检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2014年第5期35卷 471-475页

作者：孟双平卢占英李星宇刘彬马蓓第二军医大学基础部生理学教研室上海200433 第二军医大学学员旅学员5队上海200433

目的研究2，4，6一三硝基苯磺酸（TNBS）致肠炎大鼠的背根神经节（DRG）神经元电生理特性，为更全面地了解炎症性肠病（IBD）提供借鉴。方法SD大鼠（雄性，体质量160～200g）随机分为实验组和对照组，实验组（n=5）给予30％TNBS溶液（剂... 详细信息

目的研究2，4，6一三硝基苯磺酸（TNBS）致肠炎大鼠的背根神经节（DRG）神经元电生理特性，为更全面地了解炎症性肠病（IBD）提供借鉴。方法SD大鼠（雄性，体质量160～200g）随机分为实验组和对照组，实验组（n=5）给予30％TNBS溶液（剂量40mg／kg）灌肠，对照组（n=5）给予等效体积的生理盐水灌肠。在灌肠的第8天（炎症急性期）处死大鼠，对其结肠进行H—E染色，以确定造模是否成功；取其DRG神经元用全细胞膜片钳技术分析其电生理特性。结呆实验组大鼠体质量降低（P〈0．001），H—E染色示肠黏膜腺体结构严重破坏，炎性细胞浸润明显，表明造模成功。TNBS致肠炎后大鼠DRG神经元动作电位的阈电流降低（P〈0．05）。结论TNBS致肠炎后大鼠DRG神经元兴奋性增高。

关键词：炎性肠疾病结肠炎三硝基苯磺酸背根神经节电生理学

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利用细菌内同源重组技术构建胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶的基因敲入打靶载体

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第二军医大学学报 2014年第2期35卷 185-190页

作者：李玲国蓉常绪生印慨张晔刘志民章卫平第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学长征医院内分泌科上海200003 第二军医大学长海医院普通外科上海200433

目的构建胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶的基因敲入打靶载体,最终获得胰岛β细胞中特异性表达Cre重组酶的基因敲入小鼠,为胰岛β细胞功能研究提供良好的基因敲除动物模型。方法以低拷贝质粒pBR322-2s为骨架构建取获载体(retrieving vect... 详细信息

目的构建胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶的基因敲入打靶载体,最终获得胰岛β细胞中特异性表达Cre重组酶的基因敲入小鼠,为胰岛β细胞功能研究提供良好的基因敲除动物模型。方法以低拷贝质粒pBR322-2s为骨架构建取获载体(retrieving vector),应用λ噬菌体Red重组酶介导的缺口修复(gap-repair)方法,通过细菌内的同源重组克隆长度约为12kb的小鼠胰岛素2(Ins2)基因组DNA,同时构建1个带有内部核糖体进入位点(IRES)序列、Cre重组酶序列和正负向筛选标记基因的微型打靶载体(mini-targeting vector),最后通过同源重组获得Ins2-Cre打靶载体。结果以Ins2基因的第3外显子为靶点,成功构建了受内源性Ins2基因启动子严格调控的表达Cre重组酶的基因敲入型打靶载体。结论成功构建了在胰岛β细胞中特异性表达Cre重组酶的基因敲入型打靶载体,为获得胰岛β细胞中基因特异性敲除小鼠模型提供了关键材料。

关键词：胰岛分泌细胞 Cre重组酶基因打靶打靶载体同源重组内部核糖体进入位点

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高位脊髓损伤大鼠NTS区氨基酸递质受体表达的变化

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第二军医大学学报 2014年第7期35卷 758-762页

作者：王凯邹最王伟忠刘功俭齐敦益徐州医学院附属医院麻醉科徐州221000 第二军医大学基础部生理学教研室上海200433 第二军医大学长征医院麻醉科上海200003

目的研究高位脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后心血管中枢孤束核（solitary tract nucleus,NTS）氨基酸递质受体表达变化。方法采用SD大鼠T4脊髓横断模型,分为SCI组（n=5）和假手术组（n=5）,动态观察SCI后1、2、3、4、6周血压和... 详细信息

目的研究高位脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后心血管中枢孤束核（solitary tract nucleus,NTS）氨基酸递质受体表达变化。方法采用SD大鼠T4脊髓横断模型,分为SCI组（n=5）和假手术组（n=5）,动态观察SCI后1、2、3、4、6周血压和心率的变化及用蛋白质印迹法检测NTS区兴奋性递质谷氨酸（glutamate）受体N-甲基-D-天冬氨酸受体1（NMDA-R1）和抑制性递质γ-氨基丁酸A受体α1（GABAA-α1）在SCI后的变化特点。结果 SCI后,大鼠平均动脉压于1-3周明显下降（P〈0.05）,4周后逐渐恢复正常;心率于1-4周明显升高（P〈0.05）,6周时恢复正常。蛋白质印迹分析检测发现,NMDA-R1表达于1-4周明显升高（P〈0.05）,6周时恢复正常;GABAA-α1表达于2周时明显升高,4、6周明显下降（P〈0.05）;NMDA-R1与GABAA-α1的相对比值在损伤后即明显升高（P〈0.05）。结论 SCI后心血管中枢NTS区主要功能受体发生适应性变化,可能有助于纠正SCI后心血管功能紊乱。

关键词：脊髓损伤心血管功能紊乱谷氨酸受体 GABA受体孤束核

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活性氧对背根神经节P2X3受体介导的痛信号功能的影响

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第二军医大学学报 2014年第4期35卷 443-446页

作者：吕虎徐娟娟陈辉许华孙继虎蔡志扬熊源长第二军医大学长海医院麻醉科上海200433 第二军医大学基础部生理学教研室上海200433 武警8710部队医院麻醉科莆田351133

目的探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)对P2X3受体介导的神经病理性疼痛作用的影响。方法用成年雌性SD大鼠建立背根神经节慢性压迫(CCD)神经病理性疼痛模型,建模成功后随机分为4组(每组10只),经腹腔分别注射生理盐水(NS)、PBN 10... 详细信息

目的探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)对P2X3受体介导的神经病理性疼痛作用的影响。方法用成年雌性SD大鼠建立背根神经节慢性压迫(CCD)神经病理性疼痛模型,建模成功后随机分为4组(每组10只),经腹腔分别注射生理盐水(NS)、PBN 100mg/kg、PBN 30mg/kg、PBN 10mg/kg,给药30min后,经足底注射P2X3受体特异性激动剂α,β-meATP 50nmol,体积为50μL,持续观察注射后15min内的自发缩足次数和主动悬足时间,并整合计算每2min内的综合悬足时间(PLTPM)。结果 PBN能够剂量依赖性抑制由α,β-meATP引发的自发性痛行为,与NS组比较,PBN100mg/kg组在前6min内能明显抑制自发性疼痛,差异具有统计学意义(P<0.05),而PBN 30mg/kg组大鼠仅在2至4min时间单位表现出差异有统计学意义(P<0.05)。结论氧自由基清除剂可以有效缓解由CCD模型引发的神经病理性疼痛及P2X3受体激动剂诱发的自发痛,ROS可能作为信号分子参与了P2X3受体介导的痛觉信息的传递。

关键词：活性氧 P2X3受体背根神经节慢性压迫神经病理性疼痛自由基清除剂

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锌指蛋白ZBTB20基因重组腺病毒表达载体的构建和鉴定

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中国病理生理杂志 2014年第5期30卷 876-880页

作者：朱晓彤杨瑞周露婷张晔李玲章卫平施广霞陈玉霞第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 大连医科大学病理生理学教研室辽宁大连116044

目的:构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能。方法:将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-... 详细信息

目的:构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能。方法:将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-ZBTB20,之后在293细胞中进行包装以及扩增,并对病毒滴度进行检测;采用肝脏组织特异性ZBTB20基因敲除小鼠的原代肝细胞和肝脏组织模型,分别于离体和在体水平鉴定所制备的重组腺病毒Ad-ZBTB20介导的ZBTB20蛋白表达情况;并采用报告基因技术检测过表达的ZBTB20蛋白的功能活性。结果:成功制备了锌指蛋白ZBTB20重组腺病毒,该重组腺病毒感染原代肝细胞和小鼠肝脏组织能过表达ZBTB20蛋白,并且此ZBTB20蛋白能抑制其下游靶基因甲胎蛋白的转录。结论:所构建的ZBTB20重组腺病毒可以介导ZBTB20的过表达并具备转录调节活性,为今后研究ZBTB20的相关生物学功能奠定了基础。

关键词：含锌指和BTB区蛋白20 重组腺病毒甲胎蛋白类转录调节

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全程基于文献教学法的实践和评估

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基础医学教育 2014年第11期16卷 935-937页

作者：林丽王杨凯袁文俊王伟忠倪鑫第二军医大学基础部生理学教研室上海200433

全程基于文献教学法是指全程借助于专业文献串联教学内容并展开学习和讨论的教学方式。首先由教师根据教学目标和内容选择文献,列出详细的阅读提纲和思考题;然后由学生在课前参照提纲自行阅读文献;最后在课堂中由教师指导学生自主学习... 详细信息

全程基于文献教学法是指全程借助于专业文献串联教学内容并展开学习和讨论的教学方式。首先由教师根据教学目标和内容选择文献,列出详细的阅读提纲和思考题;然后由学生在课前参照提纲自行阅读文献;最后在课堂中由教师指导学生自主学习并讨论。该教学法的优点在于教学目标和内容明确、学生主体性强,既不同于传统教学蜻蜓点水式介绍文献,也不同于"Journal club"自由发散式学习文献。调查和评估表明,该教学法适合小班次专题讲座式教学,既能有效地传授专业知识,更有助于培养学生的阅读和思考能力。

关键词：专业文献教学方法素质教育

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军医院校生物技术本科生实践教学改革探讨

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西北医学教育 2014年第1期22卷 20-20,34页

作者：周立宁李密许劲松任安经第二军医大学训练部教务处上海200433 第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

实践教学是生物技术专业人才培养的关键一环,本文从改革生物技术实践教学体系、建立本科导师制、拓宽校外实践教学交流平台、优化毕业考评机制等方面对加强和完善实践教学体系进行了研究和探讨。

关键词：生物技术专业实践教学毕业实习

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Urocortin抑制心肌缺血再灌注诱导的自噬

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第二军医大学学报 2013年第1期34卷 11-16页

作者：张冠鑫韩林郭志福王崇任安经钟铿李鑫袁扬徐志云第二军医大学长海医院胸心外科上海200433 第二军医大学基础部生理学教研室上海200433

目的研究urocortin(UCN)对缺血再灌注诱导的心肌细胞自噬的影响,探讨UCN的心肌保护机制。方法构建大鼠在体心脏缺血再灌注损伤和离体新生大鼠心肌细胞的缺氧复氧模型,进行缺血/缺氧1h再灌注/复氧2h的损伤,在缺血/缺氧前1h给予UCN预处理... 详细信息

目的研究urocortin(UCN)对缺血再灌注诱导的心肌细胞自噬的影响,探讨UCN的心肌保护机制。方法构建大鼠在体心脏缺血再灌注损伤和离体新生大鼠心肌细胞的缺氧复氧模型,进行缺血/缺氧1h再灌注/复氧2h的损伤,在缺血/缺氧前1h给予UCN预处理;在再灌注/复氧2h后观察UCN对缺血再灌注/缺氧复氧诱导的心肌损伤、细胞自噬和自噬相关基因表达的影响。结果 UCN预处理可以显著降低缺血再灌注损伤导致的心肌损害,使梗死面积降低,血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)降低;增加缺氧复氧离体心肌细胞活力、减少培养上清的LDH水平。与上述心肌保护作用相伴随的是UCN预处理还能抑制缺氧复氧导致的心肌细胞自噬,使LC3BⅡ/LC3BⅠ的比值显著降低,并且抑制自噬相关基因Beclin1、Bnip3的mRNA表达。结论 UCN可以抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞自噬,可能在抗缺血再灌注损伤中起重要作用。

关键词： urocortin 心肌缺血心肌再灌注损伤心肌细胞自噬

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多西环素增加卵巢癌细胞HO8910对顺铂化疗敏感性

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第二军医大学学报 2013年第6期34卷 612-615页

作者：吴薇余立华马蓓徐明娟第二军医大学长海医院妇产科上海200433 第二军医大学基础部生理学教研室上海200433

目的探讨多西环素对卵巢癌的抗肿瘤作用及可能机制。方法采用MTT方法检测多西环素单独作用及与顺铂联合用药时对卵巢癌细胞HO8910增殖的影响;采用RT-RCR检测卵巢癌细胞HO8910中CXCR4mRNA的表达;采用蛋白质免疫印迹法检测多西环素作用后... 详细信息

目的探讨多西环素对卵巢癌的抗肿瘤作用及可能机制。方法采用MTT方法检测多西环素单独作用及与顺铂联合用药时对卵巢癌细胞HO8910增殖的影响;采用RT-RCR检测卵巢癌细胞HO8910中CXCR4mRNA的表达;采用蛋白质免疫印迹法检测多西环素作用后卵巢癌细胞HO8910中CXCR4表达的改变。结果较低浓度多西环素(10μg/mL)作用48h后即可抑制卵巢癌细胞HO8910的增殖活力(P<0.01),当其浓度为50μg/mL时抑制率达(70±2)%。多西环素与顺铂联合用药后对癌细胞的抑制效应大于同一浓度顺铂单独作用时,可提高癌细胞对顺铂的化疗敏感性。多西环素抑制卵巢癌细胞HO8910中CXCR4的表达。结论多西环素对卵巢癌细胞HO8910有明确的抑制增殖作用,能增加癌细胞对顺铂化疗的敏感性。SDF-1/CXCR4通路可能参与其中。

关键词：多西环素卵巢肿瘤 CXCR4受体顺铂肿瘤抗药性

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Rtn4-A/B基因敲除小鼠模型的制备

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第二军医大学学报 2013年第8期34卷 890-893页

作者：朱莹胥武剑宁允叶吴琳卢建李强第二军医大学长海医院呼吸内科上海200433 南京军区总医院消化内科南京200001 第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的通过制备Rtn4-A/B基因敲除小鼠,探索Rtn4-B基因的生物学功能。方法用细菌人工染色体(BAC)载体构建Rtn4-A/B基因打靶载体并使其线性化,通过电转化法将其转入129SvEv品系雄性小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)。将正确同源... 详细信息

目的通过制备Rtn4-A/B基因敲除小鼠,探索Rtn4-B基因的生物学功能。方法用细菌人工染色体(BAC)载体构建Rtn4-A/B基因打靶载体并使其线性化,通过电转化法将其转入129SvEv品系雄性小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)。将正确同源重组的ES细胞注射入C57BL/6J小鼠囊胚腔,繁育出嵌合体小鼠后,进一步繁殖以获得杂合子小鼠。抽提小鼠尾尖组织DNA,采用PCR法鉴定小鼠的基因型。结果基因打靶后,得到14个发生双臂正确同源重组ES细胞克隆。利用阳性ES细胞克隆进行囊胚内显微注射,得到5只嵌合率大于50%的雄鼠,最终繁育得到4只Rtn4-A+/-B+/-杂合子小鼠。结论利用ES细胞基因打靶、同源重组等方法,成功获得Rtn4-A/B基因敲除杂合子小鼠。

关键词： Rtn4 基因打靶基因敲除小鼠胚胎干细胞同源重组

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