检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2014年第7期45卷 1097-1103页

作者：吴彩凤戴建军张树山李维杰徐利张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海理工大学生物系统热科学研究所上海200093

本研究旨在探讨3种冷冻方法(CLV法、OPS法和Straw法)对猪MII期卵母细胞玻璃化冷冻后微丝、脂肪颗粒分布及其超微结构的影响。结果显示:(1)CLV(Cryoloop vitrification)法冷冻速率最高,达42 639℃·min-1;(2)CLV法微丝正常分布率(47.... 详细信息

本研究旨在探讨3种冷冻方法(CLV法、OPS法和Straw法)对猪MII期卵母细胞玻璃化冷冻后微丝、脂肪颗粒分布及其超微结构的影响。结果显示:(1)CLV(Cryoloop vitrification)法冷冻速率最高,达42 639℃·min-1;(2)CLV法微丝正常分布率(47.06%)最高,显著高于OPS(Open pulled straw)法的38.04%和Straw法的30.95%(P<0.05)。(3)CLV法和OPS法的脂肪颗粒正常分布率之间没有显著差异(P>0.05),但两者均显著高于Straw法(P<0.05);(4)解冻后卵母细胞超微结构观察结果显示,大的脂肪颗粒含量明显减少;大部分脂肪颗粒冷冻后呈均质化状态,只有很少的异质化脂肪颗粒存在。试验结果表明,冷冻过程中卵母细胞脂肪颗粒破坏严重,增加冷冻速率能降低对微丝的损伤,从而减少对脂肪颗粒异常分布的影响。

关键词：猪 MII期卵母细胞玻璃化 CLV 脂肪颗粒

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克隆家畜安全性评估及其产业化研究进展

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上海农业学报 2013年第1期29卷 85-90页

作者：张德福戴建军张廷宇吴彩凤张树山顾晓龙上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 四川农业大学动物医学院雅安625014

综述了克隆牛、猪和羊的研究现状、克隆动物的生长与繁殖等生物学特性以及克隆动物的再克隆等最新研究进展,为克隆家畜的产业化发展和安全性评估提供参考。

关键词：克隆家畜安全评估产业化

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纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物对猪精子介导基因转移效率的影响

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中国兽医学报 2013年第3期33卷 466-471页

作者：吴斌戴建军张廷宇张树山吴彩凤顾晓龙陈会兰张德福马恒东上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 四川农业大学生命科学与理学院四川雅安625014

为优化猪精子介导的基因转移(SMGT)技术,提高转基因效率,本试验利用纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D)为载体介导猪精子转染外源DNA,经原位杂交检测其阳性率,体外受精(IVF)分析外源基因的表达。结果显示,0.5μg线状质粒DNA中加入P... 详细信息

为优化猪精子介导的基因转移(SMGT)技术,提高转基因效率,本试验利用纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D)为载体介导猪精子转染外源DNA,经原位杂交检测其阳性率,体外受精(IVF)分析外源基因的表达。结果显示,0.5μg线状质粒DNA中加入PAMAM-D(质量比20∶1)阳性率最高(P<0.05);孵育时间为90、120min时,阳性率显著高于30、60min组(19.94%、18.57%与8.50%、13.87%;P<0.05);以此条件处理精子,阳性率显著高于无载体和脂质体处理组(23.93%与7.25%、13.25%;P<0.05)。各处理精子经IVF后,PAMAM-D组EGFP表达率显著高于其他2组(9.19%与4.81%、3.43%;P<0.05),各组绿色荧光胚胎经基因组PCR分析均能检测到EGFP基因。结果表明,PAMAM-D可有效介导猪精子转染外源DNA,并通过体外受精将外源基因导入胚胎中。

关键词： SMGT 精子 PAMAM-D 猪

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H19和IGF2R基因在体细胞克隆猪各组织中的甲基化状态

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中国兽医学报 2012年第6期32卷 922-926,932页

作者：吴志强谢一妮戴建军张廷宇吴彩凤张树山顾晓龙刘亮吴斌陈慧兰张德福马恒东上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 四川农业大学生命科学与理学院四川雅安625014

为了探求新生克隆猪可能的死亡原因以及是否存在不完全的DNA甲基化重编程,本试验运用亚硫酸氢盐测序法分别检测了H19基因和IGF2R基因差异甲基化区(DMR)在新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的甲基化状态。结果发... 详细信息

为了探求新生克隆猪可能的死亡原因以及是否存在不完全的DNA甲基化重编程,本试验运用亚硫酸氢盐测序法分别检测了H19基因和IGF2R基因差异甲基化区(DMR)在新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的甲基化状态。结果发现,H19基因DMR在克隆猪肺脏中表现为超甲基化,极显著高于正常猪(95.20%vs 46.80%P<0.01),且10个测序克隆中存在2处连续的全甲基化CpG位点(4～9位、12～S17位),而在其他组织中甲基化差异不显著(P>0.05);IGF2R基因DMR在肝脏中处于超甲基化状态,显著高于正常猪(80.00%vs 39.41%P<0.05),而在肺脏中为去甲基化状态,极显著低于正常猪(14.71%vs 66.47%P<0.01),在其他组织差异不显著(P>0.05)。结果说明,在死亡克隆猪中,H19基因DMR在肺脏和IGF2R基因在肝脏与肺脏中存在不完全的DNA甲基化重编程,这可能是导致克隆动物死亡的因素之一。

关键词：差异甲基化区 DNA甲基化体细胞克隆表观重编程

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紫杉醇在猪体外成熟卵母细胞玻璃化冷冻中的作用探讨

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上海农业学报 2010年第1期26卷 20-23页

作者：王磊杨山亭戴建军吴彩凤张廷宇张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 南京农业大学动物科技学院南京210095

使用1.0μmol/L紫杉醇预处理卵母细胞,冷冻后其形态完整率(89.93%)和FDA染色存活率(83.33%)均显著高于未处理组的79.12%和70.97%。不同预处理时间试验表明:预处理30min组冷冻后卵母细胞形态完整率和FDA染色存活率最高,分别达到90.21%和8... 详细信息

使用1.0μmol/L紫杉醇预处理卵母细胞,冷冻后其形态完整率(89.93%)和FDA染色存活率(83.33%)均显著高于未处理组的79.12%和70.97%。不同预处理时间试验表明:预处理30min组冷冻后卵母细胞形态完整率和FDA染色存活率最高,分别达到90.21%和84.13%。预处理浓度1.0μmol/L,30min是比较合适的处理方法;紫杉醇、细胞松弛素B前处理能显著提高猪成熟卵母细胞的玻璃化冷冻的效果,但两者之间没有显著差异。

关键词：猪卵母细胞玻璃化冷冻紫杉醇

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高压均质鸡蛋卵黄对猪冷冻精子凋亡的影响

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畜牧兽医学报 2021年第8期52卷 2190-2199页

作者：汪俊跃戴建军张树山孙玲伟吴彩凤张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海海洋大学水产科学国家级试验教学示范中心上海201306

为探究高压均质鸡蛋卵黄对猪冷冻精子凋亡的影响,本试验采集5头健康状态良好的杜洛克公猪精液,以普通鸡蛋卵黄+Tris-柠檬酸-葡萄糖(TCG)冷冻基础稀释液为对照组,以添加高压均质处理的鸡蛋卵黄+Tris-柠檬酸-葡萄糖(TCG)冷冻基础稀释液为... 详细信息

为探究高压均质鸡蛋卵黄对猪冷冻精子凋亡的影响,本试验采集5头健康状态良好的杜洛克公猪精液,以普通鸡蛋卵黄+Tris-柠檬酸-葡萄糖(TCG)冷冻基础稀释液为对照组,以添加高压均质处理的鸡蛋卵黄+Tris-柠檬酸-葡萄糖(TCG)冷冻基础稀释液为试验组;精液冷冻-解冻后观察精子活力、DNA完整性、线粒体膜电位变化、细胞凋亡率、多种Caspase活性;同时利用qRT-PCR检测相关凋亡功能基因的mRNA表达水平,并进行数据统计。结果表明,经高压均质处理后,猪精子冻后活力、活率和顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),为87.64%、87.14%和66.61%,较对照组分别提高了12.58%、5.82%和12.48%;线粒体膜电位和DNA完整率显著高于对照组(P<0.05),为0.74和61.76%;精子凋亡水平显著减少(P<0.05),为37.74%;试验组的Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性为17.15、11.19和15.18,较对照组分别减少了6.17、2.18和3.51(P<0.05);对照组的Bax、TNF-α、Caspase-9基因表达均明显高于试验组(P<0.05),Bcl-2基因表达量较试验组降低(P>0.05)。综上,高压均质鸡蛋卵黄能提高猪精子冻后质量,促进线粒体功能完整性、降低精子细胞早期凋亡水平和细胞内Caspase活性,同时降低凋亡相关基因mRNA表达量。

关键词：高压均质鸡蛋卵黄精子冷冻细胞凋亡

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地方牛品种云南独龙牛的研究进展

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上海农业学报 2011年第2期27卷 139-142页

作者：张德福张树山戴建军吴彩凤张廷宇罗天福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 云南省怒江州畜牧兽医局云南673100

介绍了独龙牛的习性、起源和生产性能等,并针对目前存在的问题提出建议。独龙牛是珍贵的地方牛种资源,仅分布在中国大陆的云南省怒江流域。独龙牛种质资源的保护对保持牛种质资源多样性有着重要意义,并且在牛的新品种培育方面具有不可... 详细信息

介绍了独龙牛的习性、起源和生产性能等,并针对目前存在的问题提出建议。独龙牛是珍贵的地方牛种资源,仅分布在中国大陆的云南省怒江流域。独龙牛种质资源的保护对保持牛种质资源多样性有着重要意义,并且在牛的新品种培育方面具有不可忽视的价值。

关键词：独龙牛牛种质资源地方种云南

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新生死亡克隆猪的组织病理学观察

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上海农业学报 2014年第1期30卷 65-67页

作者：陈会兰戴建军吴彩凤张廷宇张树山顾晓龙吴斌上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

对1例新生死亡的体细胞克隆猪的5种组织进行详细的组织病理学观察,结果发现:体细胞克隆猪肺脏表现为典型的肺不张,肺泡壁有明显充血;肝脏的肝细胞形态异常,肝索紊乱,无典型肝小叶结构;肾脏的肾小球处于不同发育阶段,肾小管管腔尚未形成... 详细信息

对1例新生死亡的体细胞克隆猪的5种组织进行详细的组织病理学观察,结果发现:体细胞克隆猪肺脏表现为典型的肺不张,肺泡壁有明显充血;肝脏的肝细胞形态异常,肝索紊乱,无典型肝小叶结构;肾脏的肾小球处于不同发育阶段,肾小管管腔尚未形成,仅有肾小管轮廓。

关键词：猪体细胞核移植病理学

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应用冷冻环玻璃化法冷冻猪MⅡ期卵母细胞

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上海农业学报 2009年第3期25卷 27-30页

作者：杨山亭王磊戴建军吴彩凤张廷宇张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 南京农业大学动物科技学院南京210095

利用冷冻环玻璃化法对猪MⅡ期卵母细胞进行冷冻试验。结果表明:冷冻环玻璃化法冻后存活率达80.00%,显著高于OPS法和细管法的72.50%和53.33%;冷冻环玻璃化法激活后的卵裂率为7.22%,也显著高于后两者的4.85%和0;紫杉醇和细胞松弛素预处理... 详细信息

利用冷冻环玻璃化法对猪MⅡ期卵母细胞进行冷冻试验。结果表明:冷冻环玻璃化法冻后存活率达80.00%,显著高于OPS法和细管法的72.50%和53.33%;冷冻环玻璃化法激活后的卵裂率为7.22%,也显著高于后两者的4.85%和0;紫杉醇和细胞松弛素预处理能在一定程度上提高猪MⅡ期卵母细胞的抗冻能力,两种添加物对冻后卵母细胞的存活率和卵裂率无显著影响。

关键词：冷冻环卵母细胞猪

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不同睾丸注射方法对转基因效率的影响

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上海农业学报 2014年第1期30卷 54-57页

作者：李翔戴建军吴彩凤张树山张廷宇马恒东四川农业大学动物科技学院雅安625014 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

将pEGFP-C1质粒与脂质体混合后注入小鼠睾丸内,30d后观察睾丸形态和组织变化;检测精子和配种后仔鼠转基因阳性率,探讨小鼠睾丸网、曲精细管和睾丸间质3种注射方法对转基因小鼠生产效率的影响。结果显示:3种不同注射方法对小鼠睾丸造成... 详细信息

将pEGFP-C1质粒与脂质体混合后注入小鼠睾丸内,30d后观察睾丸形态和组织变化;检测精子和配种后仔鼠转基因阳性率,探讨小鼠睾丸网、曲精细管和睾丸间质3种注射方法对转基因小鼠生产效率的影响。结果显示:3种不同注射方法对小鼠睾丸造成损伤由大到小依次为睾丸网注射、曲精细管注射和睾丸间质注射。荧光检测小鼠精子,睾丸网和曲精细管注射法阳性率分别为(35.13±1.72)%和(15.13±1.45)%,睾丸间质注射法没有观察到阳性精子。PCR检测仔鼠,三者的转基因效率分别为33.3%、12.5%和0。

关键词：小鼠转基因睾丸注射睾丸网注射

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