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中国毒理学会中药与天然药物毒理专业委员会第二次（2017年）学术交流大会

作者：饶玉良孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心复旦大学生殖与发育研究院国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室

理想的前列腺癌转移动物模型能模拟肿瘤发生、发展进程及评估肿瘤微环境因素的影响。本文分析了常见的前列腺癌转移模型,从转移模型的操作、评估、应用等方面比较各种模型的特点,为前列腺癌转移模型的构建和选择奠定基础。1理想的前列... 详细信息

理想的前列腺癌转移动物模型能模拟肿瘤发生、发展进程及评估肿瘤微环境因素的影响。本文分析了常见的前列腺癌转移模型,从转移模型的操作、评估、应用等方面比较各种模型的特点,为前列腺癌转移模型的构建和选择奠定基础。1理想的前列腺癌转移模型理想的前列腺癌转移模型,应能有效地模拟人体前列腺癌发生、发展、转移进程以及病理生理变化过程。常见的前列腺癌转移模型有自

关键词：前列腺癌动物模型肿瘤细胞系

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几种大鼠阴道涂片方法学比较研究

几种大鼠阴道涂片方法学比较研究

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2017年（第七届）药物毒理学年会

作者：邵丛丛杨阳贾玉玲周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院

动物实验中SD大鼠是常用的试验动物之一,在药物生殖毒性试验中雌鼠交配后的妊娠状况确认尤其重要,一般采用阴道涂片的发法观察SD大鼠的动情周期和交配情况。动情前期大部为椭圆形的有核细胞上皮细胞,动情期为大量的大而角化的无核细胞... 详细信息

动物实验中SD大鼠是常用的试验动物之一,在药物生殖毒性试验中雌鼠交配后的妊娠状况确认尤其重要,一般采用阴道涂片的发法观察SD大鼠的动情周期和交配情况。动情前期大部为椭圆形的有核细胞上皮细胞,动情期为大量的大而角化的无核细胞间或有少量上皮细胞,动情后期细胞中角化上皮细胞、白细胞、有核上皮细胞都有,发情间期白细胞数量最多及少量上皮细胞和粘膜。对不同时期的细胞观察,确定大鼠的动情周期,提高受孕速度。阴道涂片常用的方法有三种,第一种,用去掉针头的1ml注射器吸取0.10ml左右生理盐水,将生理盐水注入SD大鼠阴道,然后回抽,准备好玻片,将回抽的液体滴到玻片上,以另一玻片轻而快速推片,就是一张阴道涂片,然后放到显微镜下即可观察。第二种,将棉签用生理盐水沾湿,放入SD大鼠阴道里转两圈,再将棉签涂于干净的玻片上,自然风干后染色观察。第三种,用左手拇指和食指捏住尾巴,其余三指轻压SD大鼠后腰背部,翻起尾巴露出阴道口,左手拿一端有圆头的细玻棒,用生理盐水润湿,轻轻插入SD大鼠阴道里转两圈,再将玻棒涂于干净的有少量生理盐水的玻片上,将玻棒稍微在生理盐水中转一下,然后用显微镜观察。前两种方法操作发现,注射器端口是齐平的,有棱角,容易划伤阴道壁;棉花棒避免了损伤阴道壁但掉落的棉宵和棉丝会干扰细胞和雄鼠精子的观察;而用玻璃棒做阴道涂片既减少了对阴道壁的损伤又避免了干扰细胞和雄鼠精子的观察,因此采用玻璃棒进行阴道涂片比较适合。

关键词：动情周期阴道涂片

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有毒中药的安全性研究与评价任重道远

有毒中药的安全性研究与评价任重道远

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中国毒理学会中药与天然药物毒理专业委员会第二次（2017年）学术交流大会

作者：朱秋阳孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心复旦大学生殖与发育研究院国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室

安全性是药物的三大重要属性之一。在很多人的传统认识里,与西药相比,中药药性温和,毒副作用小,安全性高。但是随着中药的不断壮大发展,在为医疗事业做贡献的同时,其毒性事件也频频发生,如马兜铃酸的肾毒性事件,中药的安全性开始遭到质... 详细信息

安全性是药物的三大重要属性之一。在很多人的传统认识里,与西药相比,中药药性温和,毒副作用小,安全性高。但是随着中药的不断壮大发展,在为医疗事业做贡献的同时,其毒性事件也频频发生,如马兜铃酸的肾毒性事件,中药的安全性开始遭到质疑,有毒中药的安全性研究与评价引起人们的重视。

关键词：有毒中药毒性实验研究与评价

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用于治疗多囊卵巢综合征的中药药理学作用机制研究进展

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中国中药杂志 2016年第20期41卷 3715-3720页

作者：周娴颖周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心上海200032 国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海200032 复旦大学生殖与发育研究院上海200032

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种异质性内分泌紊乱性疾病,以高雄激素、胰岛素抵抗和持续无排卵为特征,是青春期和育龄期妇女常见的内分泌系统与代谢系统疾病之一,严重威胁着患者的健康。目前国内外西医主要通过... 详细信息

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种异质性内分泌紊乱性疾病,以高雄激素、胰岛素抵抗和持续无排卵为特征,是青春期和育龄期妇女常见的内分泌系统与代谢系统疾病之一,严重威胁着患者的健康。目前国内外西医主要通过降低雄激素、改善胰岛素抵抗、诱发排卵等手段改善患者症状,但西药不良反应较大,长期治疗不能为患者所接受。近年来中医药治疗PCOS已经取得了一定疗效,中医药具有多靶点、多环节、多途径效应,可以同时调节PCOS患者内分泌与代谢紊乱,且相对安全。该文通过查阅临床和动物实验方面的文献,阐述了中医对PCOS的认识、用药分析和中药对PCOS治疗的药理学机制,发现中药在调节下丘脑-垂体-性轴功能、纠正性激素紊乱、影响基因及调控因子的表达、改善胰岛素抵抗、纠正糖脂代谢紊乱、改善子宫内膜容受性、提高妊娠率和改善卵巢形态等方面发挥作用。该文对中医对PCOS的认识及中医药在PCOS治疗方面的积极作用加以归纳总结,为中医药防治PCOS的推广应用提供科学依据。

关键词：多囊卵巢综合征中药机制

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儿科用药非临床安全性评价中方案设计的策略

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中国新药杂志 2016年第21期25卷 2473-2482页

作者：孙祖越周莉上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院

2006年以来,FDA,EMA和ICH陆续颁布了针对幼龄动物研究的指导原则。与其他指导原则不同,这些指导原则并未对动物研究设计提出具体要求,但是明确儿科用药非临床安全性评价试验方案是基于逐案原则,需要根据患病人群特点、药理学作用、已有... 详细信息

2006年以来,FDA,EMA和ICH陆续颁布了针对幼龄动物研究的指导原则。与其他指导原则不同,这些指导原则并未对动物研究设计提出具体要求,但是明确儿科用药非临床安全性评价试验方案是基于逐案原则,需要根据患病人群特点、药理学作用、已有的毒性资料、临床数据、给药方案以及影响到的发育系统等进行设计。通常采用以下3种的设计方案之一:1一般毒性筛选研究设计。2围产期发育毒性结合幼龄毒性的研究设计。3靶器官发育毒性研究设计。结合本实验室的经验,本文着重讨论幼龄动物非临床发育毒性的研究设计的策略,以期为我国儿童用药物非临床安全性研究提供支持和参考,为制定我国相关的指导原则积累经验。

关键词：幼龄动物儿科用药非临床安全性评价实验设计

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非临床安全性评价中离乳前给药的幼龄动物分组设计

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中国新药杂志 2016年第21期25卷 2483-2488页

作者：周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院

依据儿童年龄的划分,幼龄动物非临床研究的初次给药可能会在离乳前。因此,给药设计是以窝为背景进行的。对于啮齿类动物生理和行为的变化,窝的影响最大,随着动物年龄的变化更是如此。幼龄动物非临床研究设计中也必须考虑到窝的影响。幼... 详细信息

依据儿童年龄的划分,幼龄动物非临床研究的初次给药可能会在离乳前。因此,给药设计是以窝为背景进行的。对于啮齿类动物生理和行为的变化,窝的影响最大,随着动物年龄的变化更是如此。幼龄动物非临床研究设计中也必须考虑到窝的影响。幼龄动物非临床研究中窝的构成主要有:1窝内设计。2窝间设计。3单只幼仔/性别/窝。4抚育设计。本文结合本实验室的经验针对各种分组设计的优缺点、关键点包括操作程序和孕鼠数量等展开论述。

关键词：幼龄动物非临床安全性评价窝内设计窝间设计交叉抚育设计

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药物包装材料中邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯致前列腺毒性研究

药物包装材料中邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯致前列腺毒性研究

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2017年第七届药物毒理学年会

作者：黄冬妍吴双双朱婧毛晓燕李雷吴建辉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理学检测中心上海200032 国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海200032 复旦大学生殖与发育研究院上海200032 上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理学检测中心上海200032 复旦大学生殖与发育研究院上海200032

[目的]明确环境暴露剂量邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对老年SD大鼠前列腺增生作用,并探讨其可能的机制.[方法]32只1.5岁龄老年雄性SD大鼠随机分成4组,每组8只动物,分别灌胃给予DEHP(30.0、90.0和270.0 μg/kg,daily)和溶媒处理,连续4... 详细信息

[目的]明确环境暴露剂量邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对老年SD大鼠前列腺增生作用,并探讨其可能的机制.[方法]32只1.5岁龄老年雄性SD大鼠随机分成4组,每组8只动物,分别灌胃给予DEHP(30.0、90.0和270.0 μg/kg,daily)和溶媒处理,连续4周.动物于末次给药24 h后,麻醉后采血,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中睾酮(T)、雌激素(E2)和泌乳素(PRL)等激素水平.动物处死后,剖取前列腺,分叶,称重、测量体积,病理制片后HE染色观察组织形态学改变,并利用显微图像分析软件分析前列腺上皮高度变化.[结果]给予DEHP4周后,各DEHP组前列腺重量和体积、腹侧前列腺重量、腹侧前列腺指数均大于对照组：其中高剂量DEHP组前列腺脏器系数明显增加(P＜0.05),背侧前列腺重量(P＜0.05)和背侧前列腺指数增加(P＜0.05).组织病理学结果显示DEPH明显升高腹侧前列腺上皮高度(P＜0.01)和背侧前列腺上皮高度(P＜0.05).血清激素检测结果显示,DEHP组雌二醇和泌乳素水平均高于对照组,且随着DEPH剂量增加呈现逐渐增加的趋势,而睾酮水平则呈现下降的趋势.[结论]低剂量DEHP对老年大鼠前列腺具有促进增生作用,该增生可能通过影响内源性激素水平而实现.

关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP) 环境内分泌干扰物(EDCs) 前列腺增生老年大鼠雌激素雄激素

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坤泰胶囊对大鼠实验性子宫异位内膜生长及其妊娠结局的影响

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生殖与避孕 2015年第8期35卷 517-524页

作者：钟瑞华周娴颖谢淑武李国停马阿影李钊桂幼伦朱健平朱焰广东医学院药学院东莞523808 国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海市计划生育科学研究所生殖药理研究组上海200032 复旦大学上海200032

目的:研究坤泰胶囊(KTC)对SD大鼠实验性子宫异位内膜生长及其妊娠结局的影响。方法:手术法建立SD大鼠子宫内膜异位症(EMs)模型。将造模成功的SD大鼠分为模型对照组、阳性对照组(每只给予醋酸亮丙瑞林0.1 mg皮下注射,共1次),KTC低剂量组... 详细信息

目的:研究坤泰胶囊(KTC)对SD大鼠实验性子宫异位内膜生长及其妊娠结局的影响。方法:手术法建立SD大鼠子宫内膜异位症(EMs)模型。将造模成功的SD大鼠分为模型对照组、阳性对照组(每只给予醋酸亮丙瑞林0.1 mg皮下注射,共1次),KTC低剂量组(每只按0.24 g/kg体质量灌胃,qd×21 d)、KTC高剂量组(每只按0.60 g/kg体质量灌胃,qd×21 d),每组14只。给药21 d后,每组解剖8只,比较给药前、后异位内膜体积变化;Western blotting法测定异位内膜caspase-8、caspase-3和caspase-9蛋白表达。每组剩余6只与雄鼠交配,妊娠12 d后,解剖观察受孕情况,并对胎盘、胎仔称量。动情周期正常的SD大鼠14只作为空白对照。结果:与模型对照组相比,KTC低、高剂量组体质量无统计学差异(P>0.05);KTC低、高剂量组异位内膜抑制率分别为(40.25±35.18)%和(65.52±15.82)%;KTC低、高剂量组异位内膜中caspase-8、caspase-9和活化caspase-3明显升高(P<0.05);KTC低剂量组的大鼠胎仔数量呈增加趋势。结论:KTC通过升高caspase-8、caspase-9和活化caspase-3蛋白含量,促进异位内膜的凋亡;KTC低剂量组EMs大鼠受孕率呈现出升高的趋势。

关键词：坤泰胶囊(KTC) 子宫内膜异位症(EMs) SD大鼠 caspase 妊娠率

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祛膜颗粒对大鼠药物流产后子宫出血的治疗作用

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上海中医药大学学报 2015年第5期29卷 69-73页

作者：周洁芸周娴颖李钊李国婷钟瑞华谢淑武朱焰上海市计划生育科学研究所生殖药理组国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海200032

目的:研究祛膜颗粒对大鼠药物流产后子宫出血的治疗作用。方法:采用早孕大鼠灌胃给予米非司酮(12.50 mg/kg)和米索前列醇(0.12 mg/kg)造成不完全流产大鼠模型。观察祛膜颗粒对不完全流产大鼠模型的子宫出血量、凝血酶原时间(PT)、凝血... 详细信息

目的:研究祛膜颗粒对大鼠药物流产后子宫出血的治疗作用。方法:采用早孕大鼠灌胃给予米非司酮(12.50 mg/kg)和米索前列醇(0.12 mg/kg)造成不完全流产大鼠模型。观察祛膜颗粒对不完全流产大鼠模型的子宫出血量、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白原(FIB)的影响;采用光学显微镜观察子宫内蜕膜、绒毛的残留情况;采用RM6240多道生理信号采集处理系统和JZJ01张力传感器记录大鼠离体子宫平滑肌的收缩活动。结果:祛膜颗粒能明显减少大鼠子宫出血量(P<0.05),缩短流产大鼠的PT、TT,增加FIB;祛膜颗粒能够促进子宫腔内的绒毛、蜕膜组织物排出。祛膜颗粒(0.1 g/L)与米非司酮和米索前列醇合用时,能明显提高大鼠离体子宫平滑肌收缩强度(P<0.05)。结论:祛膜颗粒对药物流产后的子宫出血有明显的止血作用,能增强子宫肌收缩,促进胚胎排出。

关键词：祛膜颗粒药物流产产后出血大鼠

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鬼臼毒素诱导大鼠附睾上皮细胞凋亡机制研究

鬼臼毒素诱导大鼠附睾上皮细胞凋亡机制研究

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中国药理学会第九届全国基础与临床生殖药理学术研讨会

作者：李国停谢淑武周洁芸钟瑞华马阿影桂幼伦朱焰上海市计划生育科学研究所生殖药理组国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心

目的:探讨鬼臼毒素(podophyllotoxin, POD)抑制SD大鼠附睾上皮细胞增殖作用,揭示其诱导凋亡的相关分子机制。方法:体外培养大鼠原代附睾上皮细胞,CCK-8法检测鬼臼毒素对细胞作用24、48、72h后的增殖影响;透视电镜观察细胞内部结构变化;A... 详细信息

目的:探讨鬼臼毒素(podophyllotoxin, POD)抑制SD大鼠附睾上皮细胞增殖作用,揭示其诱导凋亡的相关分子机制。方法:体外培养大鼠原代附睾上皮细胞,CCK-8法检测鬼臼毒素对细胞作用24、48、72h后的增殖影响;透视电镜观察细胞内部结构变化;AnnexinV-FITC/PI检测细胞凋亡率;原位末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡形态;RT-PCR技术研究TNF-αmRNA的变化;ELISA法检测鬼臼毒素对细胞培养上清TNF-α水平的影响;Western blot法检测细胞色素C、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白水平的表达。结果:CCK-8结果显示,鬼臼毒素能显著抑制大鼠附睾上皮细胞增殖并诱导凋亡,并呈剂量及时间依赖性(P <0.05),24h、48h、72h的半数抑制浓度分别为24.68±13.25, 0.0124±0.003,0.0062±0.0025μg ml-1;透射电镜下观察发现,鬼臼毒素引起附睾上皮细胞形态变圆,细胞核破碎,线粒体空泡化;RT-PCR和ELISA检测结果显示,鬼臼毒素能升高TNF-αmRNA水平及细胞培养上清中TNF-α的含量;Western blot结果显示鬼臼毒素能显著增加细胞中细胞色素C、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达。结论:鬼臼毒素可抑制大鼠附睾上皮细胞的增殖并诱导凋亡。其机制可能通过上调TNF-α水平,活化Caspase-8,并进一步激活Caspase-9和Caspase-3诱导附睾上皮细胞凋亡,推测鬼臼毒素主要是通过TNF-α及线粒体调控途径诱导附睾上皮细胞发生凋亡。

关键词：鬼臼毒素大鼠附睾上皮细胞细胞凋亡 TNF-α Caspase活化

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