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中国药理学通报 2011年第6期27卷 760-763页

作者：鲁岚董杨施建蓉吴大正上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中医药大学上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学教学实验中心上海201203

目的探讨橘红素联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人胃癌AGS细胞增殖的作用及其机制。方法采用MTT法观察5-Fu和橘红素联合5-Fu对AGS胃癌细胞增殖作用;流式细胞仪检测橘红素联合5-Fu对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素联合5-Fu对p53和p21蛋... 详细信息

目的探讨橘红素联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人胃癌AGS细胞增殖的作用及其机制。方法采用MTT法观察5-Fu和橘红素联合5-Fu对AGS胃癌细胞增殖作用;流式细胞仪检测橘红素联合5-Fu对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素联合5-Fu对p53和p21蛋白表达的影响。结果 5-Fu可呈剂量依赖地抑制人AGS胃癌细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),橘红素联合5-Fu可明显增强5-Fu对AGS胃癌细胞增殖的抑制作用,与5-Fu组比较差异有统计学意义(P<0.01);橘红素联合5-Fu作用于AGS细胞,S期细胞百分比明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);橘红素联合5-Fu可上调p53和p21蛋白的表达,与5-Fu组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论橘红素联合5-Fu可增强5-Fu抑制人AGS胃癌细胞的增殖作用,主要机制可能是通过上调p53和p21蛋白,使细胞阻滞于S期。

关键词：橘红素 5-氟尿嘧啶胃癌增殖细胞周期 p53 p21

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鼓槌石斛对小鼠非增殖性糖尿病视网膜病变的改善作用及其机制研究

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中草药 2016年第11期47卷 1908-1913页

作者：余增洋盛雨辰周玲玉陆宾季莉莉上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室中药标准化教育部重点实验室上海201203 上海中医药大学药物安全评价研究中心上海201203

目的观察鼓槌石斛乙醇提取物（ethanol extract of Dendrobium chrysotoxum，EEDC）对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠非增殖性糖尿病视网膜病变（NPDR）的改善作用及其机制。方法采用STZ诱导小鼠发生糖尿病,进而建立糖尿病并发症NPD... 详细信息

目的观察鼓槌石斛乙醇提取物（ethanol extract of Dendrobium chrysotoxum，EEDC）对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠非增殖性糖尿病视网膜病变（NPDR）的改善作用及其机制。方法采用STZ诱导小鼠发生糖尿病,进而建立糖尿病并发症NPDR实验动物模型,再给予EEDC进行干预。采用视网膜组织伊文思蓝渗漏实验观察NPDR小鼠中血-视网膜屏障（BRB）的破坏情况;采用real-time PCR（RT-PCR）检测视网膜组织中白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF-α）及早期生长反应因子（Egr-l）、组织因子（TF）、纤溶酶原激活物抑制剂l（Serpine l）的基因表达;进一步采用酶联免疫实验（ELISA）检测血清中IL-1β、IL-6、TNF-α及TF、Serpine l的量。结果与对照组相比,模型组小鼠视网膜组织伊文思蓝渗漏量明显增加,EEDC能够减少视网膜组织伊文思蓝渗透量;EEDC能够显著降低模型小鼠视网膜组织中增加的IL-1β、IL-6、TNF-α及TF、Serpine l的基因表达;EEDC能够明显下调模型小鼠血清中增加的IL-1β、IL-6、TNF-α及TF、Serpine l的量。结论 EEDC具有改善STZ诱导小鼠NPDR的作用,其机制为通过抑制NPDR小鼠视网膜和血清中增加的炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α以及与凝血/纤溶相关基因TF、Serpine l的基因表达,缓解BRB的破坏,从而发挥改善NPDR的作用。

关键词：鼓槌石斛糖尿病非增殖性糖尿病视网膜病变血视网膜屏障炎性因子

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HILIC测定三七片中三七素的含量

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中国中药杂志 2015年第13期40卷 2594-2597页

作者：鞠政财何纯勇刘青杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的：建立三七片中三七素的HILIC含量测定方法,对不同厂家不同批次的三七片质量进行分析。方法：Thermo HILIC色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为0.1%H3PO4-乙腈（40∶60）等度洗脱;流速1 m L·min-1;柱温25℃;检测波长21... 详细信息

目的：建立三七片中三七素的HILIC含量测定方法,对不同厂家不同批次的三七片质量进行分析。方法：Thermo HILIC色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为0.1%H3PO4-乙腈（40∶60）等度洗脱;流速1 m L·min-1;柱温25℃;检测波长213 nm。结果：三七素在3.6～460 mg·L-1呈良好的线性关系。不同厂家不同批次的三七片中三七素质量分数为1.60～4.31 mg·g-1。结论：该方法操作简便、稳定易行、可控性强、重复性好、结果准确,可用于三七药材及其相关制剂中止血活性成分三七素的含量测定,为其质量评价提供了参考。

关键词：亲水作用色谱三七片三七素含量

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大鼠灌胃菊三七生成吡咯蛋白加合物的药代动力学研究

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药学学报 2020年第3期55卷 473-477页

作者：陈岩王汛江熊芬王蔚倩杨莉熊爱珍王长虹王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

近年来,误服菊三七引起肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome,HSOS)的案例逐年增多,引起国内外的广泛关注。菊三七含大量吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs),经肝脏代谢活化生成吡咯-蛋白加合物(pyrrole... 详细信息

近年来,误服菊三七引起肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome,HSOS)的案例逐年增多,引起国内外的广泛关注。菊三七含大量吡咯里西啶生物碱(pyrrolizidine alkaloids,PAs),经肝脏代谢活化生成吡咯-蛋白加合物(pyrrole-protein adducts,PPAs)。本文首先利用SD雄性大鼠单次灌胃不同剂量的菊三七醇提物(0.0625、0.25、0.5、2.0和4.0 g·kg-1)后,于2、12、24和48 h眼眶静脉丛取血,并48 h后异氟烷麻醉取肝,用于苏木精-伊红染色,进行肝组织病理分析,考察不同剂量菊三七醇提物与PPAs生成量及菊三七肝毒性的关系。此外,利用SD雄性大鼠单次灌胃0.25和0.5 g·kg-1菊三七醇提物后,于不同的时间点(10、20和30 min、1、2、4、6、12、24和48 h)眼眶静脉丛取血,进行了不同剂量的PPAs的药代动力学研究。实验方案经上海中医药大学动物实验伦理委员会批准(PZSHUTCM190912019)。采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)检测血清中PPAs含量,并用PK Solutions 2TM软件的非房室模型进行拟合求算药动学参数。结果表明,PPAs含量随菊三七给药剂量增加呈剂量依赖性,且与肝损伤程度相关;PPAs在大鼠体内的消除率随着给药剂量的增加明显减慢。PPAs可作为PAs毒性标志物,其含量的高低及清除的快慢可为PAs减毒策略的开发提供参考。

关键词：菊三七吡咯里西啶生物碱肝窦阻塞综合征吡咯蛋白加合物药代动力学

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山姜素激活孕烷X受体和上调CYP3A4 mRNA转录的研究

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中国药理学通报 2012年第6期28卷 761-763页

作者：窦薇丁丽丽张晶晶王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

目的探讨山姜素能否通过活化孕烷X受体(PXR)诱导CYP3A4的转录表达及对CYP3A4 mRNA的实际诱导作用。方法在人结肠癌LS174T细胞中,用瞬时共转染报告基因实验研究山姜素(1～50μmol.L-1)对PXR介导的CYP3A4基因的转录激活;用荧光定量RT-PCR... 详细信息

目的探讨山姜素能否通过活化孕烷X受体(PXR)诱导CYP3A4的转录表达及对CYP3A4 mRNA的实际诱导作用。方法在人结肠癌LS174T细胞中,用瞬时共转染报告基因实验研究山姜素(1～50μmol.L-1)对PXR介导的CYP3A4基因的转录激活;用荧光定量RT-PCR方法检测其对CYP3A4 mRNA的实际诱导。结果 10μmol.L-1浓度山姜素能够通过活化PXR诱导CYP3A4的转录(1.63倍);10和20μmol.L-1山姜素能够明显上调CYP3A4 mRNA(2.28倍和1.65倍)的表达。结论 PXR途径也许是山姜素诱导CYP3A4基因表达的调控因素之一。

关键词：孕烷X受体 CYP3A4 共转染 mRNA 调节山姜素

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甜橙黄酮对人胃癌AGS细胞增殖和凋亡的作用及其机制研究

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中国中药杂志 2011年第6期36卷 790-794页

作者：董杨季光曹爱丽施建蓉石海莲谢建群吴大正上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学教学实验中心上海201203 上海中医药大学脾胃病研究所上海200032

目的:探讨甜橙黄酮对人胃癌AGS细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法:采用MTT法观察甜橙黄酮对AGS胃癌细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测甜橙黄酮对细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI标记定量检测细胞凋亡率,DNA片段化分析进一步验证甜... 详细信息

目的:探讨甜橙黄酮对人胃癌AGS细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法:采用MTT法观察甜橙黄酮对AGS胃癌细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测甜橙黄酮对细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI标记定量检测细胞凋亡率,DNA片段化分析进一步验证甜橙黄酮对细胞凋亡的作用;Hoechst 33342染色后倒置荧光显微镜观察凋亡细胞形态;Western blot检测对p21和p53蛋白表达的影响。结果:甜橙黄酮可明显抑制AGS胃癌细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性;甜橙黄酮可阻滞细胞于G2/M期和增加AGS胃癌细胞凋亡率,并随剂量增大作用增强;60μmol.L-1甜橙黄酮作用48 h产生凋亡特有的梯形条带;Hoechst 33342染色观察到甜橙黄酮给药组出现细胞核浓缩、边缘化以及凋亡小体等细胞凋亡的形态特征;甜橙黄酮可呈剂量依赖地增强p21和p53蛋白表达。结论:甜橙黄酮可显著抑制人AGS胃癌细胞的增殖,使细胞阻滞于G2/M期,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与上调p21和p53蛋白有关。

关键词：甜橙黄酮胃癌增殖凋亡

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葎草药材的质量标准研究

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中国中药杂志 2014年第20期39卷 3986-3990页

作者：谢凡吴迎春李医明徐红王瑞王峥涛上海中医药大学中药学院上海201203 中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

为建立葎草药材的质量标准，参照《中国药典》2010年版附录相关方法，对葎草药材的水分、灰分进行测定；以木犀草苷和大波斯菊苷为指标成分，采用薄层色谱法进行定性鉴别，采用高效液相色谱法进行含量测定。结果表明葎草的显微鉴别特征... 详细信息

为建立葎草药材的质量标准，参照《中国药典》2010年版附录相关方法，对葎草药材的水分、灰分进行测定；以木犀草苷和大波斯菊苷为指标成分，采用薄层色谱法进行定性鉴别，采用高效液相色谱法进行含量测定。结果表明葎草的显微鉴别特征性强；薄层色谱斑点清晰，分离度好；葎草中含木犀草苷质量分数为0.015%～0.651%（平均值0.148%），含大波斯菊苷质量分数为0.003%～0.118%（平均值0.036%）。所建立的方法操作简便，准确可靠，重复性好，可用于葎草药材的质量控制。

关键词：葎草药材质量标准显微鉴别薄层鉴别含量测定

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芹菜素对细胞色素酶3A4的转录调节及紫杉醇结肠癌LS174T细胞毒性的影响

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国际药学研究杂志 2013年第5期40卷 589-593页

作者：张晶晶窦薇王峥涛上海市复方中药重点实验室上海中医药大学中药研究所上海201203

目的考察芹菜素对细胞色素P450酶3A4(CYP3A4)基因的转录激活和转录诱导作用,对其与化疗药物紫杉醇联合用药中的药物相互作用进行评价。方法在人结肠癌LS174T细胞中,采用瞬时共转染报告基因实验考察芹菜素对人孕烷X受体(PXR)介导的CYP3A... 详细信息

目的考察芹菜素对细胞色素P450酶3A4(CYP3A4)基因的转录激活和转录诱导作用,对其与化疗药物紫杉醇联合用药中的药物相互作用进行评价。方法在人结肠癌LS174T细胞中,采用瞬时共转染报告基因实验考察芹菜素对人孕烷X受体(PXR)介导的CYP3A4的启动子激活作用;半定量和荧光定量PCR方法评价芹菜素对CYP3A4 mRNA的诱导作用;细胞生长抑制实验观察芹菜素对紫杉醇结肠癌细胞毒性的干预作用。结果芹菜素1、10和25μmol/L可剂量依赖性地通过激活PXR而诱导CYP3A4启动子,剂量依赖性地上调CYP3A4 mRNA表达,芹菜素25μmol/L能够显著增强紫杉醇的结肠癌细胞毒性。结论芹菜素可能会诱发潜在的药物相互作用,增强药物毒性,其对药物相互作用的影响与PXR调控途径无关。

关键词：孕烷X受体细胞色素P450酶3A4 药物相互作用紫杉醇芹菜素

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胆宁片对菊三七所致肝窦阻塞综合征的保护作用

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药学学报 2019年第3期54卷 494-501页

作者：陆龙会张芳詹常森熊爱珍杨莉王峥涛上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中医药大学交叉科学研究院上海201203 上海和黄药业有限公司上海201401

近年来,因误服菊三七所导致的肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome, HSOS)引起了国内外的广泛关注。本文研究中药复方胆宁片对菊三七所致HSOS病理症状的缓解作用,并探讨其作用机制。实验方案经上海中医药大学动物... 详细信息

近年来,因误服菊三七所导致的肝窦阻塞综合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome, HSOS)引起了国内外的广泛关注。本文研究中药复方胆宁片对菊三七所致HSOS病理症状的缓解作用,并探讨其作用机制。实验方案经上海中医药大学动物实验伦理委员会批准,所有程序均严格按照动物使用和护理的伦理原则进行。连续灌胃菊三七醇提物(1 g·kg-1) 40天造成小鼠HSOS损伤,并设胆宁片保护组(每日灌胃胆宁片3 g·kg-1和菊三七醇提物1 g·kg-1)和空白对照组。结果表明,胆宁片对菊三七所致HSOS有明显保护作用。胆宁片保护组血清转氨酶活性及总胆红素和胆汁酸含量均显著下降,中央静脉内皮损伤、内皮出血、肝窦出血及内皮纤维化等典型HSOS病变均有所缓解。进一步检测了纤维化相关指标,发现与HSOS小鼠比较,胆宁片保护组中肝脏羟脯氨酸含量、α-平滑肌肌动蛋白、I型胶原、III型胶原、金属基质蛋白酶2和9的基因表达水平均显著降低;胆宁片保护组中肝脏磷酸化Smad3 (p-Smad3)的表达及血清转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)含量亦显著低于HSOS损伤组。此外,胆宁片保护组肝脏肿瘤坏死因子-α和白介素-1β的基因表达水平也有所降低。结果表明,胆宁片对菊三七所致HSOS的保护作用与抑制TGF-β/p-Smad3信号通路及炎症信号通路的激活有关,为临床上应用胆宁片治疗HSOS提供了理论依据。

关键词：胆宁片菊三七吡咯里西啶生物碱肝窦阻塞综合征肝纤维化

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肉蔻五味丸抗抑郁作用及机制研究

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中国临床药理学与治疗学 2016年第5期21卷 514-519页

作者：王婷婷石海莲吴辉张蓓蓓黄菲吴晓俊上海市复方中药重点实验室暨上海中医药大学中药研究所上海201203

目的:探讨肉蔻五味丸的抗抑郁作用及其作用机制,为临床用药提供依据。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组(control)、模型组(model)、盐酸氟西汀(fluoxetine 10 mg/kg)阳性药组、肉蔻五味丸低剂量(rk 0.2 g/kg)组、肉蔻五味丸高剂... 详细信息

目的:探讨肉蔻五味丸的抗抑郁作用及其作用机制,为临床用药提供依据。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组(control)、模型组(model)、盐酸氟西汀(fluoxetine 10 mg/kg)阳性药组、肉蔻五味丸低剂量(rk 0.2 g/kg)组、肉蔻五味丸高剂量(rk0.5 g/kg)组,给予慢性轻度不可预见性加孤养刺激建立抑郁模型,建模同时灌胃给予小鼠药物治疗。给药五周后,进行行为学检测(强迫游泳实验、悬尾实验和高架十字迷宫实验);LC-MS/MS法检测海马内5-羟色胺(5-HT)等神经递质含量;q PCR法检测海马内5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)、5-羟色胺7受体(5-HT7R)、GABAA型受体(GABAAR)、GABAB型受体(GABABR)、神经生长因子(NGF)和胶质细胞源神经营养因子(GDNF)基因表达;ELISA法检测小鼠血清内促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(COR)的含量。结果:低剂量肉蔻五味丸有效减少慢性应激导致的小鼠游泳和悬尾不动时间的增加(P<0.05),降低模型组小鼠进入高架中央区活动时间(P<0.05),逆转小鼠海马5-HT(P<0.001)、5-HT/5-HIAA(P<0.001)的降低以及GABABR(P<0.01)、NGF(P<0.01)、GDNF(P<0.001)基因表达的降低(P<0.05),并且降低血清中ACTH的水平(P<0.05)。结论:肉蔻五味丸低剂量具有抗抑郁作用,其机制可能与提高抑郁小鼠海马5-HT含量、GABABR、NGF和GDNF基因表达以及降低血清中ACTH的水平有关。

关键词：慢性轻度不可预见性应激肉蔻五味丸行为学神经递质神经递质受体神经营养因子促肾上腺皮质激素

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