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菌物学报 2024年第7期43卷 66-78页

作者：游潇轩宋晓霞戈永杰刘建雨张美彦尚晓冬宋春艳上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部应用真菌资源与利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403

为探索刺茎侧耳多功能过氧化物酶vpl1基因在香菇菌丝体中的异源表达及功能,对比分析了野生型双核菌丝体与拥有1个或2个转化子的双核菌丝体在木质素降解酶活性和基因表达上的差异。首先,经过转化子筛选和功能验证,筛选出3个具有vpl1基因... 详细信息

为探索刺茎侧耳多功能过氧化物酶vpl1基因在香菇菌丝体中的异源表达及功能,对比分析了野生型双核菌丝体与拥有1个或2个转化子的双核菌丝体在木质素降解酶活性和基因表达上的差异。首先,经过转化子筛选和功能验证,筛选出3个具有vpl1基因的香菇t-Asm136单核转化子。其次,将3个单核转化子与其野生型w-Asm136单核菌丝体分别与实验室已有的香菇t-Bsm83单核转化子与其野生型w-Bsm83单核菌丝体进行单单杂交,获得1个纯野生型双核菌丝体、4个单转化子双核菌丝体和3个双转化子双核菌丝体。最后,仅野生型、1个单转化子和2个双转化子双核菌丝体能在木屑培养基上正常生长。这4个双核菌丝体在木屑培养基上Lac、MnP和VP酶活和对应基因的表达量不同,其中vpl1的导入使双核转化子vpl1基因上调了2-12倍,MnP酶活上调13-30倍,mnp2a表达量上调4-18倍,mnp2b表达量上调6-11倍。证实了vpl1的导入能够增强MnP的酶活力和基因的表达水平。

关键词：香菇遗传转化多功能过氧化物酶异源表达

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LC-MS分析CmSnf1基因过表达对蛹虫草代谢组的影响

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菌物学报 2023年第8期42卷 1744-1754页

作者：王晓军周湘李乐李芳盛荣丹邹根汪滢浙江农林大学林业与生物技术学院浙江杭州311300 上海市农业科学院食用菌研究所、农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室、国家食用菌工程技术研究中心上海201403

Sucrose-nonfermenting 1(SNF1)蛋白激酶调节大量基因的转录,改变代谢酶的活性,并控制各种营养反应性细胞发育过程。本研究通过LC-MS非靶向代谢组学技术比较蛹虫草Cordyceps militaris野生型菌株Cm01和CmSnf1基因过表达菌株菌丝体的化... 详细信息

Sucrose-nonfermenting 1(SNF1)蛋白激酶调节大量基因的转录,改变代谢酶的活性,并控制各种营养反应性细胞发育过程。本研究通过LC-MS非靶向代谢组学技术比较蛹虫草Cordyceps militaris野生型菌株Cm01和CmSnf1基因过表达菌株菌丝体的化学成分,从整体代谢物水平阐明CmSnf1基因过表达对蛹虫草代谢产物积累的影响。研究表明:CmSnf1基因过表达后,在LC-MS正负离子模式下检测出547种差异代谢物,同野生型菌株相比,220种产物上调和327种下调。尤其显著的是黄酮类物质2-香叶基-3,4,2′,4′-四羟基二氢查耳酮上调了140.55倍,甘油磷脂代谢中的磷脂酰丝氨酸(PS)下调了47.53倍。差异代谢产物参与甘油脂代谢、氨基酸生物合成和降解、半乳糖代谢、丙酮酸和酮类化合物代谢等多种途径。CmSnf1过表达菌株与野生型相比在酮类化合物代谢上具有优势,推测CmSnf1基因在蛹虫草药用功效中发挥着重要的作用。

关键词： SNF1 蛹虫草 Cmsnf1基因过表达代谢组学

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大球盖菇干制过程香气变化规律及与关键酶促反应的关联性

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食品科学技术学报 2023年第1期41卷 30-42页

作者：李佳霖杨焱李文陈万超刘晓风兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050 上海市农业科学院食用菌研究所/农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室/国家食用菌工程技术研究中心上海201403 上海百信生物科技有限公司上海201403

采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术对不同干制时间段的大球盖菇子实体中挥发性风味化合物进行分离、鉴定,探究其在55℃恒温热风干制过程中挥发性风味物质的变化规律。在整个干制过程中共鉴定出245种挥发性风味化合物,其中包... 详细信息

采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术对不同干制时间段的大球盖菇子实体中挥发性风味化合物进行分离、鉴定,探究其在55℃恒温热风干制过程中挥发性风味物质的变化规律。在整个干制过程中共鉴定出245种挥发性风味化合物,其中包括34种醛类化合物、29种酯类化合物、40种醇类化合物、37种酮类化合物、7种酸类化合物、24种烷烃类化合物、26种烯烃类化合物及48种其他类化合物;醛、酮、醇类化合物占比较大,三者含量之和占总含量的65.49%~89.30%,为大球盖菇中主要的挥发性物质。通过气味活度值热图分析结合偏最小二乘判别分析法,筛选出45种关键气味化合物,其中1-辛烯-3-酮始终是干制过程中气味贡献最大的化合物,整个干制过程中共有20种差异性化合物。综合分析得到大球盖菇干制过程香气变化规律:随着干制的进行,样品土腥味、青草气味逐渐减弱,干制后期呈现焦香、麦芽香等风味,但整个过程中蘑菇味、土腥味仍是大球盖菇的关键风味特征。对合成醛、酮、醇类化合物的主要代谢途径中的关键酶酶活进行测定,发现此类酶会受热激活,随干制的进行酶活整体呈现显著下降趋势,在干制终点几乎没有活性。代谢酶活性与对应化合物含量相关性分析表明,脂肪氧合酶与醛酮类化合物具有较强的正相关性,乙醇脱氢酶与醇类化合物具有较强的负相关性,这与大球盖菇干制过程中醛、酮、醇类化合物含量的动态变化趋势一致。

关键词：大球盖菇干制挥发性风味化合物气味活度值酶促反应

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桑树木屑栽培的瓦尼桑黄子实体分级醇沉粗多糖组成特征与活性相关性

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菌物学报 2023年第4期42卷 984-996页

作者：楚文琪吴迪陈万超李正鹏张忠杨焱上海理工大学健康科学与工程学院上海200093 上海市农业科学院食用菌研究所、国家食用菌工程技术研究中心、国家食用菌加工技术研发中心、农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室上海201403

对桑树木屑代料栽培瓦尼桑黄Sanghuangporus vaninii子实体分级醇沉粗多糖组分的多糖含量、总酚含量、重均分子量分布、红外光谱、单糖组成、抗氧化活性和免疫活性进行了研究,并采用Pearson相关性分析对各醇沉粗多糖组分的组成特征与活... 详细信息

对桑树木屑代料栽培瓦尼桑黄Sanghuangporus vaninii子实体分级醇沉粗多糖组分的多糖含量、总酚含量、重均分子量分布、红外光谱、单糖组成、抗氧化活性和免疫活性进行了研究,并采用Pearson相关性分析对各醇沉粗多糖组分的组成特征与活性进行了关联性分析。结果表明,不同醇沉组分粗多糖的组成特征及活性差异较大,其中,各分级醇沉粗多糖组分的多糖含量随着醇沉浓度的增加而增加;20%醇沉多糖组分的总酚含量较高,50%醇沉多糖组分中的总酚含量较低;粗多糖重均分子量随着醇沉浓度的增加而降低;红外光谱结果表明,70%醇沉组分的多糖羟基振动峰不显著,与其分子量分布较低相关;就单糖组成而言,在50%醇沉组分中,果糖及甘露糖含量较高,而在20%和70%醇沉组分中含量较高的单糖是葡萄糖。相关性分析结果显示,子实体粗多糖组分中的总酚含量与DPPH及ABTS自由基清除能力呈显著正相关关系;3个粗多糖组分均能激活RAW 264.7细胞释放NO,促进其分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)等免疫调节因子,NO释放量与多糖含量呈显著正相关关系,总酚含量较低,且半乳糖和果糖含量较高的S50具有较好的体外免疫活性。本研究为代料栽培瓦尼桑黄子实体多糖类功效成分的研究及开发利用提供参考。

关键词：桑黄多糖分级醇沉抗氧化体外免疫活性相关性分析

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木屑马铃薯培养基促进香菇单核体菌丝体生长的表达谱分析

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菌物学报 2023年第2期42卷 507-519页

作者：侯娣周陈力李燕杨瑞恒鲍大鹏上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所、农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室、国家食用菌工程技术研究中心、上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

香菇单核体菌株在传统PDA培养基上生长时具有生长缓慢、容易老化等问题,本研究以1株香菇双核体Y0040以及相对应的2株单核体(Y0040-1和Y0040-3)为研究材料,通过添加不同比例木屑粉的PDA培养基筛选适合香菇单核体生长的配比,结果表明添加... 详细信息

香菇单核体菌株在传统PDA培养基上生长时具有生长缓慢、容易老化等问题,本研究以1株香菇双核体Y0040以及相对应的2株单核体(Y0040-1和Y0040-3)为研究材料,通过添加不同比例木屑粉的PDA培养基筛选适合香菇单核体生长的配比,结果表明添加木屑能够显著促进单核体菌丝的生长,最适添加比例为2%。将Y0040-1和Y0040-3在PDA和2%木屑PDA上培养后进行转录组表达谱差异分析,结果显示Y0040-1和Y0040-3两个单核菌株在木屑-PDA培养基上生长有1066个共有的差异表达基因,进一步对其注释发现,这些差异基因在细胞结构合成以及碳水化合物代谢等途径上得到富集。同时1066个共有的差异基因中有113个共上调,富集于氧化还原反应,267个共下调主要富集于蛋白质折叠和去折叠等途径。进一步对1066个差异基因进行CAZYmes家族和木质纤维素酶分析,发现有36个家族基因差异表达,包括了4个多铜氧化酶、6个β-葡萄糖苷酶和2个内β-1,4-葡聚糖酶,其中多铜氧化酶基因表达在木屑培养基上都显著上升。木质纤维素降解酶基于氧化还原反应等将木质素降解为菌丝体生长发育所必需的小分子单糖,可能是木屑PDA培养基促进菌丝生长的原因之一。

关键词：香菇单核体培养基优化 CAZYmes家族木质纤维素酶

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不同镉耐受性香菇子实体对镉胁迫的生理响应

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农业环境科学学报 2023年第6期42卷 1267-1273页

作者：翟丹丹闫苗苗姜宁李巧珍尚晓冬谭琦李玉于海龙吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心长春130118 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

为进一步解析镉胁迫对不同镉耐受性香菇菌株生长发育的影响,明确镉胁迫下香菇子实体不同发育阶段生理变化规律,以不同镉耐受性香菇菌株为材料,通过外源添加镉的方式探究两个菌株不同发育阶段子实体中镉含量、丙二醛(MDA)含量、可溶性蛋... 详细信息

为进一步解析镉胁迫对不同镉耐受性香菇菌株生长发育的影响,明确镉胁迫下香菇子实体不同发育阶段生理变化规律,以不同镉耐受性香菇菌株为材料,通过外源添加镉的方式探究两个菌株不同发育阶段子实体中镉含量、丙二醛(MDA)含量、可溶性蛋白含量的变化规律。结果表明:镉胁迫对两个菌株子实体农艺性状和产量都产生影响,但不同镉耐受性菌株受影响的农艺性状和受影响程度不同。菌株4606受到镉胁迫后的菌盖直径、菌盖厚度显著降低,其余农艺性状未受到显著影响;菌株4625受到镉胁迫后的单棒子实体个数、单棒产量显著降低,单菇质量、菌盖质量极显著升高,其余农艺性状未受到显著影响。两个菌株不同生长发育阶段单位干质量子实体中镉含量均有随着生长发育时间的延长而显著降低的趋势。受到镉胁迫后菌株4606的MDA含量在生长期显著升高,成熟期显著下降,开伞期极显著降低;菌株4625受到镉胁迫后开伞期的MDA含量显著降低,其余阶段未受到显著影响。菌株4606对照组与镉胁迫处理组的可溶性蛋白含量均随生长时间延长显著降低,菌株4625对照组与镉胁迫处理组的可溶性蛋白含量均随生长时间延长先显著升高后显著降低;镉胁迫导致菌株4606开伞期的可溶性蛋白含量显著降低,而菌株4625在原基期、生长期、开伞期的蛋白含量均极显著升高。综上,不同镉耐受性香菇菌株子实体对镉胁迫的生理响应存在一定差异,因此,在香菇生产上应选取低镉吸收品种进行农业生产。

关键词：镉胁迫香菇生长发育农艺性状生理指标

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食用菌遗传连锁图谱研究现状

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食用菌学报 2024年第3期31卷 100-112页

作者：张丹董浩然徐蒋振宋晓霞张美彦宋春艳上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海201403 上海海洋大学食品学院上海201306

综述食用菌遗传连锁图谱构建方法,总结香菇(Lentinula edodes)、双孢蘑菇(Agaricus bisporus)、金针菇(Flammulina filiformis)、侧耳属(Pleurotus)等食用菌遗传连锁图谱构建情况,梳理食用菌遗传连锁图谱的应用,分析存在问题,并进行前... 详细信息

综述食用菌遗传连锁图谱构建方法,总结香菇(Lentinula edodes)、双孢蘑菇(Agaricus bisporus)、金针菇(Flammulina filiformis)、侧耳属(Pleurotus)等食用菌遗传连锁图谱构建情况,梳理食用菌遗传连锁图谱的应用,分析存在问题,并进行前景展望,以期为食用菌遗传育种研究提供参考。

关键词：食用菌遗传育种分子标记数量性状

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金针菇菌丝体γ-氨基丁酸快速检测方法

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菌物学报 2024年第7期43卷 135-147页

作者：卢雪伟李晓晖鲍大鹏周陈力陈洪雨冯占李贺文王瑞娟邵悠然吴莹莹上海海洋大学食品学院上海201306 上海市农业科学院食用菌研究所、国家食用菌工程技术研究中心、农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室、上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 江苏华绿生物科技股份有限公司江苏宿迁223700

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种对人体具有重要生理功能的非蛋白氨基酸,其在金针菇中含量丰富。为获得一种高效便捷检测金针菇菌丝体GABA含量的方法,本研究以工厂化栽培的金针菇菌株Fv-HL23为实验对象,在筛选菌丝体液体... 详细信息

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种对人体具有重要生理功能的非蛋白氨基酸,其在金针菇中含量丰富。为获得一种高效便捷检测金针菇菌丝体GABA含量的方法,本研究以工厂化栽培的金针菇菌株Fv-HL23为实验对象,在筛选菌丝体液体培养基的基础上,结合单因素和Box-Benhnken试验,以微板法测得的GABA含量作为响应值,对GABA提取过程中的料液比、裂解温度、超声功率以及超声时间等参数进行优化。结果表明,以YPD为液体培养基,在料液比1:43.82(质量体积比)、裂解温度81.03℃、超声功率325.95W、超声时间10.09min的条件下,Fv-HL23菌丝体中GABA得率最高,达(3566.16±93.25)μg/g。使用上述方法检测得到的同一金针菇菌株菌丝体GABA含量与子实体GABA含量关联性良好。本研究建立的金针菇菌丝体GABA检测方法可为节约检测成本、缩短GABA强化型食用菌育种进程提供参考。

关键词： γ-氨基丁酸单因素试验响应面重复性分析比色法

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灵芝孢子粉和孢子油脂溶性成分分析

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食用菌学报 2024年第3期31卷 76-89页

作者：严培兰杨志空唐庆九张劲松王金艳上海瑞丰农业科技有限公司上海201106 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心上海201403

分析不同破壁时间、不同来源灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉,灵芝孢子油加工原料(破壁孢子粉)、中间体(制粒后孢子粉、一级萃取孢子油、二级萃取孢子油)和孢子油成品,不同来源灵芝孢子油,不同植物油的脂溶性成分含量和指纹图谱。结果表... 详细信息

分析不同破壁时间、不同来源灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉,灵芝孢子油加工原料(破壁孢子粉)、中间体(制粒后孢子粉、一级萃取孢子油、二级萃取孢子油)和孢子油成品,不同来源灵芝孢子油,不同植物油的脂溶性成分含量和指纹图谱。结果表明:破壁处理能显著增加灵芝孢子粉中脂溶性成分溶出;不同来源灵芝孢子粉中脂溶性成分含量有差异,但不同来源孢子粉指纹图谱相似度均大于0.90,有18个共有峰;灵芝孢子油加工原料(破壁孢子粉)、制粒后孢子粉、一级萃取孢子油、二级萃取孢子油及孢子油成品脂溶性成分指纹图谱有22个共有峰,不考虑孢子油成品中维生素E峰,孢子油加工原料、中间体和孢子油成品间指纹图谱的相似度均大于0.99;不同来源灵芝孢子油指纹图谱峰组成和峰面积有差异,指纹图谱相似度为0.490~0.925,有23个共有峰;植物油的色谱峰与孢子油相比存在较大差异。研究结果为灵芝孢子粉和孢子油的质量控制提供参考。

关键词：灵芝孢子粉灵芝孢子油脂溶性成分指纹图谱

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灵芝子实体中18种主要三萜成分的高效液相分析

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菌物学报 2023年第11期42卷 2309-2319页

作者：曾凡清吕明亮薛振文冯娜丽水市农林科学研究院浙江丽水323000 上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室上海市农业遗传育种重点开放实验室上海201403

以灵芝子实体中18种主要三萜化合物为对照品,建立了灵芝三萜的高效液相定量检测方法。采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(0.01%乙酸)为流动相进行梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL/min,检测波长254 n... 详细信息

以灵芝子实体中18种主要三萜化合物为对照品,建立了灵芝三萜的高效液相定量检测方法。采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(0.01%乙酸)为流动相进行梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm。该方法实现了18种三萜化合物的基线分离,精密度、重复性、稳定性和加样回收率均符合方法学要求。将该方法应用于2个灵芝品种在不同栽培环境下的三萜含量评价中,结果发现,三萜的含量与品种、栽培环境都有很大的相关性,品种是影响灵芝子实体三萜含量的主要因素,但在不同环境下,同一品种的灵芝三萜含量也会发生变化。

关键词：灵芝子实体三萜定量分析种质评价

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