检索结果-内蒙古大学图书馆

目的 :通过原核表达系统获得研制ZP疫苗的靶抗原。方法 :用PCR方法删除猪卵透明带 3α(pZP3α)cDNA 5’端非编码区碱基顺序。在扩增的该基因 5’端小片段与双酶切 3’端大片段在ApaI位点相连后 ,通过双酶切位点将读框完整的目的基因定向插入pBV2 2 1表达质粒PRPL 启动子下游的多克隆区。结果 :此重组表达质粒转化宿主菌后经热诱导培养 ,可在SDS PAGE胶上观察到 6 1kD的特异蛋白表达条带 ,而且它在Westernblot鉴定实验中能被抗pZPIgGs识别。结论

关键词：猪ZP3acDNA 大肠杆菌基因表达避孕疫苗

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HCG避孕疫苗:β-亚单位免疫原的分子修饰和重建

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自然杂志 2000年第1期22卷 22-25页

作者：徐万祥谢毅上海市计划生育科学研究所副研究员上海200032 复旦大学遗传工程国家重点实验室教授上海200433

以印度Talwar的HSD-hCG疫苗通过人临床Ⅱ期试验为标志,hCG疫苗在证实人类免疫避孕可行这一点上,第一个获得了具有里程碑意义的重大突破。但此类原型hCG疫苗存在制备困难、成本高及其免疫应答受MHC遗传限制等明显缺陷,被判定不适合推广... 详细信息

以印度Talwar的HSD-hCG疫苗通过人临床Ⅱ期试验为标志,hCG疫苗在证实人类免疫避孕可行这一点上,第一个获得了具有里程碑意义的重大突破。但此类原型hCG疫苗存在制备困难、成本高及其免疫应答受MHC遗传限制等明显缺陷,被判定不适合推广应用。因此,如何克服hCG疫苗现有问题,使之早日为人类生育控制作出贡献,乃是近年来相关学者普遍关注并积极探索的重要课题。本文以抗原的基因工程制备、hCGβ分子修饰或重建以及免疫方式变革为侧重点,介绍了目前国内外hCG疫苗研究中有代表性的若干最新进展。

关键词：基因表达分子修饰 HCG疫苗 β亚单位免疫原

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猪卵透明带-3β融合蛋白在***中的表达和鉴定

引用

中国免疫学杂志 1998年第6期14卷 420-423页

作者：徐万祥邱德义王健谢毅顾少华黄燕赵寿元上海市计划生育科学研究所复旦大学遗传工程国家重点实验室

对全长猪卵透明带－３β（ｐＺＰ３β）ｃＤＮＡ的５端重新测序分析，发现文献报道的该克隆基因５端非编码序列中漏读了两个碱基，继而选择符合ｐＺＰ３βｃＤＮＡ阅读框的ｐＷＲ４５０－２载体质粒，通过双酶切构建了β－半乳糖苷... 详细信息

对全长猪卵透明带－３β（ｐＺＰ３β）ｃＤＮＡ的５端重新测序分析，发现文献报道的该克隆基因５端非编码序列中漏读了两个碱基，继而选择符合ｐＺＰ３βｃＤＮＡ阅读框的ｐＷＲ４５０－２载体质粒，通过双酶切构建了β－半乳糖苷酶／ｐＺＰ３β融合蛋白基因的细菌表达质粒。转化宿主菌后用ＩＰＴＧ诱导，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明ｐＺＰ３β融合蛋白在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得表达，并在蛋白印迹鉴定中能同兔抗猪ＺＰＩｇＧ呈特异性免疫反应。

关键词：猪卵透明带 pZP3β 融合蛋白基因表达

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寡聚脱氧核苷酸介导的体外多点定位突变——五点定位突变法改造枯草杆菌蛋白酶E基因

引用

武汉大学学报（自然科学版） 1997年第2期43卷 227-232页

作者：谢毅肖谷田王顺德孙筱清张婕徐万祥吴小舟复旦大学遗传工程国家重点实验室上海市计划生育科学研究所

用５个化学合成的寡聚脱氧核苷酸片段作为诱变引物，对枯草杆菌蛋白酶Ｅ基因（ＡｐｒＥ）同时进行体外诱变．转化子经打点杂交及温度梯度洗膜法筛选出了若干在５个预定位点同时突变了的突变子，其突变效率达到５０％．同时还得到了１个... 详细信息

用５个化学合成的寡聚脱氧核苷酸片段作为诱变引物，对枯草杆菌蛋白酶Ｅ基因（ＡｐｒＥ）同时进行体外诱变．转化子经打点杂交及温度梯度洗膜法筛选出了若干在５个预定位点同时突变了的突变子，其突变效率达到５０％．同时还得到了１个四点突变的突变子．突变子经ＤＮＡ测序分析。

关键词：定点突变枯草杆菌蛋白酶寡聚脱氧核苷酸诱变

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新化合物 A-失碳-17β-羟基-17α-乙炔基-Δ^(3(5),9(10))-雌甾二烯-2-酮的合成

引用

药学学报 1997年第6期32卷 416-419页

作者：周向东周维善王钟麒中国科学院上海有机化学研究所第三军医大学基础部化学教研室国家计划生育药具重点实验室上海市计划生育科学研究所

报道新化合物Ａ失碳１７β羟基１７α乙炔基Δ３（５），９（１０）雌甾二烯２酮２的合成。文中探讨了用炔钾粗品对Ａ失碳Δ３（５），９（１０）雌甾二烯２，１７二酮１和Ａ失碳６β，１９环氧Δ... 详细信息

报道新化合物Ａ失碳１７β羟基１７α乙炔基Δ３（５），９（１０）雌甾二烯２酮２的合成。文中探讨了用炔钾粗品对Ａ失碳Δ３（５），９（１０）雌甾二烯２，１７二酮１和Ａ失碳６β，１９环氧Δ３雄甾２，１７二酮３的选择性炔化，分别得标题化合物２（４４％）及Ａ失碳１７β羟基１７α乙炔基６β，１９环氧Δ３雄甾２酮４（６５％），４经还原性破开环氧、去羟甲基和去醋酰氧基合成了标题化合物２。四步总收率为３４％。

关键词：避孕药失碳炔诺酮雌甾二烯酮羟基合成

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