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作者：徐皆欢孙玲伟张树山吴彩凤张德福芮荣戴建军南京农业大学动物医学院上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室

引言卵母细胞玻璃化冷冻作为一种动物遗传资源保种与人类生育力保存的方式,具有良好的发展前景。目前该技术的临床应用效率低,针对冷冻损伤的机理有待进一步研究。线粒体作为细胞的能量工厂,线粒体稳态与卵母细胞质量及胚胎发育的结局...

引言卵母细胞玻璃化冷冻作为一种动物遗传资源保种与人类生育力保存的方式,具有良好的发展前景。目前该技术的临床应用效率低,针对冷冻损伤的机理有待进一步研究。线粒体作为细胞的能量工厂,线粒体稳态与卵母细胞质量及胚胎发育的结局密切相关。本研究旨在探究猪MII期卵母细胞经玻璃化冷冻-解冻后是否发生线粒体自噬,并阐明其在线粒体功能调控中的作用。

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PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在玉米烯酮诱导的猪卵子线粒体功能障碍中的作用

PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在玉米烯酮诱导的猪卵子线粒体功能...

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第二十次学术研讨会

作者：戴建军徐皆欢孙玲伟吴彩凤张树山芮荣张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室南京农业大学动物医学院

引言玉米烯酮（ZEN）具有生殖发育毒性,在猪上常是母猪出现流产、死胎、新生仔猪死亡、胚胎洗手或干尸发生率增加等。在卵母细胞体外培养中,ZEN亦能导致其发生氧化应激、凋亡、自噬和表观遗传修饰等。本文通过对ZEN处理后的猪卵母细胞... 详细信息

引言玉米烯酮（ZEN）具有生殖发育毒性,在猪上常是母猪出现流产、死胎、新生仔猪死亡、胚胎洗手或干尸发生率增加等。在卵母细胞体外培养中,ZEN亦能导致其发生氧化应激、凋亡、自噬和表观遗传修饰等。本文通过对ZEN处理后的猪卵母细胞线粒体功能、线粒体自噬和线粒体自噬通路进行研究,阐明线PINK1/Parkin粒体自噬通路在ZEN诱导的猪卵母细胞线粒体功能障碍中的作用。

关键词：线粒体功能障碍 PINK1/Parkin 线粒体自噬玉米烯酮

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6种鸡精液冷冻稀释液及冻后保存条件的比较

6种鸡精液冷冻稀释液及冻后保存条件的比较

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第二十次学术研讨会

作者：何孟纤汪俊跃孙玲伟徐皆欢吴彩凤张树山戴建军张德福上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室

引言精液冷冻保存技术是目前畜禽遗传资源收集与保护中最有应用价值的技术之一,已在多种哺乳动物的保种和商业化推广中得到了广泛应用。鸡精液冷冻技术一方面能最大限度地利用遗传性能良好的种公鸡,另一方面对禽类资源的保护具有重要意...

引言精液冷冻保存技术是目前畜禽遗传资源收集与保护中最有应用价值的技术之一,已在多种哺乳动物的保种和商业化推广中得到了广泛应用。鸡精液冷冻技术一方面能最大限度地利用遗传性能良好的种公鸡,另一方面对禽类资源的保护具有重要意义。尽管精液冷冻已部分应用于家禽种质资源保护,但仍存在冻后精子存活率低,输精后种蛋孵化率不高等问题,仍需对该技术进一步优化。

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非洲猪瘟生物学特性及防控措施

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上海农业科技 2020年第5期 72-75页

作者：谢春芳李震上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海市闵行区201106

非洲猪瘟是目前全球养殖业及公共卫生部门面临的广泛性传播的动物性疾病,其流行和爆发不仅给养猪业造成了毁灭性的损失,也给猪肉食品安全带来了巨大威胁,给人类的健康安全埋下了巨大的安全隐患。非洲猪瘟病毒分子量大且容易变异,病毒结... 详细信息

非洲猪瘟是目前全球养殖业及公共卫生部门面临的广泛性传播的动物性疾病,其流行和爆发不仅给养猪业造成了毁灭性的损失,也给猪肉食品安全带来了巨大威胁,给人类的健康安全埋下了巨大的安全隐患。非洲猪瘟病毒分子量大且容易变异,病毒结构较为复杂,可在自然环境中长期存在,这给非洲猪瘟的预防控制带来了难度。现就非洲猪瘟生物学特性的国内外研究近况进行综述,包括传播、病毒结构特征和分型、对人的危害、感染猪的临床症状、诊断以及防控措施等,以期更好地防控非洲猪瘟。

关键词：非洲猪瘟生物学特性复杂性多变性免疫防控

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高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪冻精质量的影响

高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪冻精质量的影响

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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第二十次学术研讨会

作者：汪俊跃张树山戴建军吴彩凤孙玲伟张德福上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室

引言与常温精液保存相比,冷冻精液能更大程度地克服地域和时间限制,大大提高优良种公猪的利用效率。高压均质能明显减小溶液中鸡蛋卵黄颗粒大小,提高溶液的稳定性。目前关于HPH法处理稀释液对猪冷冻精子保存效果的影响尚未见报道。本研...

引言与常温精液保存相比,冷冻精液能更大程度地克服地域和时间限制,大大提高优良种公猪的利用效率。高压均质能明显减小溶液中鸡蛋卵黄颗粒大小,提高溶液的稳定性。目前关于HPH法处理稀释液对猪冷冻精子保存效果的影响尚未见报道。本研究应用HPH处理的稀释液进行猪精液冷冻,探究其对冷冻精液质量的影响,以期为进一步提高猪精液冷冻效率提供参考。

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非洲猪瘟病毒的基因特征

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国外畜牧学（猪与禽） 2020年第12期40卷 40-47页

作者：谢春芳于瑞嵩董世娟陈冰清上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程实验室上海201106

由非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)引起的非洲猪瘟(African Swine Fever,ASF)会给猪群的健康造成极其严重的危害。ASFV是大分子病毒,基因组成分复杂而且多变,这是研究ASFV的主要难点之一。ASFV以大分子DNA病毒的独特方式... 详细信息

由非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)引起的非洲猪瘟(African Swine Fever,ASF)会给猪群的健康造成极其严重的危害。ASFV是大分子病毒,基因组成分复杂而且多变,这是研究ASFV的主要难点之一。ASFV以大分子DNA病毒的独特方式进行基因的转录、复制、翻译和表达。目前ASFV有超过150个开放阅读框编码的结构蛋白和各种酶等,能在宿主细胞中增殖并适应宿主细胞中的抗病毒应答环境。了解ASFV的基因特征可以为找到有效控制和治疗非洲猪瘟的方法提供基因组学方面的理论依据。

关键词：非洲猪瘟病毒基因特征复杂性多样性

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高压均质(HPH)大豆卵磷脂替代卵黄在猪精液冷冻保存效果的研究

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中国兽医科学 2020年第11期50卷 1461-1468页

作者：汪俊跃张树山戴建军孙玲伟吴彩凤张德福上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海种猪工程技术研究中心上海2013021

为探究大豆卵磷脂高压均质(HPH)处理对猪精液冷冻保存的影响,用6个浓度的经高压均质处理的大豆卵磷脂(A1:1%;A2:2%;A3:4%;A4:5%;A5:6%;A6:8%)替代Tris-柠檬酸-葡萄糖基础稀释液(B组)中的卵黄(20%)进行猪精液冷冻保存试验。冷冻-解冻后... 详细信息

为探究大豆卵磷脂高压均质(HPH)处理对猪精液冷冻保存的影响,用6个浓度的经高压均质处理的大豆卵磷脂(A1:1%;A2:2%;A3:4%;A4:5%;A5:6%;A6:8%)替代Tris-柠檬酸-葡萄糖基础稀释液(B组)中的卵黄(20%)进行猪精液冷冻保存试验。冷冻-解冻后分别对精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性进行质量检测,同时利用各种试剂盒对解冻后精子的抗氧化指标、DNA完整率和凋亡指标进行检测。结果显示,当高压均质大豆卵磷脂浓度为5%时,精子活力、活率、质膜完整率和顶体完整率最高,分别为67.15%、62.54%、55.21%和52.96%(P<0.05);冻后精子线粒体完整率和DNA完整率最高,为68.61%和64.39%(P<0.05);凋亡率最低,为23.31%(P<0.05);活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)最低,分别为337.59 U/m L和2.01 nmol/L(P<0.05)。当添加6%的大豆卵磷脂时超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平最高,分别为74.65 U/m L和246.92 U/L(P<0.05)。结果表明,利用5%高压均质大豆卵磷脂替代鸡蛋卵黄对猪精液冷冻保存具有良好的效果,能提高精子冻后质量、功能完整性和抗氧化性。

关键词：高压均质大豆卵磷脂猪精液冷冻

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五种糖类对犬精液冷冻保存效果的研究

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湖北畜牧兽医 2020年第6期41卷 10-13页

作者：孙玲伟戴建军吴彩凤张树山张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

选取8只身体健康、性欲旺盛的比格公犬,采集其精液,对鲜精进行质量检测,主要包括颜色、射精量、精子活率、活力和pH。选取精子活率达到70%以上犬精液用于后续精液冷冻试验。分别将含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和海藻糖的精液稀释液与... 详细信息

选取8只身体健康、性欲旺盛的比格公犬,采集其精液,对鲜精进行质量检测,主要包括颜色、射精量、精子活率、活力和pH。选取精子活率达到70%以上犬精液用于后续精液冷冻试验。分别将含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和海藻糖的精液稀释液与精液按照1∶2的比例进行稀释。经冷冻解冻后,进行活率、活力、质膜完整性和顶体完整性的精子质量检测。通过对新鲜精液进行品质检测,结果显示5只合格用犬的平均射精量为2.85 mL,密度为2.01×10~8个/mL,pH为6.56。含有果糖的冷冻稀释液中精子活率和活力最高,分别达59.90%和54.00%;其次是添加葡萄糖和乳糖的稀释液中活率较高,分别为59.21%和56.73%,且两组稀释液中精子解冻后活力均为52.00%。进一步评估精子解冻后质膜完整率,结果显示葡萄糖和果糖组显著高于其他组,分别达48.73%和49.52%;而蔗糖添加组精子质膜完整率最低,为42.21%。稀释液中添加果糖的精子解冻后顶体完整率显著高于其他组,而添加蔗糖组顶体完整率最低。在比格犬的精液冷冻保存中,添加果糖的冷冻稀释液能显著提高精子的活率和活力,从而达到提高冻精质量的效果。

关键词：犬精液冷冻冷冻保护剂糖类

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梅山猪耳成纤维细胞系的建立及生物学特性分析

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上海农业学报 2020年第1期36卷 82-87页

作者：张宏丽葛雷吴彩凤张树山张德福戴建军孙玲伟上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106

以梅山猪耳缘组织为研究材料,采用组织块培养法建立了梅山猪耳成纤维细胞系,并对所建细胞系进行生物学特性研究。结果表明:所建立的梅山猪耳成纤维细胞系生长态势良好,冷冻前后的平均细胞存活率分别为95.21%、90.08%,解冻后细胞的生长... 详细信息

以梅山猪耳缘组织为研究材料,采用组织块培养法建立了梅山猪耳成纤维细胞系,并对所建细胞系进行生物学特性研究。结果表明:所建立的梅山猪耳成纤维细胞系生长态势良好,冷冻前后的平均细胞存活率分别为95.21%、90.08%,解冻后细胞的生长曲线呈“S”型;细菌、真菌和支原体3类微生物检测结果均为阴性,细胞没有受到微生物的污染;细胞中期染色体二倍体(2n=38)占主体约为92.31%,达到了建立成纤维细胞系的要求;苹果酸脱氢同工酶和乳酸脱氢同工酶电泳结果表明,该细胞系没有被其他细胞污染,细胞纯度较高;绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染耳成纤维细胞,5个细胞系的阳性率为45.23%—67.32%。经G418筛选后,各个细胞系均能有效形成单克隆集落。本研究中梅山猪成纤维细胞系的建立使梅山猪种质资源在细胞水平得到有效保存,并可为其他动物成纤维细胞系的建立以及种质资源保存提供参考。

关键词：梅山猪耳成纤维细胞生物学特性

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成年克隆猪肺脏差异蛋白的鉴定与功能分析

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上海农业学报 2020年第4期36卷 65-70页

作者：张树山戴建军吴彩凤孙玲伟韩雪峻姜红菊张德福上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海201106 上海种猪工程技术研究中心上海201302

分别采集成年克隆猪和正常繁殖猪(对照)的肺脏样品,利用双向电泳-质谱体系和Western blot方法的比较蛋白质组学技术对其蛋白进行分离、鉴定和验证,并结合生物信息学手段对相关差异蛋白进行功能分析,研究体细胞核移植(即克隆)操作在蛋白... 详细信息

分别采集成年克隆猪和正常繁殖猪(对照)的肺脏样品,利用双向电泳-质谱体系和Western blot方法的比较蛋白质组学技术对其蛋白进行分离、鉴定和验证,并结合生物信息学手段对相关差异蛋白进行功能分析,研究体细胞核移植(即克隆)操作在蛋白质水平上对克隆猪肺脏发育的影响。结果表明:体细胞核移植操作对克隆猪肺脏的发育有较大影响。与对照猪相比,克隆猪肺脏蛋白共有26个差异蛋白,其中半胱天冬酶凋亡前衔接蛋白、增殖细胞核抗原和核糖-5-磷酸异构酶等22个为上调蛋白,纤维蛋白原γ链、纤维蛋白原β链和血红蛋白α亚基等4个为下调蛋白,主要涉及抗氧化活性、翻译调节和催化活性等重要功能。

关键词：猪体细胞核移植肺脏比较蛋白质组学

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