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中国毒理学会第四届中青年学者科技论坛

作者：崇立明王忠辉杨阳周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室

目的在生殖毒理学研究中,建立妊娠大鼠体内给药模型,并在体外检测子宫平滑肌张力的方法,模拟体内实验中受试物对妊娠子宫的影响。方法根据《药物生殖毒性研究技术指导原则》,SD大鼠于妊娠第6～15天(GD6-15)给予受试物,在妊娠第20天(GD20... 详细信息

目的在生殖毒理学研究中,建立妊娠大鼠体内给药模型,并在体外检测子宫平滑肌张力的方法,模拟体内实验中受试物对妊娠子宫的影响。方法根据《药物生殖毒性研究技术指导原则》,SD大鼠于妊娠第6～15天(GD6-15)给予受试物,在妊娠第20天(GD20)取子宫平滑肌,分别给予不同浓度缩宫素和硫酸镁溶液,选择试验的最佳条件。在此基础上,测定不同剂量组孕鼠离体子宫平滑肌张力的变化情况,采用RM-6240BD多道生理信号采集处理系统统计分析数据。结果缩宫素浓度为0.007U/ml时,可使子宫平滑肌较好的节律性收缩;硫酸镁浓度为0.008mol/ml时,可使子宫平滑肌有较好的抑制作用。在正式的实验中,也表明子宫平滑肌对缩宫素和硫酸镁的刺激有剂量-反应增加的趋势。结论本研究建立了孕鼠离体子宫平滑肌张力的测定方法,利用该方法可以更好的反映受试物对孕鼠子宫肌的毒性作用,更加全面的评价受试物的生殖毒性。

关键词：生殖毒性孕鼠离体子宫平滑肌张力

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改进离体子宫平滑肌测定方法的尝试研究

改进离体子宫平滑肌测定方法的尝试研究

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中国毒理学会第四届中青年学者科技论坛

作者：王忠辉崇立明杨阳周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室

目的探索离体子宫平滑肌测定方法中,使用增氧泵方式取代混合氧为离体子宫平滑肌通气的可行性。方法以新西兰兔的离体子宫平滑肌为例,每只新西兰兔取3×10mm大小子宫平滑肌3段,随机分为混合氧组、增氧泵通气组和不通气组,每组8段子宫... 详细信息

目的探索离体子宫平滑肌测定方法中,使用增氧泵方式取代混合氧为离体子宫平滑肌通气的可行性。方法以新西兰兔的离体子宫平滑肌为例,每只新西兰兔取3×10mm大小子宫平滑肌3段,随机分为混合氧组、增氧泵通气组和不通气组,每组8段子宫;在营养液中分别通入混合氧、增氧泵通气及不通气,采用RM-6240BD多道生理信号采集处理系统,观察新西兰兔离体子宫平滑肌的收缩反应,测定子宫平滑肌的收缩幅度、频率及活动力(幅度×频率)。结果与营养液内通入混合氧相比,离体子宫平滑肌的活动力在混合氧组与增氧泵通气组间无统计学差异(P>0.05),不通气组的频率和活动力均有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结论离体子宫平滑肌测定方法中,使用增氧泵通气也可以达到供氧及促进液体流动的双重作用,可以替代传统的使用钢瓶通入混合氧的方法,而且增氧泵操作简单、方便、经济,是离体子宫实验的理想选择。

关键词：离体子宫平滑肌活动力增氧泵

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大鼠睾丸组织固定法的优选研究

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中国比较医学杂志 2013年第6期23卷 20-23,I0002-I0004页

作者：李雷严建燕苏欣邵悦程熠周莉刘向云孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理学检测中心上海200032

目的选择一种最优势、合理的固定方式以提高对睾丸组织制片效果,以配合不同种类的科学研究。方法选用10%甲醛溶液、NBF-Bouin's、Bouin's和改良Davidson's四种不同的固定液对大鼠睾丸进行充分固定后,制作石蜡切片,进行HE染... 详细信息

目的选择一种最优势、合理的固定方式以提高对睾丸组织制片效果,以配合不同种类的科学研究。方法选用10%甲醛溶液、NBF-Bouin's、Bouin's和改良Davidson's四种不同的固定液对大鼠睾丸进行充分固定后,制作石蜡切片,进行HE染色,比较不同固定液中的睾丸组织学形态的差异;利用糖原特殊染色(PAS),探讨不同固定液对睾丸糖原观察的影响;采用免疫组织化染色,测评睾丸组织内雄激素受体的固定效果。结果改良Davidson's固定液较NBF-Bouin's引起的曲细精管萎缩轻,形态更为清晰,用免疫组织化学方法检测雄激素更为敏感,并且改良Davidson's固定液在需要对精子发生进行分期时,其PAS染色的效果与Bouin's液固定后等同。结论与其它固定液相比,改良Davidoson液对大鼠睾丸的固定效果较好。

关键词：固定液大鼠睾丸 Davidson’s 免疫组化染色

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犬睾丸组织固定方法的比较研究

犬睾丸组织固定方法的比较研究

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中国毒理学会第四届中青年学者科技论坛

作者：李雷严建燕苏欣周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室

目的比较不同组织固定方法对犬睾丸组织病理制片及诊断影响,为合理选择组织固定方式提供实验室依据。方法犬睾丸组织随机分为4组,根据固定方法不同依次为:福尔马林组(A组)、NBF-Bouin's组(B组)、Bouin's组(C组)和改良Davidson&... 详细信息

目的比较不同组织固定方法对犬睾丸组织病理制片及诊断影响,为合理选择组织固定方式提供实验室依据。方法犬睾丸组织随机分为4组,根据固定方法不同依次为:福尔马林组(A组)、NBF-Bouin's组(B组)、Bouin's组(C组)和改良Davidson's组(D组),每组样本量为4。各组的具体固定程序为:A组动物睾丸放入10%福尔马林溶液固定48 h;B组动物睾丸放入Bouin's液中固定12 h后转入10%中性福尔马林溶液中继续固定24h;C组动物睾丸放入Bouin's液中固定24 h后,在80%乙醇中浸泡和流水冲洗,进行脱苦味酸处理;D组动物睾丸在改良的Davidson's液中固定时间(18～24)h后(固定时间最好不超过24 h)转入10%福尔马林溶液液中继续固定24 h。组织固定好后,将睾丸从中部横切,取4 mm厚度组织样本,经过梯度酒精脱水,二甲苯透明及浸蜡处理后包埋成蜡块,并制作成4 um厚的切片,分别进行HE染色(苏木素-伊红染色)、PAS染色(糖原染色,碘酸雪夫染色)和免疫组织化染色(以试剂厂家提供的方法检测雄激素受体)后封片。结果 (1)HE染色结果显示:10%福尔马林固定的睾丸生精小管和生精细胞不论外周还是中央都比其他固定液收缩程度严重,而改良的Davidson's液的固定效果最为理想,生精小管的和生精细胞的收缩程度最轻,NBF-Bouin's和Bouin's液的固定效果次之;(2)免疫组化结果显示:不管是外周或是中央生精小管,其雄激素受体以改良的Davidson's液固定的阳性表达最为明显,阳性检出效果最佳;(3)PAS结果显示改良的Davidson's和NBF-Bouin's固定液对顶体精子的固定效果很好,睾丸生精小管里的精子顶体清晰,而10%福尔马林溶液和Bouin's固定效果要次之。结论改良Davidson's液与NBFBouin's相比,引起的曲细精管萎缩不明显,形态更为清晰,用免疫组织化学方法检测雄激素更为敏感,并且改良Davidson's液在需要对精子发生进行分期时,也能达到与用Bouin液固定后的PAS染色效果。

关键词：固定方法睾丸犬比较研究

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两种啤酒花浸膏对雄性小鼠生殖毒性的研究

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生殖与避孕 2014年第5期34卷 354-359页

作者：邵悦李雷崇立明许丽桂博刘向云周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理学检测中心上海200032

目的:观察2种不同厂家啤酒花浸膏(hops extract)对雄性小鼠生殖功能的作用。方法:成年小鼠随机分为A组和B组,分别灌胃给予A、B厂家的啤酒花浸膏连续20 d,均设3个剂量亚组:按国家规定的人嗜酒标准的1倍剂量(低剂量组)、10倍剂量(中剂量组... 详细信息

目的:观察2种不同厂家啤酒花浸膏(hops extract)对雄性小鼠生殖功能的作用。方法:成年小鼠随机分为A组和B组,分别灌胃给予A、B厂家的啤酒花浸膏连续20 d,均设3个剂量亚组:按国家规定的人嗜酒标准的1倍剂量(低剂量组)、10倍剂量(中剂量组)和100倍剂量(高剂量组)给予以玉米油为溶剂的啤酒花浸膏;另设溶剂对照组,每亚组5只动物。观察小鼠附睾尾精子数量、精子存活率、活动精子数、精子畸形率、生精小管直径,测定血清中睾酮(T)、双氢睾酮(DHT)和雌二醇(E2)的含量以及观察肝、脾、肾、睾丸、附睾等器官的病理改变。结果:2种不同啤酒花浸膏灌胃组小鼠的精子畸形率均较对照组高,睾丸的脏器系数均高于对照组,血清T、DHT和E2含量均低于对照组,差异有统计学意义。HE染色结果显示摄入各剂量啤酒花浸膏小鼠对睾丸、附睾组织结构无明显影响。结论:高剂量组的两种不同啤酒花浸膏对小鼠的精子均有致畸作用,并可使血清T、DHT和E2含量降低。

关键词：啤酒花浸膏 ICR小鼠生殖毒性

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医用热硫化硅橡胶安全性评价

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生殖与避孕 1991年第4期11卷 55-59页

作者：卢琦华潘漪清刘桂明张瑞雯刘力敏孙皎孟爱英上海市计划生育科学研究所药理毒理室江西省卫生学校上海第二医科大学生物材料研究室

我们对制造国产S-117型避孕宫颈帽的医用热硫化硅橡胶材料进行了急性毒性、细胞毒性、刺激性、致热原、体外溶血、过敏、肌肉内埋植等生物相容性试验,以及致畸胎、Ames试验。结果证明该材料无明显毒性作用。

关键词：宫颈帽硅橡胶安全性

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质量保证工作中的原则和变通

质量保证工作中的原则和变通

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2007年全国药物毒理学会议

作者：张晓芳谢琛静孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心

质量保证部门(Quality Assurance Unit,QAU),其频繁的监督检查和不断地提出整改意见,对被检查者来说,不免有“吹毛求疵”的嫌疑。如何在实际工作中既能执行原则,在与人相处上又能游刃有余,对 QAU 工作人员来说,是一个很大的挑战。现就... 详细信息

质量保证部门(Quality Assurance Unit,QAU),其频繁的监督检查和不断地提出整改意见,对被检查者来说,不免有“吹毛求疵”的嫌疑。如何在实际工作中既能执行原则,在与人相处上又能游刃有余,对 QAU 工作人员来说,是一个很大的挑战。现就我们中心的 QA 工作,谈点体会：

关键词：新药临床前安全性评价质量保证工作原则

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环磷酰胺对新西兰兔胚胎-胎仔发育的毒性作用研究

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药物不良反应杂志 2013年第2期15卷 87-92页

作者：周莉姜娟王永陈颖许丽崇立明闫晗王华孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室/中国生育调节药物毒理检测中心 200032

目的探讨环磷酰胺用作兔胚胎一胎仔发育毒性实验阳性对照药物的可行性及最佳用药方案，为顺利开展规范化生殖毒性试验提供依据。方法实验用普通级新西兰兔，以交配成功日为妊娠第0天（GD0），采用计算机完全随机区组法将妊娠兔分为4组... 详细信息

目的探讨环磷酰胺用作兔胚胎一胎仔发育毒性实验阳性对照药物的可行性及最佳用药方案，为顺利开展规范化生殖毒性试验提供依据。方法实验用普通级新西兰兔，以交配成功日为妊娠第0天（GD0），采用计算机完全随机区组法将妊娠兔分为4组，包括环磷酰胺A组（14只，GD6～20环磷酰胺18mg／kg，10：／a灌胃）、B组（11只，GD10—13环磷酰胺25mg／kg，1次／d皮下注射）、C组（12只，GD6～18环磷酰胺15mg／kg，1次／d肌内注射）和溶媒对照组（12只，GD6—18生理盐水2ml／kg，1次／d灌胃）。观察用药期间动物的一般情况，分别于GD0、3、6、10、13、15、18、20、24、28对各组妊娠兔称重并计算宫外增重，于GD5和GD28取兔血清测定睾酮、黄体酮和雌二醇水平。GD28处死各组兔，取胎仔，记录黄体数、着床数、活胎率、吸收胎率、死胎率；检查胎仔，计算外观、内脏和骨骼畸形发生率。结果环磷酰胺A组兔GD10和GD15、环磷酰胺B和C组兔GDl5体重均明显低于溶媒对照组（P〈0．05或P〈0．01）；环磷酰胺A组宫外增重明显低于溶媒对照组[（-0．013±0．163）kg比（0．208±0．194）kg，P〈0．01]。GD28与GD5的激素水平差值比较显示，环磷酰胺A组激素水平变化明显，与溶媒对照组相比，雌二醇和睾酮变化幅度差异有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05），黄体酮变化幅度差异无统计学意义（P〉0．05）；环磷酰胺B组及C组激素变化幅度与溶媒对照组相比，均无统计学意义（P〉0．05）。大体解剖未见母兔有明显异常。环磷酰胺A组、B组活胎率（65．1％、19．2％）均明显低于溶媒对照组（93．1％）（均P〈0．01），吸收胎率（17．4％、53．9％）及死胎率（17．4％、26．9％）均明显高于溶媒对照组（4．2％、2．8％）（均P〈0．01）。环磷酰胺A组、B组、C组胎仔外观畸形发生率（60．6％、93．3％、16．1％）、内脏畸形发生率（62．9％、93．3％、25．9％）及骨骼畸形发生率（91．4％、100．0％、61．7％）均明显高于溶媒对照组（0、0、3．0％）（均P〈0．01）。结论环磷酰胺用作新西兰兔胚胎-胎仔发育毒性实验阳性对照药物是可行的，其最佳用药方案为18m∥kg，10c／a灌胃，GD6～20连续用药15d。

关键词：环磷酰胺药物毒性兔胚胎和胎儿发育

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药物非临床生殖毒性实验中优选阳性对照药的探索

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中南药学 2014年第8期12卷 726-731页

作者：孙祖越周莉上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心上海200032

目的探索在药物非临床生殖毒性实验中,选择较为适宜的阳性对照药。方法选择本实验室不同阶段开展的生殖毒性实验结果,采用列表对比方式汇总和分析。结果生育力与早期胚胎发育毒性实验、胚胎-胎仔发育毒性实验、围产期毒性实验结果均出... 详细信息

目的探索在药物非临床生殖毒性实验中,选择较为适宜的阳性对照药。方法选择本实验室不同阶段开展的生殖毒性实验结果,采用列表对比方式汇总和分析。结果生育力与早期胚胎发育毒性实验、胚胎-胎仔发育毒性实验、围产期毒性实验结果均出现阳性反应。结论在大鼠生育力与早期胚胎发育毒性实验中选择环磷酰胺,在大鼠胚胎-胎仔发育毒性实验中选敌枯双和环磷酰胺,在兔胚胎-胎仔发育毒性实验中选反应停和环磷酰胺,在围产期毒性实验中选择丙基硫氧嘧啶为阳性对照药都是较为适宜的。

关键词：非临床实验生殖毒性大鼠兔子阳性对照药

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注射用灯盏花素Beagle犬和小鼠安全药理学差异性研究

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中南药学 2015年第5期13卷 458-464页

作者：谢琛静骆永伟王蓉王永陈颖桂博周莉孙祖越上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室中国生育调节药物毒理检测中心上海200032

目的观察注射用灯盏花素对Beagle犬呼吸系统、心血管系统以及ICR小鼠协调功能和自发活动的影响,考察药物可能关系到人安全性的非期望药理作用。方法 24只Beagle犬雌雄各半,按体重随机分为10、30、90 mg·kg-1和溶媒对照组,每组6只,... 详细信息

目的观察注射用灯盏花素对Beagle犬呼吸系统、心血管系统以及ICR小鼠协调功能和自发活动的影响,考察药物可能关系到人安全性的非期望药理作用。方法 24只Beagle犬雌雄各半,按体重随机分为10、30、90 mg·kg-1和溶媒对照组,每组6只,平行测定动物给药前和给药后2 min、30 min、1 h、2 h及4 h的心电图、呼吸、血压及肛温;ICR小鼠80只雌雄各半,其中40只按体重随机分为10、100、500mg·kg-1和溶媒对照组,分别尾静脉给予不同剂量注射用灯盏花素后观察动物机体协调能力;另外40只同样分组测定给药后不同时间点的小鼠自发活动次数。结果相同时间点各剂量组与溶媒对照组及给药前自身比较发现,Beagle犬心电指标、体温、收缩压、舒张压和平均动脉压均有一定程度的波动,但差异无统计学意义(P>0.05)。ICR小鼠给药后高剂量组出现闭眼和运动减少等反应,1 h左右恢复正常;与溶媒对照组比较,各组动物协调功能差异没有统计学意义(P>0.05),高剂量组雌雄小鼠给药后2 min和30min自发活动次数均有下降的趋势,雌鼠给药后2 min自发活动次数明显减少(P<0.05)。结论在本实验条件下,单次静脉给予注射用灯盏花素对Beagle犬的呼吸、心血管系统及体温无明显影响。单次给予注射用灯盏花素对小鼠协调功能无明显影响,500 mg·kg-1注射用灯盏花素对雌性小鼠在2 min时会产生一过性的轻度躯体运动障碍或中枢抑制作用。

关键词：注射用灯盏花素小鼠 Beagle犬安全药理学差异性

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