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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第3期33卷 303-308页

作者：丁蓓蓓沈卫英蒋俶王健高尔生申庆祥上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室!上海200032

从人睾丸中抽提mRNA ,合成双链cDNA ,利用合成的PCR引物扩增受精蛋白 β(fertilinβ)的整联蛋白配体区cDNA(hf2 79)。序列分析表明 ,该区编码 93个氨基酸 ,与文献报道完全相同。将hf2 79插入质粒 pGEX 4T 2 ,构建 pGEX hf2 79表达质粒 ... 详细信息

从人睾丸中抽提mRNA ,合成双链cDNA ,利用合成的PCR引物扩增受精蛋白 β(fertilinβ)的整联蛋白配体区cDNA(hf2 79)。序列分析表明 ,该区编码 93个氨基酸 ,与文献报道完全相同。将hf2 79插入质粒 pGEX 4T 2 ,构建 pGEX hf2 79表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,表达菌株经IPTG诱导 ,可产生大量可溶性的表达蛋白GST HF93。SDS PAGE分析表明融合蛋白表观分子量为 38kD ,其含量占菌体可溶性蛋白的 5 0 %以上。表达产物经谷胱甘肽转硫酶 (GST)亲和层析柱纯化 ,得到 90 %以上纯度的融合蛋白。融合蛋白经凝血酶酶切 2h可得HF93肽。再经GST亲和层析柱去除GST ,得到纯度大于 80 %的HF93肽。将其和SDS PAGE凝胶上切下的HF93多肽条带一起用于免疫BALB/c小鼠 ,经ELISA检测 ,证明获得了较高滴度的抗体

关键词：人受精蛋白β整联蛋白配体区基因克隆基因表达大肠杆菌抗体

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小鼠着床丝氨酸蛋白酶2cDNA的克隆、表达及抗体制备

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生物化学与生物物理学报 2003年第7期35卷 649-654页

作者：黄哲平王健余浩黄萍沈维雄左嘉客杨增明申庆祥上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室东北农业大学生命科学学院上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室上海200032 哈尔滨150030

以孕 4 .5天小鼠子宫着床位点总cDNA为模板 ,用PCR方法扩增获得着床丝氨酸蛋白酶 2 (ISP2 )的cDNA。序列分析表明 ,该cDNA序列中的开放阅读框编码 2 79个氨基酸 ,并与文献报道完全相同 ,但在 3′非翻译区多 2 0 4bp ,已登录于GenBank(... 详细信息

以孕 4 .5天小鼠子宫着床位点总cDNA为模板 ,用PCR方法扩增获得着床丝氨酸蛋白酶 2 (ISP2 )的cDNA。序列分析表明 ,该cDNA序列中的开放阅读框编码 2 79个氨基酸 ,并与文献报道完全相同 ,但在 3′非翻译区多 2 0 4bp ,已登录于GenBank(登录号 :AF4 4 2 819)。为了获得重组ISP2 (rISP2 ) ,构建了pGEX 4T 2 ISP2表达质粒 ,进而在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达融合蛋白质GST ISP2 ,经SDS PAGE回收的融合蛋白质用牛凝血酶酶切 ,再经SDS PAGE回收获得rISP2。用rISP2作为免疫原免疫家兔获得ISP2多克隆抗血清。用该抗血清进行免疫组化研究表明 ,ISP2在妊娠早期的小鼠子宫内膜腺上皮有特异性的高表达。

关键词： ISP2 PCR 基因表达抗体制备

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米非司酮对豚鼠子宫内膜接受性的影响

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第2期23卷 85-90页

作者：刘承权王忠兴袁瑶上海市计划生育科学研究所上海市计划生育科学研究所上海中国 200032 计划生育药具国家重点实验室

目的:从细胞及分子水平分析低剂量米非司酮在子宫内膜对胚泡接受性中的作用.方法:以组织学方法观察内膜形态变化;免疫组织学方法测定LIF及IL-6在子宫内膜的基因表达以及用半定量反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)测定内膜雌、孕激素受体nRN... 详细信息

目的:从细胞及分子水平分析低剂量米非司酮在子宫内膜对胚泡接受性中的作用.方法:以组织学方法观察内膜形态变化;免疫组织学方法测定LIF及IL-6在子宫内膜的基因表达以及用半定量反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)测定内膜雌、孕激素受体nRNA水平等方法来评估子宫内膜的成熟度.结果:米非司酮在剂量为0.03mg·kg-1·d-1时,可明显延缓子宫内膜的成熟,抑制间质细胞蜕膜化,降底LIF和IL-6在内膜的基因表达和增高内膜雌、孕激素受体mRNA水平.结论:小剂量米非司酮可直接作用于子宫内膜,影响内膜的成熟而抑制内膜对胚泡的接受性.

关键词：米非司酮子宫内膜豚鼠细胞因子

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重组人绒毛膜促性腺激素嵌合肽12的聚丙烯酰胺凝胶电泳制备

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生物化学与生物物理学报 2002年第5期34卷 671-674页

作者：邹永水徐万祥何远孙志达薛小琳上海市计划生育科学研究所计划生育药具国家重点实验室

利用板状聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)方法 ,建立了一步分离纯化基因工程表达蛋白质的新技术。在构建的人绒毛膜促性腺激素嵌合肽 (CP1 2 )表达率约为 1 %的情况下 ,借助分析制备两用型板状PAGE装置 ,通过下行和上行两次电泳以及用透析膜... 详细信息

利用板状聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)方法 ,建立了一步分离纯化基因工程表达蛋白质的新技术。在构建的人绒毛膜促性腺激素嵌合肽 (CP1 2 )表达率约为 1 %的情况下 ,借助分析制备两用型板状PAGE装置 ,通过下行和上行两次电泳以及用透析膜隔离形成收集槽这两步改进 ,从包涵体抽提液中一步纯化了目的表达产物。结果表明 ,一次上样总蛋白质量为 3～ 4mg的PAGE ,可获得 5 0～ 1 0 0 μgCP1 2蛋白 ,其相对均一性达到 95 %。研究提示此改良的制备性PAGE新技术 ,是一种分离纯化低分子量目的蛋白质的好方法

关键词：人绒毛膜促性腺激素基因工程嵌合肽聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化

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禁欲时间对男性精液质量的影响

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复旦学报（医学版） 2003年第4期30卷 391-393页

作者：李文英武俊青高尔生杨秋英陶建国陈锡宽上海市计划生育科学研究所-计划生育药具国家重点实验室上海200032

目的了解不同禁欲时间的男性精液质量状况,为临床治疗不育提供参考。方法对来自全国7个省市562名健康男性的精液质量进行分析。结果随着禁欲时间的延长,精液量、精子密度、精子总数都有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论精... 详细信息

目的了解不同禁欲时间的男性精液质量状况,为临床治疗不育提供参考。方法对来自全国7个省市562名健康男性的精液质量进行分析。结果随着禁欲时间的延长,精液量、精子密度、精子总数都有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论精子数目过少的男性,禁欲时间可以稍长,但不宜超过7 d。精子活力差而精子数量足够的男性,则禁欲时间可以稍短,3 d左右即可。

关键词：禁欲时间男性不育症精液质量流行病学质量控制

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比格犬前列腺增生模型中输精管病理变化

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中国药理学与毒理学杂志 2003年第3期17卷 221-226页

作者：吴建辉孙祖越钟恩宏朱焰刘桂明何桂林曹霖上海市计划生育科学研究所计划生育药具国家重点实验室

目的　探讨前列腺增生症中输精管的增生机制。方法　丙酸睾酮 (TP)诱导比格犬前列腺增生模型建立后 ,获取输精管组织 ,利用放射免疫分析法检测输精管组织中的双氢睾酮 (DHT)含量 ,组织经石蜡固定包埋切片 ,显微图像分析技术分析输精管... 详细信息

目的　探讨前列腺增生症中输精管的增生机制。方法　丙酸睾酮 (TP)诱导比格犬前列腺增生模型建立后 ,获取输精管组织 ,利用放射免疫分析法检测输精管组织中的双氢睾酮 (DHT)含量 ,组织经石蜡固定包埋切片 ,显微图像分析技术分析输精管管腔大小及上皮细胞高度 ,流式细胞术检测输精管组织凋亡率 ,免疫组织化学技术检测输精管组织中前列腺特异抗原 (PSA)、前列腺酸性磷酸酶 (PAP)、Bcl 2及P5 3蛋白表达 ,2 %的琼脂糖凝胶电泳观察输精管组织的凋亡情况。结果　输精管组织中DHT含量随TP剂量增大而增加 ,但无统计显著性差异。输精管管腔面积随TP增加增大 (P <0 .0 1 ) ,输精管上皮细胞高度也随TP增高 (P <0 .0 1 )。流式细胞术结果中 ,对照组细胞凋亡率高于 0 .8及 7.5mg·kg-1TP组(P <0 .0 1 )。免疫组化结果中 ,PSA ,PAP和Bcl 2表达没有明显差异 ,但各组P5 3表达均低于对照组 (P <0 .0 5 )。琼脂糖凝胶电泳结果中 ,对照组中可以看到 2 0 0bp整数倍的DNA片段 ,其他组则没有观察到类似现象。结论　DHT促进输精管增生。

关键词：输精管睾酮凋亡前列腺增生

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吉士脱酮的~1H及^(13)CNMR研究

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波谱学杂志 1999年第1期16卷 65-70页

作者：盛宛云白秀梅上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具实验室

Ｇｅｓｔｏｄｅｎｅ是避孕药物１８甲基炔诺酮的衍生物，动物实验表明它的孕激素活性为１８甲基炔诺酮的３～５倍．本文采用各种２ＤＮＭＲ技术，包括：１Ｈ１ＨＣＯＳＹ，１Ｈ１３ＣＣＯＳＹ和ＨＭＢＣ等，归属了它的１Ｈ和１３... 详细信息

Ｇｅｓｔｏｄｅｎｅ是避孕药物１８甲基炔诺酮的衍生物，动物实验表明它的孕激素活性为１８甲基炔诺酮的３～５倍．本文采用各种２ＤＮＭＲ技术，包括：１Ｈ１ＨＣＯＳＹ，１Ｈ１３ＣＣＯＳＹ和ＨＭＢＣ等，归属了它的１Ｈ和１３Ｃ的谱线。

关键词：口服避孕药二维核磁共振谱线归属吉士脱酮

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受精蛋白β在人精子表面的免疫组织化学定位

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实验生物学报 2001年第4期34卷 283-289页

作者：丁蓓蓓蒋俶蒋文珏王健高尔生左嘉客申庆祥上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室上海200032

以人受精蛋白β整联蛋白配体区为抗原免疫小鼠并制备单抗,应用免疫组化方法研究了受精蛋白β在不同状态人精子表面的分布规律。结果表明受精蛋白β散在分布于新鲜人精子的头部,获能后则向顶体区集中,顶体反应过程中同时出现表达量及分... 详细信息

以人受精蛋白β整联蛋白配体区为抗原免疫小鼠并制备单抗,应用免疫组化方法研究了受精蛋白β在不同状态人精子表面的分布规律。结果表明受精蛋白β散在分布于新鲜人精子的头部,获能后则向顶体区集中,顶体反应过程中同时出现表达量及分布位置的急剧变化,最后定位于精子头后部。其分布规律与动物受精蛋白有所不同。受精蛋白β在人精子表面分布的位置及其变化揭示其在受精过程中的重要作用。

关键词：受精蛋白β 人精子获能免疫组织化学定位分布

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中国7省市年轻男性精液质量的灰关联综合评价

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复旦学报（医学版） 2003年第5期30卷 466-469页

作者：梁翠玲武俊青高尔生陶建国杨秋英复旦大学-上海市计划生育科学研究所流行病室-计划生育药具国家重点实验室上海200032

目的　综合评价中国 7省市的年轻男性精液质量状况。方法　灰色关联分析评定 1998年 12月至1999年 12月在上海、河南、浙江、山西、青岛、河北、贵州 7省市年轻男性的精液质量状况。结果　 7个地区年轻男性精液质量从优到差的顺序如下 ... 详细信息

目的　综合评价中国 7省市的年轻男性精液质量状况。方法　灰色关联分析评定 1998年 12月至1999年 12月在上海、河南、浙江、山西、青岛、河北、贵州 7省市年轻男性的精液质量状况。结果　 7个地区年轻男性精液质量从优到差的顺序如下 :山西 (Y4)、上海 (Y1)、河北 (Y6)、贵州 (Y7)、青岛 (Y5)、河南 (Y2 )、浙江 (Y3 )。经相似程度的聚类分析可大致评定为两个等级。结论　 7个地区年轻男性精液质量可评定为两个等级 :山西、上海地区较优 ,其他地区略差。

关键词：精液质量男性灰关联分析综合评价

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RU486对兔输卵管平滑肌的收缩效应

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生理学报 1996年第3期48卷 277-283页

作者：奚明杨丽珍谢衷明沈颖李路上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室江西医学院生理教研室

应用肌肉机械－电换能器和Ｇｉｌｓｏｎ生理记录仪，观察ＲＵ４８６对假孕４ｄ兔离体输卵管平滑肌的收缩效应。结果显示：（１）ＲＵ４８６可直接作用输卵管平滑肌，使其收缩频率增加，而未明显改变收缩张力及振幅，与在体肌内注射ＲＵ... 详细信息

应用肌肉机械－电换能器和Ｇｉｌｓｏｎ生理记录仪，观察ＲＵ４８６对假孕４ｄ兔离体输卵管平滑肌的收缩效应。结果显示：（１）ＲＵ４８６可直接作用输卵管平滑肌，使其收缩频率增加，而未明显改变收缩张力及振幅，与在体肌内注射ＲＵ４８６观察到的结果相似；（２）ＲＵ４８６部分抑制ｃａ^（２＋）诱发的平滑肌收缩活动，它还与Ｖｅｒａｐａｍｉｌ诱发的抑制效应有协同作用，与ＮＥ诱发的收缩张力有拮抗作用，而对Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ诱发的效应未产生任何影响。以上结果表明，ＲＵ４８６对输卵管平滑肌的作用似乎是改变细胞内游离Ｃａ（２＋）的结果，可能干扰Ｃａ（２＋）的流入、或／和内质网Ｃａ（２＋）释放以及Ｃａ（２＋）－Ｉｐ３信息传递机制。

关键词： RU486 米非司酮避孕药输卵管平滑肌药理学

来源：评论

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