检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2011年第1期32卷 1-4页

作者：闫亚敏李忆东宋兴磊王燕卢建王志红第二军医大学护理系临床护理教研室上海200433 第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的探讨雾化吸入肺表面活性物质(PS)对油酸型急性肺损伤(ALI)大鼠血液氧合水平的影响。方法 43只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雾化生理盐水组和雾化PS组。颈外静脉注入油酸(0.2 ml/kg)复制ALI模型,约1 h后雾化生理盐水组和雾化PS... 详细信息

目的探讨雾化吸入肺表面活性物质(PS)对油酸型急性肺损伤(ALI)大鼠血液氧合水平的影响。方法 43只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雾化生理盐水组和雾化PS组。颈外静脉注入油酸(0.2 ml/kg)复制ALI模型,约1 h后雾化生理盐水组和雾化PS组分别雾化吸入生理盐水和160 mg PS。实验过程中测定大鼠血气分析指标和呼吸频率(BR)。计算大鼠存活率。结果雾化吸入PS后,大鼠动脉血氧分压(PaO2)及动脉血氧饱和度(SaO2)均逐渐增加,至雾化吸入4 h后,PaO2及SaO2分别增加至99.4 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)及98.2%,与雾化生理盐水组相比,差异有统计学意义(P<0.05);大鼠BR自雾化吸入PS 0.5 h后即开始下降,雾化吸入PS 4 h后,BR降至100次/min,低于同时间点的雾化生理盐水组(P<0.05)。雾化PS组大鼠的存活率为100%,与雾化生理盐水组(60%)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论雾化吸入PS能明显提高ALI大鼠血液的氧合状况,改善大鼠的肺功能及提高其存活率。

关键词：气雾剂肺表面活性物质急性肺损伤血气分析

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抗新型锌指蛋白ZBTB45单克隆抗体的制备与应用

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第二军医大学学报 2011年第12期32卷 1277-1281页

作者：王燕王科嘉李玲陈榕麻献华郭小芹张晔邹大进谢志芳章卫平第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学长海医院内分泌科上海200433 第二军医大学基础部细胞生物学教研室上海200433

目的制备新型锌指蛋白ZBTB45的单克隆抗体,建立该分子的体内外免疫学检测方法,为研究其生物学功能提供技术手段。方法制备小鼠ZBTB45的多表位抗原融合蛋白,免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA检测、多次有限稀释亚克隆建立分... 详细信息

目的制备新型锌指蛋白ZBTB45的单克隆抗体,建立该分子的体内外免疫学检测方法,为研究其生物学功能提供技术手段。方法制备小鼠ZBTB45的多表位抗原融合蛋白,免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA检测、多次有限稀释亚克隆建立分泌ZBTB45单克隆抗体的杂交瘤细胞株,从荷瘤小鼠的腹水中通过蛋白A柱纯化单克隆抗体,鉴定分析所制备抗体在免疫印迹、免疫沉淀和免疫组织化学中的应用效果。结果成功制备了6株抗ZBTB45的特异性单克隆抗体,其中3E5、2G4、4D2和1D4可成功用于免疫印迹和免疫沉淀分析,3E5、6D8和8E3可用于免疫组织化学检测内源性ZBTB45,具有较好的敏感性、特异性。结论首次成功制备了抗ZBTB45单克隆抗体,可应用于体外和体内的免疫学检测,为深入研究ZBTB45的生物学功能提供了技术支持。

关键词：锌指蛋白转录因子 ZBTB45 单克隆抗体

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人类免疫缺陷病毒1型Tat蛋白N末端缺失突变体融合蛋白的表达及其免疫原性分析

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病毒学报 2011年第6期27卷 580-586页

作者：张华群廖文婷陈秋莉葛宜兵杨界章萍萍祁培培刘超何婷王锦红潘卫曹洁第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海200433 安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032

本研究采用PCR方法从人类免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus 1,HIV-1)HXB2株tat基因中扩增编码Tat蛋白N末端1-21位氨基酸缺失的突变体Tat22-101基因片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat22-101,经双酶切及测序验证后,转化大... 详细信息

本研究采用PCR方法从人类免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus 1,HIV-1)HXB2株tat基因中扩增编码Tat蛋白N末端1-21位氨基酸缺失的突变体Tat22-101基因片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat22-101,经双酶切及测序验证后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达及Ni^(2+)-NTA柱亲和层析纯化。纯化后的突变体融合蛋白PET32a-Tat22-101经SDS-PAGE及Western blotting鉴定,其相对分子质量约为26.9kD。该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,经ELISA检测结果表明,pET32a-Tat22-101融合蛋白不仅较好地保留其免疫原性,而且能诱导产生高滴度的针对Tat N末端区之外的Tat其他功能区表位的抗体,为进一步研究Tat生物学功能和研制新型HIV Tat疫苗奠定试验基础。

关键词：人类免疫缺陷病毒1型 Tat蛋白缺失突变原核表达免疫原性

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高活力原代小鼠肝细胞的分离与纯化

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医学研究杂志 2011年第3期40卷 28-31页

作者：王燕周露婷章卫平谢志芳第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 第二军医大学基础部细胞生物学教研室

目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝... 详细信息

目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝细胞悬液进行低速Percoll单密度离心纯化。分离后的肝细胞进行体外培养。肝细胞活力和得率用台盼蓝染色法检测。结果新鲜分离的小鼠原代肝细胞活力能稳定达到87%±3%,平均活细胞总数为8×105每克小鼠体重,绝大部分细胞在体外培养2h后贴壁生长。结论优化后的肝细胞分离方法更为稳定、有效,分离到的肝细胞具有高活力的优点。

关键词：小鼠肝细胞分离灌注原代培养

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地塞米松和TGFβ_1对人卵巢癌HO-8910细胞中PAI-1表达的影响

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第二军医大学学报 2010年第1期31卷 7-11页

作者：王雁曹冬梅王燕闫亚敏卢建第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的观察地塞米松(Dex)和转化生长因子β1(TGFβ1)对人卵巢癌HO-8910细胞中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)表达的影响,探讨其在卵巢癌的发生发展中可能发挥的作用。方法将HO-8910细胞分别用TGFβ1(0.01～10ng/ml)和Dex(100nmol/L)单... 详细信息

目的观察地塞米松(Dex)和转化生长因子β1(TGFβ1)对人卵巢癌HO-8910细胞中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)表达的影响,探讨其在卵巢癌的发生发展中可能发挥的作用。方法将HO-8910细胞分别用TGFβ1(0.01～10ng/ml)和Dex(100nmol/L)单独或联合处理不同时间后,用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测PAI-1mRNA和蛋白表达的变化;用放线菌素D阻断新的mRNA合成,检测PAI-1mRNA的稳定性。结果HO-8910细胞中,TGFβ1能以时间和浓度依赖性的方式上调PAI-1mRNA的表达,最高可上调3.75倍(P<0.01);Dex也能上调PAI-1mRNA的表达,最高为1.65倍(P<0.01);Dex和TGFβ1两者联合作用4h,可上调PAI-1mRNA12.7倍(P<0.01),远大于两者单独作用之和,两者联合处理对PAI-1蛋白的上调作用也大于两者单独作用;Dex和TGFβ1单独及联合作用均不影响PAI-1mRNA的稳定性。结论Dex和TGFβ1单独均能上调HO-8910细胞中PAI-1的表达,联用对PAI-1上调有协同作用,该协同作用不是通过增强PAI-1mRNA的稳定性,而是通过它们在转录水平的作用实现的。

关键词：孵巢肿瘤地塞米松转化生长因子B 纤溶酶原激活物抑制物1

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内毒素耐受导致肾上腺皮质内分泌细胞功能不全的机制

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中国病理生理杂志 2010年第A10期26卷 2037-2038页

作者：朱晓燕刘书娟刘宇健王山第二军医大学基础部生理学教研室上海200000 第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200000

目的:脓毒症患者常伴有肾上腺功能不全,患者皮质醇基础分泌降低或对促肾上腺皮质激素(ACTH)刺激反应低下,其机制仍未阐明。方法:荧光免疫组织化学方法检测原代分离培养的大鼠肾上腺网状带/束状带(F/R)细胞中TLR4表达;EIA试剂盒检测皮质... 详细信息

目的:脓毒症患者常伴有肾上腺功能不全,患者皮质醇基础分泌降低或对促肾上腺皮质激素(ACTH)刺激反应低下,其机制仍未阐明。方法:荧光免疫组织化学方法检测原代分离培养的大鼠肾上腺网状带/束状带(F/R)细胞中TLR4表达;EIA试剂盒检测皮质酮浓度;荧光实时定量PCR和Western blotting方法观察F/R细胞中皮质酮合成相关酶mRNA和蛋白表达。结果:(1)肾上腺组织和F/R细胞有TLR4表达;(2)内毒素(LPS)刺激F/R细胞分泌皮质酮,同时诱导StAR、CYP11B1表达。ACTH促进StAR和皮质酮合成相关酶CYP11A1、HSD3B、CYP21和CYP11B1表达;(3)LP

关键词：内毒素耐受肾上腺皮质内分泌细胞皮质酮束状带试剂盒检测肾上腺组织组织化学方法脓毒症患者胞分泌

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ZBTB20基因敲除小鼠出生后肝脏甲胎蛋白基因持续高表达的病理学意义

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第二军医大学学报 2010年第10期31卷 1045-1048页

作者：张海谢志芳 Claude Szpirer 章卫平第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433 比利时布鲁塞尔大学生物与分子医学研究所12 Rue Profs Jeneer & Brachet B 6041 Gosselies Belgium

目的探讨出生后肝脏甲胎蛋白(AFP)基因异常高表达在ZBTB20基因敲除小鼠生长发育障碍、严重低血糖和未成年死亡等表型中可能的病理作用。方法将ZBTB20单基因敲除小鼠与AFP单基因敲除小鼠杂交,建立ZBTB20与AFP的联合基因敲除小鼠模型,观... 详细信息

目的探讨出生后肝脏甲胎蛋白(AFP)基因异常高表达在ZBTB20基因敲除小鼠生长发育障碍、严重低血糖和未成年死亡等表型中可能的病理作用。方法将ZBTB20单基因敲除小鼠与AFP单基因敲除小鼠杂交,建立ZBTB20与AFP的联合基因敲除小鼠模型,观察并监测其与ZBTB20单基因敲除小鼠在生长发育、存活率及血糖水平上的差异。结果 ZBTB20/AFP双基因敲除小鼠繁殖成功后,通过观察和监测发现其在生长发育、生存率及血糖代谢等方面与ZBTB20单基因敲除小鼠相比无明显差异。结论 ZBTB20单基因敲除小鼠生长发育障碍、严重低血糖和未成年死亡等表型与其AFP基因出生后异常开放无显著关系。

关键词：甲胎蛋白类 ZBTB20 锌指蛋白基因敲除小鼠

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MicroRNA在乳腺癌中的作用

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国际病理科学与临床杂志 2010年第4期30卷 346-350页

作者：杨復唐闫亚敏李忆东第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

MicroRNA是一种小分子RNA,在基因的转录后调控中发挥着重要作用。研究证实microRNA与乳腺癌之间有很强的相关性。它能够通过抑制雌激素受体、抑制乳腺癌干细胞以及作用于乳腺癌相关蛋白等多种方式抑制乳腺癌的发生,同时它在乳腺癌的发... 详细信息

MicroRNA是一种小分子RNA,在基因的转录后调控中发挥着重要作用。研究证实microRNA与乳腺癌之间有很强的相关性。它能够通过抑制雌激素受体、抑制乳腺癌干细胞以及作用于乳腺癌相关蛋白等多种方式抑制乳腺癌的发生,同时它在乳腺癌的发生及其转移中也可起到一定的促进作用。本文对一些乳腺癌相关的microRNA及其作用作一综述。

关键词： microRNA 乳腺癌雌激素受体

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地塞米松和TCFβ1对人卵巢癌HO-8910细胞中PAI-1表达的影响

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第二军医大学学报 2010年第1期 7-11页

作者：王雁曹冬梅王燕闫亚敏卢建第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

目的观察地塞米松（Dex）和转化生长因子β1（TGFβ1）对人卵巢癌HO-8910细胞中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）表达的影响,探讨其在卵巢癌的发生发展中可能发挥的作用。方法将HO-8910细胞分别用TGFβ1（0.01～10ng/ml）和Dex（100nm... 详细信息

目的观察地塞米松（Dex）和转化生长因子β1（TGFβ1）对人卵巢癌HO-8910细胞中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）表达的影响,探讨其在卵巢癌的发生发展中可能发挥的作用。方法将HO-8910细胞分别用TGFβ1（0.01～10ng/ml）和Dex（100nmol/L）单独或联合处理不同时间后,用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测PAI-1mRNA和蛋白表达的变化;用放线菌素D阻断新的mRNA合成,检测PAI-1mRNA的稳定性。结果HO-8910细胞中,TGFβ1能以时间和浓度依赖性的方式上调PAI-1mRNA的表达,最高可上调3.75倍（P〈0.01）;Dex也能上调PAI-1mRNA的表达,最高为1.65倍（P〈0.01）;Dex和TGFβ1两者联合作用4h,可上调PAI-1mRNA12.7倍（P〈0.01）,远大于两者单独作用之和,两者联合处理对PAI-1蛋白的上调作用也大于两者单独作用;Dex和TGFβ1单独及联合作用均不影响PAI-1mRNA的稳定性。结论Dex和TGFβ1单独均能上调HO-8910细胞中PAI-1的表达,联用对PAI-1上调有协同作用,该协同作用不是通过增强PAI-1mRNA的稳定性,而是通过它们在转录水平的作用实现的。

关键词：孵巢肿瘤地塞米松转化生长因子B 纤溶酶原激活物抑制物1

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心血管系统中微小RNA的作用

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医学综述 2010年第5期16卷 644-646页

作者：秦升金百翰魏茜任安经第二军医大学研究生管理大队上海200433 第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

miRNA是一类内源性的,小的非编码的RNA,它可以调节人类大约30%的蛋白质编码基因。到目前为止,已有400多个人的miRNA被克隆和测序,其中一些miRNA在心血管组织高表达和特异性表达,参与心脏发育、心肌肥大/心力衰竭、电重塑和血管增殖的调... 详细信息

miRNA是一类内源性的,小的非编码的RNA,它可以调节人类大约30%的蛋白质编码基因。到目前为止,已有400多个人的miRNA被克隆和测序,其中一些miRNA在心血管组织高表达和特异性表达,参与心脏发育、心肌肥大/心力衰竭、电重塑和血管增殖的调节,miRNA在心血管方面的生理和病理意义越来越被关注,将来也很有希望为心血管疾病的治疗提供新的手段。

关键词：心血管心肌肥大血管增生微小RNA

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