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作者：戴建军吴彩凤张廷宇张德福张树山上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海 201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海 201106

本研究的目的是探讨三种冷冻方法对猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻后发育能力、线粒体及脂肪颗粒分布变化的影响,同时也对冻后卵母细胞的超微结构进行了观察。结果显示：(1)孤雌激活后,CLV法的染色存活率和卵裂率(72.00％,7.22%)最高,OPS法(... 详细信息

本研究的目的是探讨三种冷冻方法对猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻后发育能力、线粒体及脂肪颗粒分布变化的影响,同时也对冻后卵母细胞的超微结构进行了观察。结果显示：(1)孤雌激活后,CLV法的染色存活率和卵裂率(72.00％,7.22%)最高,OPS法(60.00%,4.85%)次之,straw法(42.22%,0%)最低;(2)CLV法线粒体的正常分布率(52.24%)要比其它两组要高(OPS,48.65%;straw,37.68%),且三者之间没有显著差异(P＞0.05);(3)CLV法和OPS法的脂肪颗粒正常分布率之间没有显著差异(P＞0.05),但两者均显著高于straw法(P＜0.05);(4)超微结构表明：冻后卵母细胞线粒体变得粗糙和模糊,大的脂肪颗粒含量在明显减少;大部分脂肪颗粒为均质化状态,只有很少的异质化脂肪颗粒存在。

关键词：猪 MⅡ期卵母细胞玻璃化线粒体脂肪颗粒

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中华绒螯蟹育种群体与野生群体后代生长特性比较研究

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上海海洋大学学报 2016年第6期25卷 839-846页

作者：陈军伟马旭洲王武杨永超陶程上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海市水产养殖工程技术研究中心上海201306 水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306

为比较中华绒螯蟹育种群体与野生群体后代的生长发育,在生态池塘中放置网箱开展了中华绒螯蟹养殖实验,按照亲本来源和规格不同设置3个处理,处理A:育种群体后代,母本质量为(150.39±5.82)g,父本质量为(300.23±9.61)g;处理B、C:... 详细信息

为比较中华绒螯蟹育种群体与野生群体后代的生长发育,在生态池塘中放置网箱开展了中华绒螯蟹养殖实验,按照亲本来源和规格不同设置3个处理,处理A:育种群体后代,母本质量为(150.39±5.82)g,父本质量为(300.23±9.61)g;处理B、C:野生群体后代,母本质量分别为(150.47±6.28)g和(250.33±8.68)g,父本质量均为(300.56±10.27)g。每个处理设4个平行,每个网箱放养中华绒螯蟹500只,以水花生为隐蔽物,从大眼幼体开始养殖,保持生长环境相同且适宜生长。经过158 d的养殖,处理A、B和C的体质量分别增长1273.00、1258.17和1363.95倍。长成蟹种后综合指标最佳的是处理C,处理C的体质量、壳长和壳宽显著优于A和B(P<0.05)。处理A平均成活率最高,分别较B和C高1.40%和3.00%。综合研究表明:大规格野生母本后代生长性状优于小规格野生母本后代与小规格育种母本后代,存在母本效应。育种群体较野生群体更能适应池塘水体养殖环境。

关键词：中华绒螯蟹野生群体网箱蜕壳特定生长率成活率

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猪MII期卵母细胞冷冻前后全基因组表达谱分析

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上海农业学报 2019年第2期35卷 67-74页

作者：戴建军吴彩凤张树山孙玲伟陈亚宁张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海种猪工程技术研究中心上海201302

为探究猪MII期卵母细胞冷冻前后基因表达的变化,采用猪全基因组表达谱芯片对其冷冻前后的基因进行表达谱分析,筛选出2倍以上差异表达基因,并利用生物信息学对这些基因进行GO和KEGG Pathway分析。结果表明:(1)猪卵母细胞玻璃化冷冻前后... 详细信息

为探究猪MII期卵母细胞冷冻前后基因表达的变化,采用猪全基因组表达谱芯片对其冷冻前后的基因进行表达谱分析,筛选出2倍以上差异表达基因,并利用生物信息学对这些基因进行GO和KEGG Pathway分析。结果表明:(1)猪卵母细胞玻璃化冷冻前后共获得2倍以上差异表达基因171个,其中冻后上调表达基因103个,下调表达基因68个;选取的6个差异表达基因的RT-PCR验证结果与芯片分析结果一致。(2)损伤应答、细胞凋亡、程序性细胞死亡、细胞坏死及蛋白激酶调节、RNA拼接、核mRNA拼接和mRNA代谢等参与了卵母细胞冻后基因差异表达的生物学过程;(3)胞外区、基底质膜、细胞外间隙、质膜、肌动蛋白细胞骨架、线粒体脊、线粒体、细胞器膜和线粒体包膜等参与了卵母细胞冻后基因差异表达的细胞组分调控;(4)类固醇结合、酶抑制剂的活性、激素结合、核苷酸结合、辅酶结合和ATP酶活等参与了卵母细胞冻后差异表达基因的分子功能调控。(5) KEGG Pathway分析表明,Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路、黏着连接和MAPK信号通路等参与了冻后卵母细胞的基因表达调控。综上所述,冷冻能造成猪MII期卵母细胞多系统的损伤,如线粒体损伤、凋亡、坏死、质膜损伤和RNA拼接与代谢异常等。

关键词：猪卵母细胞玻璃化冷冻表达谱基因芯片

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温度对一株耐高氨氮绿球藻生长及油脂特性的影响

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上海海洋大学学报 2016年第5期25卷 692-699页

作者：穆亮亮黄旭雄蔡敬危立坤上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海市水产养殖工程技术研究中心上海201306 水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306

利用耐污微藻净化污水并耦合微藻生物柴油生产是当前微藻开发应用的热点。探讨了不同培养温度（20、25、30、35和40℃）对一株耐高氨氮绿球藻（Chlorococcum sp.）生长及细胞油脂特性的影响。初始接种密度为300×104cells/m L,培养... 详细信息

利用耐污微藻净化污水并耦合微藻生物柴油生产是当前微藻开发应用的热点。探讨了不同培养温度（20、25、30、35和40℃）对一株耐高氨氮绿球藻（Chlorococcum sp.）生长及细胞油脂特性的影响。初始接种密度为300×104cells/m L,培养周期为7 d。结果表明：培养温度对绿球藻的生长具有显著影响,随着温度的升高,绿球藻的细胞密度和生物量呈现先上升后下降的变化,其峰值均在35℃,分别为3 604×10~4cells/m L和0.92 g/L。对采收的藻细胞脂肪蓄积及特性分析表明,藻细胞的油脂含量和油脂产量随着温度的升高先上升后下降,其峰值也出现在35℃,分别为23.67%和21.65 mg/L。随着培养温度的升高,藻细胞的饱和脂肪酸含量先升高后降低,而多不饱和脂肪酸则持续下降。从微藻生长并耦合生物柴油生产的角度考虑,该耐高氨氮绿球藻株的适宜培养温度为30~35℃。

关键词：绿球藻温度生长总脂脂肪酸生物柴油

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中华绒螯蟹幼蟹生长和蜕壳与积温关系的研究

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上海海洋大学学报 2016年第5期25卷 675-683页

为研究中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)幼蟹生长和蜕壳与有效积温的关系,在河蟹生态养殖池塘中放置网箱养殖中华绒螯蟹;温度记录仪探头入水深度为20 cm,且每周清理一次,每次记录时间间隔为20 min,每天至少早晚各查看一次。每口网箱放养... 详细信息

为研究中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)幼蟹生长和蜕壳与有效积温的关系,在河蟹生态养殖池塘中放置网箱养殖中华绒螯蟹;温度记录仪探头入水深度为20 cm,且每周清理一次,每次记录时间间隔为20 min,每天至少早晚各查看一次。每口网箱放养中华绒螯蟹大眼幼体500只,以水花生为隐蔽物,保持生长环境尽量相同且适宜生长。经过158 d的养殖,幼蟹蜕壳11次长成蟹种,平均成活率为28.43%±4.61%,平均水温为(24.4±0.05)℃,总有效积温为(3 040.4±244.16)℃·d,且随着中华绒螯蟹蜕壳,有效积温增长趋势最接近指数函数y=40.942e0.2655x(R2=0.9904),累计有效积温增长趋势最接近多项式y=33.336x^2-115.05x+196.14(R2=0.997 8);特定生长率随有效积温的变化曲线最接近幂指数增长关系y=20.926e-0.005x(R2=0.933 3);累计有效积温对壳长、壳宽、体高的相关性极为显著,壳长、壳宽、体高随累计有效积温的增长均呈幂指数增长关系。

关键词：中华绒螯蟹有效积温成活率特定生长率水温

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基于HRM技术的草鱼抗小瓜虫nlrc3基因SNP标记开发及关联分析

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上海海洋大学学报 2024年第1期33卷 1-8页

作者：陈锋黄梦璐李家乐沈玉帮上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海海洋大学上海水产养殖工程技术研究中心上海201306 上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306

为探究草鱼nlrc3基因的多态性和抗多子小瓜虫(Ichthyophthirius multifiliis)病之间的关联性,通过多子小瓜虫感染草鱼(Ctenopharyngodon idella)筛选出易感群体和抗病群体,并分析比较两个群体nlrc3基因的单核苷酸多态性(Single nucleoti... 详细信息

为探究草鱼nlrc3基因的多态性和抗多子小瓜虫(Ichthyophthirius multifiliis)病之间的关联性,通过多子小瓜虫感染草鱼(Ctenopharyngodon idella)筛选出易感群体和抗病群体,并分析比较两个群体nlrc3基因的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)位点,使用高分辨率熔解(High resolution melt,HRM)和Sanger测序技术验证SNP位点基因型,并将获得的SNP位点与草鱼抗病性状进行关联性分析。结果显示,从草鱼nlrc3基因中筛选得到了4个SNPs位点,有3个SNPs位点(SNP1、SNP3和SNP4)成功分型,其中SNP1和SNP3中分别含有AA、AG和AA、GG两种基因型,且与抗多子小瓜虫性状显著相关;倍型组合及其与抗病能力相关性分析显示,与其他二倍型相比,由SNP1的AG和SNP3的AA基因型组成的二倍型(D1)中100%为抗病个体,由SNP1的AG与SNP3的GG基因型组成的二倍型(D2)中95%为抗病个体,均为抗病优势基因型。研究表明,抗小瓜虫的草鱼全体中存在nlrc3基因多态性现象,并且不同分型与抗多子小瓜虫感染的能力显著相关,其中SNP1 AG与SNP3 AA组合的D1基因型为最强基因型。该研究结果为进一步开展草鱼抗小瓜虫病的育种和预防提供了重要的理论依据和技术支持。

关键词：草鱼多子小瓜虫高分辨率熔解单核苷酸多态性

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盐度-光照强度-温度对小环藻Cyclotella sp. SHOU-B108生长及ARA和EPA含量的影响

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上海海洋大学学报 2016年第3期25卷 406-414页

作者：蔡敬王星宇曾蓓蓓黄旭雄穆亮亮危立坤上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海市水产养殖工程技术研究中心上海201306 水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306

采用L_9(3~4)正交实验法,研究了盐度(3、6、9)、光照强度[20、40、60μmol/(m^2·s)]和温度(10、20、30℃)3因素对半咸水小环藻(Cyclotella sp.)SHOU-B108生长及细胞中ARA和EPA含量的影响。结果表明:培养10 d后小环藻在盐度6、光照... 详细信息

采用L_9(3~4)正交实验法,研究了盐度(3、6、9)、光照强度[20、40、60μmol/(m^2·s)]和温度(10、20、30℃)3因素对半咸水小环藻(Cyclotella sp.)SHOU-B108生长及细胞中ARA和EPA含量的影响。结果表明:培养10 d后小环藻在盐度6、光照强度40μmol/(m^2·s)和温度30℃组具有最大生物量(干重)。盐度、光照强度和温度对小环藻细胞ARA和EPA含量的影响均有显著的交互作用,但温度是影响藻细胞ARA和EPA含量的主要因素。低的盐度(3)和高的温度(30℃)有利于小环藻细胞积累ARA;而高的光照强度[60μmol/(m^2·s)]则有利于细胞积累EPA。本研究表明环境因子对小环藻细胞中不同的脂肪酸会产生不同的诱导效应,通过调控小环藻的培养条件,能够获得特定营养物质含量丰富的饵料微藻。

关键词：小环藻盐度光照强度温度花生四烯酸二十碳五烯酸

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三角帆蚌17β-HSD11基因的表达特征及17β-雌二醇对其表达的影响

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上海海洋大学学报 2023年第1期32卷 1-9页

作者：上官宵兆刘美玲毛颖睿王晓强王雅昱汪桂玲李家乐上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海海洋大学、上海水产养殖工程技术研究中心上海201306 上海海洋大学、水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306

通过RACE技术、实时荧光定量(qRT-PCR)技术、原位杂交和17β-雌二醇注射来探究17β-HSD11基因在三角帆蚌性腺发育和性激素合成中的表达特性和作用。结果显示:17β-HSD11基因的cDNA全长为1134 bp,其中,5′UTR 40 bp,开放阅读框(ORF)923 b... 详细信息

通过RACE技术、实时荧光定量(qRT-PCR)技术、原位杂交和17β-雌二醇注射来探究17β-HSD11基因在三角帆蚌性腺发育和性激素合成中的表达特性和作用。结果显示:17β-HSD11基因的cDNA全长为1134 bp,其中,5′UTR 40 bp,开放阅读框(ORF)923 bp,3′UTR 171 bp,编码307个氨基酸。17β-HSD11基因在肝胰腺、性腺中表达量较高,且卵巢极显著高于精巢。原位杂交结果显示雌性三角帆蚌卵母细胞、滤泡膜和卵膜上均存在杂交信号。注射不同质量浓度17β-雌二醇之后发现17β-HSD11基因在雌雄性腺中的相对表达量均被抑制,其中:低质量浓度注射后,17β-HSD11基因的表达量在卵巢中下降33.38%,在精巢中下降37.74%;而高质量浓度注射后,17β-HSD11基因的表达量在卵巢中下降57.78%,在精巢中下降61.31%。由此推测17β-HSD11可能与三角帆蚌性腺发育和雌激素合成相关。

关键词：三角帆蚌 17β-HSD11 17β-雌二醇性腺发育

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青鱼生长相关SNP标记在不同地理群体中的验证

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上海海洋大学学报 2022年第5期31卷 1089-1096页

作者：郭加民徐晓雁李家乐沈玉帮上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海海洋大学上海水产养殖工程技术研究中心上海201306 上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306

单核苷酸多态性分子标记(single nucleotide polymorphism,SNP)是目前常用的分子标记辅助育种的工具之一。本研究在前期构建的青鱼(Mylopharyngodon piceus)高密度连锁图谱和QTL定位结果的基础上,利用体质量QTL区间中的2个SNP标记在3个... 详细信息

单核苷酸多态性分子标记(single nucleotide polymorphism,SNP)是目前常用的分子标记辅助育种的工具之一。本研究在前期构建的青鱼(Mylopharyngodon piceus)高密度连锁图谱和QTL定位结果的基础上,利用体质量QTL区间中的2个SNP标记在3个青鱼群体中进行验证,目的是为了检测通过QTL定位得到的SNP是否存在并能应用于其他地理群体,利用对分子标记的侧翼序列进行基因型组成分析、遗传多样性分析及中性检验等方法,对3个群体的2个SNP侧翼序列进行分析。遗传多样性结果显示,snp8107的扩展片段的单倍型多样性(H)在邗江群体、湘江群体和石首群体中分别为0.782、0.515和0.497;各位点的观测杂合度(H)为0.067~0.533,平均为0.239;期望杂合度(H)为0.127~0.506,平均为0.306;多态信息含量(PIC)为0.117~0.374,平均为0.246。中性检验显示3个群体在历史上可能发生过瓶颈效应导致稀有等位基因丢失的现象,结合遗传多样性结果推测,邗江群体在经历瓶颈效应后保留下来的稀有等位基因更多,最终得出结论邗江群体是适合进行遗传改良的最优群体。

关键词：青鱼 SNP 遗传多样性中性检验

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雌性三角帆蚌外鳃组织形态周年变化及低氧胁迫对外鳃组织形态和酶活性影响

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上海海洋大学学报 2022年第4期31卷 865-872页

作者：郭思鹏汪桂玲白志毅孙田洋上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306 上海海洋大学上海水产养殖工程技术研究中心上海201306

通过石蜡切片观察雌性三角帆蚌外鳃组织形态周年变化,并探究低氧环境对雌性三角帆蚌外鳃组织形态及酶活性的影响。结果表明,雌性三角帆蚌外鳃鳃瓣1月最薄,至5月增至最厚,较1月显著增厚173.86%,随后鳃瓣逐渐变薄,其鳃小腔宽度随鳃瓣厚度... 详细信息

通过石蜡切片观察雌性三角帆蚌外鳃组织形态周年变化,并探究低氧环境对雌性三角帆蚌外鳃组织形态及酶活性的影响。结果表明,雌性三角帆蚌外鳃鳃瓣1月最薄,至5月增至最厚,较1月显著增厚173.86%,随后鳃瓣逐渐变薄,其鳃小腔宽度随鳃瓣厚度增厚也显著增大,至6月增至最宽较1月显著增宽171.22%,随后鳃小腔逐渐变窄,且3—6月在雌性三角帆蚌外鳃发育为育儿囊,其中发现大量早期胚胎。在低氧环境下,乳酸脱氢酶(LDH)活性在1~5 d逐渐升高,第5天达到最大值,较对照组显著提升131.1%,5~9 d缓慢下降;超氧化物歧化酶(SOD)活性在1~7 d逐渐下降,在第7天达到最小值,较对照组显著降低40.53%,7~9 d缓慢上升;过氧化氢酶(CAT)活性在1~7 d逐渐上升,7~9 d无明显变化,第7天活性最高,较对照组显著提升91.34%,琥珀酸脱氢酶(SDH)活性在1~9 d呈下降趋势,最低值出现在第9天,较对照组显著降低68.9%;低氧胁迫5 d后,外鳃侧纤毛较对照组增宽了79.58%,外鳃小水管较对照组增宽了248.73%。本研究分别为怀卵期雌性三角帆蚌外鳃组织结构变化和低溶氧对雌性三角帆蚌外鳃组织结构和酶活性的影响提供了基础资料,为提升三角帆蚌繁育技术提供了理论依据。

关键词：三角帆蚌外鳃育儿囊低氧酶活性

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