检索结果-内蒙古大学图书馆

上海农业学报 2008年第4期24卷 36-38页

作者：吴彩凤戴建军张廷宇杨山亭王磊殷方芝张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 南京农业大学动物科技学院南京210095

本研究的目的是检测电激活前亚胺环己酮(CHX)预处理对猪体外成熟卵母细胞孤雌激活及随后胚胎发育的影响。试验结果表明:去卵丘卵母细胞最佳电激活参数为120 V/mm,40μs,1DC。卵母细胞在含CHX(10mg/mL)的NCSU-23中处理10min获得的囊胚率... 详细信息

本研究的目的是检测电激活前亚胺环己酮(CHX)预处理对猪体外成熟卵母细胞孤雌激活及随后胚胎发育的影响。试验结果表明:去卵丘卵母细胞最佳电激活参数为120 V/mm,40μs,1DC。卵母细胞在含CHX(10mg/mL)的NCSU-23中处理10min获得的囊胚率最高,显著高于处理0、30、40min组。电激活前,用CHX预处理较短时间可提高体外成熟卵母细胞孤雌激活胚的发育能力。

关键词：猪孤雌激活亚胺环已酮电激活

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崇明白山羊超数排卵和胚胎冷冻初步研究

崇明白山羊超数排卵和胚胎冷冻初步研究

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会

作者：戴建军张德福吴华莉吴彩凤乔建宁黄松明上海农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海 201106 上海市崇明县动物疫病预防控制中心上海崇明 202150

目前胚胎移植技术已经成为人们讨论和研究的热门话题。它有许多延伸技术，如转基因技术、体外受精技术、胚胎分割技术等。它们的研究都已经取得了很重大的成果。超数排卵作为胚胎移植技术中首要的、也是非常重要的环节正引起了人们的广... 详细信息

目前胚胎移植技术已经成为人们讨论和研究的热门话题。它有许多延伸技术，如转基因技术、体外受精技术、胚胎分割技术等。它们的研究都已经取得了很重大的成果。超数排卵作为胚胎移植技术中首要的、也是非常重要的环节正引起了人们的广泛重视。胚胎的冷冻保存可以使胚胎移植不受时间和地点的限制，胚胎的运输代替种畜的进出口，可节约购买和运输活畜的费用。本文主要介绍了崇明白山羊的超数排卵、胚胎冷冻过程和其中的一些注意事项。

关键词：超数排卵冷冻保存白山羊胚胎冷冻胚胎移植

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猪胚胎开放式拉长细管玻璃化冷冻保存研究

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生物工程学报 2006年第5期22卷 845-849页

作者：张德福刘东吴华丽郑筱峰王昭凯王少兵上海农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 南京农业大学动物医学院南京农业大学动物科技学院

从20头供体母猪获得的291枚可用胚胎(囊胚/桑葚胚),采用二步法开放式拉长细管(OPS,openpulledstraw)玻璃化冷冻技术进行保存,即胚胎首先在冷冻液I(TCM199+20%FBS+10%EG+10%DMSO)中平衡3min,然后立即转入冷冻液II(TCM199+20%FBS+20%EG+20%DMSO+0.4mol/LSUC)中并在1min内装管,直接投入液氮保存;3个月后解冻移植给8头受体母猪,其中1头怀孕产仔(8头活仔),在我国首次获得猪胚胎超低温(-196℃)冷冻后代。

关键词：猪冷冻胚胎玻璃化冷冻

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猪卵母细胞去核方法的改进

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中国兽医学报 2006年第5期26卷 574-577页

作者：张德福刘东汤琳琳陈晓宇 Lin Cailu 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 Animal Breeding Institute Bonn UniversityBonn 53121 Germany

对猪体细胞克隆技术中关键步骤之一的去核方法作了较深入的研究。结果表明,由本实验室改进的Willadsen去核法———二步挤压去核法,无论在去核操作成功率(73.9%)上还是在去核效率(81.2%)上都明显好于McGrath-Solter去核法(42.5%、67.4%,... 详细信息

对猪体细胞克隆技术中关键步骤之一的去核方法作了较深入的研究。结果表明,由本实验室改进的Willadsen去核法———二步挤压去核法,无论在去核操作成功率(73.9%)上还是在去核效率(81.2%)上都明显好于McGrath-Solter去核法(42.5%、67.4%,P<0.05);同时,本试验还发现,卵母细胞成熟培养36 h后去核组去核效率(89.1%)显著地高于成熟培养44 h后去核组(55.8%,P<0.05),而核移植重构胚的发育率2个组间无显著差异。

关键词：猪卵母细胞去核核移植

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猪卵母细胞冷冻保存研究

猪卵母细胞冷冻保存研究

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会

作者：张德福刘东王邵凯王少兵汤琳琳上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 南京农业大学动物科技学院南京252100

[方法]利用屠宰场卵巢采集的卵母细胞,以台盼蓝染色、二乙酸荧光素(FDA)染色鉴定义母细胞冷冻后的存活率,以体外成熟和体外受精鉴定卵母细胞冷冻后的发育能力,研究了不同冷冻方法和不同冷冻保护剂对猪卵母细胞的冷冻效果.[结果](1)程序... 详细信息

[方法]利用屠宰场卵巢采集的卵母细胞,以台盼蓝染色、二乙酸荧光素(FDA)染色鉴定义母细胞冷冻后的存活率,以体外成熟和体外受精鉴定卵母细胞冷冻后的发育能力,研究了不同冷冻方法和不同冷冻保护剂对猪卵母细胞的冷冻效果.[结果](1)程序化法冷冻保存中,3种冷冻保护剂乙二醇(EG),二甲基亚砜(DMSO),甘油(Gly)均对猪MⅡ期卵母细胞有冷冻保护作用,极显著高于对照组(存活率33.8％,25.8％,2 3.5％vs 2.5％,P＜0.01),且以EG的效果最好,显著高于另外两组(33.8％ vs 25.8％,23.5％,P＜0.05).(2)玻璃微细管(GMP)法是猪卵母细胞超低温冷冻的较好方法,以普通的麦管(Straw)法进行的程序化冷冻为对照组,GMP管法显著提高猪卵母细胞的冷冻存活率(分别为63.3％和34.5％,P＜0.05).(3)在玻璃化冷冻方法中,不同的冷冻液载体对猪卵母细胞冷冻存活率有影响.以EFS40为冷冻液,Straw和GMP管作冷冻液载体,卵母细胞的存活率分别为45.0％和65.9％,二者差异显著(P＜0.05).(4)用Straw的程序化冷冻法和和用GMP管的玻璃化冷冻法对猪GV期卵母细胞冷冻均有效,但二者差异显著(存活率分别为30.0％和59.7％,P＜0.05).冷冻后继续培养,分别有2.8％和6.3％的卵母细胞周围颗粒层发生扩散.(5)冷冻对MII期卵母细胞的发育潜能影响较大,用新鲜精液使其受精,仅有4.9％的受精卵分裂,极显著低于对照组的49.5％(P＜0.01);发育至4-细胞期的比例为1.7％,未能发育至8-细胞期以上胚胎.

关键词：猪卵母细胞冷冻保存体外受精

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猪精液大管冷冻技术研究

猪精液大管冷冻技术研究

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会

作者：张德福刘东吴华丽郑筱峰王昭凯王少兵上海农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 南京农业大学动物医学院南京210095 南京农业大学动物科技学院南京210095

本研究应用5ml大管研究稀释液成分、冷冻速率、解冻时间和温度对冷冻精液顶体形态和活力的影响.表明稀释液中2％甘油、11％乳糖、20％卵黄、1％OEP、甘油的平衡时间2-3小时、铝架与液氮面距离5cm对解冻精子的顶体形态和活力最有利;0.05... 详细信息

本研究应用5ml大管研究稀释液成分、冷冻速率、解冻时间和温度对冷冻精液顶体形态和活力的影响.表明稀释液中2％甘油、11％乳糖、20％卵黄、1％OEP、甘油的平衡时间2-3小时、铝架与液氮面距离5cm对解冻精子的顶体形态和活力最有利;0.05％N-乙酰-D-氨基葡萄糖能显著提高冷冻精子活力和顶体完整率.

关键词：猪大管冷冻技术冷冻精液

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影响基因工程猪生长激素复性效率的因素

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上海农业学报 2004年第1期20卷 26-29页

作者：于瑞嵩李震刘惠莉张平张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程分室上海201106

对影响基因工程猪生长激素 (r pGH)体外复性效率的因素进行了研究 ,结果表明 :复性液组成、变性剂种类、复性方法的选择、变复性pH对r pGH体外复性效率有较大影响 ,β 巯基乙醇、谷光苷肽等添加剂对r pGH的体外复性影响不显著。提取包... 详细信息

对影响基因工程猪生长激素 (r pGH)体外复性效率的因素进行了研究 ,结果表明 :复性液组成、变性剂种类、复性方法的选择、变复性pH对r pGH体外复性效率有较大影响 ,β 巯基乙醇、谷光苷肽等添加剂对r pGH的体外复性影响不显著。提取包含体用 6mol L盐酸胍溶解 ,空气氧化 80h后转入复性缓冲液中开始重组蛋白复性 ,采用透析复性法———复性缓冲液Ⅲ (0 .2 5 %NaHCO3,0 .2 %α 乳糖 ,0 .2 %甘露醇 ) ,pH9.0 ,透析 5～ 6次 ,可较好地恢复r pGH生物活性。复性后蛋白浓缩液进行去垂体大鼠试验 ,大鼠增重明显 ,表明得到了正确折叠的较高生物活性的r pGH。

关键词：基因工程猪生长激素复性效率影响因素

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不同直径卵泡对猪卵母细胞体外成熟的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2004年第7期32卷 7-10页

作者：陈晓宇李青旺胡建宏王立强张德福卜书海韩增胜燕山大学环境与化学工程学院河北秦皇岛610400 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 上海市农业遗传育种重点实验室上海201106

　以TCM-199成熟培养猪卵巢表面直径2～3mm,3～5mm和5～8mm卵泡内的卵母细胞,比较了成熟培养液中添加以上各组卵泡液(pFF)对猪卵母细胞体外成熟(IVM)的影响,以成熟培养48h后排出第一极体为成熟标准对猪卵母细胞进行成熟鉴定。结果表明,2... 详细信息

　以TCM-199成熟培养猪卵巢表面直径2～3mm,3～5mm和5～8mm卵泡内的卵母细胞,比较了成熟培养液中添加以上各组卵泡液(pFF)对猪卵母细胞体外成熟(IVM)的影响,以成熟培养48h后排出第一极体为成熟标准对猪卵母细胞进行成熟鉴定。结果表明,2～3mm,5～8mm和3～5mm3组卵泡内卵母细胞的体外成熟(IVM)率依次升高,分别为12.7%,31.3%和46.0%,各组间差异显著(P<0.05);添加3～5mm卵泡液的卵母细胞体外成熟率(42.0%)也显著高于5～8mm组(11.0%)和2～3mm组(12.7%)(P<0.05)。试验同时观察记录了不同直径卵泡内卵母细胞的等级,结果发现5～8mm组中A级卵母细胞的比例(37.7%)显著高于3～5mm组(23.9%)(P<0.01),但其B级卵母细胞的比例(45.9%)却显著低于2～3mm(62.1%)组和3～5mm(59.2%)(P<0.05)。这说明,2～3mm,3～5mm和5～8mm3组卵泡中,卵泡直径增大,其在猪卵母细胞体外成熟中的优势渐增。

关键词：猪卵泡卵母细胞体外成熟

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重组猪生长激素对上海白猪长上白猪的生物学效应

重组猪生长激素对上海白猪长上白猪的生物学效应

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动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会

作者：李震张平于瑞嵩王英张德福刘惠莉周智爱上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程公室

在去垂体大鼠实验验证重组猪生长激素(rPGH)活性的基础上,为证明rPGH在本体动物即猪体上的生物学效应,使用上海白猪、长上白猪等进行了本体动物试验。注射试验的结果证明产物使

关键词：上海白猪重组猪生长激素生物学效应

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