛仙米水溶性多糖含量的方法学进行考察。以纯化的葛仙米多糖为标准品,应用HPLC对经过不同预处理的葛仙米水溶性多糖进行含量测定。结果表明:选择柱型为TSKgel G6000... 详细信息

通过建立高效液相法(HPLC)测定葛仙米水溶性多糖含量的方法,对HPLC测定葛仙米水溶性多糖含量的方法学进行考察。以纯化的葛仙米多糖为标准品,应用HPLC对经过不同预处理的葛仙米水溶性多糖进行含量测定。结果表明:选择柱型为TSKgel G6000 PWXL液相色谱分析柱的效果较好,标准品的定量上、下限分别为10mg/mL和0.078625mg/mL;标准溶液浓度(Y)在0.15625~5mg/mL范围内,峰面积与进样量(X)呈良好的线性关系,线性方程Y=1995695.548X-170.597、R^2=0.999;精密度、重复性和稳定性的RSD分别为1.59%、1.13%、2.56%,平均加样回收率为97.8%、RSD为1.72%,说明该方法灵敏度高、重复性和稳定性较好,试验结果可靠,所建方法适用于葛仙米水溶性多糖含量的测定。

关键词：葛仙米水溶性多糖高效液相色谱法含量

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樟芝活性化合物抗非小细胞肺癌活性及作用机制研究

樟芝活性化合物抗非小细胞肺癌活性及作用机制研究

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中国菌物学会2018年学术年会

作者：杨海芮贾薇张劲松张赫男杨焱汪雯翰上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验石河子大学生命科学学院

肺癌在全球癌症死亡率中占据第一位。非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)在所有类型肺癌中所占比例最大。目前主要用于治疗NSCLC的方法是化疗法,然而,临床使用的化疗药物普遍具有较大的毒副作用,且容易产生耐药性。食药... 详细信息

肺癌在全球癌症死亡率中占据第一位。非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)在所有类型肺癌中所占比例最大。目前主要用于治疗NSCLC的方法是化疗法,然而,临床使用的化疗药物普遍具有较大的毒副作用,且容易产生耐药性。食药用真菌在东方有着独特的经济和医药价值,其天然组分的活性研究更是深得广大研究学者的青睐。因此,从食药用真菌中提取高效低毒的抗肿瘤活性先导化合物,用以研发新药将是生物医药界学者们研究的热点和难点。樟芝是原产于我国台湾的一种珍稀药用菌,具有多种生理活性,尤其是它卓越的抗肿瘤活性。樟芝中的明星分子,安卓喹诺儿,对NSCLC有很好的抑制作用,目前已进入FDA批准的NSCLC二期临床实验。然而,安卓喹诺儿主要来源于樟芝子实体,由于樟芝依赖生长的牛樟树是珍稀保护树种,且子实体生长极其缓慢,使得其研究成本居高不下,不利于科研的顺利进展。液态深层发酵具有原料来源广泛、成本低廉、生长过程短、操作易控制等优点,从液态发酵产物中分离纯化得到与安卓喹诺儿类似的活性物质,就成为十分值得开发的途径。本研究首先以樟芝液态发酵产物的粗提物为材料,研究其对NSCLC的抑制作用,发现其对NSCLC有较好的抑制作用,可引起S期细胞周期阻滞,诱导细胞发生凋亡。然而,粗提物是混合物,包含着许多成分不明的活性物质,很难从中发现发挥主要作用的活性单体物质。因此,后续研究采用实验室前期分离得到的两种单体化合物By-1和Antrodin C进行抗肺癌活性评价,并进一步探究其作用机制。其中,By-1主要来源于发酵液,Antrodin C主要来源于发酵菌丝体。通过对细胞迁移、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡及凋亡相关蛋白、细胞自噬等检测来评价By-1和Antrodin C的抗肺癌活性,并探究自噬和凋亡的交互式调控是否参与抗肺癌活性中,进一步探究作用的信号通路。实验发现,By-1和Antrodin C均对非小细胞肺癌SPCA-1细胞株有较好的抑制作用,其作用机制主要是由于引起S期细胞周期阻滞,上调P53蛋白,P53参与ROS和Bcl-2介导的线粒体细胞凋亡途径,进一步引起Caspase家族的级联反应,促进凋亡执行因子Caspase-3的释放,进而诱导细胞凋亡。通过检测自噬性结构,自噬流的发生以及自噬标记蛋白LC3 II表达和LC3 I向LC3 II转变,发现By-1和Antrodin C可诱导SPCA-1细胞发生自噬。并进一步发现自噬发生是通过下调Akt/mTOR通路来介导的。通过自噬抑制剂和自噬激活剂处理细胞,对细胞增殖的检测,发现自噬在By-1和Antrodin C的抗肺癌活性中起保护性作用。将促凋亡化合物和抑制自噬化合物联用,将明显增加对肿瘤细胞的抑制能力,这可能为NSCLC治疗提供一条新思路。肺癌细胞中存在多种类型的基因突变,其中EGFR突变占到了总突变类型的一半以上。有数据表明,对EGFR突变型肺癌,采用靶向性治疗的方法,能达到更好的效果,且预后良好。通过对EGFR突变型细胞株HCC827细胞进行细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的相关检测,发现By-1和Antrodin C可以抑制该细胞增殖,将细胞阻滞在S期,并能诱导细胞发生凋亡。本研究采用不同类型的人非小细胞肺癌细胞系探究By-1和Antrodin C的抗肺癌活性及其分子机制,发现By-1和Antrodin C对NSCLC有较好的抑制作用,其作用机制是由于凋亡和自噬的交互式调控所致。由此可见,By-1和Antrodin C都有可能发展成为潜在的抗肺癌治疗的化疗药物,这也为后续的深入研究提供了理论依据。

关键词：樟芝非小细胞肺癌细胞凋亡细胞自噬

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基于湖北随州气候条件下香菇菌株品比试验

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食用菌 2015年第4期37卷 18-19页

作者：于海龙杨颖李亚楠宋春艳章炉军尚晓冬谭琦上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海奉贤201403 上海市浦东新区农业服务中心上海浦东201299 山东农业大学生命科学学院山东泰安271018

在随州气候条件以及生产模式下对5个香菇菌株进行筛选,以发菌时间、转色时间、出菇时间、农艺性状以及产量等为筛选考察指标。结果表明:泌阳6号在农艺性状、产量等方面要明显优于其余4个菌株,最适合在湖北随州栽培。

关键词：香菇随州品种筛选

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一种适宜于北方地区的香菇高产栽培技术

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甘肃农业科技 2017年第6期48卷 91-92页

作者：李玉吕景东尚晓冬宋春艳李正鹏谭琦周峰上海市农业科学院食用菌研究所上海奉贤201403 农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海奉贤201403 国家食用菌工程技术研究中心上海奉贤201403 国家食用菌加工技术研发分中心上海奉贤201403 农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海奉贤201403 上海市农业遗传育种重点开放实验室上海奉贤201403 河北燕塞生物科技有限公司河北承德067508

从生产安排、制棒、灭菌、接种、培养管理、出菇、休养管理及注水操作等生产流程方面介绍了一种适宜我国北方地区香菇生产的高产栽培技术。

关键词：香菇高产栽培技术北方地区

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樟芝发酵液中抗肿瘤活性物质的研究

樟芝发酵液中抗肿瘤活性物质的研究

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中国菌物学会第六届会员代表大会（2014年学术年会）暨贵州省食用菌产业发展高峰论坛

作者：贾薇白岩岩张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室河南农业大学生命科学学院

分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等对樟芝发酵液进行萃取,对四个萃取相提取物的体外生物活性进行了研究,细胞实验显示樟芝发酵液提取物具有体外抗肿瘤、免疫调节、抗衰老以及抗氧化等的生物活性,其中抗肿瘤活性最为显著。对抗肿... 详细信息

分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等对樟芝发酵液进行萃取,对四个萃取相提取物的体外生物活性进行了研究,细胞实验显示樟芝发酵液提取物具有体外抗肿瘤、免疫调节、抗衰老以及抗氧化等的生物活性,其中抗肿瘤活性最为显著。对抗肿瘤活性较强的氯仿相和乙酸乙酯相采用硅胶吸附色谱法进行分离,由氯仿相获得得到化合物Ⅰ和化合物Ⅱ。采用HNMR,C NMR以及高分辨质谱等现代光谱技术,进行结构鉴定,确定化合物Ⅰ为新化合物,命名为3-isobutyl-1-methoxy-4-(4-(3-methylbut一2-enyloxy)phenyl)-1H-pyrrole-2,5-dione,化合物Ⅱ为5-羟甲基呋喃甲醛。两个化合物具有很好的体外抗肿瘤活性。

关键词：樟芝发酵液抗肿瘤活性

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