目的 为优化小型猪体细胞核移植技术（SCNT）技术,探讨供体细胞不同类型、不同传代数以及蚜肠霉素（Aphidicolin,APC）处理各供体细胞对重构胚体外发育的影响.方法 小型猪输卵管上皮细胞（OEC）,耳成纤维细胞（EFC）和卵丘细胞（CC）分别经血清饥饿或血饥饿后再使用0.1μg/mlAPC处理.核移植重构胚体外培养7d,以检测其发育能力.结果 OEC经APC处理后,重构胚的卵裂率和囊胚形成均显著高于仅血清饥饿处理组（61.82％ vs 56.25％,24.55％ vs 17.86％; P＜0.05）.以EFC为供体细胞,APC组重构胚卵裂率显著高于血清饥饿组（63.36％ vs 57.01％; P＜0.05）.注入CC,APC处理能显著提高重构胚的囊胚形成率（29.63％; P＜0.05）.三种细胞经APC处理,CC作为核供体,重构胚的卵裂率和囊胚形成率最高.三种细胞中,无论哪一种作为核供体,其传代数对重构胚的发育没有影响.结论 以CC为供体细胞,血清饥饿后再使用APC处理,更适合小型猪的体细胞核移植.
目的：为优化小型猪体细胞核移植技术(SCNT)技术,探讨供体细胞不同类型、不同传代数以及aphidicolin(蚜肠霉素,APC)处理各供体细胞对重构胚体外发育的影响。方法：小型猪输卵管上皮细胞(OEC),耳成纤维细胞(EFC)和卵丘细胞(CC)分别经血清饥饿或血饥饿后再使用0.1μg/ml APC处理。核移植重构胚体外培养4d,以检测其发育能力。结果：OEC经APC处理后,重构胚的卵裂率和囊胚形成均显著高于仅血清饥饿处理(61.82%vs56.25%,24.55%vs17.86%;P＜0.05)。以EFC为供体细胞,APC组重构胚卵裂率显著高于血清饥饿组(63.36% vs 57.01%;P＜0.05)。注入CC,APC处理能显著提高重构胚的囊胚率(29.63%：p＜0.05)。三种细胞经APC处理,CC作为核供体,重构胚的卵裂率和囊胚率最高。三种细胞中,无论哪一种作为核供体,其传代数对重构胚的发育没有影响。结论以CC为供体细胞,血清饥饿后再使用APC处理,更适合小型猪的体细胞核移植。
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