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第二军医大学学报 2006年第4期27卷 417-419页

作者：王正昕傅志仁丁国善马钧郭闻渊宋少华李卫东石学银第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003

目的:探讨改良的腔门静脉半转位肝移植术治疗门脉系统广泛栓塞的外科处理方法。方法:对2例门脉系统广泛栓塞患者进行改良的腔门静脉半转位肝移植术(采用腔静脉肠系膜上静脉吻合+辅助性门静脉脾静脉吻合重建门脉血流),观察术后肝功能恢... 详细信息

目的:探讨改良的腔门静脉半转位肝移植术治疗门脉系统广泛栓塞的外科处理方法。方法:对2例门脉系统广泛栓塞患者进行改良的腔门静脉半转位肝移植术(采用腔静脉肠系膜上静脉吻合+辅助性门静脉脾静脉吻合重建门脉血流),观察术后肝功能恢复情况、术后门脉血流灌注、术后肾功能不全、下肢水肿及食管胃底静脉曲张等情况。结果:2例患者手术顺利,术后肝功能恢复正常,门脉血流灌注良好,无肾功能不全、下肢水肿及食管胃底静脉曲张等并发症。结论:改良的腔门静脉吻合半转位肝移植术是治疗门脉系统广泛栓塞的有效方法。

关键词：肝移植腔门静脉半转位门脉系统栓塞

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常染色体显性遗传多囊肾差异表达基因的研究

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第二军医大学学报 2006年第2期27卷 182-185页

作者：崔心刚王立明朱有华第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003

目的:应用表达谱芯片研究常染色体显性遗传多囊肾病(ADPKD)与正常肾组织基因表达的差异,探讨此病的致病因素及可能的治疗途径。方法:等量的人正常肾和ADPKD肾组织的mRNA分别用Cy3和Cy5逆转录荧光标记,制作cDNA探针,混合后与4 096点人cDN... 详细信息

目的:应用表达谱芯片研究常染色体显性遗传多囊肾病(ADPKD)与正常肾组织基因表达的差异,探讨此病的致病因素及可能的治疗途径。方法:等量的人正常肾和ADPKD肾组织的mRNA分别用Cy3和Cy5逆转录荧光标记,制作cDNA探针,混合后与4 096点人cDNA表达谱芯片进行杂交,ScanArray4000扫描仪扫描芯片荧光信号图像,数字化处理和分析后比较两种组织基因表达谱的差异。RT-PCR法验证其中4条基因表达水平。结果:在ADPKD肾组织与正常肾组织中存在463条差异表达基因,其中206条基因在多囊肾组织中高表达,特别是细胞周期素D2(cyclin D2)、基质金属蛋白酶1(MMP1)、组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)、成纤维细胞活化蛋白基因等;257条基因在多囊肾组织中低表达,特别是蛋白磷酸酶1A、酸性磷酸酶1基因等。RT-PCR法验证的4条基因表达水平与芯片结果相一致。结论:ADPKD病理改变可能与细胞周期蛋白、MMPs以及各种生长因子相关基因的上调有关,钙调素抑制剂和MMPs抑制剂可能会对其有一定的治疗作用。

关键词：多囊肾常染色体显性基因表达谱成纤维细胞钙调素抑制剂

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应用生物发光法监测CD4^+细胞三磷酸腺苷水平评估肝移植术后患者的免疫功能

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中国临床康复 2006年第25期10卷 115-117页

作者：王志才付志仁解放军第二军医大学长征医院全军器官移植研究所肝移植部上海市200003

目的:评估三磷酸腺苷生物发光法检测肝移植受者早期CD4+细胞免疫功能的变化。方法:选择2004-06/10在解放军第二军医大学长征医院器官移植研究所进行的30例肝移植受者手术前后(0,1,2,4周)和50例健康志愿者。采用三磷酸腺苷生物发光法通... 详细信息

目的:评估三磷酸腺苷生物发光法检测肝移植受者早期CD4+细胞免疫功能的变化。方法:选择2004-06/10在解放军第二军医大学长征医院器官移植研究所进行的30例肝移植受者手术前后(0,1,2,4周)和50例健康志愿者。采用三磷酸腺苷生物发光法通过植物凝血素刺激后CD4+细胞三磷酸腺苷量的变化来监测细胞的免疫功能。①三磷酸腺苷标准品的检测:用培养基将三磷酸腺苷标准品配制成系列浓度:1,10,1×102,1×103和1×104μg/L,加入等量的Celltiter-GloTM荧光试剂混匀,取200μL进行测定,取对数制作标准曲线。②样本三磷酸腺苷检测:采集两组人员全血样本(肝素抗凝),置于细胞培养板过夜,加入含有洗涤过的抗人CD4单抗免疫磁粒悬浮液,用磁珠强效分离磁架将CD4+细胞吸于培养孔的一侧,用磷酸盐缓冲液洗3～5次,加入培养基(+体积分数为0.1的胎牛血清),加入Celltiter-GloTM试剂,1h内用荧光仪(发射波长562nm)读取荧光发光信号,计算其平均数值。③外周血T淋巴细胞亚群检测:肝素钠抗凝血加相应的抗体,放于Q-prep,workstation上处理后上机,计算出阳性细胞的百分率;或标记后的标本同样处理后,加混匀的Flow-Count标准荧光小球到标本管2h内上机,计算出CD4+细胞的绝对计数。④检测他克莫司血药浓度。结果:①在三磷酸腺苷浓度为1×(100～104)μg/L之间时,三磷酸腺苷标准品与荧光发光信号呈线性关系。直线方程为Y=0.75X+2.37(r=0.99484)。②移植组患者三磷酸腺苷明显低于健康人群犤(350±191),(735±370)μg/L,P<0.05犦,术后1周显著下降为(161±107)μg/L,而后逐渐提高。表明肝移植受者的细胞免疫功能术后第1周明显下降,以后逐渐恢复,第4周仍低于术前水平。③反应细胞免疫功能的三磷酸腺苷量与免疫抑制剂他克莫司血药浓度缺乏直接的相关性(r2=0.02)。结论:三磷酸腺苷生物发光法有利于正确评估肝移植后患者的细胞免疫功能。

关键词：肝移植腺苷三磷酸 CD4阳性T淋巴细胞

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低剂量乙肝免疫球蛋白与拉米夫定长期联用预防肝移植后HBV复发

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世界华人消化杂志 2006年第13期14卷 1288-1293页

作者：夏念信傅志仁邱宝安王正昕李先兴白刚杨英祥王昆海军总医院肝胆外科北京市100037 第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海市200003

目的:评价长期低剂量HBIgim联用LAM预防急慢性HBV相关性终末期肝病OLT后HBV复发的效能.方法:肝移植患者173例,根据OLT后接受的抗病毒预案分成3组,LAM组(n=2)、HBIg+LAM组(n=168)和阿德福韦组(ADF,n=3).所有OLT受者术前至少接受1-2wkLAM... 详细信息

目的:评价长期低剂量HBIgim联用LAM预防急慢性HBV相关性终末期肝病OLT后HBV复发的效能.方法:肝移植患者173例,根据OLT后接受的抗病毒预案分成3组,LAM组(n=2)、HBIg+LAM组(n=168)和阿德福韦组(ADF,n=3).所有OLT受者术前至少接受1-2wkLAM治疗.施药剂量,LAM100mg/d,阿德福韦10mg/d.术中和术后1wk内,HBIg每日静脉给予(HBVDNA>108copies/L,总量10000U;否则总量5000U);此后imHBIg400U/次,并根据血中HBsAb滴度调整im间隔时间.1mo内维持HBsAb滴度>300U/L;3mo内HBsAb滴度>200U/L;超过3moHBsAb滴度>100U/L.定期检测肝功能、血清HBV标志物,必要时穿刺肝组织免疫组化检查.平均随访20.8±14mo.统计3种预案HBV复发的例数并分析原因;与国外同期研究结果比较.结果:4例HBV复发.LAM组1例HBV复发,术后1wkHBsAg(+),术后2moHBV(+),伴ALT升高,诊断LAM药物耐受;术后8mo死于多器官功能衰竭.HBIg+LAM组3例HBV复发,分别出现在12d,12mo和1.5mo;3例患者术前HBV-DNA>108copies/L.第1例术后血中HBeAg和HBVDNA持续(+),血中HBsAb滴度远低于有效预防浓度,诊断HBIg治疗失败,术后11mo死于爆发性肝炎.第2例成为乙肝携带者,术后15mo死于肿瘤复发.第3例HBV复发后改用HBIg+阿德福韦治疗,术后5.5moHBsAg(-),目前肝功能正常.第2和第3例可能存在HBV逃逸突变.阿德福韦组受者随访期间无HBV复发.HBIg+LAM预案,HBV相关性终末期肝病OLT后HBV复发率为1.8%(3/168);所有患者imHBIg耐受性好.OLT后HBV复发率与国外肝移植部比较,两者无统计学意义(χ2=0.28037),预防费用3000-4000＄/a.结论:长期低剂量HBIgim联用LAM可以有效预防HBV相关性终末期肝病OLT后的HBV复发,费用相对低.阿德福韦治疗HBV-YMDD变异株有效,可能是预防HBV复发的更有效因子.

关键词：肝移植乙型肝炎病毒人乙肝免疫球蛋白拉米夫定阿德福韦复发

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肝移植术后Banff积分指导下急性排斥反应的个体化治疗

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第二军医大学学报 2006年第4期27卷 435-436页

作者：夏念信傅志仁邱宝安丁国善李先兴傅宏王正昕白刚杨英祥海军总医院肝胆外科北京100037 第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003

目的:评价肝移植术后Banff积分指导下抗急性排斥反应(AR)个体化治疗的临床价值。方法:2002年1月至2004年8月,246例肝移植(LT)患者术后3个月内共发生肝穿刺病理证实的AR 44例(52例次),按患者第1次原位肝移植手术的年月次序分2组抗AR治疗... 详细信息

目的:评价肝移植术后Banff积分指导下抗急性排斥反应(AR)个体化治疗的临床价值。方法:2002年1月至2004年8月,246例肝移植(LT)患者术后3个月内共发生肝穿刺病理证实的AR 44例(52例次),按患者第1次原位肝移植手术的年月次序分2组抗AR治疗,病理按Banff参数评分。对照组(n=24,29次),均采用大剂量甲泼尼龙(MP,总量2 100 mg)冲击治疗;个体化治疗组(n=20,23次),据Banff积分将AR分为交界性、轻度和中重度,分别应用总量1 000、1 500、2 100 mg的MP冲击。观察2组治疗效果和不良事件。结果:对照组和个体化治疗组的AR发生率分别为18.2%(24/132)和17.5%(20/114)。对照组中需用ATG抗AR 1例,出现骨髓抑制、肺部感染、上消化道并发症和MCV感染各1例;个体化治疗组出现上消化道并发症1例和肺部感染2例。以抗AR治疗次数累计不良事件,其发生率2组分别为17.2%(5/29)、13.0%(3/23),两者无显著差异(cχ2=0.645 8,P=0.421 8)。结论:Banff积分指导下的个体化抗AR和经典MP冲击抗AR治疗近期效果一致,不良事件的发生率也无明显差异,有一定的临床应用价值。

关键词：肝移植移植物排斥 Banff积分治疗学

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肝癌患者肝移植术前外周血AFP mRNA的表达与肿瘤复发及患者生存的关系

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第二军医大学学报 2006年第10期27卷 1052-1055页

作者：蔡金贞郑虹朱志军邓永林潘澄张雅敏张建军蒋文涛王亮沈中阳傅志仁丁国善张友磊天津市第一中心医院器官移植中心天津300071 第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003

目的：探讨原发性肝细胞肝癌患者在肝移植术前外周血AFP mRNA的表达及其与术后肿瘤复发、患者预后的关系.方法：以2003年2月～2004年2月收入天津市第一中心医院的31例肝细胞肝癌行原位肝移植患者为研究对象,采用实时定量RT-PCR检测患者... 详细信息

目的：探讨原发性肝细胞肝癌患者在肝移植术前外周血AFP mRNA的表达及其与术后肿瘤复发、患者预后的关系.方法：以2003年2月～2004年2月收入天津市第一中心医院的31例肝细胞肝癌行原位肝移植患者为研究对象,采用实时定量RT-PCR检测患者术前外周血AFP mRNA表达水平,均采用尸体供肝经典原位肝移植.以SPSS 12.0软件分析AFP mRNA的表达与患者术后肿瘤复发及生存的相关性.结果：31例患者中有10例AFP mRNA表达阳性,表达量为57～10 400 copy/μg,中位数为360 copy/μg.患者Child-pugh分级,肿瘤的大小、个数,病理Edmond分级与术前AFP mRNA的表达水平无关.肿瘤TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期的患者AFP mRNA的阳性表达率显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者（P=0.001）;脉管浸润的患者AFP mRNA的表达水平显著高于无脉管浸润者（P=0.029）.肝移植术前AFP mRNA阴性组的无瘤生存及总体生存显著高于AFP mRNA阳性组.结论：术前AFP mRNA表达的水平是肿瘤复发的危险因素,是术前可能存在肝外微转移的指标,可作为预后的判断因子.

关键词：癌,肝细胞肝移植甲胎蛋白肿瘤复发,局部

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SMO保存液对犬肾低温保存期间皮质细胞凋亡的影响

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第二军医大学学报 2006年第10期27卷 1059-1062页

作者：牛强朱有华于常虎罗明缪明永第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003 基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433

目的：探讨自制上海多器官保存液（Shanghai multi-organ preservation solution,SMO液）对低温保存期间犬肾皮质细胞凋亡的影响,以探讨SMO液的作用机制.方法：犬肾分别以0～4℃的SMO液、高渗枸橼酸盐腺嘌呤液（HC-A）或UW液（Universit... 详细信息

目的：探讨自制上海多器官保存液（Shanghai multi-organ preservation solution,SMO液）对低温保存期间犬肾皮质细胞凋亡的影响,以探讨SMO液的作用机制.方法：犬肾分别以0～4℃的SMO液、高渗枸橼酸盐腺嘌呤液（HC-A）或UW液（University of Wisconsin solution）灌洗保存,在低温保存各时间点取肾皮质标本作形态学观察;采用TUNEL法检测皮质细胞凋亡发生情况;以硫代巴比妥酸法测定各保存液组肾皮质丙二醛（MDA）含量的改变,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性变化.结果：低温保存第1天光镜观察细胞水肿、胞质空泡化、肾小管坏死等改变,三组相似,但保存2 d后SMO组和UW组形态学改变明显轻于HC-A组.随低温保存时间延长,各保存液组肾皮质细胞凋亡的发生增加,而SMO组凋亡指数显著低于同时点HC-A液组（P＜0.05）.随着低温保存时间延长,各保存液组肾皮质MDA含量增加,保存1～3 d SMO液组MDA含量显著低于HC-A液组（P＜0.05）;低温保存中SMO液组、HC-A液组、UW液组肾皮质SOD酶活性无明显差异.结论：SMO液可以提高肾皮质保存效果,可能与其减少低温保存期间肾皮质细胞凋亡和抑制脂质过氧化损伤有关.

关键词：器官保存反应性氧族低温细胞凋亡

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二次肝移植患者的术后观察及护理

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解放军护理杂志 2006年第3期23卷 58-59页

作者：陈律席淑华第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003

通过对14例二次肝移植患者的术后观察及护理,探讨临床观察要点及相应的护理措施,以提高护理肝移植患者的临床护理水平。

关键词：二次肝移植术后观察护理

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肝移植术后预防乙型肝炎病毒再感染281例的分析

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消化外科 2006年第1期5卷 26-29页

作者：王正昕傅志仁丁国善郭闻渊傅宏倪之嘉马钧李先兴施晓敏上海第二军医大学长征医院全军器官移植研究所 200003

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病肝移植术后HBV再感染的原因及防治经验。方法回顾性分析281例HBV相关性肝病,移植前后给予抗病毒药物拉米夫定+人乙肝免疫球蛋白(HBIg)预防HBV再感染,其中9例为拉米夫定+阿德夫韦+HBIg,观察临床表现... 详细信息

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病肝移植术后HBV再感染的原因及防治经验。方法回顾性分析281例HBV相关性肝病,移植前后给予抗病毒药物拉米夫定+人乙肝免疫球蛋白(HBIg)预防HBV再感染,其中9例为拉米夫定+阿德夫韦+HBIg,观察临床表现、血清HBV标志物、HBV DNA及肝活检免疫组织化学检测等指标。结果用拉米夫定+HBIg预防的272例中,有7例再感染,血清HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性,肝活检免疫组织化学检测有HBsAg表达,其中2例血清HBV DNA阳性,4例经治疗后HBsAg又转阴。用拉米夫定+阿德夫韦+HBIg预防的9例中,血清学和肝活检免疫组织化学检测无HBsAg表达。结论拉米夫定+HBIg或拉米夫定+阿德夫韦+HBIg联合应用,可以有效预防HBV相关性肝病肝移植后HBV的再感染。

关键词：肝移植 HBV 再感染

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SMO液对低温下肾皮质线粒体功能的保护作用

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第二军医大学学报 2006年第2期27卷 196-199页

作者：牛强朱有华缪明永杨军昌张纯第二军医大学长征医院全军器官移植研究所上海200003 基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 长征医院药学部

目的：探讨自制上海多器官保存液（SMO液）对肾皮质线粒体低温缺氧损伤的保护作用。方法：以HC-A液和UW液作对照，在犬肾低温保存各时间点，取皮质标本；通过电镜观察保存期间线粒体形态改变；差速离心法分离皮质线粒体，Clark氧电极法... 详细信息

目的：探讨自制上海多器官保存液（SMO液）对肾皮质线粒体低温缺氧损伤的保护作用。方法：以HC-A液和UW液作对照，在犬肾低温保存各时间点，取皮质标本；通过电镜观察保存期间线粒体形态改变；差速离心法分离皮质线粒体，Clark氧电极法测定其活性，描记四态呼吸曲线，计算Ⅲ态、Ⅳ态耗氧速率、线粒体呼吸控制率（RCR）及磷氧比（P／O）。结果：低温保存期间，HC-A组肾皮质线粒体水肿、空泡样变明显重于SMO组和UW组，而后两者改变相似；随着低温保存时间延长，实验组和对照组肾皮质线粒体Ⅲ态呼吸耗氧速率、RCR和P／0均明显降低；保存1～3dHC-A组Ⅲ态呼吸耗氧速率显著低于SMO组（P〈0．05）；保存各时间点SMO组线粒体RCR和P／O显著高于HC-A组（P〈0．05），与UW组无明显差异。结论：SMO液对肾皮质线粒体低温缺氧损伤的保护作用比HC-A液强，与UW液相似。

关键词：器官保存液低温保存缺氧肾皮质线粒体保护作用

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