检索结果-内蒙古大学图书馆

^99Tc^m-Annexin B1探测荷瘤鼠化疗后肿瘤细胞凋亡的实验观察

中华肿瘤防治杂志 2008年第20期15卷 1524-1527,1539页

作者：罗全勇陈泽泉陈立波王芳袁志斌孙树汉陆汉魁朱瑞森上海交通大学附属第六人民医院核医学科上海200233 中国人民解放军第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的:探讨^(99)Tc^m-Annexin B1探测化疗后肿瘤细胞凋亡的潜力与可行性。方法:乳腺癌细胞MDA-MB-435荷瘤小鼠经大剂量(30mg/kg)紫杉醇单次化疗后,注射^(99)Tc^m-Annexin B1,计算化疗后不同时间(0、5、10、15、20和25h)每克肿瘤组织摄取^... 详细信息

目的:探讨^(99)Tc^m-Annexin B1探测化疗后肿瘤细胞凋亡的潜力与可行性。方法:乳腺癌细胞MDA-MB-435荷瘤小鼠经大剂量(30mg/kg)紫杉醇单次化疗后,注射^(99)Tc^m-Annexin B1,计算化疗后不同时间(0、5、10、15、20和25h)每克肿瘤组织摄取^(99)Tc^m-Annexin B1的百分注射剂量率(%ID/g)。肉瘤细胞W256荷瘤大鼠经大剂量(200mg/kg)环磷酰胺单次化疗后24h注射^(99)Tc^m-Annexin B1,对照组荷瘤大鼠注射生理盐水;行SPECT平面显像观察肿瘤摄取情况。结果:乳腺癌荷瘤小鼠化疗后15h,肿瘤摄取^(99)Tc^m-Annexin B1达高峰,由0h的(0.15±0.013)%ID/g上升至(0.22±0.026)%ID/g。肿瘤对^(99)Tc^m-Annexin B1的摄取与肿瘤细胞凋亡指数(AI)具有相关性,r=0.88,P<0.01。W256细胞荷瘤大鼠化疗后24h显像发现,肿瘤对^(99)Tc^m-Annexin B1的摄取较对照荷瘤大鼠显著升高,对照组的肿瘤与非肿瘤摄取比值(T/B)为1.39±0.21,化疗组为2.57±0.43。结论:^(99)Tc^m-Annexin B1对探测化疗后肿瘤细胞凋亡具有潜力与可行性。

关键词：膜联蛋白A5 细胞凋亡疾病模型动物环磷酰胺紫杉酚

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膜联蛋白B2基因的克隆及其真核表达载体的构建

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动物医学进展 2007年第3期28卷 31-33页

作者：王义会闫强王平王凯慧陈明勇中国农业大学动物医学院北京100094 第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

根据GenBank已登录的猪囊尾蚴膜联蛋白B2基因序列,设计合成1对特异性引物,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术从猪囊尾蚴中扩增出膜联蛋白B2基因,将其克隆至pcDNA3.1表达载体上,经酶切鉴定和基因测序表明,目的基因AnnexinB2已正确地... 详细信息

根据GenBank已登录的猪囊尾蚴膜联蛋白B2基因序列,设计合成1对特异性引物,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术从猪囊尾蚴中扩增出膜联蛋白B2基因,将其克隆至pcDNA3.1表达载体上,经酶切鉴定和基因测序表明,目的基因AnnexinB2已正确地整合至表达质粒中,成功构建了膜联蛋白B2基因的真核表达载体。

关键词：膜联蛋白B2基因真核表达载体克隆

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含三联密码AAA的Kozak类似序列特异性增强口蹄疫DNA疫苗的免疫效果

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第10期26卷 915-919页

作者：张秀伟郭瀛军王开宇黄力杨勇军张术陈祖欢王凯慧杨康鹃孙树汉上海第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室吉林省延边大学医院200433 吉林省延边大学医院

目的引入6种不同的Kozak类似序列制备口蹄疫DNA疫苗,比较分析Kozak类似序列中不同碱基组成对口蹄疫DNA疫苗表达水平及免疫效果的影响作用。方法在口蹄疫DNA疫苗抗原编码基因VP1起始位点引入Kozak通用序列及所设计的5种Kozak类似序列(KZ1... 详细信息

目的引入6种不同的Kozak类似序列制备口蹄疫DNA疫苗,比较分析Kozak类似序列中不同碱基组成对口蹄疫DNA疫苗表达水平及免疫效果的影响作用。方法在口蹄疫DNA疫苗抗原编码基因VP1起始位点引入Kozak通用序列及所设计的5种Kozak类似序列(KZ1-KZ6),插入真核表达载体pVAX1,制备口蹄疫DNA疫苗,对6～8周龄BALB/c小鼠进行免疫,用间接ELISA分析实验动物外周血VP1的抗体滴度；同时插入带有绿色荧光蛋白的融合表达载体pEGFP-N1构建6种体外表达质粒,转染HeLa细胞,进行瞬时表达并分析体外表达水平。结果引入含三联密码AAA的Kozak类似序列KZ6的疫苗质粒pKV6接种动物后产生的免疫抗体滴度高于其他组；相应的体外表达质粒pKG6转染HeLa细胞后体外表达水平亦高于其他组。结论含三联密码AAA的Kozak类似序列KZ6的口蹄疫DNA疫苗,能特异性地增强口蹄疫DNA疫苗的表达水平及免疫效果。

关键词：三联密码AAA Kozak类似序列口蹄疫 DNA疫苗表达水平免疫效果

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强直性脊柱炎易感基因的研究进展

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Acta Genetica Sinica 2005年第10期32卷 1108-1114页

作者：陈蕊雯王勇孙树汉段世伟第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室上海200433 上海交通大学Bio-X生命科学研究中心上海200031

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种常见的高度遗传的风湿类疾病。至20世纪70年代以来,越来越多的证据表明HLA-B27是AS最主要的易感基因。然而,全基因组扫描和关联分析等研究发现在HLA以外的区域仍存在AS的易感区域,大量的... 详细信息

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种常见的高度遗传的风湿类疾病。至20世纪70年代以来,越来越多的证据表明HLA-B27是AS最主要的易感基因。然而,全基因组扫描和关联分析等研究发现在HLA以外的区域仍存在AS的易感区域,大量的证据显示在HLA区内外有许多基因与AS的发病有关。文章主要综述了与AS相关的易感基因以及它们的研究现状。

关键词：强直性脊柱炎易感性全基因组扫描关联分析连锁分析

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肝组织特异表达人核受体nr5a2转基因小鼠的构建(英文)

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Acta Genetica Sinica 2005年第12期32卷 1241-1247页

作者：王水良杨桦谢幼华汪垣厉建中王龙王铸钢傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室中国科学院上海生命科学院生化和细胞生物研究所上海200031 上海南方模式生物研究中心上海201203

人乙肝病毒增强子ⅡB1结合因子(hB1F)系FtzF1(NR5A)亚家族的新成员。经基因重组法将人hb1fcDNA置于小鼠白蛋白增强子/启动子序列下游构建成肝特异重组载体,通过原核显微注射将该载体导入小鼠受精卵原核,经注射且状态良好的卵回输至假孕... 详细信息

人乙肝病毒增强子ⅡB1结合因子(hB1F)系FtzF1(NR5A)亚家族的新成员。经基因重组法将人hb1fcDNA置于小鼠白蛋白增强子/启动子序列下游构建成肝特异重组载体,通过原核显微注射将该载体导入小鼠受精卵原核,经注射且状态良好的卵回输至假孕母鼠输卵管。产下仔鼠经PCR和Southernblotting鉴定,同时RTPCR和Westernblotting分析转基因的表达。阳性Founder鼠与正常C57鼠交配以建立转基因纯系小鼠,F1代以PCR法鉴定。结果共获得4只PCR鉴定转基因阳性Founder鼠,其中一只同时经Southernblotting鉴定为阳性。RTPCR和Westernblotting结果显示,外源基因在转基因小鼠的肝组织成功表达。遗传学分析表明,转基因已整合入小鼠基因组并可稳定遗传。

关键词：核受体转基因小鼠肝特异基因表达 NR5A2(hB1F)

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肿瘤坏死因子α基因多态性对强直性脊柱炎发病易感性和临床病变程度的影响(英文)

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中国临床康复 2005年第22期9卷 252-254页

作者：韩星海陈蕊雯段世伟杨波蔡青林懿孙树汉解放军第二军医大学长海医院风湿免疫科上海市200433 解放军第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海市200433 上海交通大学生命科学研究中心中国科学院营养研究所上海市200031

背景:肿瘤坏死因子α基因多态性与强直性脊柱炎发生与发展的关系是近年强直性脊柱炎遗传学研究的热点。目的:探讨肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性对强直性脊柱炎发病易感性和病变程度的影响。设计:病例-对照观察。单位:... 详细信息

背景:肿瘤坏死因子α基因多态性与强直性脊柱炎发生与发展的关系是近年强直性脊柱炎遗传学研究的热点。目的:探讨肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性对强直性脊柱炎发病易感性和病变程度的影响。设计:病例-对照观察。单位:第二军医大学长海医院风湿免疫科。对象:随机选择1999-01/2003-12在第二军医大学长海医院风湿免疫科就诊的强直性脊柱炎患者108例,各对象间均无血缘关系。男女比为5.3∶1;年龄13～71(30±12)岁,根据骶髂关节破坏程度X射线片评估为Ⅰ～Ⅳ级。另从解放军上海血站(长海医院)随机选取100名健康献血者作为对照,年龄19～56(33±9)岁,男女比为4.9∶1,参与者均知情同意。方法:每例参与者取外周血,加乙二胺四乙酸A抗凝后进行肿瘤坏死因子-α基因启动子的聚合酶链反应扩增和纯化;对聚合酶链反应产物测序,并用Chromas1.62软件展示分析DNA测序结果。②以X射线骶髂关节片分级和肿瘤坏死因子α-308位点(G/C)和(G/A)的对应值评估其对疾病程度的影响。主要观察指标:以DNA直接测序法对-238和-308位点进行基因分型,并分析基因类型与疾病临床表现之间的关系。结果:①肿瘤坏死因子α-238G/G基因型和-238G/A基因型:强直性脊柱炎组有106例(98.1%)和2例(1.9%),正常对照组有95例(95.0%)和5例(5.0%),两组间比较无显著性差异。②肿瘤坏死因子α-308.1.1(G/G)基因型和-308.1.2(G/A)基因型:强直性脊柱炎组有89例(82.4%)和19例(17.6%),正常对照组中有85例(85.0%)和14例(14.0%)。两组比较亦无显著性差异。③根据骶髂关节X射线分级判定疾病严重程度与肿瘤坏死因子α-308位点G/G和G/A基因型之间的关系:强直性脊柱炎患者X射线片Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级时,(G/G)型为3/35/40/11例,(G/A)型为1/12/6/0例。两组差异比较意义显著(χ2GMH=4.77,P<0.05)。结论:在观察对象中未发现肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性与强直性脊柱炎发病易感性相关,但根据骶髂关节损害程度X射线分级说明肿瘤坏死因子α基因启动子-308位点的多态性对强直性脊柱炎的严重程度有影响。

关键词：脊柱炎,强直性肿瘤坏死因子多态现象(遗传学) 基因疾病易感性

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癌胚抗原DNA疫苗对大肠癌特异性细胞免疫的激活效果

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消化外科 2005年第3期4卷 181-184页

作者：王中川傅传刚王庆敏何天霖郝立强孙树汉上海市第二军医大学附属长海医院肛肠外科 200433 上海市第二军医大学医学遗传学教研室 200433

目的检测以质粒pIRES为载体构建的带有全序列癌胚抗原(CEA)基因的核苷酸疫苗对机体特异性抗肿瘤免疫反应的激活效果。方法将CEA基因片段连接于真核表达质粒pIRES中,用肌肉注射方法接种核酸疫苗;检测CEA在小鼠肌肉组织中的表达情况及其... 详细信息

目的检测以质粒pIRES为载体构建的带有全序列癌胚抗原(CEA)基因的核苷酸疫苗对机体特异性抗肿瘤免疫反应的激活效果。方法将CEA基因片段连接于真核表达质粒pIRES中,用肌肉注射方法接种核酸疫苗;检测CEA在小鼠肌肉组织中的表达情况及其对小鼠脾细胞CEA特异性细胞免疫反应的激活效果。结果小鼠经肌肉注射质粒后,免疫组化证实该核酸疫苗可在体内有效表达CEA;分子免疫检测显示注射后小鼠特异性淋巴细胞增值反应明显并且伴有自然杀伤细胞NK活性显著增高。结论实验所构建的核酸疫苗pIRESCEA可在体外及小鼠体内高效表达并表现出良好的细胞免疫原性。

关键词：大肠肿瘤 DNA疫苗癌胚抗原

来源：评论

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卡介苗基因组DNA对哮喘小鼠模型过敏性气道炎症的影响

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中国呼吸与危重监护杂志 2005年第5期4卷 352-354,347,i0001页

作者：商艳李强胡振林施柯周凤娟刘忠令孙树汉第二军医大学长海医院呼吸内科上海200433 第二军医大学医学遗传学教研室

目的探讨腹腔注射卡介苗基因组DNA(BCGDNA)对哮喘小鼠模型的影响。方法BALB/c小鼠经鸡卵蛋白(OVA)免疫建立哮喘模型,分别于致敏前、激发时腹腔注射100μgBCGDNA,观察哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸性粒细胞数(EOS),EL... 详细信息

目的探讨腹腔注射卡介苗基因组DNA(BCGDNA)对哮喘小鼠模型的影响。方法BALB/c小鼠经鸡卵蛋白(OVA)免疫建立哮喘模型,分别于致敏前、激发时腹腔注射100μgBCGDNA,观察哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸性粒细胞数(EOS),ELISA检测脾单核细胞(SMNC)培养上清和BALF中白细胞介素4(IL4)、IL5、IL12及γ干扰素(IFNγ)的含量变化,常规病理切片观察肺内炎症情况,ABPAS染色观察杯状细胞增生和黏液分泌情况。结果哮喘小鼠OVA致敏前及激发时腹腔注射BCGDNA后可明显增加BALF和脾单核细胞培养上清中IL12和IFNγ的产生,使IL4和IL5的产生减少,BALF中嗜酸性粒细胞减少,黏液过度分泌明显减轻。结论哮喘小鼠腹腔注射BCGDNA可诱导IL12和IFNγ产生,抑制Th2型细胞反应,减轻哮喘气道炎症。

关键词：卡介苗基因组DNA 哮喘小鼠动物模型过敏性气道炎症

来源：评论

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DNA疫苗诱导的小鼠抗肿瘤特异性细胞免疫和体液免疫

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中国癌症杂志 2005年第4期15卷 309-312页

作者：王中川傅传刚王庆敏何天霖郝立强孙树汉第二军医大学附属长海医院肛肠外科上海200433 第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的:检测以双表达质粒pIRES为载体构建的带有全序列癌胚抗原(CEA)基因和IL-2基因的核苷酸疫苗对机体特异性抗肿瘤免疫反应的激活效果。方法:利用分子生物学技术,将CEA基因片段和IL-2基因片段连接于真核双表达质粒pIRES中,用肌内注射方... 详细信息

目的:检测以双表达质粒pIRES为载体构建的带有全序列癌胚抗原(CEA)基因和IL-2基因的核苷酸疫苗对机体特异性抗肿瘤免疫反应的激活效果。方法:利用分子生物学技术,将CEA基因片段和IL-2基因片段连接于真核双表达质粒pIRES中,用肌内注射方法接种核酸疫苗;检测疫苗在小鼠肌肉组织中的表达情况及其对小鼠脾细胞CEA特异性细胞免疫和体液免疫反应的激活效果。结果:小鼠经肌内注射质粒后,免疫组化证实该核酸疫苗可在体内有效表达CEA分子;免疫检测显示注射后小鼠血清中出现抗CEA抗体,脾细胞IL-4分泌增强,特异性淋巴细胞增值反应明显并伴有自然杀伤细胞NK活性显著增高。结论:实验所构建的核酸疫苗pIRES-CEA,pIRES-IL-2,pIRES-IL-2等可在小鼠体内高效表达并表现出良好的免疫原性。

关键词： DNN疫苗癌胚抗原大肠癌白细胞介素-2

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癌胚抗原与γ-干扰素核酸疫苗对机体特异性细胞免疫的激活作用

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肿瘤防治杂志 2005年第14期12卷 1041-1044页

作者：王中川傅传刚何天霖郝立强王庆敏孙树汉第二军医大学附属长海医院肛肠外科上海200433 第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的检测以双表达质粒pIRES为载体构建的带有全序列癌胚抗原(carcinoembry-onic antigens,CEA)基因和γ-干扰素(interfer-on-γ,IFN-γ)基因的核苷酸疫苗对机体特异性抗肿瘤免疫反应的激活效果。方法利用分子生物学技术,将CEA基因片段和... 详细信息

目的检测以双表达质粒pIRES为载体构建的带有全序列癌胚抗原(carcinoembry-onic antigens,CEA)基因和γ-干扰素(interfer-on-γ,IFN-γ)基因的核苷酸疫苗对机体特异性抗肿瘤免疫反应的激活效果。方法利用分子生物学技术,将CEA基因片段和IFN-γ基因片段连接于真核双表达质粒pIRES中,用肌肉注射方法接种核酸疫苗;检测疫苗在小鼠肌肉组织中的表达及其对小鼠脾细胞CEA特异性细胞免疫反应的激活效果。结果小鼠经肌肉注射质粒后,核酸疫苗可在体内有效表达CEA和IFN-γ分子;小鼠特异性淋巴细胞增殖反应明显增高,并且伴有自然杀伤细胞(natural killercell,NK细胞)活性显著增高,F=15289·67,P<0·001。结论实验所构建的核酸疫苗pIRES-CEA、pIRES-CEA-IFN-γ和pIRES-CEA-IFN-γ等可在小鼠体内高效表达,并表现出良好的细胞免疫原性。

关键词：癌胚抗原/免疫学干扰素Ⅱ型/免疫学杀伤细胞,天然基因表达聚合酶链反应

来源：评论

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