检索结果-内蒙古大学图书馆

肿瘤 2008年第4期28卷 282-287页

作者：章莉郑大利黄健韩泽广华东理工大学生物工程学院生物化学系上海200237 上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家重点实验室培育基地国家人类基因组南方研究中心

目的:研究HBx基因对肝癌细胞Huh7中基因表达的影响,为探讨HBx在肝癌发生发展中的分子机制提供依据。方法:以pcDNA3.1b质粒为载体,将HBx转入Huh7细胞中,同时将pcDNA3.1b作空白对照。用Western印迹法证实基因转染成功。应用Affymetrix公... 详细信息

目的:研究HBx基因对肝癌细胞Huh7中基因表达的影响,为探讨HBx在肝癌发生发展中的分子机制提供依据。方法:以pcDNA3.1b质粒为载体,将HBx转入Huh7细胞中,同时将pcDNA3.1b作空白对照。用Western印迹法证实基因转染成功。应用Affymetrix公司的人类全基因组寡核苷酸基因芯片分析转染HBx基因前后,Huh7细胞的基因表达谱。随机选择转染前后有明显差异的6个基因(3个上调,3个下调),用荧光定量PCR技术进行验证。结果:从基因芯片结果分析中发现,与对照组相比,HBx转染后Huh7细胞中明显上调的基因有88个,下调的基因有111个,这些差异基因的功能涉及多个方面。结论:HBx基因对肝癌细胞的影响是双向的,既有转录激活的作用,同时又有转录抑制的功能。这些数据对于理解HBx基因在肝癌发生发展中的作用具有重要的参考意义。

关键词：癌肝细胞转录激活因子类寡核苷酸序列分析 HBx基因

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肝癌相关基因DLK1转基因小鼠的构建与鉴定

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中华消化杂志 2008年第5期28卷 310-313页

作者：黄丽钰王克生韩泽广张新上海交通大学医学院附属瑞金医院血液病研究所 200025 上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家重点实验室培育基地国家人类基因组南方研究中心

目的构建并鉴定肝脏特异性表达的DLKl转基因小鼠.方法通过基因重组方法,将小鼠DLK1 cDNA片段置于小鼠白蛋白基因增强子和启动子序列下游,构建肝脏特异性表达的DLKl重组质粒,酶切重组质粒得到转基因片段,转基因在体外进行表达鉴定后,... 详细信息

目的构建并鉴定肝脏特异性表达的DLKl转基因小鼠.方法通过基因重组方法,将小鼠DLK1 cDNA片段置于小鼠白蛋白基因增强子和启动子序列下游,构建肝脏特异性表达的DLKl重组质粒,酶切重组质粒得到转基因片段,转基因在体外进行表达鉴定后,显微注射获得DLK1转基因首建小鼠,对首建小鼠进行传代,利用F1代小鼠进行DLK1转基因表达的鉴定.结果逆转录(RT)-PCR和细胞免疫荧光显示,转基因DLK1片段可在小鼠肝癌细胞系Hep1-6中表达.RT-PCR和免疫组化结果显示,DLK1在F1代成年转基因小鼠肝脏中特异性表达.结论成功构建了肝脏特异性表达的DLK1转基因小鼠.

关键词：肝肿瘤基因表达鼠,转基因

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肝细胞癌中转录因子E2F7对Wnt/β-catenin信号通路活性的影响

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中国生物化学与分子生物学报 2014年第6期30卷 565-570页

作者：翟杨杨卢大儒韩泽广邓庆复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室现代人类学教育部重点实验室上海200433 上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家重点实验室培育基地国家人类基因组南方研究中心上海201203

探讨肝细胞癌(HCC)中非典型性E2F家族成员E2F7在肝癌细胞生长、分化中的作用及可能涉及的分子机制.本研究运用实时荧光定量PCR检测38例原发性肝细胞癌及对应的癌旁组织中E2F7基因mRNA的表达情况;分别通过基因过表达和RNA干扰技术上调或... 详细信息

探讨肝细胞癌(HCC)中非典型性E2F家族成员E2F7在肝癌细胞生长、分化中的作用及可能涉及的分子机制.本研究运用实时荧光定量PCR检测38例原发性肝细胞癌及对应的癌旁组织中E2F7基因mRNA的表达情况;分别通过基因过表达和RNA干扰技术上调或下调E2F7基因表达,并运用实时荧光定量PCR和Western印迹检测肝癌细胞株MHCC-H中β-catenin及其靶基因cmyc的表达情况;双荧光素酶报告基因系统检测E2F7对Wnt/β-catenin信号通路活性的影响;核浆分离实验检测过表达E2F7基因对β-catenin入核的影响;免疫共沉淀实验检测异位表达E2F7与内源β-catenin的相互作用.结果显示,肝细胞癌组织中E2F7基因的表达量显著高于相应的癌旁组织(P<0.001);转录因子E2F7可与β-catenin相互作用并促进β-catenin进入细胞核.转录因子E2F7可以促进Wnt/β-catenin信号通路的活性.

关键词：转录因子E2F7 肝细胞癌 Wnt β-catenin信号通路

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ING5在肝癌中表达的研究

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胃肠病学 2010年第2期15卷 86-89页

作者：路美玲陈斐王勤婉韩泽广张新华东理工大学生物工程学院 200237 上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家重点实验室培育基地国家人类基因组南方研究中心

背景：生长抑制因子（ING）家族基因对多种肿瘤的发生具有抑制作用。目的：研究ING5基因在肝癌发生、发展中的作用。方法：构建表达ING5的真核和原核质粒，制备ING5多克隆抗体。以实时荧光定量RT-PCR检测肝癌组织中ING家族基因mRNA表达... 详细信息

背景：生长抑制因子（ING）家族基因对多种肿瘤的发生具有抑制作用。目的：研究ING5基因在肝癌发生、发展中的作用。方法：构建表达ING5的真核和原核质粒，制备ING5多克隆抗体。以实时荧光定量RT-PCR检测肝癌组织中ING家族基因mRNA表达以及肝癌组织和肝癌细胞株中ING5mRNA表达，分别以蛋白质印迹法和免疫组化染色检测肝癌细胞株和肝癌组织中ING5蛋白表达。结果：肝癌组织中ING家族基因mRNA表达均下调。肝癌组织和肝癌细胞株中ING5mRNA和蛋白表达均下调。结论：ING5在肝癌中表达下调．对其发生、发展可能起抑制作用。

关键词：基因肿瘤抑制 ING5 肝肿瘤细胞系肿瘤

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PNMA5基因在肝癌组织中的表达及功能研究

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肿瘤 2008年第11期28卷 911-915页

作者：滕小梅邓庆韩泽广黄健上海交通大学附属瑞金医院上海血液学研究所上海200025 上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家重点实验室培育基地国家人类基因组南方研究中心上海201203 苏州大学附属第一人民医院心血管外科苏州215006

目的:研究功能未知基因PNMA5在肝癌组织中的表达及其与肝癌细胞生长的关系;方法:利用肝癌基因表达谱数据研究发现PNMA5基因在肝癌组织中高表达。采用RT-PCR及实时荧光定量-PCR(real-time fluorescemt quantitative PCR,RFQ-PCR)方法检测... 详细信息

目的:研究功能未知基因PNMA5在肝癌组织中的表达及其与肝癌细胞生长的关系;方法:利用肝癌基因表达谱数据研究发现PNMA5基因在肝癌组织中高表达。采用RT-PCR及实时荧光定量-PCR(real-time fluorescemt quantitative PCR,RFQ-PCR)方法检测PNMA5在人类正常组织以及肝癌组织和癌旁组织中的表达水平;利用RNA干扰技术沉默肝癌细胞株(Focus和PLC)内PNMA5基因的表达;CCK-8实验定量分析内源性PNMA5基因被沉默前后的Focus和PLC细胞生长曲线的变化。结果:在14种人正常组织中,PNMA5只在睾丸、卵巢和脑组织中高表达,PNMA5基因在42%(5/12)的肝癌组织中有明显的上调(与癌旁组织比大于2倍以上,P<0.05)。沉默肝癌细胞株Focus和PLC中内源性PNMA5基因表达后,2种肝癌细胞的生长均受到明显的抑制(P<0.01),同时,从G1期进入S期细胞明显减少(P<0.01)。结论:PNMA5在维持肝癌细胞恶性表型过程中可能起到重要的作用,可能是一个新的肿瘤-睾丸相关基因。进一步研究其功能有可能发现肝癌发病的新机制,成为肝癌治疗的新靶点。

关键词：肝肿瘤实验性 RNA 小分子干扰基因 PNMA5

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马尔尼菲青霉环腺苷酸依赖性蛋白激酶基因的功能研究

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复旦学报（自然科学版） 2010年第3期49卷 280-286,F0002页

作者：夏志强陶菊红任双喜复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系上海200433 上海市疾病与健康基因组学实验室一省部共建国家重点实验室培育基地国家人类基因组南方研究中心上海201203

从本实验室早期建立的马尔尼菲青霉cDNA文库中,筛选到了一个编码环腺苷酸依赖性蛋白激酶(cAMP dependent protein kinase)基因cdpk.为了研究这个基因的功能,构建了相应的RNA干扰表达盒(利用gus基因将cdpk基因313 bp的反向重复序列片段隔... 详细信息

从本实验室早期建立的马尔尼菲青霉cDNA文库中,筛选到了一个编码环腺苷酸依赖性蛋白激酶(cAMP dependent protein kinase)基因cdpk.为了研究这个基因的功能,构建了相应的RNA干扰表达盒(利用gus基因将cdpk基因313 bp的反向重复序列片段隔开,并由受木糖诱导的xylP启动子来调控RNA干扰),通过根癌农杆菌介导转化到马尔尼菲青霉中.对转化子的研究发现,cdpk基因的沉默对菌体细胞的形态、孢子的萌发过程无明显影响,但是却减弱了菌落的生长速度、降低了红色色素的产量、并使马尔尼菲青霉几乎丧失了产孢功能.这暗示着cdpk基因对该青霉孢子的形成是必需的.

关键词：马尔尼菲青霉 RNAi 环腺苷酸依赖性蛋白激酶产孢

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PEG10基因在肝癌组织中高表达的分子机制及其功能的研究

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肿瘤 2013年第1期33卷 28-35页

作者：林昀张云丽胡昕邓庆李琦高勇滕小梅韩泽广黄健同济大学附属东方医院肿瘤科上海200120 上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家重点实验室培育基地国家人类基因组南方研究中心上海201203 苏州大学附属第一人民医院心血管外科江苏苏州215006 生物芯片上海国家工程研究中心上海201203

目的:探讨印迹基因父系表达基因10(paternally expressed gene10,PEG10)在肝癌组织中高表达的分子机制,及其对肝癌细胞生长的影响。方法:采用半定量RT-PCR法检测30例肝癌患者术后肝癌和癌旁组织中以及15株肝癌细胞株中PEG10基因的表达水... 详细信息

目的:探讨印迹基因父系表达基因10(paternally expressed gene10,PEG10)在肝癌组织中高表达的分子机制,及其对肝癌细胞生长的影响。方法:采用半定量RT-PCR法检测30例肝癌患者术后肝癌和癌旁组织中以及15株肝癌细胞株中PEG10基因的表达水平;甲基化特异PCR(methylation specific PCR,MSP)技术检测17例PEG10基因高表达的肝癌和癌旁组织中PEG10基因启动子区域CpG岛甲基化状态的差异,及其与PEG10基因表达水平的关系。采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术沉默肝癌QGY-7703细胞中PEG10基因的表达,并观察对细胞克隆形成能力的影响。结果:与癌旁组织相比,PEG10基因在67%(20/30)的肝癌组织中表达水平明显提高,在15株肝癌细胞株中均有表达。PEG10基因CpG岛2在29.4%(5/17)肝癌组织中显示有肝癌特异性低甲基化,同时采用亚硫酸氢盐测序验证了PEG10基因CpG岛2在肝癌病例中总体低甲基化的状态。与对照组相比,短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰PEG10表达后,肝癌细胞株QGY-7703的克隆数目明显减少(P<0.05)。结论:印迹相关基因PEG10在肝癌中高表达,可能与其启动子区域CpG岛2的低甲基化密切相关,沉默PEG10表达可以抑制肝癌细胞的生长,提示PEG10基因可能是一个新的肝癌治疗的药物靶点。

关键词：肝肿瘤 DNA甲基化 PEG10基因

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1号染色体扩增区MEF2D基因在肝细胞癌组织中的表达

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中国实验诊断学 2009年第11期13卷 1570-1572页

作者：廖维甲梅铭惠谢兴旺陈红松张恒辉覃理灵陈谦黄健桂林医学院肝病防治研究所广西桂林541001 北京大学肝病研究所北京100044 上海市疾病与健康基因组学实验室省部共建国家重点实验室培育基地国家人类基因组南方研究中心上海201203

目的探讨1号染色体扩增区基因MEF2D mRNA在正常肝组织、肝癌细胞系及肝细胞癌(HCC)与癌旁组织中的表达并探讨其意义。方法利用逆转录聚合酶链反应方法对正常肝组织、13个肝癌细胞系及40例HCC癌组织与癌旁组织中MEF2D mRNA的表达情况进... 详细信息

目的探讨1号染色体扩增区基因MEF2D mRNA在正常肝组织、肝癌细胞系及肝细胞癌(HCC)与癌旁组织中的表达并探讨其意义。方法利用逆转录聚合酶链反应方法对正常肝组织、13个肝癌细胞系及40例HCC癌组织与癌旁组织中MEF2D mRNA的表达情况进行初步分析。结果MEF2D mRNA在正常肝组织、13个肝癌细胞系及40例HCC癌组织与癌旁组织中均为高表达,其表达阳性率分别为100.0%(2/2)、92.3%(12/13)、95.0%(38/40)和97.5%(39/40)。MEF2D在各组的表达阳性率与-βactin相类似,差异无统计意义,均为P>0.05。结论染色体扩增区域常常存潜在的癌基因,由于染色体具有不稳定性,1号染色体扩增区MEF2D基因非HCC发生的癌基因,MEF2D mRNA高表达与HCC发生、发展无相关性。

关键词：肝细胞癌 MEF2D 1号染色体扩增区表达

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帕金森病致病基因DJ-1的研究

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内科理论与实践 2010年第5期5卷 390-393页

作者：熊慧张雅坤上海人类基因组研究中心省部共建国家重点实验室培育基地-上海市疾病与健康基因组学重点实验室上海201203

帕金森病（Parkinson disease,PD）是一种常见的神经系统退行性变疾病,临床上主要以静止性震颤、肌强直、运动徐缓和姿势平衡障碍等症状为主要特征。尽管PD大部分的病例表现为散发,但是在相当一部分病例（约为10%～15%）中却以孟德尔遗... 详细信息

帕金森病（Parkinson disease,PD）是一种常见的神经系统退行性变疾病,临床上主要以静止性震颤、肌强直、运动徐缓和姿势平衡障碍等症状为主要特征。尽管PD大部分的病例表现为散发,但是在相当一部分病例（约为10%～15%）中却以孟德尔遗传的方式在家族中传递。

关键词：帕金森病基因 DJ-1基因发病机制

来源：评论

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肝癌组织CT抗原基因CSAG1表达及体外对肝癌细胞生长的影响

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中华肿瘤防治杂志 2009年第2期16卷 109-113页

作者：宗伟英邓庆梅铭惠黄健韩泽广华东理工大学生物工程学院生物化学与分子生物学系上海200237 上海市疾病与健康基因组学实验室省部共建国家重点实验室培育基地国家人类基因组南方研究中心上海201203 桂林医学院附属医院肝胆胰外科桂林541001

目的:探讨CSAG1(chondrosar-coma associated gene 1)基因在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞生长增殖的影响,为了解肝癌发生的分子机制奠定理论基础。方法:利用半定量RT-PCR技术检测CSAG1基因在12例肝癌和癌旁组织中的表达差异;RNA干扰... 详细信息

目的:探讨CSAG1(chondrosar-coma associated gene 1)基因在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞生长增殖的影响,为了解肝癌发生的分子机制奠定理论基础。方法:利用半定量RT-PCR技术检测CSAG1基因在12例肝癌和癌旁组织中的表达差异;RNA干扰技术沉默肝癌细胞株(Focus)内CSAG1基因的表达;利用CCK-8、克隆形成实验以及流式细胞仪分别定量分析内源性CSAG1基因被沉默前后的Focus细胞生长曲线、克隆形成能力以及细胞周期的变化。结果:与癌旁组织相比较,CSAG1基因在75%(9/12)肝癌组织中的表达量明显上调;沉默肝癌细胞株Focus中内源性CSAG1基因表达后,Focus细胞的生长明显减慢,克隆形成能力明显降低,S期细胞明显减少。结论:CSAG1可能是一个新的肝癌相关的促进基因,对其进行深入的研究有可能发现肝癌发病的新机制,也有可能发现肝癌治疗的新靶点。

关键词： CSAG1基因肝肿瘤 RNA干扰

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