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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第3期33卷 303-308页

作者：丁蓓蓓沈卫英蒋俶王健高尔生申庆祥上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室!上海200032

从人睾丸中抽提mRNA ,合成双链cDNA ,利用合成的PCR引物扩增受精蛋白 β(fertilinβ)的整联蛋白配体区cDNA(hf2 79)。序列分析表明 ,该区编码 93个氨基酸 ,与文献报道完全相同。将hf2 79插入质粒 pGEX 4T 2 ,构建 pGEX hf2 79表达质粒 ... 详细信息

从人睾丸中抽提mRNA ,合成双链cDNA ,利用合成的PCR引物扩增受精蛋白 β(fertilinβ)的整联蛋白配体区cDNA(hf2 79)。序列分析表明 ,该区编码 93个氨基酸 ,与文献报道完全相同。将hf2 79插入质粒 pGEX 4T 2 ,构建 pGEX hf2 79表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,表达菌株经IPTG诱导 ,可产生大量可溶性的表达蛋白GST HF93。SDS PAGE分析表明融合蛋白表观分子量为 38kD ,其含量占菌体可溶性蛋白的 5 0 %以上。表达产物经谷胱甘肽转硫酶 (GST)亲和层析柱纯化 ,得到 90 %以上纯度的融合蛋白。融合蛋白经凝血酶酶切 2h可得HF93肽。再经GST亲和层析柱去除GST ,得到纯度大于 80 %的HF93肽。将其和SDS PAGE凝胶上切下的HF93多肽条带一起用于免疫BALB/c小鼠 ,经ELISA检测 ,证明获得了较高滴度的抗体

关键词：人受精蛋白β整联蛋白配体区基因克隆基因表达大肠杆菌抗体

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小鼠着床丝氨酸蛋白酶2cDNA的克隆、表达及抗体制备

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生物化学与生物物理学报 2003年第7期35卷 649-654页

作者：黄哲平王健余浩黄萍沈维雄左嘉客杨增明申庆祥上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室东北农业大学生命科学学院上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室上海200032 哈尔滨150030

以孕 4 .5天小鼠子宫着床位点总cDNA为模板 ,用PCR方法扩增获得着床丝氨酸蛋白酶 2 (ISP2 )的cDNA。序列分析表明 ,该cDNA序列中的开放阅读框编码 2 79个氨基酸 ,并与文献报道完全相同 ,但在 3′非翻译区多 2 0 4bp ,已登录于GenBank(... 详细信息

以孕 4 .5天小鼠子宫着床位点总cDNA为模板 ,用PCR方法扩增获得着床丝氨酸蛋白酶 2 (ISP2 )的cDNA。序列分析表明 ,该cDNA序列中的开放阅读框编码 2 79个氨基酸 ,并与文献报道完全相同 ,但在 3′非翻译区多 2 0 4bp ,已登录于GenBank(登录号 :AF4 4 2 819)。为了获得重组ISP2 (rISP2 ) ,构建了pGEX 4T 2 ISP2表达质粒 ,进而在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达融合蛋白质GST ISP2 ,经SDS PAGE回收的融合蛋白质用牛凝血酶酶切 ,再经SDS PAGE回收获得rISP2。用rISP2作为免疫原免疫家兔获得ISP2多克隆抗血清。用该抗血清进行免疫组化研究表明 ,ISP2在妊娠早期的小鼠子宫内膜腺上皮有特异性的高表达。

关键词： ISP2 PCR 基因表达抗体制备

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米非司酮对豚鼠子宫内膜接受性的影响

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第2期23卷 85-90页

作者：刘承权王忠兴袁瑶上海市计划生育科学研究所上海市计划生育科学研究所上海中国 200032 计划生育药具国家重点实验室

目的:从细胞及分子水平分析低剂量米非司酮在子宫内膜对胚泡接受性中的作用.方法:以组织学方法观察内膜形态变化;免疫组织学方法测定LIF及IL-6在子宫内膜的基因表达以及用半定量反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)测定内膜雌、孕激素受体nRN... 详细信息

目的:从细胞及分子水平分析低剂量米非司酮在子宫内膜对胚泡接受性中的作用.方法:以组织学方法观察内膜形态变化;免疫组织学方法测定LIF及IL-6在子宫内膜的基因表达以及用半定量反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)测定内膜雌、孕激素受体nRNA水平等方法来评估子宫内膜的成熟度.结果:米非司酮在剂量为0.03mg·kg-1·d-1时,可明显延缓子宫内膜的成熟,抑制间质细胞蜕膜化,降底LIF和IL-6在内膜的基因表达和增高内膜雌、孕激素受体mRNA水平.结论:小剂量米非司酮可直接作用于子宫内膜,影响内膜的成熟而抑制内膜对胚泡的接受性.

关键词：米非司酮子宫内膜豚鼠细胞因子

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禁欲时间对男性精液质量的影响

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复旦学报（医学版） 2003年第4期30卷 391-393页

作者：李文英武俊青高尔生杨秋英陶建国陈锡宽上海市计划生育科学研究所-计划生育药具国家重点实验室上海200032

目的了解不同禁欲时间的男性精液质量状况,为临床治疗不育提供参考。方法对来自全国7个省市562名健康男性的精液质量进行分析。结果随着禁欲时间的延长,精液量、精子密度、精子总数都有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论精... 详细信息

目的了解不同禁欲时间的男性精液质量状况,为临床治疗不育提供参考。方法对来自全国7个省市562名健康男性的精液质量进行分析。结果随着禁欲时间的延长,精液量、精子密度、精子总数都有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论精子数目过少的男性,禁欲时间可以稍长,但不宜超过7 d。精子活力差而精子数量足够的男性,则禁欲时间可以稍短,3 d左右即可。

关键词：禁欲时间男性不育症精液质量流行病学质量控制

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受精蛋白β在人精子表面的免疫组织化学定位

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实验生物学报 2001年第4期34卷 283-289页

作者：丁蓓蓓蒋俶蒋文珏王健高尔生左嘉客申庆祥上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室上海200032

以人受精蛋白β整联蛋白配体区为抗原免疫小鼠并制备单抗,应用免疫组化方法研究了受精蛋白β在不同状态人精子表面的分布规律。结果表明受精蛋白β散在分布于新鲜人精子的头部,获能后则向顶体区集中,顶体反应过程中同时出现表达量及分... 详细信息

以人受精蛋白β整联蛋白配体区为抗原免疫小鼠并制备单抗,应用免疫组化方法研究了受精蛋白β在不同状态人精子表面的分布规律。结果表明受精蛋白β散在分布于新鲜人精子的头部,获能后则向顶体区集中,顶体反应过程中同时出现表达量及分布位置的急剧变化,最后定位于精子头后部。其分布规律与动物受精蛋白有所不同。受精蛋白β在人精子表面分布的位置及其变化揭示其在受精过程中的重要作用。

关键词：受精蛋白β 人精子获能免疫组织化学定位分布

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中国7省市年轻男性精液质量的灰关联综合评价

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复旦学报（医学版） 2003年第5期30卷 466-469页

作者：梁翠玲武俊青高尔生陶建国杨秋英复旦大学-上海市计划生育科学研究所流行病室-计划生育药具国家重点实验室上海200032

目的　综合评价中国 7省市的年轻男性精液质量状况。方法　灰色关联分析评定 1998年 12月至1999年 12月在上海、河南、浙江、山西、青岛、河北、贵州 7省市年轻男性的精液质量状况。结果　 7个地区年轻男性精液质量从优到差的顺序如下 ... 详细信息

目的　综合评价中国 7省市的年轻男性精液质量状况。方法　灰色关联分析评定 1998年 12月至1999年 12月在上海、河南、浙江、山西、青岛、河北、贵州 7省市年轻男性的精液质量状况。结果　 7个地区年轻男性精液质量从优到差的顺序如下 :山西 (Y4)、上海 (Y1)、河北 (Y6)、贵州 (Y7)、青岛 (Y5)、河南 (Y2 )、浙江 (Y3 )。经相似程度的聚类分析可大致评定为两个等级。结论　 7个地区年轻男性精液质量可评定为两个等级 :山西、上海地区较优 ,其他地区略差。

关键词：精液质量男性灰关联分析综合评价

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避孕节育技术服务咨询规范步骤

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生殖与避孕 2002年第6期22卷 377-379页

作者：武俊青陈锡宽李玉艳陈约高尔生上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室上海200032

根据国内外避孕节育知情选择经验,介绍咨询服务的六个步骤,也叫“聚集”原则(GATHER原则),即G-greeting:问候对象,建立良好的人际关系;A-asking:询问对象详细的情况;T-telling:告知对象有关的避孕信息;H-helping:帮助对象做出知情选择;E... 详细信息

根据国内外避孕节育知情选择经验,介绍咨询服务的六个步骤,也叫“聚集”原则(GATHER原则),即G-greeting:问候对象,建立良好的人际关系;A-asking:询问对象详细的情况;T-telling:告知对象有关的避孕信息;H-helping:帮助对象做出知情选择;E-explaining:解释对象所选避孕方法的使用;R-retuning:必要时让对象回来复诊。

关键词：聚集原则知情选择咨询技巧步骤避孕节育技术

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RU486对兔输卵管平滑肌的收缩效应

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生理学报 1996年第3期48卷 277-283页

作者：奚明杨丽珍谢衷明沈颖李路上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室江西医学院生理教研室

应用肌肉机械－电换能器和Ｇｉｌｓｏｎ生理记录仪，观察ＲＵ４８６对假孕４ｄ兔离体输卵管平滑肌的收缩效应。结果显示：（１）ＲＵ４８６可直接作用输卵管平滑肌，使其收缩频率增加，而未明显改变收缩张力及振幅，与在体肌内注射ＲＵ... 详细信息

应用肌肉机械－电换能器和Ｇｉｌｓｏｎ生理记录仪，观察ＲＵ４８６对假孕４ｄ兔离体输卵管平滑肌的收缩效应。结果显示：（１）ＲＵ４８６可直接作用输卵管平滑肌，使其收缩频率增加，而未明显改变收缩张力及振幅，与在体肌内注射ＲＵ４８６观察到的结果相似；（２）ＲＵ４８６部分抑制ｃａ^（２＋）诱发的平滑肌收缩活动，它还与Ｖｅｒａｐａｍｉｌ诱发的抑制效应有协同作用，与ＮＥ诱发的收缩张力有拮抗作用，而对Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ诱发的效应未产生任何影响。以上结果表明，ＲＵ４８６对输卵管平滑肌的作用似乎是改变细胞内游离Ｃａ（２＋）的结果，可能干扰Ｃａ（２＋）的流入、或／和内质网Ｃａ（２＋）释放以及Ｃａ（２＋）－Ｉｐ３信息传递机制。

关键词： RU486 米非司酮避孕药输卵管平滑肌药理学

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去氧胆酰酪氨酸对人类精子质膜完整性和细胞凋亡的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2014年第3期28卷 386-390页

作者：温成丽职瑞娜王玉柱黄超李卫华丁训城复旦大学公共卫生学院上海200032 上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室上海200032

目的探讨去氧胆酰酪氨酸(DCT)对人类精子活力、质膜完整性以及凋亡的影响。方法上游高活力人类精子分别与DCT 0.25,0.5和1.0 g·L-1作用20 min,取精子悬液分析精子活率(SM)和活力(SV);SYBR-14/PI双染后经过荧光显微镜和流式细胞仪... 详细信息

目的探讨去氧胆酰酪氨酸(DCT)对人类精子活力、质膜完整性以及凋亡的影响。方法上游高活力人类精子分别与DCT 0.25,0.5和1.0 g·L-1作用20 min,取精子悬液分析精子活率(SM)和活力(SV);SYBR-14/PI双染后经过荧光显微镜和流式细胞仪观察质膜完整性,AnnexinⅤ/PI双染流式细胞仪分析细胞凋亡。结果 DCT对SM和SV均有显著的抑制作用,且存在量-效关系(rSV=0.91,rSM=0.88,P<0.05)。质膜完整性结果显示,质膜破损精子在DCT 0.25,0.5和1.0 g·L-1时质膜破损精子百分率分别为(54.3±9.8)%,(73.8±3.5)%和(80.6±8.3)%,与空白对照组具有明显差别(P<0.05),且具有明显的量效关系(r=0.91,P<0.05)。凋亡实验结果显示,晚期凋亡精子百分率在0.25,0.5和1.0 g·L-1时,分别是(11.9±1.2)%,(30.1±6.3)%和(75.6±6.3)%,具有明显的浓度依赖性(r=0.98,P<0.05)。DCT≤0.5 g·L-1引起精子早期凋亡率升高,但是高浓度时却出现降低趋势。结论 DCT不仅破坏精子质膜完整性,同时诱发精子凋亡,导致受精能力降低或消失。

关键词：去氧胆酰酪氨酸精子获能细胞凋亡

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视锥细胞环核苷酸门控通道研究进展

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中华实验眼科杂志 2015年第6期33卷 573-576页

作者：徐建华(综述) 张兆奉杜晶(审校) 上海市计划生育科学研究所 200032 国家人口计划生育委员会计划生育药具重点实验室

环核苷酸门控（CNG）通道是由环核苷酸活化的离子通道，其在视觉和嗅觉信号传导过程中发挥重要作用。CNG通道蛋白由6个不同基因编码，包含4个A亚单元（A1～A4）和2个B亚单元（B1和B3），其中CNGA3和CNGB3基因突变与全色盲发病相关。近... 详细信息

环核苷酸门控（CNG）通道是由环核苷酸活化的离子通道，其在视觉和嗅觉信号传导过程中发挥重要作用。CNG通道蛋白由6个不同基因编码，包含4个A亚单元（A1～A4）和2个B亚单元（B1和B3），其中CNGA3和CNGB3基因突变与全色盲发病相关。近年来，大量研究表明对全色盲动物模型进行基因治疗后视网膜功能恢复效果明显。就视锥细胞CNG通道的功能研究和CNG通道缺陷小鼠模型的发病机制和基因治疗研究进行综述。

关键词：环核苷酸门控通道视锥细胞基因敲除

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