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食用菌学报 2021年第2期28卷 18-25页

作者：龚明李燕鲍大鹏尚俊军杨瑞恒周陈力万佳宁吴莹莹上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

以38份斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)种质资源为研究对象,采用全基因组重测序获得供试菌株的SNP(single nucleotide polymorphism)数据,结合在不同温度(10、15、20、25、30℃)下的菌丝生长速率测定结果,开展全基因组关联分析(genome wid... 详细信息

以38份斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)种质资源为研究对象,采用全基因组重测序获得供试菌株的SNP(single nucleotide polymorphism)数据,结合在不同温度(10、15、20、25、30℃)下的菌丝生长速率测定结果,开展全基因组关联分析(genome wide association study,GWAS)。结果表明:供试群体分为4大类群;在实验范围内,20、25℃为斑玉蕈适宜生长温度;GWAS分析显示20、25℃分别存在10、14个与生长速率显著关联的SNP位点,其中1个属于潜在功能性SNP位点。

关键词：斑玉蕈遗传变异生长速率 SNP GWAS

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液态发酵灵芝多糖的优势菌株筛选及定向发酵研究

液态发酵灵芝多糖的优势菌株筛选及定向发酵研究

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：冯杰刘艳芳唐传红张劲松农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所

灵芝是我国著名的药用真菌,研究历史悠久。灵芝多糖作为灵芝的重要代谢产物之一,具有多种药理活性,因此是众多灵芝产品的主要功效成分和标志性成分,产品中多糖含量的多少会显著影响灵芝产品的质量和市场潜力。从液态发酵原料胞外液和菌... 详细信息

灵芝是我国著名的药用真菌,研究历史悠久。灵芝多糖作为灵芝的重要代谢产物之一,具有多种药理活性,因此是众多灵芝产品的主要功效成分和标志性成分,产品中多糖含量的多少会显著影响灵芝产品的质量和市场潜力。从液态发酵原料胞外液和菌丝体获得多糖具有周期短、可定向产生目标产物和易实现规模化生产等优势,是获取灵芝多糖更有效的途径。然而,我国灵芝种质资源丰富,质量参差不齐,缺少适用于液态发酵的优势菌株。本研究对实验室保藏的41株灵芝菌株进行筛选,分别筛选出高产胞内外多糖的菌株,然后在50L发酵罐中进行放大发酵,进一步探究其液态发酵中多糖的生长变化,为多糖的产业化应用提供科学数据。主要研究结果如下:(1)筛选出液态发酵高产灵芝菌丝体多糖的优势菌株。通过液态发酵的方式对实验室保藏的41株灵芝杂交菌株在菌丝体干重、胞内多糖含量、多糖得率、分子量分布特征和细胞免疫活性等方面进行了系统分析。筛选出菌丝体干重最高的菌株GZ04,菌丝体干重为29.86 g/L,比亲本G0130、G0154分别提高95%、63%;胞内多糖得率最高的菌株GZ02,胞内多糖得率为1.34 g/L,比亲本G0130、G0154分别提高64%、101%。(2)高稳定性液体菌种最优制作工艺研究:通过研究液体菌种制备工艺流程,发现平板培养、初级摇瓶培养、摇瓶制备和发酵罐制备等过程中的影响因素。通过优化平板装液量和选择最佳菌丝体位置,以及初级摇瓶培养时间和还原率,结合人工神经网络和遗传算法优化碳源和氮源浓度,获得最优液体菌种制作工艺参数。在最优条件下,生物量和还原糖得率分别提高18.03%和27.41%。比较不同摇瓶规模和发酵罐制备液体菌种的代谢活力,发现250 mL摇瓶和50 L发酵罐制备的液体菌种最佳,综合生物量和代谢活力考虑,液体菌种选择培养5天。(3)研究胞内高分子量多糖的最优培养基,以灵芝为指标,通过筛选碳源和氮源并探究氮源浓度影响。最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为酵母自溶粉。分子量和含量随氮源浓度升高而增加和下降。BP神经网络结合遗传算法优化得到最佳培养基配方:葡萄糖29.0 g/L、酵母自溶粉4.0 g/L、七水硫酸镁0.3 g/L,优化后含量提高40.8%。(4)研究接种量、通气量和不同规模发酵等因素对灵芝胞内高分子量多糖的影响。最佳接种量为0.5 g/100 mL,通气量为1.0 vvm时菌丝体生物量和多糖含量最高。不同发酵规模下,胞内多糖含量由高到低为250 mL摇瓶、50 L发酵罐和3 L发酵罐。补料方法可提高菌丝体生物量和多糖含量。该方法可减少工业化生产成本并提高底物利用率。

关键词：灵芝液态发酵菌株筛选菌丝体多糖

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灵芝β-葡寡糖的分离纯化、结构表征及其活性研究

灵芝β-葡寡糖的分离纯化、结构表征及其活性研究

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：马冠骅秦秀张劲松颜梦秋周帅冯杰刘艳芳上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海理工大学健康科学与工程学院

灵芝(Ganoderma lucidum)是我国传统的药食兼用真菌,β-葡聚糖作为灵芝中主要的活性成分之一,在免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等方面活性显著。实验室前期从灵芝子实体中纯化出一种β-葡聚糖组分GLP20,研究发现该葡聚糖具有较好的生... 详细信息

灵芝(Ganoderma lucidum)是我国传统的药食兼用真菌,β-葡聚糖作为灵芝中主要的活性成分之一,在免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等方面活性显著。实验室前期从灵芝子实体中纯化出一种β-葡聚糖组分GLP20,研究发现该葡聚糖具有较好的生物活性,然而由于其分子量大、溶解性差、黏度大等特点影响了其进一步的开发利用。且相关研究表明多糖降解为低聚糖不仅可以降低多糖的分子量,提高其水溶性,还可以保留甚至提高多糖原有的生物活性,所以本实验室前期通过微波降解手段将灵芝β-葡聚糖GLP20降解为低聚糖片段,初步分离后得到具有抗炎活性的葡寡糖组分GLPW-A(聚合度为2-14)。为阐释抗炎活性与灵芝葡寡糖聚合度之间的关系,将灵芝β-葡寡糖组分GLPW-A(DP2-14)通过Bio-GelP-2凝胶色谱柱分离,从洗脱液、流速以及每管接样量三个方面优化分离条件。通过阴离子色谱和基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析测定其聚合度,并进行体外抗炎活性评价。结果表明,当洗脱液为0.1 mol/L的NH4HCO3溶液,流速为0.1m L/min,每2m L收集一管时分离效果最佳,按出峰时间先后收集得到了八个组分(F1-F8)。聚合度分析显示,F8和F7分别为DP2和DP3的葡寡糖组分,其余六个组分F6-F1均主要含有2-3种聚合度的葡寡糖。体外抗炎活性表明,主要含有DP4-6的F5和F6组分在实验范围内无明显抗炎活性,而其余各组分均在一定浓度下表现出不同程度的抗炎作用,且活性优于GLPW-A组分,推测灵芝β-葡寡糖的抗炎活性与寡糖片段的聚合度有关,本研究为灵芝β-葡寡糖的构效关系研究奠定基础。

关键词：灵芝β-葡寡糖分离纯化结构解析抗炎活性

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金针菇提取物FVP60B通过调节胆固醇代谢和肠道菌群改善高脂血症的研究

金针菇提取物FVP60B通过调节胆固醇代谢和肠道菌群改善高脂血症的...

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：王慧敏刘肖肖张劲松刘艳芳杨焱刘利平贾薇汪雯翰农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业科学院食用菌研究所上海海洋大学食品学院

高脂血症作为心血管病的主要危险因素之一,防治高脂血症已成为当前的研究热点。临床上常用降脂疗效良好的他汀类、树脂类等药物,长期服用会引起肾病、肌病、肝损伤、胃肠道疾病等毒副作用,因此探索安全无毒或安全低毒的天然活性物质的... 详细信息

高脂血症作为心血管病的主要危险因素之一,防治高脂血症已成为当前的研究热点。临床上常用降脂疗效良好的他汀类、树脂类等药物,长期服用会引起肾病、肌病、肝损伤、胃肠道疾病等毒副作用,因此探索安全无毒或安全低毒的天然活性物质的降脂活性十分必要。金针菇降血脂的药理活性已多有报道,但对于其降血脂的机理研究较少。本研究选用的金针菇子实体经水提醇沉和离子柱层析方法获得提取物FVP60B,拟采用脂质沉积细胞体外模型、高脂斑马鱼幼鱼模型和高脂小鼠体内模型评价其降血脂功效,并探讨其相关作用机理。本研究发现经金针菇子实体水提醇沉和离子柱层析分离可得到FVP60A和FVP60B两种成分,其多糖含量分别为46.64%和43.15%,蛋白含量分别为4.34%和13.79%;利用体外脂质沉积细胞模型和体内斑马幼鱼高脂模型研究发现FVP60A和FVP60B样品均具有良好的降脂效果,且FVP60B效果优于FVP60A,400μg/mLFVP60B对斑马鱼的降脂效果可达到100%。在细胞和斑马鱼模型研究基础上,利用小鼠高脂模型对FVP60B降脂效果进行验证,研究表明不同浓度的FVP60B均可降低肥胖小鼠体内甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白和小鼠肝指数,减轻肝脏脂质沉积,缓解肝脂肪变性,改善高脂小鼠肝脏表观形态,且作用浓度在400μg/mL时降脂效果最好;研究还发现高剂量组FVP60B能极显著提高血清载脂蛋白A1水平,各剂量组均能显著降低血清ApoB水平。针对FVP60B降血脂作用机理研究发现,其可通过调节胆固醇代谢相关因子mRNA表达、代谢相关酶活性和胆固醇代谢产物来调节高脂血症。中高剂量组FVP60B显著提高了小鼠胆汁酸排泄量,高剂量多糖显著提高粪固醇排泄量,表明FVP60B可降低胆固醇的生物合成,加速胆固醇的逆转运,促进胆固醇的转化和排泄。多糖FVP60B干预可显著提高CYP7A1、LDL-R和LCAT基因转录水平,降低HMG-CoA还原酶基因转录水平,显著提高LCAT酶和CYP7A1酶表达量。Alpha多样和Beta多样性分析表明,高脂饮食可诱导小鼠肠道菌群出现一定的紊乱,使其多样性和丰富度下降,而FVP60B多糖干预对高脂小鼠肠道微生物的结构和丰度有一定改变。多糖组小鼠相较于高脂组相比肠道菌群的丰富度显著提高,且金针菇多糖FVP60B能显著增加小鼠肠道菌群的双歧杆菌属、阿克曼菌属等,显著降低了血尿杆菌属、葡萄球菌属等。另外,产生短链脂肪酸的相关菌属丰度也在FVP60B的干预下提高。本研究发金针菇多糖FVP60B可通过调控胆固醇合成、转运和排泄,改变肠道菌群结构发挥其降血脂功效,以上研究将为金针菇多糖开发防治高脂血症功能性食品、保健品和药品提供数据支持。

关键词：高脂小鼠胆固醇代谢肠道菌群降血脂

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金针菇切根提取物FVP60B通过调节肠道菌群改善胆固醇代谢异常和防治高脂血症的研究

金针菇切根提取物FVP60B通过调节肠道菌群改善胆固醇代谢异常和防...

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第十二届药用真菌学术研讨会

高脂血症作为心血管病的主要危险因素之一,防治高脂血症已成为当前的研究热点。临床上常用降脂疗效良好的他汀类、树脂类等药物,长期服用会引起肾病、肌病、肝损伤、胃肠道疾病等毒副作用,因此探索安全无毒或安全低毒的天然活性物质的降脂活性十分必要。金针菇降血脂的药理活性已多有报道,但对于其降血脂的机理研究较少。本研究选用的金针菇子实体经水提醇沉和离子柱层析方法获得提取物FVP60B,拟采用脂质沉积细胞体外模型、高脂斑马鱼幼鱼模型和高脂小鼠体内模型评价其降血脂功效,并探讨其相关作用机理。本研究发现经金针菇子实体水提醇沉和离子柱层析分离可得到FVP60A和FVP60B两种成分,其多糖含量分别为46.64%和43.15%,蛋白含量分别为4.34%和13.79%;利用体外脂质沉积细胞模型和体内斑马幼鱼高脂模型研究发现FVP60A和FVP60B样品均具有良好的降脂效果,且FVP60B效果优于FVP60A,400μg/mLFVP60B对斑马鱼的降脂效果可达到100%。在细胞和斑马鱼模型研究基础上,利用小鼠高脂模型对FVP60B降脂效果进行验证,研究表明不同浓度的FVP60B均可降低肥胖小鼠体内甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白和小鼠肝指数,减轻肝脏脂质沉积,缓解肝脂肪变性,改善高脂小鼠肝脏表观形态,且作用浓度在400μg/mL时降脂效果最好;研究还发现高剂量组FVP60B能极显著提高血清载脂蛋白A1水平,各剂量组均能显著降低血清ApoB水平。针对FVP60B降血脂作用机理研究发现,其可通过调节胆固醇代谢相关因子m RNA表达、代谢相关酶活性和胆固醇代谢产物来调节高脂血症。中高剂量组FVP60B显著提高了小鼠胆汁酸排泄量,高剂量多糖显著提高粪固醇排泄量,表明FVP60B可降低胆固醇的生物合成,加速胆固醇的逆转运,促进胆固醇的转化和排泄。多糖FVP60B干预可显著提高CYP7A1、LDL-R和LCAT基因转录水平,降低HMG-CoA还原酶基因转录水平,显著提高LCAT酶和CYP7A1酶表达量。Alpha多样和Beta多样性分析表明,高脂饮食可诱导小鼠肠道菌群出现一定的紊乱,使其多样性和丰富度下降,而FVP60B多糖干预对高脂小鼠肠道微生物的结构和丰度有一定改变。多糖组小鼠相较于高脂组相比肠道菌群的丰富度显著提高,且金针菇多糖FVP60B能显著增加小鼠肠道菌群的双歧杆菌属、阿克曼菌属等,显著降低了血尿杆菌属、葡萄球菌属等。另外,产生短链脂肪酸的相关菌属丰度也在FVP60B的干预下提高。本研究发金针菇多糖FVP60B可通过调控胆固醇合成、转运和排泄,改变肠道菌群结构发挥其降血脂功效,以上研究将为金针菇多糖开发防治高脂血症功能性食品、保健品和药品提供数据支持。

关键词：高脂小鼠胆固醇代谢肠道菌群降血脂

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pH对灵芝液态发酵代谢物及抗氧化活性的影响

pH对灵芝液态发酵代谢物及抗氧化活性的影响

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：唐晨旻张劲松刘艳芳冯杰上海海洋大学食品学院国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所

文献报道灵芝栽培生长的最适pH在中性偏酸环境,在碱性范围的生长及代谢情况鲜见报道。本研究主要探究广泛pH对灵芝液态发酵代谢物及其抗氧化活性的影响。采用摇瓶液态培养后分析代谢物中灵芝三萜、胞内外多糖、菌丝体蛋白及抗氧化活性... 详细信息

文献报道灵芝栽培生长的最适pH在中性偏酸环境,在碱性范围的生长及代谢情况鲜见报道。本研究主要探究广泛pH对灵芝液态发酵代谢物及其抗氧化活性的影响。采用摇瓶液态培养后分析代谢物中灵芝三萜、胞内外多糖、菌丝体蛋白及抗氧化活性等指标,系统比较灵芝菌丝体在pH值2–11范围内的生长和代谢情况。本项实验探究了灵芝在初始pH2–11较广范围内的发酵情况,在文献研究的基础上对碱性pH范围的灵芝发酵代谢进行了系统的研究。通过实验发现发酵后菌丝体干重最高在初始pH10;灵芝三萜含量最高在初始pH3胞内外多糖含量最高在初始pH2和pH5;胞内多糖组分1和组分2分子量最大均在初始pH4,分别为1.016×108g/mol,9.280×104g/mol,胞外多糖组分1分子量最大在初始pH10,为4.946×106g/mol;菌丝体蛋白含量最高在初始pH2。目前通过调整发酵参数对于灵芝菌丝体蛋白及其抗氧化性影响的研究较少,本文通过对发酵初始pH进行调整,发现不同初始pH条件下发酵时灵芝菌丝体蛋白及抗氧化性有明显影响,但还需要进一步研究。虽然灵芝代谢物仍在酸性条件下含量较高,但是在碱性条件下发酵的生物量远高于在酸性条件下发酵,从各种代谢物的产量上看,碱性条件下发酵的灵芝三萜,胞内多糖及菌丝体蛋白总产量更高。同时本研究为灵芝液态深层发酵的规模化生产提供了一定的借鉴,发酵生产中可以根据目标产物将初始pH调整至相应的最适pH进行发酵生产,不同目标产物合成的最适pH不同。也可以分阶段调控pH,先将初始pH调整至最适合灵芝生长的pH值,待灵芝菌丝体生长情况较好时再调整至代谢产物较高的对应pH值,可以兼顾生物量及代谢物含量,从而提高目标代谢物的产量,能够有效食品、节约生产成本,降低产品的价格。

关键词：灵芝 pH值液态发酵代谢物菌丝体蛋白抗氧化

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香菇单单杂交过程中核迁移和细胞质遗传规律

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食用菌学报 2021年第1期28卷 16-21页

作者：宋晓霞章炉军赵妍宋春艳李传华陈明杰谭琦黄建春上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

通过香菇(Lentinula edodes)L808P65、EFISAAS5053P1和YAASM363P1原生质体单核菌丝体两两单单杂交,观察杂交过程中的菌落形态变化,利用ITS和rrnL部分序列分别鉴定双核菌丝体的细胞核和细胞质来源,以明确单单杂交过程中核迁移路径和细胞... 详细信息

通过香菇(Lentinula edodes)L808P65、EFISAAS5053P1和YAASM363P1原生质体单核菌丝体两两单单杂交,观察杂交过程中的菌落形态变化,利用ITS和rrnL部分序列分别鉴定双核菌丝体的细胞核和细胞质来源,以明确单单杂交过程中核迁移路径和细胞质遗传规律。结果表明:双亲菌落接触部位存在一条明显比周围菌丝体稀疏的分界线,3个亲本菌落的扩大速度从快到慢依次为EFISAAS5053P1、L808P65和YAASM363P1,双亲菌落接触区域的分界线均向菌落扩大速度慢的亲本菌落弯曲,有的甚至在分界线两端生长出两个与亲本菌落存在分界线的扇形菌落;细胞核迁移起始于分界线,双亲的细胞核互相向对方菌落迁移,不同培养皿中核迁移速度最快的区域不同;除位于分界线上的双核菌丝体外,左边亲本菌落的双核菌丝体细胞质来源于左边亲本菌落,右边亲本菌落的双核菌丝体细胞质来源于右边亲本菌落。

关键词：香菇单单杂交细胞核遗传细胞质遗传

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大孔吸附树脂富集香菇中核苷类成分的工艺优化

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食用菌学报 2021年第5期28卷 79-86页

作者：平志豪唐庆九王金艳李德顺张劲松冯杰刘艳芳上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403

对香菇(Lentinula edodes)子实体中核苷类成分的提取条件进行优化,筛选适宜富集核苷类成分的大孔吸附树脂,并优化该树脂对香菇中核苷类成分的吸附和解吸工艺。结果表明:超声(25℃、600 W)提取2 h所得提取液中核苷含量是沸水浴提取法的4... 详细信息

对香菇(Lentinula edodes)子实体中核苷类成分的提取条件进行优化,筛选适宜富集核苷类成分的大孔吸附树脂,并优化该树脂对香菇中核苷类成分的吸附和解吸工艺。结果表明:超声(25℃、600 W)提取2 h所得提取液中核苷含量是沸水浴提取法的4.10倍;NKA-Ⅱ大孔吸附树脂对香菇中核苷的富集效果较好,其吸附率和解吸率分别为86.55%和85.61%;每100 mL香菇提取液中加入20 g NKA-Ⅱ大孔吸附树脂吸附2 h,用30%乙醇解吸0.5 h,解吸2次,富集产物得率为8.39%,其中已知核苷总含量为21.15%。

关键词：香菇核苷提取方法富集工艺

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温度对梯棱羊肚菌抗氧化酶活及其基因表达的影响

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菌物学报 2021年第12期40卷 3276-3285页

作者：白静陈明杰唐利华杜军华冯志勇张津京陈辉国家食用菌工程技术研究中心农业农村部南方食用菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306 青海师范大学青海西宁810008

大田栽培条件下,环境温度无法精确调控,温度胁迫是影响羊肚菌生长发育的重要因素。抗氧化酶和抗氧化活性物质是羊肚菌抵御逆境胁迫的重要因子。温度胁迫下,羊肚菌菌丝会通过增加相应酶活性来减少活性氧的积累,降低对细胞的损伤。作者研... 详细信息

大田栽培条件下,环境温度无法精确调控,温度胁迫是影响羊肚菌生长发育的重要因素。抗氧化酶和抗氧化活性物质是羊肚菌抵御逆境胁迫的重要因子。温度胁迫下,羊肚菌菌丝会通过增加相应酶活性来减少活性氧的积累,降低对细胞的损伤。作者研究了不同温度对梯棱羊肚菌菌丝生长、抗氧化酶(超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、谷胱甘肽还原酶GR、谷胱甘肽过氧化物酶GPX)活性及其基因表达和抗氧化活性物质的影响,结果显示:在5–25℃的温度区间内,随着温度的增加,菌丝生长速度加快,菌丝的老化速度也加快;对抗氧化酶活性研究发现,SOD、GPX和GR在低温下活性更高,CAT在高温下活性更高;抗氧化活性物质含量会随温度升高而增加,如还原型抗坏血酸(AsA)和还原型谷胱甘肽(GSH);温度越高,羊肚菌菌丝中H_(2)O_(2)、O_(2)^(-)和丙二醛含量也随之增加。因此,在温度胁迫下,羊肚菌通过启动不同的抗氧化酶和抗氧化活性物质来减少活性氧含量,缓解菌丝损伤,本研究为探讨温度对羊肚菌种质质量的影响和栽培条件优化提供了基础数据支撑。

关键词：梯棱羊肚菌抗氧化酶基因表达活性氧

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不同处理方法对灵芝孢子粉胞壁多糖溶出率和分子量分布的分析比较

不同处理方法对灵芝孢子粉胞壁多糖溶出率和分子量分布的分析比较

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第十二届药用真菌学术研讨会

作者：罗童妍梁锐王金艳唐庆九上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海海洋大学食品学院

多糖是灵芝孢子粉中主要的活性成分之一,但灵芝孢子粉双层胞壁结构严重阻碍了其中有效成分的释放,特别是多糖成分溶出率低。为增加胞壁多糖的溶出,分别比较物理法、化学法和酶法对溶出率的影响,寻找一种多糖溶出率高、产物丰富、简单易... 详细信息

多糖是灵芝孢子粉中主要的活性成分之一,但灵芝孢子粉双层胞壁结构严重阻碍了其中有效成分的释放,特别是多糖成分溶出率低。为增加胞壁多糖的溶出,分别比较物理法、化学法和酶法对溶出率的影响,寻找一种多糖溶出率高、产物丰富、简单易行的提取方法。以脱脂孢子粉水提残渣为原料,比较分析处理后总糖含量和分子量分布,结果表明:化学法和酶法可提高多糖的得率,但降解后获得的多糖分子量均小于10～4 g/mol;物理法中超声破碎提取法、微波提取法、辐照提取法和高能纳米球磨法也均可提高灵芝孢子粉胞壁多糖的得率,超声破碎提取得到的水提物分子量大于10～4 g/mol,辐照提取得到的水提物分子量小于10～5 g/mol,而微波消解法和高能纳米球磨法得到的水提物分子量分布均较广,其中高能纳米球磨法多糖得率可提高到9.42%。选择高能纳米球磨法作为提取灵芝孢子粉胞壁多糖的方法进一步采用分级醇沉从灵芝孢子粉胞壁粗多糖中分离得到四个不同分子量段的组分,分别为1.90×10～5、3.11×10～4、1.09×10～4、和4.99×10～3 g/mol,本研究可为灵芝孢子粉胞壁多糖的高效制备和分离纯化奠定基础。

关键词：灵芝孢子粉胞壁多糖高能纳米球磨法分子量分布

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