检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验外科杂志 2005年第3期22卷 372-372页

作者：王中川傅传刚何天霖王庆敏孙树汉第二军医大学附属长海医院肛肠外科上海200433 第二军医大学医学遗传学教研室

基因疫苗是把外源基因连接到真核表达质粒载体上,将重组的质粒DNA注射到动物体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体免疫系统引发免疫反应.DNA疫苗制备简便、安全长效、可组建多价疫苗并兼有预防和治疗作用.癌胚抗原(CEA)有一... 详细信息

基因疫苗是把外源基因连接到真核表达质粒载体上,将重组的质粒DNA注射到动物体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体免疫系统引发免疫反应.DNA疫苗制备简便、安全长效、可组建多价疫苗并兼有预防和治疗作用.癌胚抗原(CEA)有一定的抗原性,可作为诱导肿瘤免疫的有效靶抗原[1].B7.1分子可促进多种抗原诱导的免疫反应[2].我们选择编码人全长CEA和B7.1的cDNA构建共表达质粒载体,并检测其在体内、外的表达,为增强CEA基因疫苗的免疫效果进行研究。

关键词： B7.1 免疫反应癌胚抗原 CEA 诱导基因疫苗靶抗原表达基因真核表达质粒载体外源基因

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新型重组膜联蛋白B1的特征及其抗血液凝固活性的比较

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福建医科大学学报 2005年第1期39卷 1-4页

作者：杨湘越兰小鹏朱忠勇颜宏利张毅孙树汉南京军区福州总医院全军医学检验中心(福建医科大学福总临床医学院) 福州350025 第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的　研究毕赤酵母重组膜联蛋白 B1的特征变化 ,比较其和原核表达产物对血细胞凝集与血栓形成过程的影响。　方法　对毕赤酵母重组膜联蛋白 B1行 SDS- PAGE,等电聚焦 ,脱磷酸反应 ,蛋白质 N端氨基酸测序 ,白陶土部分凝血活酶时间 (KPTT... 详细信息

目的　研究毕赤酵母重组膜联蛋白 B1的特征变化 ,比较其和原核表达产物对血细胞凝集与血栓形成过程的影响。　方法　对毕赤酵母重组膜联蛋白 B1行 SDS- PAGE,等电聚焦 ,脱磷酸反应 ,蛋白质 N端氨基酸测序 ,白陶土部分凝血活酶时间 (KPTT)测定及大鼠下腔静脉血栓形成观察。　结果　毕赤酵母重组膜联蛋白 B1显示两条电泳带 ,其中一条带的相对分子质量比原核表达产物大 ,已被磷酸化 ,等电点较理论值低 ,两条带的 N端均携带了来自载体的 4个氨基酸 ,毕赤酵母重组膜联蛋白 B1和大肠杆菌谷胱甘肽转移酶融合膜联蛋白 B1具有明显的抗凝及抑制血栓形成作用。　结论　虽然毕赤酵母重组膜联蛋白 B1的分子特征较原核产物有了明显变化 ,但其抗凝及抑制血栓功能基本未受影响。

关键词：膜联蛋白原核表达产物血液凝固抗凝部分凝血活酶时间 KPTT 白陶土毕赤酵母等电点电泳

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氦氖激光穴位照射后缺氧缺血新生大鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化

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中国临床康复 2005年第23期9卷 196-197页

作者：李宛青陈雪梅吴爱群刘伟刘华郑州师范高等专科学校生命科学系河南省郑州市450044 郑州大学基础医学院人体解剖学教研室河南省郑州市450052 解放军第二军医大学解剖学教研室上海市200433 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所解剖与组织胚胎学系北京市100005 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室河南省郑州市450052

目的:观察缺氧缺血新生大鼠经过氦氖激光穴位照射后脑组织中的活性物质超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化情况。方法:实验于2003-03/11在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室完成。选择30只7d龄健康Wistar大鼠,体质量12～15g,雌雄... 详细信息

目的:观察缺氧缺血新生大鼠经过氦氖激光穴位照射后脑组织中的活性物质超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化情况。方法:实验于2003-03/11在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室完成。选择30只7d龄健康Wistar大鼠,体质量12～15g,雌雄不拘。随机分为3组,即假手术对照组、缺氧缺血组和激光穴位照射组,每组10只。缺氧缺血组与激光穴位照射组动物均制作成缺氧缺血模型,在清醒状态下实施左侧颈总动脉结扎术,术后在室温中恢复1～4h后,置于常压缺氧仓中,通入8mL/L氧气、920mL/L氮气(体积比)的混合气体,2h后将动物取出。缺氧缺血组不加任何治疗。激光穴位照射组于缺氧缺血后第2天,采用氦氖激光照射百会、大椎两穴,功率4mW,光斑直径3mm,每次照射10min,1次/d,同一时间进行,10d为1个疗程,共3个疗程,各疗程间隔2d。百会穴在颅顶正中,大椎穴在C7～T1之间,背部正中。假手术组仅分离左侧颈总动脉,不结扎,不缺氧。各组大鼠常规饲养34d后,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性,比色法测定丙二醛含量。结果:因缺氧缺血对动物造成了伤害,缺氧缺血组死亡3只,激光穴位照射组死亡2只。进入结果分析,假手术对照组、缺氧缺血组和激光穴位照射组分别为10,7和8只。①大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性:缺氧缺血组显著低于假手术对照组和激光穴位照射组[(59.70±4.03)NU/mL,(76.24±2.43)NU/mL,(72.56±5.60)NU/mL,(t=5.03,4.83,P<0.05)]。②大鼠脑组织丙二醛含量:缺氧缺血组显著高于假手术对照组和激光穴位照射组[(267.58±30.55)mmol/L,(99.87±15.48)mmol/L,(135.29±32.76)mmol/L,(t=10.68,8.81,P<0.05)]。结论:氦氖激光穴位照射能提高、诱发缺氧缺血大鼠脑组织中超氧化物歧化酶的生成和活力,降低丙二醛水平。新生大鼠未成熟脑的可塑性较大,如果利用此关键时期进行氦氖激光穴位照射,可能对脑功能的恢复有一定帮助。

关键词：脑缺氧脑缺血氦氖激光超氧化物歧化酶丙二醛

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在中国汉族人群中发现一个强直性脊柱炎新的易感位点

在中国汉族人群中发现一个强直性脊柱炎新的易感位点

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中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：陈蕊雯段世伟蔡青吴丹林经安吕柯胡建达施柯韩星海陈琦冯国鄞贺林孙树汉第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室上海交通大学Bio-X生命科学研究中心中国科学院营养研究所第二军医大学长海医院风湿免疫科第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室福建医科大学第一附属医院中心实验室第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室福建医科大学协和医院福建省血液研究所第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室第二军医大学长海医院风湿免疫科上海交通大学Bio-X生命科学研究中心中国科学院营养研究所上海交通大学Bio-X生命科学研究中心中国科学院营养研究所上海交通大学Bio-X生命科学研究中心中国科学院营养研究所第二军医大学医学生物技术与分子遗传研究所基础医学部医学遗传学教研室

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种常见的、累及中轴关节和肌腱韧带骨附着点的慢性炎症性疾病,在炎症性关节炎中发病率占第二位,被认为是一种复杂性状疾病。目前,AS病因尚不清楚,近年来,随着分子遗传学技术的发展和人类基... 详细信息

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种常见的、累及中轴关节和肌腱韧带骨附着点的慢性炎症性疾病,在炎症性关节炎中发病率占第二位,被认为是一种复杂性状疾病。目前,AS病因尚不清楚,近年来,随着分子遗传学技术的发展和人类基因组研究的深入,对AS的研究已取得很大进展, 发现遗传因素在发病中起了主导作用,所涉及的遗传因素除HLA-B27以外,尚有HLA区域内外的其它易感基因的参与。肿瘤坏死因子基因(TNFα)位于染色体6p21．3的MHC Ⅲ区域,由4个外显子和3个内含子组成,四个独立的全基因组扫描结果提示TNFα位于AS的易感区域。TNFα具有介导炎症和免疫调节作用。相关研究表明:AS病人骶髂关节的滑液中TNFαmRNA升高;cDNA芯片表达谱显示AS病人 TNF-α表达上调,半定量RT-PCR证实TNF-α转录显著高于健康人。所有这些都提示TNFα是AS的候选易感基因。

关键词：强直性脊柱炎 TNF 启动子易感位点中国汉族人群

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核受体的研究进展

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Acta Genetica Sinica 2004年第4期31卷 420-429页

作者：王水良傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

核受体是配体依赖性转录因子超家族 ,与机体生长发育、细胞分化 ,以及体内许多生理、代谢过程中的基因表达调控密切相关。文中综述了核受体研究的一般概况以及核受体与脂生物学、核受体与肿瘤、核受体与辅调节因子等方面的研究进展。

关键词：核受体转录因子辅调节因子基因表达调控

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CpG-ODN气道内应用抑制哮喘小鼠过敏性气道炎症及GATA-3的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第7期24卷 540-544页

作者：商艳李强胡振林施柯周凤娟刘忠令孙树汉第二军医大学长海医院呼吸内科上海200433 第二军医大学医学遗传学教研室

目的　研究气道内应用CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)对小鼠哮喘模型气道过敏性炎症的治疗作用及对肺内GATA 3表达的影响。方法　鸡卵蛋白 (OVA)免疫BALB c小鼠建立哮喘模型 ,激发后 1h气道内滴入 10 0 μgCpG ODN ,处死动物后观察支气管... 详细信息

目的　研究气道内应用CpG寡脱氧核苷酸 (CpG ODN)对小鼠哮喘模型气道过敏性炎症的治疗作用及对肺内GATA 3表达的影响。方法　鸡卵蛋白 (OVA)免疫BALB c小鼠建立哮喘模型 ,激发后 1h气道内滴入 10 0 μgCpG ODN ,处死动物后观察支气管肺泡灌洗液 (BALF)中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比 (EOS % )的变化及IL 4、IL 5、IL 12、IFN γ的含量变化。取肺组织行病理切片HE染色、AB PAS染色检查 ,观察小鼠气道炎症情况 ,免疫组化染色观察CpG ODN对小鼠哮喘模型肺部GATA 3表达的影响。结果　CpG ODN治疗组BALF中IL 12和IFN γ的产生增加 ,IL 4、IL 5的产生减少 ,BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞比例降低 ,肺部炎症情况明显减轻 ,肺血管周围及支气管周围表达GATA 3的细胞数较哮喘模型组及对照寡核苷酸治疗组明显减少。结论　哮喘小鼠激发阶段气道内滴入CpG可能通过诱导IL 12、IFN γ产生 ,抑制GATA 3的表达 ,导致TH2型细胞因子的产生减少 ,从而减轻哮喘气道过敏性炎症。

关键词： CpG-ODN气道哮喘小鼠过敏性气道炎症 GATA-3 基因表达细胞因子

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钩端螺旋体鞭毛蛋白B(FlaB)基因flaB在大肠杆菌内的表达

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中国人兽共患病杂志 2004年第3期20卷 180-182页

作者：寇志华张毅郭瀛军陈祖欢施柯孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

目的　在大肠杆菌中高效表达钩端螺旋体内鞭毛蛋白 (FlaB)用于钩体病的诊断和预防。方法　将目的基因flaB定向克隆至原核表达载体 pGEX - 5T ,构建重组融合表达质粒 pGF ;Western -blot鉴定其特异性 ,ELISA法判定其用于钩体病诊断的可... 详细信息

目的　在大肠杆菌中高效表达钩端螺旋体内鞭毛蛋白 (FlaB)用于钩体病的诊断和预防。方法　将目的基因flaB定向克隆至原核表达载体 pGEX - 5T ,构建重组融合表达质粒 pGF ;Western -blot鉴定其特异性 ,ELISA法判定其用于钩体病诊断的可行性。结果　GST -FlaB主要以包涵体形式表达 ,表达量约占菌体总蛋白的 4 0 % ;Western -blot结果显示该蛋白与FlaB抗血清能呈现明显的单一条带 ;包涵体经TritonX - 10 0及尿素纯化后 ,纯度可达 90 % ,并且能溶于包被缓冲液中 ;ELISA检测显示纯化后的GST -FlaB具有较好的特异性。结论　钩端螺旋体FlaB可以高效表达并可能用于ELISA检测及钩体病的预防。

关键词：钩端螺旋体鞭毛蛋白B 基因 flaB 大肠杆菌表达

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毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1的特征研究

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中国人兽共患病杂志 2004年第3期20卷 241-243,253页

作者：杨湘越兰小鹏颜宏利陈蕊雯孙树汉南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025 上海第二军医大学医学遗传学教研室

目的　研究毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的特征变化。方法　对表达产物行SDS -PAGE ,FPLC离子交换层析和分子筛 ,等电聚焦 ,脱磷酸反应 ,N端氨基酸测序 ,小鼠免疫接种。结果　毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的分子量较原核的大 ,... 详细信息

目的　研究毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的特征变化。方法　对表达产物行SDS -PAGE ,FPLC离子交换层析和分子筛 ,等电聚焦 ,脱磷酸反应 ,N端氨基酸测序 ,小鼠免疫接种。结果　毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的分子量较原核的大 ,易于纯化 ,等电点较理论值低 ,重组cC1已被磷酸化 ,N端携带了来自载体的 4个氨基酸 ,免疫原性较原核的明显增强。结论　毕赤酵母重组猪囊尾蚴抗原cC1蛋白的特征较原核的有了明显变化 ,尤其是蛋白易于纯化及免疫原性的增强 ,表明毕赤酵母表达系统非常适合重组亚单位疫苗的生产制备。

关键词：抗原cCl 特征猪囊尾蚴巴斯德毕赤酵母

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结核杆菌抗原HSP65基因在大肠杆菌中的表达及纯化

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中国生物工程杂志 2004年第4期24卷 74-76页

作者：王庆敏胡振林肖存杰章建程孙树汉第二军医大学医学遗传学教研室上海200433 海军医学研究所舰艇卫生研究室上海200433

目的 :为研制预防结核病疫苗 ,选取结核杆菌HSP65蛋白为免疫抗原 ,将结核分枝杆菌HSP65抗原基因在大肠杆菌中表达、纯化。方法 :将HSP65的全长cDNA插入到原核表达载体pGEX5T中 ,构建成pGEX5T HSP65重组质粒。将质粒转化到E .coli.K80 2... 详细信息

目的 :为研制预防结核病疫苗 ,选取结核杆菌HSP65蛋白为免疫抗原 ,将结核分枝杆菌HSP65抗原基因在大肠杆菌中表达、纯化。方法 :将HSP65的全长cDNA插入到原核表达载体pGEX5T中 ,构建成pGEX5T HSP65重组质粒。将质粒转化到E .coli.K80 2细菌 ,用IPTG诱导HSP65表达 ,然后用亲和层析的方法进行纯化 ,最后用Western blot方法确认表达蛋白的特异性。结果 :获得了pGEX5T HSP65重组子 ,HSP65蛋白在k80 2菌中获得了表达 ,表达的蛋白条带大小约 86kDa ,与预期的结果相符。表达产物经亲和层析后获得了较单一的蛋白条带 ;表达及纯化的蛋白在纯化前后均可被结核病患者血清特异地识别。为进一步研究其在结核病诊断和防治中的应用打下了基础。

关键词：结核分支杆菌抗原 HSP65 基因大肠杆菌表达纯化免疫

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毕赤酵母重组Annexin32的分子特征及其对血凝与血栓形成的影响

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中国生物工程杂志 2004年第11期24卷 33-37页

作者：杨湘越兰小鹏颜宏利张毅朱忠勇孙树汉南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025 第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

采用SDS PAGE、等电聚焦、脱磷酸反应、蛋白质N端氨基酸测序、KPTT及大鼠下腔静脉血栓形成观察 ,发现毕赤酵母重组Annexin32的分子特征较原核产物有了明显变化。有主、次 2条带 ,主带的分子量比原核产物大 ,等电点较理论值低 ,已被磷酸... 详细信息

采用SDS PAGE、等电聚焦、脱磷酸反应、蛋白质N端氨基酸测序、KPTT及大鼠下腔静脉血栓形成观察 ,发现毕赤酵母重组Annexin32的分子特征较原核产物有了明显变化。有主、次 2条带 ,主带的分子量比原核产物大 ,等电点较理论值低 ,已被磷酸化 ,2条带的N端均携带了来自载体的 4个氨基酸 ,可能对其与活化血小板表面磷脂的结合有所下调 ,导致血凝与血栓形成受到一定的影响 ,但仍具有明显的抗凝及抑制血栓形成作用。

关键词：血栓形成血凝原核分子特征 Annexin32 KPTT 活化血小板毕赤酵母等电点等电聚焦

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