检索结果-内蒙古大学图书馆

组织工程与重建外科 2023年第3期19卷 213-222页

作者：罗润娇艾雪峰李凯祥卢婷婷刘明璐陈颖王湘莹王会景付炜王伟上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心胸心外科上海市200127 上海长征医院胸外科上海市200003 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心儿科转化医学研究所上海市200127 上海组织工程研究重点实验室上海市200011

目的探索人诱导多能干细胞来源的心脏前体细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的效果。方法利用免疫荧光染色鉴定人诱导多能干细胞的多能性,利用GiWi法在体外将其分化为心脏前体细胞,再继续分化为心肌细胞,利用流式细胞术及免疫荧光染色对所... 详细信息

目的探索人诱导多能干细胞来源的心脏前体细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的效果。方法利用免疫荧光染色鉴定人诱导多能干细胞的多能性,利用GiWi法在体外将其分化为心脏前体细胞,再继续分化为心肌细胞,利用流式细胞术及免疫荧光染色对所获得的心脏前体细胞和心肌细胞进行分化效率及形态学鉴定。通过结扎大鼠冠状动脉左前降支制备急性心肌梗死模型,利用TTC染色、超声心动图评估造模情况。将心脏前体细胞移植到心肌梗死边缘区,术后1周、4周利用超声心动图检测心功能;利用HE、Masson染色评估梗死区域大小以及纤维化程度;利用免疫荧光染色评估心脏前体细胞的体内存活及分化情况。结果人诱导多能干细胞高表达干性标志物OCT4、SOX2、Nanog以及Tra-1-60。心脏前体细胞的体外分化效率高达77.8%,表达心脏前体细胞特异性标志物Isl1;并可进一步分化为心肌细胞,其效率高达83.3%,同时高表达cTnT、α-actinin等心肌特异性标志物。大鼠急性心肌梗死模型制备成功,TTC染色见梗死区发白,左室射血分数降低。体内移植后4周,与模型组相比,细胞组心功能改善明显,心室扩张减弱,纤维化减轻;移植细胞体内存活并分化为心肌细胞。结论人诱导多能干细胞来源的心脏前体细胞体外分化效率高,体内移植后可存活并分化为心肌细胞,可抑制心室重构,改善心功能。

关键词：诱导多能干细胞心脏前体细胞心肌梗死细胞移植

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利用hiPSC-CPCs结合纤维蛋白凝胶构建3D心肌微组织

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组织工程与重建外科 2023年第2期19卷 101-110页

作者：卢婷婷罗润娇谭瑶颜冰倩陈颖刘明璐王会景王湘莹李凯祥王伟付炜上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心转化医学研究所上海市200127 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心心胸外科上海市200127 上海市组织工程重点实验室上海市200011

目的利用人诱导多能干细胞来源心肌前体细胞(Human induced pluripotent stem cell-derived cardiac progenitor cells,hiPSCs-CPCs)结合纤维蛋白凝胶构建3D心肌微组织用于研究心脏发育及药物筛选。方法首先利用化学分化法获得hiPSC-CP... 详细信息

目的利用人诱导多能干细胞来源心肌前体细胞(Human induced pluripotent stem cell-derived cardiac progenitor cells,hiPSCs-CPCs)结合纤维蛋白凝胶构建3D心肌微组织用于研究心脏发育及药物筛选。方法首先利用化学分化法获得hiPSC-CPCs,并对其进行鉴定,然后将其混于纤维蛋白凝胶构建3D微组织,待hiPSC-CPCs分化成心肌细胞后获得心肌微组织;观察心肌微组织随培养时间延长的形态变化;分别于第15天和第30天对心肌微组织进行冰冻切片,使用免疫荧光对获得的心肌微组织进行心肌鉴定,并统计分析心肌微组织中心肌细胞的肌节长度、Z带宽度和排列情况;使用钙成像技术检测第15天和第30天心肌微组织的钙信号变化;使用MUSCLEMOTION ImageJ macro插件分析第15天和第30天的心肌微组织的收缩情况,并利用该软件检测心肌微组织对药物的反应。结果使用化学分化法可高效分化获得hiPSC-CPCs,将其与纤维蛋白凝胶结合可成功构建3D微组织,且该微组织培养至第10天可成功获得具有自发跳动能力的心肌微组织,继续培养至第30天,心肌微组织形态仍可维持,未出现溶解情况;免疫荧光结果显示,心肌微组织可高表达心肌标志物c Tn T和α-actinin,随着培养时间延长,肌节更趋于成熟状态;钙成像结果显示,可顺利检测到心肌微组织的钙信号变化,且随着培养时间延长,钙信号变化一致性明显提升;MUSCLEMOTION ImageJ macro结果显示,随着培养时间延长,心肌微组织收缩频率降低、收缩幅度增强,且异丙肾上腺素能成功激动心肌微组织,且随培养时间的延长,心肌微组织对异丙肾上腺素的反应更加灵敏。结论将hiPSC-CPCs混于纤维蛋白凝胶中可成功构建可持续培养的3D心肌微组织,其钙信号及收缩易于检测,且对药物反应敏感,有望成为研究心脏发育和药物筛选的有利工具。

关键词：人诱导多能干细胞来源心肌前体细胞人诱导多能干细胞来源心肌细胞纤维蛋白凝胶心肌微组织

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利用CO_(2)点阵激光精准构建小鼠背侧皮肤深Ⅱ度烧伤模型

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组织工程与重建外科 2024年第1期20卷 51-57页

作者：王湘莹卢婷婷李凯祥曾俊文王会景王伟邓丹付炜上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心儿科转化医学研究所上海市200127 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心心胸外科上海市200127 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心皮肤科上海市200127 上海市组织工程重点实验室上海市200011

目的利用CO_(2)点阵激光精准控制烧伤强度及面积,并摸索最适能量强度,制备皮肤浅Ⅱ度至深Ⅱ度烧伤模型。方法首先通过50 mJ、80 mJ能量强度的CO_(2)点阵激光对小鼠进行造模,得到两组不同能量强度的烧伤模型;观察造模后烧伤部位表面皮肤... 详细信息

目的利用CO_(2)点阵激光精准控制烧伤强度及面积,并摸索最适能量强度,制备皮肤浅Ⅱ度至深Ⅱ度烧伤模型。方法首先通过50 mJ、80 mJ能量强度的CO_(2)点阵激光对小鼠进行造模,得到两组不同能量强度的烧伤模型;观察造模后烧伤部位表面皮肤变化情况,在造模后0、3、7、14 d拍照,观察伤口愈合情况,分析伤口愈合率;随后,对不同时间点所取烧伤部位组织进行HE染色、Masson染色,以及ColⅠ、ColⅢ免疫组织化学染色,并进行结果分析。结果对不同时间点的组织进行组织学染色发现,两组的激光打孔深度、毛囊再生情况及瘢痕生成情况存在显著差异;ColⅠ、ColⅢ免疫组织化学染色结果显示,两组间胶原蛋白再生情况同样存在显著差异。综合分析发现,80 mJ能量强度对小鼠皮肤组织所造成的损伤更符合深Ⅱ度烧伤模型特点。结论本研究成功利用CO_(2)点阵激光在小鼠背部构建出皮肤组织再生明显障碍的背侧深Ⅱ度烧伤模型,并通过组织学、免疫组织化学等方法对其损伤程度进行了详细评估,最终筛选出80 mJ的能量强度用于构建皮肤深Ⅱ度烧伤模型,有望为烧伤病理生理研究及皮肤组织再生药物筛选提供新工具。

关键词：深Ⅱ度烧伤二氧化碳点阵激光皮肤损伤

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基于hiPSC-CM的新型明胶水凝胶构建体外心肌微组织研究

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组织工程与重建外科 2022年第3期18卷 219-226页

作者：刘明璐姜思涵谭瑶陈颖罗润娇卢婷婷王会景付炜游正伟王伟上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心胸心外科上海市200127 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心儿科转化医学研究所上海市200127 东华大学化学纤维及聚合物材料改性国家重点实验室上海市201620 上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的探索应用新型明胶水凝胶复合人诱导多能干细胞来源心肌细胞(hiPSC-CMs)构建体外心肌微组织的可行性。方法制备一种新型明胶水凝胶,以冷冻扫描电镜观察其表面结构,以循环拉伸试验测定其机械强度。在该材料上种植hiPSC-CMs,评估该... 详细信息

目的探索应用新型明胶水凝胶复合人诱导多能干细胞来源心肌细胞(hiPSC-CMs)构建体外心肌微组织的可行性。方法制备一种新型明胶水凝胶,以冷冻扫描电镜观察其表面结构,以循环拉伸试验测定其机械强度。在该材料上种植hiPSC-CMs,评估该材料的细胞相容性及其沟槽结构对心肌细胞的影响。将交联明胶水凝胶与hiPSC-CMs混合制备心肌微组织,探索构建体外心肌微组织过程中和冻存后心肌细胞的活性。结果冷冻扫描电镜显示,新型明胶水凝胶表面呈现均匀的疏松多孔结构。循环拉伸试验显示,新型明胶水凝胶具有良好的机械性能。细胞试验显示,心肌细胞在该材料上生长良好,其沟槽结构对心肌细胞的有序排列有一定的引导作用。新型明胶水凝胶与hiPSC-CMs混合构建心肌微组织的实验结果表明,明胶水凝胶对心肌细胞具有良好的保护作用,对冻存复苏的心肌细胞具有一定的细胞保护作用。结论新型明胶水凝胶具有疏松多孔的表面微结构、良好的力学性能和细胞相容性,对体外构建心肌微组织中的细胞和冻存后的细胞具有保护作用,未来有望用于组织工程领域,进行器官再生、药物筛选、体外建模等方面的研究。

关键词：明胶水凝胶人诱导多能干细胞来源心肌细胞心肌微组织丝

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软骨脱细胞基质仿生支架的制备及其对骨髓基质干细胞成软骨分化的影响

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组织工程与重建外科 2021年第1期17卷 19-24页

作者：张沛灵慈政贾立涛刘豫曹谊林周广东上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海市200011 潍坊医学院整形外科研究所山东省潍坊市261042 组织工程国家工程研究中心上海市200241

目的探讨软骨脱细胞基质(ACM)仿生支架的制备及其对骨髓基质干细胞(BMSCs)成软骨分化的影响。方法将软骨组织粉碎后脱细胞处理,并以不同的比例与明胶(GT)溶液混合并交联,冷冻干燥制成多孔仿生支架。用扫描电镜(SEM)观察不同交联比例制成... 详细信息

目的探讨软骨脱细胞基质(ACM)仿生支架的制备及其对骨髓基质干细胞(BMSCs)成软骨分化的影响。方法将软骨组织粉碎后脱细胞处理,并以不同的比例与明胶(GT)溶液混合并交联,冷冻干燥制成多孔仿生支架。用扫描电镜(SEM)观察不同交联比例制成的ACM/GT支架,并对其孔径、孔隙率、生物力学、降解速率进行评估,从而选取最优组用于体外软骨构建。分离并培养山羊BMSCs,接种于单纯GT和ACM/GT支架上,SEM观察培养1、7、14 d后细胞在支架上的黏附、分布与基质分泌情况,并通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)评估成软骨分化能力。结果制备的ACM无细胞残留。随着ACM占比增加,孔径逐渐增大,降解速率逐渐增快,力学强度逐渐降低。其中G2A2组在孔径、孔隙率、生物力学和降解速率方面均适宜体外构建软骨组织。SEM显示细胞在单纯GT和G2A2支架上均匀分布,增殖显著,基质分泌明显。qRT-PCR显示G2A2显著促进了BMSCs的成软骨分化。结论ACM可以制备成适宜软骨再生的支架材料,并可促进BMSCs的成软骨分化。

关键词：软骨脱细胞基质细胞支架骨髓基质干细胞组织工程软骨再生

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巨噬细胞在骨关节炎中的调控机制

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组织工程与重建外科 2021年第5期17卷 442-444页

作者：贾卓璇张文杰上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海市200011

骨关节炎(Osteoarthritis,OA)通常被认为是由老化、肥胖或机械性损伤导致的关节软骨磨损性疾病。滑膜巨噬细胞作为免疫细胞,在OA的症状和结构进展中起着至关重要的作用。通过分泌炎症因子和基质金属蛋白酶,巨噬细胞与软骨细胞相互作用,... 详细信息

骨关节炎(Osteoarthritis,OA)通常被认为是由老化、肥胖或机械性损伤导致的关节软骨磨损性疾病。滑膜巨噬细胞作为免疫细胞,在OA的症状和结构进展中起着至关重要的作用。通过分泌炎症因子和基质金属蛋白酶,巨噬细胞与软骨细胞相互作用,在OA的启动和发展中发挥重要作用。此外,巨噬细胞的激活状态、M1/M2比值与OA的严重程度高度相关。本文对巨噬细胞在OA中的作用进行综述。

关键词：骨关节炎巨噬细胞滑膜炎

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p53 modRNA促进人诱导多能干细胞来源早期心肌细胞分化成熟的初步研究

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组织工程与重建外科 2022年第2期18卷 89-98页

作者：陈颖杨礼宫艺其谭瑶王会景刘明璐卢婷婷罗润娇王伟付炜上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心儿科转化医学研究所上海市200127 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心胸心外科上海市200127 复旦大学附属肿瘤医院麻醉科上海市200032 上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的探索p53 modRNA对促进人诱导多能干细胞来源早期心肌细胞分化成熟的影响。方法将p53 modRNA转染至人诱导多能干细胞来源的早期心肌细胞,利用qRT-PCR检测心肌细胞成熟相关基因mRNA的表达情况;利用Western blot检测心肌细胞成熟相关... 详细信息

目的探索p53 modRNA对促进人诱导多能干细胞来源早期心肌细胞分化成熟的影响。方法将p53 modRNA转染至人诱导多能干细胞来源的早期心肌细胞,利用qRT-PCR检测心肌细胞成熟相关基因mRNA的表达情况;利用Western blot检测心肌细胞成熟相关蛋白的表达情况;利用细胞免疫荧光染色观察心肌细胞的形态、肌节发育情况。结果qRT-PCR结果表明,p53 modRNA处理过后的心肌细胞增殖相关基因表达减少,脂代谢基因表达水平增高,且心肌特异性基因表达量增高,提示心肌细胞内结构可能更加成熟。Western blot结果显示,转染组cTnI蛋白表达量相比未转染组有增高趋势。免疫荧光染色结果显示,与未转染组相比,转染组细胞形态趋近长棒型,心肌细胞肌节排列更加整齐且数量丰富,更接近成熟心肌细胞形态。结论用p53 modRNA处理人诱导多能干细胞来源的早期心肌细胞,可一定程度上改善细胞成熟的相关指标。

关键词：心肌细胞成熟干细胞细胞周期

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静电纺有序rGO/PLCL支架对hiPSC-CPC心肌分化影响的初步研究

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组织工程与重建外科 2021年第1期17卷 8-18页

作者：谭瑶颜冰倩艾雪峰宫艺其王会景陈颖刘明璐徐徐王伟付炜上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心转化医学研究所胸心外科上海市200127 上海市组织工程重点实验室上海市200011

目的探索静电纺丝技术制备的有序rGO/PLCL支架对hiPSC-CPC心肌分化的影响。方法采用静电纺丝技术制备有序rGO/PLCL支架。使用扫描电镜观察支架表面结构;通过拉伸试验测定材料机械性能;利用XRD测定支架成分;通过电阻率测定评估支架导电性... 详细信息

目的探索静电纺丝技术制备的有序rGO/PLCL支架对hiPSC-CPC心肌分化的影响。方法采用静电纺丝技术制备有序rGO/PLCL支架。使用扫描电镜观察支架表面结构;通过拉伸试验测定材料机械性能;利用XRD测定支架成分;通过电阻率测定评估支架导电性;种植hiPSC-CPC评估该材料对心肌分化、增殖、形态的影响;通过qPCR、RNA-seq探索rGO对hiPSC-CPC心肌分化基因水平的影响。结果扫描电镜显示,支架材料表面纤维有序排列。拉伸试验显示,在干燥和湿润情况下支架都具有良好机械性能,rGO的加入增加了支架材料的应变能力。XRD验证了rGO/PLCL的成分组成。电阻率测定提示rGO的加入显著增加了支架的导电性。细胞试验显示支架对细胞具有引导作用,rGO的添加使更多的心肌细胞趋于成熟细胞形态,rGO的加入对细胞增殖无明显影响。qPCR结果提示rGO的加入上调了肌节成熟相关基因cTNT、MYH7/MYH6以及细胞间通信相关的连接蛋白CX43的表达。RNA-seq检测提示rGO主要通过下调与细胞外空间、细胞外区域、钙离子结合、细胞外基质组成和排列、细胞黏附等相关基因的表达来影响细胞分化。结论有序rGO/PLCL支架具有有序排列的表面微结构、合适的力学性能以及良好的导电性和生物相容性,能够引导细胞排列,有利于改善hiPSC-CPC分化形成的心肌细胞的形态,以及促进肌节成熟相关基因的表达。

关键词：组织工程静电纺丝有序支架还原氧化石墨烯心肌分化

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心脏芯片研究进展

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组织工程与重建外科 2021年第1期17卷 66-69页

作者：陈颖(综述) 付炜(审校) 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心转化医学研究所/胸心外科上海市200127 上海市组织工程重点实验室上海市200011

为了降低药物开发的成本,以及对心脏特定疾病的发生发展进行准确的临床预测并制订个性化的治疗方案,需要开发相关的体外试验平台。这个平台既要具备高度精确性,能模拟复杂的心脏微环境,又要保证操作简易、经济成本低廉,心脏芯片应运而... 详细信息

为了降低药物开发的成本,以及对心脏特定疾病的发生发展进行准确的临床预测并制订个性化的治疗方案,需要开发相关的体外试验平台。这个平台既要具备高度精确性,能模拟复杂的心脏微环境,又要保证操作简易、经济成本低廉,心脏芯片应运而生。心脏芯片利用其精细的结构,精确模拟体内环境,大大提升了体外试验平台的可靠程度,成为未来心脏组织工程领域最重要的发展方向之一。本文将对心脏芯片的基本组成及优化进行阐述。

关键词：心脏芯片微流控平台微型器

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负载姜黄素支架体内构建组织工程软骨的可行性研究

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组织工程与重建外科杂志 2020年第1期16卷 16-21页

作者： KANG BO KYOUNG 陈维明周广东曹德君上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市200011 上海市组织工程研究重点实验室上海市200011 组织工程国家工程研究中心上海市200241

目的探索以负载姜黄素材料为支架,在动物皮下构建组织工程软骨的可行性。方法通过细胞划痕试验明确既可抑制血管但又不影响干细胞生物活性的姜黄素的最佳浓度范围。负载姜黄素的支架材料与单纯明胶支架材料分别植入裸鼠皮下,术后3、6周... 详细信息

目的探索以负载姜黄素材料为支架,在动物皮下构建组织工程软骨的可行性。方法通过细胞划痕试验明确既可抑制血管但又不影响干细胞生物活性的姜黄素的最佳浓度范围。负载姜黄素的支架材料与单纯明胶支架材料分别植入裸鼠皮下,术后3、6周取材,比较局部皮下血管抑制程度。软骨细胞-负载姜黄素支架复合物与软骨细胞-明胶支架复合物分别植入裸鼠皮下,术后3、6周取材进行组织学检测,比较软骨形成情况。结果姜黄素对h UVEC的有效抑制浓度为30μmol/L,而对BMSC的有效抑制浓度为40μmol/L。负载姜黄素支架在裸鼠皮下具有明显的血管抑制作用。软骨细胞-负载姜黄素支架复合物在裸鼠皮下可形成成熟软骨。结论负载姜黄素支架具有血管抑制作用且不影响软骨再生,有望成为软骨再生的理想支架。

关键词：组织工程软骨姜黄素抗血管化缓释材料

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