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中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

作者：李国停谢淑武钟瑞华周洁芸郭湘洁李钊杨文捷曹灿朱焰复旦大学生殖与发育研究院上海市计划生育科学研究所药物发展室生殖药理研究组国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学

目的:研究乙酰唑胺对雄性大鼠生育力及附睾腔液蛋白表达的影响。方法:大鼠适应性饲养1周,将48只SD雄性大鼠根据体重随机分为空白对照组(给予2ml溶媒/d),乙酰唑胺低(25 g/kg/d)、中(50 g/kg/d)、高(100 g/kg/d)剂量组,每组12只,连续灌胃... 详细信息

目的:研究乙酰唑胺对雄性大鼠生育力及附睾腔液蛋白表达的影响。方法:大鼠适应性饲养1周,将48只SD雄性大鼠根据体重随机分为空白对照组(给予2ml溶媒/d),乙酰唑胺低(25 g/kg/d)、中(50 g/kg/d)、高(100 g/kg/d)剂量组,每组12只,连续灌胃给药,每天一次,持续56天。给药结束后,4只用于检测生育力,4只用于精子密度及活力分析,剩余4只用于附睾组织基因表达差异的检测。结果:与空白对照组比较,乙酰唑胺各组雄鼠的交配率未见明显差异,受孕率降低,其中乙酰唑胺中、高剂量组交配雌鼠受孕率分别降低至80%和60%;精子活力检测结果发现乙酰唑胺可降低雄性大鼠精子活力,乙酰唑胺低、中和高剂量组分别降低至83.0%,63.5%,34.2%;与空白对照组相比,乙酰唑胺组大鼠附睾腔液蛋白芯片的结果提示ECM、BCR、PTEN、MEK、ERK、NFKB等蛋白显著上调,差异表达蛋白主要集中在生物学过程(biological process)和细胞组件(cellular component)方面,涉及到的通路有补体系统、肿瘤蛋白聚糖、黏着斑、肌动蛋白细胞骨架调节、PI3K-Akt通路、氨基酸的合成。结论:乙酰唑胺降低大鼠生育力可能是通过改变附睾腔液蛋白的表达阻碍精子在附睾成熟从而影响大鼠生育力。

关键词：乙酰唑胺大鼠生育力精子活力附睾腔液蛋白

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GLP研究中实验动物质量控制主要关注的问题

GLP研究中实验动物质量控制主要关注的问题

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2017年第七届药物毒理学年会

作者：王忠辉周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院上海200032

目的：实验动物质量是保证GLP动物实验顺利进行和药物非临床前安全性评价结果可重复性、可靠性和准确性的关键因素.因此有效控制实验动物的质量是药物临床前安全性评价所必须的. 方法：通过实验动物供应商的管理、GLP安评中心实验动物... 详细信息

目的：实验动物质量是保证GLP动物实验顺利进行和药物非临床前安全性评价结果可重复性、可靠性和准确性的关键因素.因此有效控制实验动物的质量是药物临床前安全性评价所必须的. 方法：通过实验动物供应商的管理、GLP安评中心实验动物房的管理和人员的操作管理三方面管理控制实验动物的质量. 1、考察实验动物供应商的资质实验动物的供应商要有生产动物的资质,生产许可证在有效期内且有每年的年检记录,每年有第三方实验动物抽检报告,供应商经营许可证和企业法人营业执照在有效期内.供应商的动物房饲育环境和设施需要符合国家标准,每年要有第三方环境检测报告.供应商生产实验动物需要配备相应饲养人员和管理人员,要有资质的兽医人员,这些人员每年需要进行体检且体检结果为健康.供应商生产动物期间动物饲料、饮水和所需垫料必须符合有关标准.供应商需要配备专车运输实验动物,装动物包装盒符合装运动物级别的卫生要求,盒子中放有运输途中相应动物数量所需卫生的饲料和饮水.每年最好去供应商养殖基地进行实地考察,建立供应商档案资料.对不良的供应商作淘汰. 2、GLP安评中心动物房的管理GLP安评中心动物房的饲育环境和设施必须符合国家标准，每年要有第三方环境检测报告。安评中心必须配备相应饲养人员、管理人员和有资质的兽医人员，这些人员每年必须进行体检且体检结果为健康。动物实验饲养期间动物饲料、饮水和所需垫料必须符合有关标准。 3、安评中心饲养人员和实验人员的操作管理对安评中心饲养人员和实验人员的操作管理必须制定相应的SOP加强管理，每年定期和不定期的对他们进行相关的培训。通过对相关人员的严格管理，使他们在相关操作过程中在实验动物身上不带入和不增加病源微生物和寄生虫。通过三方面的严格管理，做到实验动物进入安评中心时不带入病源微生物和寄生虫，在安评中心动物实验期间不增加病源微生物和寄生虫，实验动物质量得到保证。结果：通过实验动物供应商的管理、GLP安评中心实验动物房的管理和人员的管理三方面管理，实验动物质量得到有效控制。结论：只有有效控制实验动物质量，GLP动物实验才能获得可靠的实验结果。降低试验误差，确保实验结果的真实性。

关键词：药物非临床研究实验动物质量控制操作管理

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利用昆虫细胞杆状病毒表达系统表达重组人类ZP3蛋白

利用昆虫细胞杆状病毒表达系统表达重组人类ZP3蛋白

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GTAUF2014 & APSMHA2014第六届长城泌尿男科转化医学论坛暨第七届亚太男性健康与抗衰老研究学会年会

作者：卢慧刁华肖玉芳于合国李铮施惠娟上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科上海市人类精子库上海200135中国上海市计划生育科学研究所国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海200032中国

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间质-上皮转化参与子宫内膜异位症模型大鼠包囊形成

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中华生殖与避孕杂志 2018年第9期38卷 748-756页

作者：牛亚南庄梦斐曹阳郁琳张婷婷孙兆贵上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院 200437 国家人口计生委计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院上海市计划生育科学研究所200032

目的探讨间质上皮转化以及转录因子Snail在子宫内膜异位症(EMS)模型大鼠异位包囊形成中的作用。方法自体移植法建立EMS大鼠模型。选取造模成功形成包囊的EMS大鼠，分为造模后2周至7周组，取正常大鼠为正常对照组。采用免疫组织化学... 详细信息

目的探讨间质上皮转化以及转录因子Snail在子宫内膜异位症(EMS)模型大鼠异位包囊形成中的作用。方法自体移植法建立EMS大鼠模型。选取造模成功形成包囊的EMS大鼠，分为造模后2周至7周组，取正常大鼠为正常对照组。采用免疫组织化学方法研究上皮标志物(E-钙黏蛋白、角蛋白8)、间质标志物(波形蛋白)以及Snail在异位内膜包囊中的定位和表达情况，Western blotting法检测E-钙黏蛋白、波形蛋白在异位内膜包囊形成组织中的含量。采用TUNEL法检测异位包囊内部脱落细胞凋亡情况。结果免疫组织化学结果显示，EMS模型大鼠的异位内膜包囊腔上皮E-钙黏蛋白、角蛋白8和波形蛋白含量在造模后2~7周过程中，相对于包囊壁间质层均处于较高水平，而且与正常子宫内膜上皮比较，亦处于较高的水平。另发现造模后2~7周异位包囊腔上皮样细胞脱落，E-钙黏蛋白、角蛋白8、波形蛋白阳性表达，且在造模后4~5周阳性信号最强。与正常大鼠子宫内膜组织比较，造模后3~5周异位内膜包囊腔上皮中Snail阳性表达信号增强。Western blotting法检测显示，造模后2~7周异位内膜中E-钙黏蛋白、波形蛋白含量与正常内膜比较，均维持在较高水平，差异均有统计学意义( P <0.05)。TUNEL法检测发现异位包囊内部脱落细胞未发生凋亡。结论 EMS模型大鼠异位包囊腔上皮细胞可能是由间质细胞转化形成，提示间质-上皮转化(MET)参与了异位包囊形成，且Snail参与调控其过程；异位内膜包囊上皮细胞脱落以形成囊腔，但其上皮细胞脱落不伴随细胞凋亡。

关键词：子宫内膜异位症(EMS) 大鼠自体移植模型间质-上皮转化(MET) 包囊发生

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注射用灯盏花素Beagle犬安全药理学研究

注射用灯盏花素Beagle犬安全药理学研究

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2018第八届药物毒理学年会——创新技术、评估风险、保障安全

作者：郑弛阳张鑫王忠辉侯祎雯绍丛丛姜娟周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院

目的:观察注射用灯盏花素对Beagle犬呼吸及心血管系统的影响,考察药物可能关系到人的安全性的非期望药理作用。方法:雌雄各半24只动物分别按体重随机分为低(10mg/kg)、中(30mg/kg)、高剂量组(90mg/kg)和溶媒对照组,每组6只动物;平行测...

目的:观察注射用灯盏花素对Beagle犬呼吸及心血管系统的影响,考察药物可能关系到人的安全性的非期望药理作用。方法:雌雄各半24只动物分别按体重随机分为低(10mg/kg)、中(30mg/kg)、高剂量组(90mg/kg)和溶媒对照组,每组6只动物;平行测定动物给药前(0min)及给药后2min、30min、1hr、2hr及4hr的心电图、呼吸、血压及肛温。

关键词：

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药物包装材料中邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯致前列腺毒性研究

药物包装材料中邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯致前列腺毒性研究

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2017年（第七届）药物毒理学年会

作者：黄冬妍吴双双朱婧毛晓燕李雷吴建辉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理学检测中心国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院

【目的】明确环境暴露剂量邻苯二甲酸二(2-乙基)已酯(DEHP)对老年SD大鼠前列腺增生作用,并探讨其可能的机制。【方法】32只1.5岁龄老年雄性SD大鼠随机分成4组,每组8只动物,分别灌胃给予DEHP(30.0、90.0和270.0μg/kg,daily)和溶媒处理,... 详细信息

【目的】明确环境暴露剂量邻苯二甲酸二(2-乙基)已酯(DEHP)对老年SD大鼠前列腺增生作用,并探讨其可能的机制。【方法】32只1.5岁龄老年雄性SD大鼠随机分成4组,每组8只动物,分别灌胃给予DEHP(30.0、90.0和270.0μg/kg,daily)和溶媒处理,连续4周。动物于末次给药24 h后,麻醉后采血,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中睾酮(T)、雌激素(E2)和泌乳素(PRL)等激素水平。动物处死后,剖取前列腺,分叶,称重、测量体积,病理制片后HE染色观察组织形态学改变,并利用显微图像分析软件分析前列腺上皮高度变化。【结果】给予DEHP 4周后,各DEHP组前列腺重量和体积、腹侧前列腺重量、腹侧前列腺指数均大于对照组;其中高剂量DEHP组前列腺脏器系数明显增加(P<0.05),背侧前列腺重量(P<0.05)和背侧前列腺指数增加(P<0.05)。组织病理学结果显示DEPH明显升高腹侧前列腺上皮高度(P<0.01)和背侧前列腺上皮高度(P<0.05)。血清激素检测结果显示,DEHP组雌二醇和泌乳素水平均高于对照组,且随着DEPH剂量增加呈现逐渐增加的趋势,而睾酮水平则呈现下降的趋势。【结论】低剂量DEHP对老年大鼠前列腺具有促进增生作用,该增生可能通过影响内源性激素水平而实现。

关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP) 环境内分泌干扰物(EDCs) 前列腺增生老年大鼠雌激素雄激素

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BRC颗粒灌胃4周对幼龄大鼠中枢神经系统的影响

BRC颗粒灌胃4周对幼龄大鼠中枢神经系统的影响

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2018第八届药物毒理学年会——创新技术、评估风险、保障安全

作者：崇立明侯祎雯杨阳邵丛丛王忠辉张鑫周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院

目的:观察中药BRC颗粒对刚离乳SD大鼠(PND21)中枢神经系统发育的影响。方法:在BRC颗粒幼年SD大鼠灌胃重复给药研究中,分别在给药中期(D14)、给药期结束(D28)和恢复期结束(D42)增加中枢神经系统发育的相关指标(平衡协调能力、自发活动、...

目的:观察中药BRC颗粒对刚离乳SD大鼠(PND21)中枢神经系统发育的影响。方法:在BRC颗粒幼年SD大鼠灌胃重复给药研究中,分别在给药中期(D14)、给药期结束(D28)和恢复期结束(D42)增加中枢神经系统发育的相关指标(平衡协调能力、自发活动、学习记忆能力)以评价该药物对大鼠感觉运动功能、自发活动、反应性、

关键词：

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西地那非致前列腺增生的验证性研究

西地那非致前列腺增生的验证性研究

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中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

作者：吴建辉黄冬妍苏欣吴双双潘琦闫晗陈丽芬李雷孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理学检测中心国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院

目的:利用大鼠前列腺增生模型和老年大鼠,观察长期使用临床剂量西地那非对大鼠前列腺是否具有促进增生作用。方法:(1)去势雄性SD大鼠60只,随机分成阴性对照、模型对照组和三个西地那非组,每组12只动物。除阴性对照组外,其余各组动物sc 1... 详细信息

目的:利用大鼠前列腺增生模型和老年大鼠,观察长期使用临床剂量西地那非对大鼠前列腺是否具有促进增生作用。方法:(1)去势雄性SD大鼠60只,随机分成阴性对照、模型对照组和三个西地那非组,每组12只动物。除阴性对照组外,其余各组动物sc 1.0 mg/kg睾酮造模,同时西地那非组分别ig 5.0、10.0和20.0 mg/kg枸橼酸西地那非,连续4周。(2)1.5岁龄以上雄性SD大鼠32只,适应性饲养后按体重随机分成4组,依次分设对照组和三个西地那非组,每组8只动物。对照组ig 10ml/kg溶媒,西地那非组分别ig 5.0、10.0和20.0mg/kg枸橼酸西地那非,连续3个月。(3)动物每周称量体重一次,于末次给药24h后,麻醉后采血,ELISA法检测血清和前列腺组织中睾酮(T)、雌二醇(E2)和胰岛素(Ins)等水平,处死动物,剖取前列腺,测量前列腺体积、各叶前列腺湿重和总湿重,计算前列腺指数,组织切片后,利用显微图像分析系统分析前列腺上皮高度及腺腔面积大小。结果:(1)大鼠前列腺增生模型结果显示,与模型对照相比,枸橼酸西地那非能够增大良性前列腺增生(BPH)模型大鼠的前列腺体积(P<0.05),明显增加模型大鼠前列腺湿重(P<0.01)和前列腺脏体系数(P<0.01),且对BPH模型大鼠前列腺作用表现出剂量-依赖关系。病理分析结果显示,与模型对照组相比,BPH大鼠给予西地那非后,背侧叶前列腺上皮呈增高趋势;血清分析结果显示,与模型对照组相比,BPH大鼠给予西地那非后,血清中前列腺结合蛋白(PBP)呈升高趋势。(2)老年大鼠结果显示,与对照组相比,枸橼酸西地那非能明显提高老年大鼠血清中E2(P<0.05)、T(P<0.05)和背侧叶前列腺组织中T(P<0.05)水平,并且,西地那非对T水平的影响呈现出剂量-效应关系;病理分析结果显示,与对照组相比,西地那非剂量组前列腺总湿重(P<0.05)、前列腺体积(P<0.05)、前列腺脏体系数(P<0.05)、腹侧叶前列腺湿重及脏体系数、背侧叶前列腺湿重及脏体系数均明显增大,且表现出剂量-效应关系;显微图像分析结果进一步显示,西地那非各剂量组腹侧叶前列腺上皮细胞高度和背侧叶前列腺上皮细胞高度均大于对照组(P<0.05),且各剂量组背侧叶前列腺腺腔面积较对照组明显增大(P<0.05)。结论:临床使用剂量范围内,西地那非对BPH模型大鼠和老年大鼠前列腺具有促进增生作用,提示西地那非长期使用可能加重前列腺增生患者症状。

关键词：西地那非前列腺增生 BPH模型老年大鼠

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儿科用中药注射剂的幼龄动物非临床生殖与发育毒性研究

儿科用中药注射剂的幼龄动物非临床生殖与发育毒性研究

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2019年海峡两岸暨港澳青年科学家毒理学学术交流会

作者：周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院

中药注射剂的问世,为临床治疗疾病提供了更多选择和可能性,更好地丰富了临床治疗手段。其既保留了传统中药辨证施治的特点,又有效结合了注射剂作用迅速、疗效确切等优势。但是作为特殊的受试物,中药注射剂具有化学药不同的特性:独特的... 详细信息

中药注射剂的问世,为临床治疗疾病提供了更多选择和可能性,更好地丰富了临床治疗手段。其既保留了传统中药辨证施治的特点,又有效结合了注射剂作用迅速、疗效确切等优势。但是作为特殊的受试物,中药注射剂具有化学药不同的特性:独特的中医药理论体系、有一定的临床用药经验、多为复方用药、成分复杂、制备工艺更为复杂、物质基础及作用机理不甚明确、有效成分或毒性成分不清等等。因此,其安全性评价与化学药也有所不同。中药注射剂多源于临床,积累了相当的临床用药经验及有效和安全性数据,一定程度上为其进行临床研究提供了参考,但是还应考虑到大多数的药味甚至已上市的中药注射剂并无更多或更全面的儿科人群用药的安全性信息。此外,因中药注射剂成分的多样性和复杂性,使动物的药代动力学和毒代动力学研究难度增加,也无法通过代谢差异的研究进行敏感动物的筛选,故无动物及人体药代动力学数据的支持,也无法像化学药一样从成人临床药代数据推测儿科人群的用药剂量等。目前的中药注射剂,特别是儿科用中药注射剂说明书几乎无生殖与发育毒理学研究数据,而其生殖与发育毒性在临床试验中难以观察,时间较长,混杂因素较多。儿科用药的发育毒性研究更显薄弱,实际操作中还存在许多技术上的难点或瓶颈。上述这些现状也使我们清楚地认识到开展儿科用中药注射剂非临床安全性评价的重要性、必要性和紧迫性。开展中药注射剂非临床幼龄动物的安全性评价是一个具有挑战性、难度较大的工作,在遵循上述安全性评价要则的基础上,不但需要有较雄厚的生殖与发育毒理学研究的基础,还需要有一段较长时间的探索研究。相信通过国家的立法和监管,药物开发人员的意愿和要求,以及我们众多安全性评价领域的努力,儿科用中药注射剂的非临床安全性评价工作将步入正轨。

关键词：中药注射剂发育毒性幼龄动物非临床

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低剂量环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯致前列腺毒性研究

低剂量环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯致前列腺毒性...

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中国药理学会第十届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨2017育英生殖药理论坛

目的:明确环境暴露剂量邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对老年SD大鼠前列腺增生作用,并探讨其可能的机制。方法:32只1.5岁龄老年雄性SD大鼠随机分成4组,每组8只动物,分别灌胃给予DEHP(30.0、90.0和270.0μg/kg,daily)和溶媒处理,连续4... 详细信息

目的:明确环境暴露剂量邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对老年SD大鼠前列腺增生作用,并探讨其可能的机制。方法:32只1.5岁龄老年雄性SD大鼠随机分成4组,每组8只动物,分别灌胃给予DEHP(30.0、90.0和270.0μg/kg,daily)和溶媒处理,连续4周。动物于末次给药24h后,麻醉后采血,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中睾酮(T)、雌激素(E2)和泌乳素(PRL)等激素水平。动物处死后,剖取前列腺,分叶,称重、测量体积,病理制片后HE染色观察组织形态学改变,并利用显微图像分析软件分析前列腺上皮高度变化。结果:给予DEHP4周后,各DEHP组前列腺重量和体积、腹侧前列腺重量、腹侧前列腺指数均大于对照组;其中高剂量DEHP组前列腺脏器系数明显增加(P<0.05),背侧前列腺重量(P<0.05)和背侧前列腺指数增加(P <0.05)。组织病理学结果显示DEPH明显升高腹侧前列腺上皮高度(P <0.01)和背侧前列腺上皮高度(P <0.05)。血清激素检测结果显示,DEHP组雌二醇和泌乳素水平均高于对照组,且随着DEPH剂量增加呈现逐渐增加的趋势,而睾酮水平则呈现下降的趋势。结论:低剂量DEHP对老年大鼠前列腺具有促进增生作用,该增生可能通过影响内源性激素水平而实现。

关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP) 环境内分泌干扰物(EDCs) 前列腺增生老年大鼠雌激素雄激素

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