检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究 2018年第21期22卷 3376-3380页

作者：徐莹张定棋慕永平陈佳美王清兰平键刘伟刘平上海中医药大学上海中医药大学附属曙光医院上海市中医药研究院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海中医临床重点实验室上海市201203 上海中医药大学上海高校中医内科学E-研究院上海市201203

背景:由于小鼠肝脏小、血管较细,其原代肝星状细胞分离的难度相对较大,且得率有限,难以满足体外实验需求。目的:建立小鼠原代肝星状细胞高效稳定的分离方法,提高小鼠原代肝星状细胞的得率与纯度,为研究肝纤维化的机制奠定实验基础。方法... 详细信息

背景:由于小鼠肝脏小、血管较细,其原代肝星状细胞分离的难度相对较大,且得率有限,难以满足体外实验需求。目的:建立小鼠原代肝星状细胞高效稳定的分离方法,提高小鼠原代肝星状细胞的得率与纯度,为研究肝纤维化的机制奠定实验基础。方法:取成年雄性C57BL/6小鼠,以无钙镁离子的前灌流液经门静脉充分灌注肝脏,再先后以1 g/L链霉蛋白酶和0.7 g/LⅣ型胶原酶灌注,使用Nycodenz进行梯度密度离心,获取中间层原代肝星状细胞,锥虫蓝染法观察肝星状细胞活力,流式细胞法检测细胞纯度,免疫荧光法检测Desmin表达,并于倒置显微镜下观察细胞培养3,5,7 d后的形态变化,PCR法检测培养3,5,7 d后α-平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原蛋白基因表达情况。结果与结论:(1)每只小鼠肝脏可获得肝星状细胞(5.5±0.4)×10~6个,锥虫蓝检测细胞活力均大于95%,流式细胞法检测细胞纯度为94%,免疫荧光检测细胞高表达Desmin;(2)随着体外培养时间的延长,可见原代肝星状细胞逐渐由圆形向星型发展;(3)随培养天数增长,α-平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原蛋白表达逐渐升高;(4)结果提示,实验成功建立了高效分离小鼠肝星状细胞的方法,可为获得高纯度、高细胞活力的小鼠原代肝星状细胞提供技术方案,也为肝纤维化的机制研究提供技术保障。

关键词：肝星状细胞细胞分离技术原代细胞细胞外基质荧光鉴定肝纤维化细胞得率国家自然科学基金肝细胞细胞分离组织工程

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组分复方“CKJ”药物血清对大鼠原代肝星状细胞活化和转化生长因子β_1及其受体的影响

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中国中西医结合杂志 2015年第2期35卷 210-215页

作者：陈亮冯琴彭景华刘林梁春耕海亚美胡义扬上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学肝病研究所上海201203 上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海市高校中医内科学E-研究院上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203

目的探讨由虫草多糖、苦杏仁苷、绞股蓝总皂苷组成的"CKJ方"药物血清对大鼠原代肝星状细胞(primary hepatic stellate cells,r HSCs)活化的影响及相关药理作用机制。方法分离并培养r HSCs,将培养4天的r HSCs分为正常组、模型... 详细信息

目的探讨由虫草多糖、苦杏仁苷、绞股蓝总皂苷组成的"CKJ方"药物血清对大鼠原代肝星状细胞(primary hepatic stellate cells,r HSCs)活化的影响及相关药理作用机制。方法分离并培养r HSCs,将培养4天的r HSCs分为正常组、模型组及CKJ组。模型组及CKJ组以2.5 ng/m L转化生长因子β1(TGF-β1)刺激造模24 h,正常组以不含TGF-β1的基质液(无血清的DMeM)作为对照。药物组以5%CKJ方药物血清继续孵育24 h,正常组及模型组以5%空白血清孵育24 h。采用细胞高内涵筛选技术(HCS)免疫荧光法及Western blot检测r HSCsα-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、血小板源性生长因子β受体(PDGF-βR)、TGF-β1、转化生长因子β受体1(TGF-βR1)、转化生长因子β受体2(TGF-βR2)mRNA的表达水平。结果与正常组比较,模型组r HSCsα-SMA蛋白表达及α-SMA、Col-Ⅰ、PDGF-βR、TGF-β1、TGF-βR1、TGF-βR2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,5%CKJ药物血清组r HSCsα-SMA蛋白表达及α-SMA、Col-Ⅰ、PDGF-βR、TGF-β1、TGF-βR1、TGF-βR2 mRNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论组分复方"CKJ"药物血清可降低大鼠r HSCsα-SMA的蛋白表达,其主要作用机理可能与抑制TGF-β1及其相关受体有关。

关键词： CKJ方转化生长因子β1 原代肝星状细胞

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健脾活血方抗内毒素诱发大鼠急性肝损伤的主效应中药筛选验证及药理作用环节点分析

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中华中医药杂志 2012年第4期27卷 779-783页

作者：傅琪琳冯琴胡义扬徐琳王文静曹健美李小飞彭景华王晓柠陈亮赵瑜黄甫上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学肝病研究所上海201203 上海市高校中医内科学E-研究院上海201203

目的:探索中药复方"健脾活血方"中抗内毒素攻击作用的主效应中药及其主要药理作用环节点。方法:采用均匀设计法及尾静脉注射内毒素诱导的大鼠肝损伤模型,以血浆TNF-α含量为指标筛选主效应中药,并再次以该模型验证其药效;进... 详细信息

目的:探索中药复方"健脾活血方"中抗内毒素攻击作用的主效应中药及其主要药理作用环节点。方法:采用均匀设计法及尾静脉注射内毒素诱导的大鼠肝损伤模型,以血浆TNF-α含量为指标筛选主效应中药,并再次以该模型验证其药效;进一步检测肝组织CD68、CD14、TLR4、P-IκB蛋白表达及LBP、TLR2、TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达。结果:健脾活血方中抗内毒素攻击的主效应中药为枳壳、白芍、泽泻、五味子的组合;主效应中药可显著降低大鼠血浆TNF-α含量;主效应中药可显著降低大鼠肝组织CD68、CD14、TLR4、P-IκB蛋白表达,且其降低肝组织CD68蛋白有优于健脾活血方的优势;主效应中药可显著降低LBP、TLR2、TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA表达,均有优于全方的优势。结论:枳壳、白芍、泽泻、五味子组合是健脾活血方中对抗内毒素诱发大鼠急性肝损伤的的主效应中药;主效应中药抗内毒素攻击的主要药理环节在于抑制肝脏库普弗细胞的活化。

关键词：健脾活血方主效应中药急性肝损伤库普弗细胞活化

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慢性乙型肝炎常见证候特征的二元Logistic回归分析

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中华中医药杂志 2015年第5期30卷 1780-1783页

作者：徐琳赵瑜彭景华冯琴沈晓萍海亚美梁春耕刘林田华捷胡义扬上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学肝病研究所上海201203 上海市高校中医内科学E-研究院上海201203

目的:运用二元Logistic回归分析探讨慢性乙型肝炎(CHB)中医临床常见证候的症状特征。方法:规范采集明确诊断的CHB患者临床四诊信息,运用频数统计CHB患者中医证型分布情况,选取证型无明显兼夹者为研究对象,经χ2检验筛选各证候差异症状,... 详细信息

目的:运用二元Logistic回归分析探讨慢性乙型肝炎(CHB)中医临床常见证候的症状特征。方法:规范采集明确诊断的CHB患者临床四诊信息,运用频数统计CHB患者中医证型分布情况,选取证型无明显兼夹者为研究对象,经χ2检验筛选各证候差异症状,纳入二元Logistic回归分析提取特征性症状,并以刀切法验证。结果:1 474例CHB患者中,无明显兼夹证者862例。二元Logistic回归分析湿热内阻证(429例)的症状为身目发黄、口臭、大便秽臭、口干渴、苔色黄、苔质厚、腻腐;肝郁脾虚证(219例)为便溏、脘闷、倦怠乏力、舌质淡、舌体齿痕、苔色白、脉濡、缓;肝肾阴虚证(93例)为腰酸、心悸、目干、多梦、舌质红、脉细,其刀切法预测准确率达85.8%、86.1%和89.8%。结论:湿热内阻证、肝郁脾虚证和肝肾阴虚证是CHB的临床常见证型,经Logistic回归筛选出的特征性症状可为规范化的证候诊断提供参考依据。

关键词：慢性乙型肝炎中医证候 Logistic回归分析

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基于肾主骨理论观察肾小球系膜细胞对成骨细胞增殖及功能的影响

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中国中医基础医学杂志 2012年第2期18卷 164-165,168页

作者：吴锋林日阳何立群上海中医药大学附属曙光医院肾内科肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市高校中医内科E-研究院上海200021

目的:研究肾小球系膜细胞对成骨细胞的影响。方法:应用体外细胞培养法,将成骨细胞分为正常血清组和系膜细胞组。检测培养24h、48h7、2h、120h后的成骨细胞增殖情况,并在72h后检测碱性磷酸酶(ALP)及骨桥蛋白(OPN)浓度。结果:系膜细胞组... 详细信息

目的:研究肾小球系膜细胞对成骨细胞的影响。方法:应用体外细胞培养法,将成骨细胞分为正常血清组和系膜细胞组。检测培养24h、48h7、2h、120h后的成骨细胞增殖情况,并在72h后检测碱性磷酸酶(ALP)及骨桥蛋白(OPN)浓度。结果:系膜细胞组上清液的成骨细胞增殖要明显高于正常血清组,在72h后系膜细胞组上清液的AKP及OPN浓度要明显高于正常血清组。结论:肾系膜细胞能直接作用于成骨细胞,促进成骨细胞的增殖及功能,为中医"肾主骨"理论体系提供了新的实证。

关键词：肾主骨细胞培养系膜细胞成骨细胞

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单侧输尿管梗阻模型肾纤维化的中医药研究进展

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辽宁中医杂志 2010年第6期37卷 1168-1171页

作者：吴锋何立群上海中医药大学附属曙光医院肾内科肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市高校中医内科E-研究院上海201203

肾纤维化是各种慢性肾脏病进展导致肾功能损害的共同病理过程。单侧输尿管梗阻是研究肾纤维化的经典动物实验模型。实验研究显示中药抗肾纤维化效果确切。现将近2年以来中医药对单侧输尿管梗阻肾纤维化的研究作一综述。

关键词：单侧输尿管梗阻肾纤维化中医药

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脂联素及其受体在脂肪肝病理机制中的意义及中药干预作用

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中华肝脏病杂志 2009年第11期17卷 826-830页

作者：李红山冯琴胡义扬陈少东彭景华李雪梅许丽莉上海中医药大学曙光医院、上海中医药大学肝病研究所、肝肾疾病病证教育部重点实验室、上海中医药大学上海市高校中医内科学E-研究院 201203

目的研究脂联素（ADP）及其脂联素受体2（AdipoR2）在脂肪肝病理变化中的意义及中药的干预作用。方法采用单纯高脂饮食（高脂模型组）和四氯化碳皮下注射复合高脂低蛋白饮食诱导（复合模型组）的两组大鼠脂肪肝模型，各随机分为正常组... 详细信息

目的研究脂联素（ADP）及其脂联素受体2（AdipoR2）在脂肪肝病理变化中的意义及中药的干预作用。方法采用单纯高脂饮食（高脂模型组）和四氯化碳皮下注射复合高脂低蛋白饮食诱导（复合模型组）的两组大鼠脂肪肝模型，各随机分为正常组、模型组和中药干预组。高脂模型组大鼠造模10周，其中药组在第7周起予以中药（祛湿化瘀方）灌胃干预4周；复合模型组大鼠造模4周，其中药组在第3周起予中药干预2周。观察项目：（1）肝组织He染色，观察各组大鼠肝脂肪变性程度变化；（2）肝组织甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）、AdipoR2含量及血清ADP含量；（3）肝组织TG、FFA、AdipoR2、血清ADP含量间的相关性分析。数据均使用SPSS12．0软件包进行统计学分析。组间比较采用单因素方差分析S—N-K检验（q检验）。等级资料用Ridit分析。相关分析采用Bivariate相关分析。结果（1）在两个模型大鼠实验中，模型组肝组织均出现严重的脂肪变性，肝组织TG、FFA含量均显著升高，高脂模型组分别达正常组的3．2倍和3．5倍，q值分别为16．00和8．10，P值均〈0．01；复合模型组分别达正常组的3．8倍和3．6倍，q值分别为10．10和10．87，P值均〈0．01。血清ADP与肝组织AdipoR2均显著降低，高脂模型组分别为正常组的56．1％和56．0％，q值分别为10．19和9．03，P值均〈0．01；复合模型组分别达正常组的55．6％和71．1％，q值分别为5．48和7．16，P值均〈0．01；在两个模型中，中药干预组的TG、FFA含量显著低于模型组，ADP、AdipoR2含量显著高于模型组。（2）肝脏TG、FFA含量与血清ADP含量、肝组织AdipoR2含量之间均呈显著负相关。结论（1）血清ADP和肝AdipoR2水平均显著低下，在脂肪肝病理机制中有重要意义。（2）中药祛湿化瘀方可显著提高脂肪肝大鼠的ADP、AdipoR2水平，这可能为该方防治脂肪肝作用的重要药理环节。

关键词：脂肪肝中草药干预性研究脂联素

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实验性肝纤维化血管新生评价方法的比较

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中华肝脏病杂志 2015年第2期23卷 107-111页

作者：赵志敏郭涛杨烁慧潘凯谭烨陈高峰刘成海上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所 201203 上海中医药大学附属曙光医院放射科 201203 上海市中因临床重点实验室上海高校中医内科学E-研究院

目的探索实验性肝纤维化血管新生的评价方法。方法将C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组和模型组,每组6只,以体积分数10％ CCl4橄榄油溶液腹腔注射4周制作肝纤维化模型。分别以MRI、CT、同步辐射X线二维成像及vWF免疫荧光染色方法在不同... 详细信息

目的探索实验性肝纤维化血管新生的评价方法。方法将C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组和模型组,每组6只,以体积分数10％ CCl4橄榄油溶液腹腔注射4周制作肝纤维化模型。分别以MRI、CT、同步辐射X线二维成像及vWF免疫荧光染色方法在不同层面观察肝脏血管;He及天狼猩红染色观察肝组织炎症及纤维化程度。两组比较采用t检验;MRI信号强度、CT值、微血管相对长度与微血管密度（MVD）的相关性采用Pearson相关分析。结果与正常组比较,模型组小鼠肝组织炎症和纤维化明显;MR示T2WI上两组增强前后信号强度均减低,且增强后两组之间信号强度差异有统计学意义（386.67±69.04对比492.67±112.50,t=-2.456,P=0.026）;CT示模型组增强后肝脏CT值及增强前后差值均较正常组显著降低;同步辐射X线二维成像后,模型组纤维化肝脏血管纹理增多、紊乱,可见小血管数量较多;MR在T2W增强的信号值（439.67±104.80,Pearson相关系数为0.714,P=0.009）、微血管相对长度（676.53±122.75,Pearson相关系数为0.791,P=0.002）与vWF标记MVD （14.50±5.95）呈正相关,CT增强前后的差值（132.60±57.02,Pearson相关系数为-0.612,P=0.034）与MVD呈负相关。结论采用纳米对比剂的MR、CT检测及同步辐射X线二维成像可用于纤维化血管新生的评价,与传统的MVD法具有相关性;其中同步辐射X线二维成像更直观、清晰,是评价肝血管新生的良好方法。

关键词：肝硬化血管新生评价方法

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肾小管间质纤维化动物模型的研究进展

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时珍国医国药 2010年第4期21卷 969-971页

作者：张新志何立群上海中医药大学附属曙光医院肾内科肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海市高校中医内科E-研究院上海201203

肾间质纤维化与肾功能的恶化密切相关,而动物实验是研究肾间质纤维化尤为重要的手段。文章拟对常见的肾间质纤维化动物模型,包括单侧输尿管梗阻模型、环孢素A肾病模型、马兜铃酸肾病模型、镇痛剂肾病模型、阿霉素肾病模型等10种模型的... 详细信息

肾间质纤维化与肾功能的恶化密切相关,而动物实验是研究肾间质纤维化尤为重要的手段。文章拟对常见的肾间质纤维化动物模型,包括单侧输尿管梗阻模型、环孢素A肾病模型、马兜铃酸肾病模型、镇痛剂肾病模型、阿霉素肾病模型等10种模型的制作和研究进展作一综述,以利于实验者根据不同的实验目的选择适宜的动物模型。

关键词：肾小管间质纤维化动物模型

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茵陈醇提物抗游离脂肪酸对体外培养HepG2细胞脂毒性的作用及机制研究

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中国中药杂志 2009年第18期34卷 2373-2378页

作者：陈少东冯琴彭景华许丽莉刘平刘成胡义扬上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点研究室上海市高校中医内科学E-研究院上海201203 厦门大学医学院福建厦门361005

目的:研究茵陈醇提物对游离脂肪酸刺激HepG2细胞所致肝脂毒性的抑制作用及机制。方法:制备大鼠的正常血清和药物血清,在经毒性试验确定无药物毒性的前提下,分设正常组、模型组和茵陈醇提物组(10%,1%,0.1%3个剂量),以相应浓度的正常血清... 详细信息

目的:研究茵陈醇提物对游离脂肪酸刺激HepG2细胞所致肝脂毒性的抑制作用及机制。方法:制备大鼠的正常血清和药物血清,在经毒性试验确定无药物毒性的前提下,分设正常组、模型组和茵陈醇提物组(10%,1%,0.1%3个剂量),以相应浓度的正常血清和药物血清培养HepG2细胞,同时添加长链游离脂肪酸(FFA)刺激HepG2细胞24 h。观察:①细胞上清肿瘤坏死因子(TNF-α)含量(eLISA法);②细胞内甘油三酯(TG)含量、细胞脂肪油红O染色;③细胞内磷酸化κB抑制蛋白(P-IκB)、组织蛋白酶B(ctsb)、凋亡抑制基因相关X蛋白(Bax)蛋白表达(W estern B lotting法);④细胞TNF-,αctsb和Bax基因表达(real-tim e PCR);⑤细胞内ctsb的表达和分布(免疫荧光法)。结果:模型组细胞内TG及上清TNF-α含量显著升高,分别达(590±186)mg.g-1,(77±11)***-1,细胞内ctsb,P-IκB的蛋白表达以及ctsb,TNF-α的mRNA表达显著增强;而10%茵陈醇提物组细胞内TG和上清TNF-α含量较模型组显著降低,仅为(335±54)mg.g-1,(55±7)***-1,且显著抑制细胞内ctsb,P-IκB的蛋白表达以及ctsb,TNF-α的mRNA表达。结论:茵陈醇提物对FFA诱导的HepG2细胞脂肪变性,TNF-α分泌有显著的抑制作用,其作用与抑制ctsb等基因和蛋白表达有关。

关键词：茵陈醇提物游离脂肪酸 HepG2细胞肝脂毒性

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