检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物医学工程学报 2005年第2期24卷 245-253页

作者：祝联刘伟刘德莉吴娟娟王丹茹崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究中心上海200011

根据Clonetech公司的腺病毒载体构建流程 ,原核表达载体pBlue- BMP7经一系列特定的限制性内切酶酶切 ,重组成BMP7的腺病毒载体 ,并转染 2 93细胞进行大量扩增、滴度测定。重组Adeno- BMP7经限制性内切酶PI SceⅠ和Ⅰ CeuⅠ双酶切获得B... 详细信息

根据Clonetech公司的腺病毒载体构建流程 ,原核表达载体pBlue- BMP7经一系列特定的限制性内切酶酶切 ,重组成BMP7的腺病毒载体 ,并转染 2 93细胞进行大量扩增、滴度测定。重组Adeno- BMP7经限制性内切酶PI SceⅠ和Ⅰ CeuⅠ双酶切获得BMP7基因片段 ,PCR扩增得到特异的扩增片段 ,表明重组的Adeno-BMP7载体构建成功 ,其中携带有目的基因BMP7cDNA片段。Adeno- Lac- Z的体外转染骨髓基质干细胞 (BMSCs) ,染色表明转染率可达90 %以上 ;RT- PCR、免疫组化证明Adeno -BMP7转染BMSCs后BMP7在基因和蛋白水平上均有表达 ;转染Adeno- BMP7后的BMSCs细胞悬液裸鼠肌肉内注射后 ,x光片和组织学观察都表明BMP7转染可明显促进新骨的形成 ,与没转染Adeno -BMP7的BMSCs有显著差异。

关键词：重组腺病毒骨髓基质干细胞骨形成蛋白7

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In-vitro cultivation of normal human oral keratinocytes

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Chinese Medical Journal 2001年第7期114卷 59-62,107页

作者：周曾同周海文商庆新曹谊林上海第二医科大学第九人民医院口腔内科上海200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程重点实验室上海200011

Abstract:Objective To establish a method for culturing normal human oral *** Specimens obtained from healthy humans undergoing oral surgery were dissociated into single cell suspensions by dispase and trypsin. The cells were grown in serum-free medium. Morphological characteristics were studied under light microscope and electron microscope. Cytokeratins were shown by *** Cells could be maintained in culture up to 4-5 passages or 30-50 days. Electron microscope revealed that there were desmosomes and tonofibrils in the oral keratinocytes. The cells showed positive staining for cytokeratin antibody. Conclusion Human oral keratinocytes have been successfully grown in serial culture.

关键词： cell culture · oral keratinocytes/epithelial cells · morphology · cytokeratin

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组织工程技术修复自体肌腱缺损的实验研究

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中华医学杂志 2001年第8期81卷 500-501页

作者：刘永涛商庆新曹谊林刘彦春张兆峰刘德莉夏万尧钟斌上海第二医科大学组织工程研究中心

肌腱缺损是目前临床上治疗的一大难题.目前常用的治疗方法主要有3种:(1)自体肌腱移植;(2)人工肌腱代用品;(3)同种异体肌腱移植.因分别存在着供体来源缺乏,供区损伤,异物反应及免疫排斥反应等问题,使临床应用受到限制.作者采用组织工程技... 详细信息

肌腱缺损是目前临床上治疗的一大难题.目前常用的治疗方法主要有3种:(1)自体肌腱移植;(2)人工肌腱代用品;(3)同种异体肌腱移植.因分别存在着供体来源缺乏,供区损伤,异物反应及免疫排斥反应等问题,使临床应用受到限制.作者采用组织工程技术,在自体动物体内构建肌腱组织并修复肌腱缺损,为进一步临床应用提供理论依据.

关键词：组织工程技术自体肌腱缺损修复实验研究

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体外连续培养人口腔粘膜角化细胞

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中华口腔医学杂志 2000年第6期35卷 455-457,I034页

作者：周海文周曾同商庆新曹谊林上海第二医科大学口腔医学院口腔内科 200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程重点实验室

目的　建立一个稳定的人正常口腔粘膜角化细胞体外培养体系。方法　取正常口腔粘膜 ,经Dispase及胰蛋白酶消化获取细胞 ,采用无血清培养液进行原代及传代培养 ,并进行形态学观察和角蛋白免疫组化染色等一系列细胞定性研究。结果　获取... 详细信息

目的　建立一个稳定的人正常口腔粘膜角化细胞体外培养体系。方法　取正常口腔粘膜 ,经Dispase及胰蛋白酶消化获取细胞 ,采用无血清培养液进行原代及传代培养 ,并进行形态学观察和角蛋白免疫组化染色等一系列细胞定性研究。结果　获取的细胞为单一上皮细胞 ;细胞可连续传4～ 5代 ,成活 30～ 5 0d ;细胞呈铺路石状 ,为上皮细胞的典型形态 ;电镜下见细胞具有丰富的张力丝和桥粒等特征性超微结构 ;角蛋白免疫组化染色阳性。结论　应用Dispase酶及无血清培养液 ,在无

关键词：细胞培养口腔粘膜角蛋白角化细胞癌前病变

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骨髓间质干细胞向软骨细胞表型定向诱导分化的实验研究

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中华整形外科杂志 2002年第1期18卷 12-14页

作者：夏万尧商庆新崔磊徐蓉丁小邦曹谊林上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科

目的　研究体外培养的猪骨髓间质干细胞 (BoneMarrowStemCells,MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型转化 ,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法　取成年崇明长枫杂交猪髂骨骨髓 5ml,在低糖DMEM完全培养液培养 2周 ,传... 详细信息

目的　研究体外培养的猪骨髓间质干细胞 (BoneMarrowStemCells,MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型转化 ,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法　取成年崇明长枫杂交猪髂骨骨髓 5ml,在低糖DMEM完全培养液培养 2周 ,传代后以高糖DMEM无血清特定培养液诱导 (含胰岛素 2mg L、转铁蛋白 3mg L、丙酮酸 10 0mg L、地塞米松 10 - 7mol L、TGF β110ng ml) ,在相差显微镜和电镜下进行观察 ,免疫组化检测Ⅱ型胶原分泌 ,原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达。结果　细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形转变 ,透视电镜观察见大量扩张粗面内质网、高尔基体、线粒体。诱导培养后第 7,14dⅡ型胶原免疫组化阳性 ,同时原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达呈阳性。结论　MSCs在特定培养液诱导下能向软骨细胞表型转化 ,并能分泌软骨特异性基质 ,有可能成为软骨组织工程较理想的种子细胞来源的应用前景。

关键词：组织工程骨髓间充质干细胞分化软骨细胞表型动物实验

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应用可注射性生物材料再生自体组织工程化软骨组织的实验研究

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中华整形外科杂志 2001年第5期17卷 302-305页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春刘德莉徐蓉吴娟娟上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究中心重点实验室上海200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海200011

目的　探讨自体组织工程化软骨在动物自体内形成的最佳细胞浓度 ,为临床应用提供理论依据。方法　取贵州香猪部分耳廓软骨组织 ,于体外消化分离软骨细胞 ,与可注射性生物材料PluronicF12 7混合形成复合物 ,浓度为 10 ,2 0 ,3 0 ,4 0 ,5 ... 详细信息

目的　探讨自体组织工程化软骨在动物自体内形成的最佳细胞浓度 ,为临床应用提供理论依据。方法　取贵州香猪部分耳廓软骨组织 ,于体外消化分离软骨细胞 ,与可注射性生物材料PluronicF12 7混合形成复合物 ,浓度为 10 ,2 0 ,3 0 ,4 0 ,5 0 ,60和 70× 10 6 ml,并将其接种于猪自体腹外侧壁皮下 ,于第 6周取材 ,分别进行大体、组织学、氨基糖氨多糖 (GAG)和Ⅱ型胶原含量检测 ,对再生软骨组织进行评价。结果　细胞浓度为 5 0× 10 6 ml时 ,再生的软骨组织 ,软骨细胞均匀分布 ,包埋在软骨陷窝内 ,与正常软骨组织有相似的组织学特征。而细胞浓度为 10× 10 6 ml、3 0× 10 6 ml则形成软骨组织不完全 ,软骨细胞散在分布 ,并被未降解的生物材料分隔。对所有样本称重 ,在 3 0～ 110mg之间 ,各样本GAG含量在 5 .8%～ 9.2 %之间 ,正常耳软骨含量为 9.2 %。WesternBlot证实所有样本都有Ⅱ型胶原。结论　利用组织工程技术可在具有免疫功能的自体动物内形成软骨组织 ,并确定了软骨组织形成的最佳细胞接种浓度为 5 0× 10 6 ml。

关键词：软骨细胞软骨组织组织工程生物材料软骨修复动物实验

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力学刺激影响猪骨髓基质干细胞体外软骨形成的初步研究

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中华医学杂志 2004年第23期84卷 1997-2001页

作者：刘天一周广东苗春雷魏娴陈付国崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究中心 200011

目的　研究力学刺激对猪骨髓基质干细胞 (BMSC)体外构建组织工程化软骨的影响。方法　取第二代猪BMSC以 5× 10 7/cm3 的密度接种于聚羟基乙酸 /聚羟基乳酸 (PGA/PLA)圆盘形支架上 ,一周后均改用软骨诱导液 [高糖DMEM培养基含 10 %... 详细信息

目的　研究力学刺激对猪骨髓基质干细胞 (BMSC)体外构建组织工程化软骨的影响。方法　取第二代猪BMSC以 5× 10 7/cm3 的密度接种于聚羟基乙酸 /聚羟基乳酸 (PGA/PLA)圆盘形支架上 ,一周后均改用软骨诱导液 [高糖DMEM培养基含 10 %胎牛血清 (FBS)、转化生长因子 (TGF) β110ng/ml、胰岛素样生长因子 (IGF) I 5 0ng/ml、地塞米松 4 0ng/ml]体外培养。根据不同的施加力分为 3组 :离心组设定离心力 10 0g ,2次 /d ,30min/次 ,间隔 12h ;摇床组设定为 80r/min ,每天施力 8h ;静止培养作为对照组。分别于第 4周、第 8周进行大体观察、组织学、组织化学、免疫组织化学 ,蛋白聚糖(GAG)定量等检测 ,比较不同力学刺激对诱导BMSC体外软骨形成的影响。结果第 4周时两实验组 ,即摇床组及离心组形成的细胞材料复合物基本保持原来的体积与外形 ,软骨陷窝形成 ,呈结节状或巢状分布并伴有GAG沉积及胶原合成 ,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。静止组体积缩小 ,有少量软骨陷窝结构形成 ;8周时两实验组形成的细胞材料复合物形状保持良好 ,浅灰白色 ,光泽好 ;HE染色结果显示大量成熟软骨陷窝形成 ,核仁清楚并有多处分裂相 ,细胞外基质沉积均匀 ;Safranin O染色显示有大量的GAG形成 ,Masson染色显示有较多新生胶原组织形成 ,免疫?

关键词：力学刺激猪骨髓基质干细胞体外软骨形成组织工程

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皮肤成纤维细胞构建组织工程化肌腱的初步研究

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中华医学杂志 2002年第16期82卷 1105-1107页

作者：陈兵丁小邦刘方军崔磊刘伟商庆新曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究中心 200011

目的　探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞的组织工程化肌腱体内形成。方法　取猪自体皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增 ,与可吸收生物材料聚羟基乙酸形成细胞—生物材料复合物 ,将该复合物植入手术缺损的右侧趾浅屈肌腱处 ,6周取材 ,对标... 详细信息

目的　探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞的组织工程化肌腱体内形成。方法　取猪自体皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增 ,与可吸收生物材料聚羟基乙酸形成细胞—生物材料复合物 ,将该复合物植入手术缺损的右侧趾浅屈肌腱处 ,6周取材 ,对标本进行大体、组织学、电镜检查及生物力学评价。结果　新生组织在大体形态、细胞与胶原排列方式上与正常肌腱相似。新生组织的最大张力和最大应力分别为 1 73 0± 1 8 2与 1 8 9± 1 9N/mm2 ,分别达到左侧同一部位正常肌腱的 57 4%与51 9%。

关键词：皮肤肌腱人体组织工程成纤维细胞种子细胞体外培养

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下颌骨缺损修复方法的研究进展

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上海口腔医学 2004年第2期13卷 137-140页

作者：袁捷翁雨来曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海第二医科大学组织工程研究中心上海200011 上海第二医科大学组织工程研究中心

下颌骨缺损可由多种疾病引起。近年来随着骨科学、生物材料学、细胞生物学的研究进步,下颌骨缺损修复方法也有一定的发展。作者系统回顾了近年来一些下颌骨缺损修复方法的研究和应用情况,并阐述了组织工程化骨在这方面的应用前景。

关键词：下颌骨缺损骨牵引术骨组织工程修复方法

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组织工程技术构建小口径血管的实验研究

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中华外科杂志 2003年第9期41卷 679-683页

作者：刘阳张燕中陈瑾君殷德民曹颖许志成刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海第二医科大学组织工程研究中心 200011

目的　探讨运用组织工程技术构建血管组织的方法。　方法　将体外培养、扩增的新生婴儿脐静脉血管内皮细胞与平滑肌细胞接种于片状聚羟基乙酸材料上 ,形成细胞材料复合物 ,将该复合物包绕于硅胶管使成管状结构后移植于裸鼠皮下 ,第 2... 详细信息

目的　探讨运用组织工程技术构建血管组织的方法。　方法　将体外培养、扩增的新生婴儿脐静脉血管内皮细胞与平滑肌细胞接种于片状聚羟基乙酸材料上 ,形成细胞材料复合物 ,将该复合物包绕于硅胶管使成管状结构后移植于裸鼠皮下 ,第 2及第 6周后行大体及组织学检测。结果　组织工程技术构建的血管组织大体结构与天然血管相似 ,免疫组化显示组织工程化血管最内层有Ⅷ因子阳性细胞覆盖 ,管壁内有大量细胞外基质及散在的α 平滑肌肌动蛋白阳性细胞存在。结论　运用组织工程技术可形成具有与正常血管组织学结构相似的血管。

关键词：组织工程技术构建小口径血管实验研究生物相容性材料

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