检索结果-内蒙古大学图书馆

水产学报 2007年第6期31卷 848-852页

作者：李家乐董志国郑汉丰上海水产大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海水产大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海 200090 上海高校水产养殖学 E-研究院上海 200090 淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室江苏连云港 222005 上海 200090 中国水产科学研究院东海水产研究所

三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)是我国特有淡水经济贝类,是我国最主要的淡水育珠母蚌。上世纪70年代中期三角帆蚌人工繁殖初步成功,解决了育珠所需的蚌源问题。由于种种原因,三角帆蚌种质退化问题突出,表现在抗逆性下降、经济性状变差,... 详细信息

三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)是我国特有淡水经济贝类,是我国最主要的淡水育珠母蚌。上世纪70年代中期三角帆蚌人工繁殖初步成功,解决了育珠所需的蚌源问题。由于种种原因,三角帆蚌种质退化问题突出,表现在抗逆性下降、经济性状变差,因此有必要开展三角帆蚌良种选育。

关键词：三角帆蚌地理种群杂交F1代遗传差异 RAPD

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缢蛏β-ACTIN1基因的分子特性及其表达分析

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水产学报 2011年第5期35卷 650-659页

作者：冯冰冰钟玉民牛东红陈慧林国文李家乐上海海洋大学水产与生命学院农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室福建省闽东水产研究所上海海洋大学水产与生命学院上海市高校水产养殖学E-研究院

为研究缢蛏功能基因的表达调控,利用SMART cDNA文库构建试剂盒成功构建了缢蛏肝脏组织的标准化cDNA文库。对随机选取的5 679个克隆进行随机测序,比对、筛选出2条β-actin同源序列,对其中一条eST序列两端进行扩增、测序,然后进行5′RACe(... 详细信息

为研究缢蛏功能基因的表达调控,利用SMART cDNA文库构建试剂盒成功构建了缢蛏肝脏组织的标准化cDNA文库。对随机选取的5 679个克隆进行随机测序,比对、筛选出2条β-actin同源序列,对其中一条eST序列两端进行扩增、测序,然后进行5′RACe(rapidamplification of cDNA ends,RACe)扩增、测序,拼接得到全长cDNA序列,命名为β-ACTIN 1。该序列全长为1 552 bp,包括73 bp的5′非翻译区和348 bp的3′非翻译区,以及1 131 bp的开放阅读框。阅读框共编码376个氨基酸,推算分子量约为41.95 ku,理论等电点为5.23。与其他7种软体动物的氨基酸序列进行比对发现,β-ACTIN1基因的氨基酸序列中Ile179、G lu229、Ser232、Pro236、Ile248、Asn272、Cys273、Val283、Ser320、Ser325、Val330、Pro339等12个氨基酸残基具有特异性;同时发现缢蛏β-ACTIN 1氨基酸序列与其他软体动物的相似性高达97%以上。系统进化分析显示,缢蛏首先与软体动物聚在一起,然后与节肢动物聚在一起,再依次与鱼类、两栖类、哺乳类聚在一起。荧光定量PCR检测结果显示,β-ACTIN1基因在缢蛏各组织中的表达及鳗弧菌诱导后的表达均不稳定,不适合作为内参基因。

关键词：缢蛏 cDNA文库 β-ACTIN1基因序列分析基因表达

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应用激光共聚焦显微技术研究Ca2+在三角帆蚌组织内的积累与分布

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水产学报 2011年第2期35卷 214-220页

作者：李文娟施志仪郝莹莹叶显峰上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海市高校水产养殖学E-研究院上海海洋大学水产与生命学院安徽省芜湖市繁昌县农委

为了探讨淡水贝类Ca2+吸收和转运信号传递机理,采用激光共聚焦技术研究了三角帆蚌不同组织细胞在静息状态下细胞内游离Ca2+浓度,以及水体Ca2+浓度对外套膜组织细胞内钙沉积的影响。试验选取10只健康的三角帆蚌,分别获得外套膜外膜、内... 详细信息

为了探讨淡水贝类Ca2+吸收和转运信号传递机理,采用激光共聚焦技术研究了三角帆蚌不同组织细胞在静息状态下细胞内游离Ca2+浓度,以及水体Ca2+浓度对外套膜组织细胞内钙沉积的影响。试验选取10只健康的三角帆蚌,分别获得外套膜外膜、内膜、斧足、腮及内脏团上表皮组织细胞,短期培养后用Fluo-3/AM荧光探针孵育细胞1 h,观察细胞内Ca2+荧光强度。研究结果表明,蚌不同组织细胞内Ca2+荧光强度存在显著差异,外套膜外膜细胞内Ca2+荧光强度最高,内脏团上表皮细胞的最低(P<0.05);育珠三角帆蚌在相同Ca2+浓度的孵育水平下,外套膜细胞内Ca2+荧光强度比非育珠蚌都有增加的趋势,其中在1.25 mmol/L添加组中,两组外套膜内膜细胞内Ca2+荧光强度差异达到显著水平(P<0.05);不同Ca2+孵育水平对细胞内Ca2+荧光强度有显著影响(P<0.05),随着Ca2+在孵育液中浓度的升高,外套膜细胞内Ca2+荧光强度显著增强(P<0.05),表明外套膜是从外界吸收Ca2+的主要组织,蚌体珍珠的培育增强了其对Ca2+的沉积,并且水体Ca2+浓度在1.25～3.00 mmol/L有助于蚌体内Ca2+的贮藏,这对进一步开展淡水蚌类育珠学研究提供了基础理论,为珍珠培育的生产实践工作提供了依据。

关键词：三角帆蚌细胞培养激光共聚焦技术 Ca2+沉积

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缢蛏ScHsc70 cDNA的分子特性和表达分析

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中国水产科学 2012年第1期19卷 33-44页

作者：冯冰冰牛东红钟玉民陈慧林国文李家乐上海海洋大学水产与生命学院农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306 福建省闽东水产研究所福建宁德352100 上海市高校水产养殖学E研究院上海海洋大学水产与生命学院上海201306

从缢蛏(Sinonovacula constricta Lamarck)cDNA文库中筛选出一条热休克蛋白70(Heat shock protein 70,HSP70)同源序列,采用eST扩增和5′RACe(rapid amplification of cDNA ends,RACe)扩增方法获得全长cDNA序列,共2 335 bp,包括76 bp的5′非翻译区和309 bp的3′非翻译区,以及1 950 bp的开放阅读框。阅读框共编码649个氨基酸,推算的分子量约为70.89 kD,理论等电点为5.28。氨基酸序列分析结果表明,该基因的氨基酸序列含有HSP70家族的3个签名序列,2个糖基化位点,1个ATP-GTP结合位点,且C末端具有GGXP四肽重复序列以及细胞质特异性调控基序eeVD。该基因是组成型HSC70(Heat shock cognate 70)亚家族基因成员,被命名为ScHsc70。基于氨基酸序列的双壳贝类聚类分析表明,缢蛏与南极帽贝(Laternula elliptica)、文蛤(Meretrix meretrix)的亲缘关系最近。荧光定量表达分析显示,ScHsc70 mRNA在缢蛏水管、鳃、斧足、外套膜、肝和性腺等组织中以不同水平存在,其中在外套膜中的表达量最低,而在水管和肝中的表达量最高。经副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和副鳗弧菌(***)诱导后,ScHsc70 mRNA在缢蛏肝中的水平呈现先升高后下降的变化趋势,且分别在感染后的第20小时和第30小时达到最高。结果提示,缢蛏ScHsc70基因可能参与了对细菌感染的防御反应。

关键词：缢蛏热休克蛋白70 序列分析基因表达

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运用微电极技术测定三角帆蚌外套膜Ca^(2＋)流量的研究

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水生生物学报 2011年第3期35卷 545-549页

作者：李文娟施志仪郝莹莹韩健靳雨丽叶显峰上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306 上海市高校水产养殖学E研究院上海海洋大学上海201306 安徽省芜湖市繁昌县农委安徽241200

Ca既是珍珠和贝壳中的主要组成成分（CaCO3占95%以上）,又是普遍存在的细胞内第二信使,在生物体内承担着非常重要生理功能。生物矿化的研究表明外套膜细胞在珍珠和贝壳生长中起着非常重要的作用[1,2],并且Ca^2＋在外套膜中也保持一个较... 详细信息

Ca既是珍珠和贝壳中的主要组成成分（CaCO3占95%以上）,又是普遍存在的细胞内第二信使,在生物体内承担着非常重要生理功能。生物矿化的研究表明外套膜细胞在珍珠和贝壳生长中起着非常重要的作用[1,2],并且Ca^2＋在外套膜中也保持一个较高的水平^[3]。研究贝类Ca代谢，特别是外套膜组织的Ca^2＋跨膜转运，对进一步阐明贝壳以及珍珠形成机理，提高优质珠的产量都有着重要意义。

关键词：三角帆蚌外套膜细胞培养选择性微电极 Ca2+流量

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缢蛏铁蛋白基因的分子特性及其表达分析

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上海海洋大学学报 2012年第5期21卷 641-649页

作者：牛东红冯冰冰李家乐上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306 江苏省水产技术推广站江苏南京210036 上海海洋大学上海市高校水产养殖学E研究院上海201306

从缢蛏(Sinonovacula constricta)cDNA文库中筛选出一条铁蛋白同源序列,直接扩增质粒获得全长cDNA序列,共1 106 bp,包括128 bp的5'非翻译区和309 bp的3'非翻译区,以及669 bp的开放阅读框。阅读框共编码222个氨基酸,N端含有17个... 详细信息

从缢蛏(Sinonovacula constricta)cDNA文库中筛选出一条铁蛋白同源序列,直接扩增质粒获得全长cDNA序列,共1 106 bp,包括128 bp的5'非翻译区和309 bp的3'非翻译区,以及669 bp的开放阅读框。阅读框共编码222个氨基酸,N端含有17个氨基酸的信号肽序列,推算的分子量约为25.47 ku,理论等电点为5.48。氨基酸序列分析结果表明,该基因含有保守的铁氧化酶活性中心的7个氨基酸残基,但是不具有糖基化位点(NQS)和5'非编码区铁蛋白的铁反应元件(iron response element,IRe),属于H型铁蛋白基因,该基因被命名为ScFeRs。系统进化显示,基本上同一个物种的不同亚型铁蛋白首先聚在一起,然后和其他物种的铁蛋白聚在一起。缢蛏ScFeRs首先与日本花棘石鳖(Liolophura japonica)LjFeRs聚在一起,然后与缢蛏另一种ScFeR以及文蛤(Meretrix meretrix)MmFeRs聚在一起。荧光定量PCR检测结果显示ScFeRs基因在肝胰腺中高度表达,肝胰腺与其它组织间的表达量存在着极显著差异。经鳗弧菌(Vibrioanguillarum)和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)诱导后,ScFeRs基因表达水平呈显著上调。为进一步研究缢蛏铁蛋白基因的结构和功能奠定了基础。

关键词：缢蛏铁蛋白基因序列分析基因表达

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中国五大潮三角帆蚌群体遗传变异的ISSR分析

中国五大潮三角帆蚌群体遗传变异的ISSR分析

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中国水产学会水产生物技术专业委员会成立暨第一届学术研讨会

作者：汪桂玲李家乐白志毅上海水产大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海高校水产养殖学E-研究院上海200090

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一种坛紫菜新细菌病害的研究

一种坛紫菜新细菌病害的研究

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国家“863”计划资源环境技术领域第三届海洋生物高技术论坛

作者：严兴洪周晓李琳陈俊华上海水产大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海高校水产养殖学E-研究院上海200090

本文以采自福建省平县牛山岛海区的天然坛紫菜叶状体为研究材料,对其发生的腐烂病进行了研究。研究表明，此病害不同于由于真菌侵入造成的坛紫菜赤腐病,也不同于紫菜绿斑病,因为绿斑病的病理是病原菌靠外分泌能解离并消化紫菜细胞的酶... 详细信息

本文以采自福建省平县牛山岛海区的天然坛紫菜叶状体为研究材料,对其发生的腐烂病进行了研究。研究表明，此病害不同于由于真菌侵入造成的坛紫菜赤腐病,也不同于紫菜绿斑病,因为绿斑病的病理是病原菌靠外分泌能解离并消化紫菜细胞的酶而杀死紫菜细胞的。

关键词：紫菜养殖细菌病害原菌分离

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我国沿海不同群体文蛤遗传差异RAPD分析

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海洋渔业 2005年第4期27卷 281-285页

作者：冯建彬李家乐王美珍陈汉春农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海水产大学上海高校水产养殖E-研究院上海200090 浙江省慈溪市水产研究所浙江慈溪315300

本文运用RAPD对辽宁、山东、江苏、福建、广东、广西等7个地理群体的文蛤进行了分析.从40条随机引物中,筛选出11个扩增效果好、条带清晰的随机引物进行扩增.结果显示,7群体内遗传多样性丰富,遗传相似度在0.7251～0.8972之间,依次排列为... 详细信息

本文运用RAPD对辽宁、山东、江苏、福建、广东、广西等7个地理群体的文蛤进行了分析.从40条随机引物中,筛选出11个扩增效果好、条带清晰的随机引物进行扩增.结果显示,7群体内遗传多样性丰富,遗传相似度在0.7251～0.8972之间,依次排列为:辽宁营口(0.8972)＞广东湛江(0.8756)＞山东日照(0.8729)＞山东潍坊(0.8643)＞福建云霄(0.8245)＞江苏启东(0.7653)＞广西合浦(0.7251).群体间遗传距离指数及用UPGMA和NJ法构建的分子系统树结果表明,山东日照与山东潍坊两群体的亲缘关系较近,广东湛江群体与其它群体亲缘关系相对较远.

关键词：文蛤群体 RAPD 中国沿海

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RP-HPLC法测定中华绒螯蟹主要组织中的恩诺沙星及其代谢产物

RP-HPLC法测定中华绒螯蟹主要组织中的恩诺沙星及其代谢产物

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中国水产学会鱼病学专业委员会第六次会员代表大会暨国际学术讨论会

作者：郑宗林唐俊喻文娟胡鲲叶金明杨先乐上海高校水产养殖E一研究院上海水产大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室农业部渔业动植物病原库上海200090 上海高校水产养殖E一研究院上海水产大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室农业部渔业动植物病原库上海200090 扬州水产生产技术指导站江苏扬州225003

建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定中华绒螯蟹肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢组织内的恩诺沙星、环丙沙星含量.结果表明,恩诺沙星和环丙沙星在四种组织中的平均回收率分别为70.5％±12.61％,70.25％±14.73％;日内精密度分别为3... 详细信息

建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定中华绒螯蟹肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢组织内的恩诺沙星、环丙沙星含量.结果表明,恩诺沙星和环丙沙星在四种组织中的平均回收率分别为70.5％±12.61％,70.25％±14.73％;日内精密度分别为3.27％±0.84％,2.14％±0.68％;日间精密度分别为5.38％±2.46％,3.48％±1.16％.恩诺沙星、环丙沙星的最低检测限分别为0.02μg/g和o.004μg/g.以10mg/kg蟹体重剂量单次肌肉注射给药后,恩诺沙星在中华绒螯蟹肌肉、肝胰腺、精巢和卵巢内的Tmax,Cmax分别为:1h,4.323±0.56μg/g;1h,6042±0.72μg/g;3h,2.381±0.43μg/g;3h,2.101±0.29μg/g,各组织的药物消除半衰期(t1/2β)分别为:45.186h,73.93h,45.577h,38.081h.各组织中均能检测到环丙沙星,但含量均处较低水平,且代谢和消除起伏波动较大.本方法快速、灵敏、准确,适合于中华绒螯蟹组织中恩诺沙星、环丙沙星含量分析.

关键词：中华绒螯蟹 RP-HPLC法恩诺沙星环丙沙星药代动力学

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