检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通报 2020年第5期36卷 68-73页

作者：杨镇州刘刚梁文上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射所生物计量实验室上海201203

针对抗虫耐除草剂大豆转基因品系MON89788,从转基因植物基因组DNA的提取、核酸模板的质量和浓度控制、引物探针的筛选、PCR反应过程的建立等方面建立了一套完整的转基因大豆芯片式dPCR定量检测方法。本实验也对该方法的重复性和定量检... 详细信息

针对抗虫耐除草剂大豆转基因品系MON89788,从转基因植物基因组DNA的提取、核酸模板的质量和浓度控制、引物探针的筛选、PCR反应过程的建立等方面建立了一套完整的转基因大豆芯片式dPCR定量检测方法。本实验也对该方法的重复性和定量检测限进行考察。10组5%转基因品系大豆MON89788样品定量重复性RSD在1.17%-9.97%之间,均满足国际上转基因定量结果RSD小于25%的要求。用该方法对转基因含量为5%、1%、0.1%的大豆MON89788进行定量检测,其定量结果为5.20%、0.94%和0.11%,RSD分别为6.2%、3.6%和15.2%。该检测方法的定量限达到0.1%,能满足欧盟对转基因定量标识0.9%的要求。将本实验建立的方法用于转基因大豆的定量检测,能为规范我国转基因监管工作的实施提供强有力的技术支撑。

关键词：转基因大豆数字PCR 大豆MON89788

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T淋巴细胞亚群CD4^(+)比例标准物质的研制

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生物技术进展 2022年第4期12卷 600-605页

作者：李妍杨镇州梁文上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射所国家市场监管重点实验室(生物分析计量溯源)上海201203

CD4^(+)T细胞的减少常见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病等。检测实验室常需要对CD4^(+)T细胞检测能力进行质控,急需有准确CD4^(+)比例量值的T淋巴细胞标准物质。将人工制备的T淋巴细胞进行纯化后,使用流式细胞术进行标准物质候... 详细信息

CD4^(+)T细胞的减少常见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病等。检测实验室常需要对CD4^(+)T细胞检测能力进行质控,急需有准确CD4^(+)比例量值的T淋巴细胞标准物质。将人工制备的T淋巴细胞进行纯化后,使用流式细胞术进行标准物质候选物的均匀性检验、稳定性检验。联合8家检测实验室采用流式细胞微球计数法对标准物质候选物进行协同定值。实验数据统计表明,该标准物质候选物的均匀性好,并且在-20℃储存条件下可稳定12个月以上,其标准量值CD4^(+)比例为74.0%±6.7%(k=2)。该标准物质适用于流式细胞仪中CD4^(+)细胞占总淋巴细胞的百分比项目的计量校准,以及流式细胞术检测过程的方法验证和检测结果的质量控制。

关键词： T淋巴细胞标准物质流式细胞术

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新型冠状病毒核酸检测试剂盒中酶的性能比较研究

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生物技术进展 2021年第6期11卷 777-782页

作者：杨镇州李妍杨雪刘刚梁文上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射所生物计量实验室上海201203

新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS⁃CoV⁃2)核酸检测试剂盒中酶的性能对检测效果有决定性作用。为探索逆转录酶和DNA聚合酶性能的快速评价方法,采用常用SARS⁃CoV⁃2核酸检测试剂盒,以SARS⁃CoV⁃2核酸标... 详细信息

新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS⁃CoV⁃2)核酸检测试剂盒中酶的性能对检测效果有决定性作用。为探索逆转录酶和DNA聚合酶性能的快速评价方法,采用常用SARS⁃CoV⁃2核酸检测试剂盒,以SARS⁃CoV⁃2核酸标准物质为考察依据,对试剂盒中逆转录酶、DNA聚合酶的技术性能进行综合评价研究。第一步,通过分析cDNA产物与目标RNA浓度比值,考察逆转录酶的逆转录效率;第二步,以相同的cDNA为目标样品,进行实时荧光定量PCR分析;第三步,以新冠病毒RNA标准物质为目标样品,进行逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT⁃PCR),比较试剂盒的扩增效率;第四步,考察试剂盒中酶的热稳定性。结果显示,所考察的试剂盒产品逆转录酶的逆转录效率为6.5%~80.7%,DNA聚合酶的扩增效率为90.4%~119.7%,而总体逆转录PCR的扩增效率为90.7%~102.4%。热稳定性评价结果显示,初始较好的酶活性可能在保存和运输期间发生质量变化。通过反映目前新冠病毒核酸检测试剂盒中酶的质量水平,以期对相关质控工作提供一定参考。

关键词：新型冠状病毒 RT⁃PCR 逆转录 PCR效率

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新型冠状病毒RNA标准物质

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科学通报 2020年第22期65卷 2363-2370页

作者：许丽梁文杨雪闻艳丽李兰英杨镇州李妍邓敏陆青丁敏任淑贞孙洁林左小磊王丽华曹程明胡钧刘刚樊春海上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量技术研究所生物计量实验室上海201203 上海交通大学化学化工学院转化医学研究院分子医学研究院上海200240 中国科学院上海高等研究院上海201210 上海市医疗器械检测所上海201318

研制了一种新型冠状病毒(coronavirus, SARS-CoV-2)体外转录RNA标准物质,用于SARS-CoV-2病毒RNA检测的量值溯源.目标基因范围涵盖已公布的SARS-CoV-2病毒检测的3个主要靶标基因:核壳蛋白N基因全长(基因组坐标:28274-29533, GenBank:MT02... 详细信息

研制了一种新型冠状病毒(coronavirus, SARS-CoV-2)体外转录RNA标准物质,用于SARS-CoV-2病毒RNA检测的量值溯源.目标基因范围涵盖已公布的SARS-CoV-2病毒检测的3个主要靶标基因:核壳蛋白N基因全长(基因组坐标:28274-29533, GenBank:MT027064.1)、包膜蛋白E基因全长(基因组坐标:26245-26472, GenBank:MT027064.1)、开放阅读框1ab(ORF1ab)基因片段(基因组坐标:13321-15540, GenBank:MT027064.1).通过采用数字聚合酶链式反应(digital PCR, dPCR)方法进行多实验室联合定值,确定了该标准物质的量值为N、E和ORF1ab基因的拷贝数浓度.研究结果表明,该RNA标准物质量值可靠,均匀性良好,稳定性可满足运输要求.进一步地,通过在临床检验、多家不同原理的病毒检测试剂盒生产企业、方法开发实验室等试用,验证了RNA标准物质的普适性.这一RNA标准物质的研制为新型冠状病毒检测试剂盒的质量控制提供了计量学依据,为防控流行性疾病提供了便利.

关键词：新型冠状病毒体外转录RNA 标准物质数字PCR 实时荧光反转录PCR

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电化学生物传感器在高致病性病毒检测中的应用

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中国测试 2020年第10期46卷 59-71页

作者：齐佳伟许丽闻艳丽刘刚饶品华上海工程技术大学化学与化工学院上海201620 上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量技术研究所生物计量实验室上海201203

电化学生物传感器具有高效、灵敏、低成本等优势,已在多种高致病性病毒检测中得到应用。该文介绍电化学生物传感器的工作原理和分类,综述近年来电化学生物传感技术在肝炎病毒、流感病毒、人乳头瘤病毒、人类免疫缺陷病毒、寨卡病毒、新... 详细信息

电化学生物传感器具有高效、灵敏、低成本等优势,已在多种高致病性病毒检测中得到应用。该文介绍电化学生物传感器的工作原理和分类,综述近年来电化学生物传感技术在肝炎病毒、流感病毒、人乳头瘤病毒、人类免疫缺陷病毒、寨卡病毒、新型冠状病毒等多种高致病性病毒检测中的研究进展,最后讨论该技术在病毒检测领域面临的挑战和未来发展方向。

关键词：病毒检测生物传感器电化学生物传感器

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霍乱弧菌核酸标准物质定值方法:ICP-MS法和数字PCR法

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化学试剂 2018年第12期40卷 1179-1182页

作者：梁文李妍许丽李兰英闻艳丽杨雪罗超刘刚上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射所生物计量实验室

霍乱弧菌是人类霍乱的病原体,霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一。曾在世界上引起多次大流行,主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水,死亡率甚高,属于国际检疫传染病。霍乱弧菌定量检测质粒标准物质,霍乱弧菌的外膜蛋白编码基因omp ... 详细信息

霍乱弧菌是人类霍乱的病原体,霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一。曾在世界上引起多次大流行,主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水,死亡率甚高,属于国际检疫传染病。霍乱弧菌定量检测质粒标准物质,霍乱弧菌的外膜蛋白编码基因omp W为靶基因,可作为霍乱弧菌核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒中的阳性物质替代物。构建霍乱弧菌质粒DNA标准样品,采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)方法和数字PCR两种方法定值,最终定值结果为(79. 2±5. 2) ng/μL,可为霍乱弧菌核酸检测的量值准确性、可比性和有效性提供保障。

关键词：霍乱弧菌 ICP-MS 数字PCR

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一种特异性检测单增李斯特菌的质粒DNA标准物质

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化学试剂 2016年第7期38卷 664-668页

作者：刘刚李妍许丽上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射所生物计量实验室上海201203

研制了一种质粒DNA标准物质,包含目前单增李斯特菌检测常用的靶基因序列——内化素基因(Inl A)序列,可适用于扩增Inl A基因的单增李斯特菌PCR相关检测方法。采用紫外分光光度法(UV)和高分辨电感耦合等离子体质谱(HR-ICP-MS)两种方法,多... 详细信息

研制了一种质粒DNA标准物质,包含目前单增李斯特菌检测常用的靶基因序列——内化素基因(Inl A)序列,可适用于扩增Inl A基因的单增李斯特菌PCR相关检测方法。采用紫外分光光度法(UV)和高分辨电感耦合等离子体质谱(HR-ICP-MS)两种方法,多家实验室联合定值的方法,对该套标准物质的均匀性、稳定性、量值以及不确定度进行详细的考察,质粒DNA标准物质的最终定值结果为94.9(±5.1)ng/μL。该质粒DNA标准物质可用于微生物实验室对单增李斯特菌PCR相关检测进行检测结果质量控制、开展方法比对和能力验证等。

关键词：单增李斯特菌 PCR 质粒DNA标准物质

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TODGA/[C_2mim][NTf_2]萃取Th^(4+)

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无机化学学报 2015年第1期31卷 121-126页

作者：刘超赵龙韦悦周何林峰唐方东上海交通大学核科学与工程学院核能化工实验室上海200240 上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量技术研究所上海201203

研究了N,N,N′,N′-四辛基-3-氧戊二酰胺(TODGA)溶于疏水性离子液体咪唑类离子液体1-乙基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐([C2mim][NTf2])中对硝酸水溶液体系中四价钍离子(Th4+)的萃取行为。详细考察了接触时间、酸度、Th4+浓度、TODGA... 详细信息

研究了N,N,N′,N′-四辛基-3-氧戊二酰胺(TODGA)溶于疏水性离子液体咪唑类离子液体1-乙基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐([C2mim][NTf2])中对硝酸水溶液体系中四价钍离子(Th4+)的萃取行为。详细考察了接触时间、酸度、Th4+浓度、TODGA浓度、温度对TODGA/[C2mim][NTf2]体系萃取性能的影响。作为对比,我们还考察了TODGA在传统有机溶剂异辛烷中对Th4+的萃取。结果表明:TODGA/[C2mim][NTf2]体系对Th4+的萃取是吸热反应,且在50℃下,能在5 min内达到平衡。萃取体系随着酸度对Th4+的萃取性能先降后增大;Th4+浓度的增大,TODGA浓度的降低,对Th4+的萃取性能下降。TODGA在离子液体萃取体系中比在有机体系中有更好的Th4+萃取效果,特别是在低酸条件下。通过萃取机理研究,推测出在低酸下萃取反应是离子交换且TODGA与Th4+配比为2∶1,在高酸下萃取是中性配位。

关键词：四价钍离子 N,N,N′,N′-四辛基-3-氧戊二酰胺离子液体萃取

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TODGA-离子液体体系对钍铀的萃取分离的研究

TODGA-离子液体体系对钍铀的萃取分离的研究

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第十三届全国核化学与放射化学学术研讨会

作者：刘超赵龙韦悦周何林峰唐方东上海交通大学核科学与工程学院核能化工实验室上海市计量测试技术研究院化学与电离辐射计量技术研究所

钍(Th)是一种存在于自然界中天然放射性元素,其在自然界的储量非常丰富,约为铀储量的3倍多。Th本身不易裂变,但可以通过吸收中子经过一系列的核反应(（?）)生成人工易裂变核素U,具有很好的核性能。因此,钍资源的利用是可望未来核能发展... 详细信息

钍(Th)是一种存在于自然界中天然放射性元素,其在自然界的储量非常丰富,约为铀储量的3倍多。Th本身不易裂变,但可以通过吸收中子经过一系列的核反应(（?）)生成人工易裂变核素U,具有很好的核性能。因此,钍资源的利用是可望未来核能发展中核燃料短缺的有效途径之一。然而钍/铀循环至今尚未用于工业体系,钍基燃料的后处理是其中的难点和瓶颈问题之一,高效地分离回收钍基乏燃料中的剩余的Th,可裂变物

关键词： TODGA 离子液体

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