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第十届全国水产青年学术年会

作者：牟岱英刘红蔡生力上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306

为研究酵母菌核糖体RNA的沉降系数,用酶解法和液氮研磨法裂解酿酒酵母菌的细胞壁,用TRIzol Reagent提取其总RNA,同时提取小白鼠和斑马鱼的总RNA进行比较.经紫外分光光度计检测和甲醛琼脂糖变性胶电泳后,RNA纯度好,条带清晰,无弥散或降... 详细信息

为研究酵母菌核糖体RNA的沉降系数,用酶解法和液氮研磨法裂解酿酒酵母菌的细胞壁,用TRIzol Reagent提取其总RNA,同时提取小白鼠和斑马鱼的总RNA进行比较.经紫外分光光度计检测和甲醛琼脂糖变性胶电泳后,RNA纯度好,条带清晰,无弥散或降解现象.实验发现,与酶解法相比,用液氮研磨法破碎酵母菌细胞壁提取总RNA所用的成本低,时间少,产率和纯度高,适用于少量样品RNA的提取.同时,酵母菌与斑马鱼和小白鼠总RNA电泳图谱表明,三者的18S rRNA在条带大小方面差异较小,而28S rRNA差异较大.利用分析型离心机测得的酵母菌两个较大rRNA的沉降系数分别为24.7S和18.1S.

关键词：酵母菌总RNA提取酶解法液氮研磨法甲醛变性胶电泳沉降系数

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稀有(鮈)鲫β-肌动蛋白启动子的克隆及序列分析

稀有(鮈)鲫β-肌动蛋白启动子的克隆及序列分析

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2009年全国海水养殖学术研讨会

作者：叶斐菲刘红蔡生力王豪杰李媛媛上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306

稀有鮈鲫又名金白娘、墨线鱼，属鲤形目，鲤科，鮈鲫属，是我国特有的一种小型鲤科鱼类。转基因技术是改变动物遗传性状，培育动物新品系的有效途径，且在观赏鱼培育和市场开发上具有较好的实用价值。转基因重组表达载体构建的重要工作... 详细信息

稀有鮈鲫又名金白娘、墨线鱼，属鲤形目，鲤科，鮈鲫属，是我国特有的一种小型鲤科鱼类。转基因技术是改变动物遗传性状，培育动物新品系的有效途径，且在观赏鱼培育和市场开发上具有较好的实用价值。转基因重组表达载体构建的重要工作是强效启动子的克隆。肌动蛋白是真核生物中参与构成细胞骨架的结构成分，在脊椎动物中主要有6种异构体，根据等电点的不同，可分为α、β、γ肌动蛋白。β-actin是主要的胞质肌动蛋白，广泛表达于真核生物的非肌细胞和未分化的成肌细胞中。目前已成功分离了多种鱼类的β-actin基因启动子，并在转基因鱼的应用研究中发现其具有很强的转录活性。有关稀有鮈鲫β-actin基因启动子序列的克隆尚未见报道，本研究旨在克隆稀有鮈鲫的β-actin基因启动子，为下一步构建相应的表达载体和转基因研究之用。

关键词：鮈鲫基因克隆肌动蛋白基因启动子序列分析

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草鱼Ⅱ型肝表达抗菌肽基因的克隆及表达分析

草鱼Ⅱ型肝表达抗菌肽基因的克隆及表达分析

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第十届全国水产青年学术年会

作者：刘峰李家乐傅建军上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306

Ⅱ型肝表达抗菌肽(LEAP-2)是近年来在脊椎动物中发现的一种新型抗菌肽,其氨基酸序列、二级结构及表达模式等与已知肽类均不相同,并具有较强的抗微生物活性。为探讨该肽类在我国主养鱼类草鱼中的功能及潜在应用,本研究克隆了草鱼LEAP-2... 详细信息

Ⅱ型肝表达抗菌肽(LEAP-2)是近年来在脊椎动物中发现的一种新型抗菌肽,其氨基酸序列、二级结构及表达模式等与已知肽类均不相同,并具有较强的抗微生物活性。为探讨该肽类在我国主养鱼类草鱼中的功能及潜在应用,本研究克隆了草鱼LEAP-2编码基因及全长cDNA,对该基因进行了表达谱分析、原核表达及表达产物的活性检测。草鱼LEAP-2基因由两个内含子和三个外显子组成,编码92个氨基酸,包含26个氨基酸的信号肽和41个氨基酸的成熟肽。定量PCR检测显示,LEAP-2基因在肝脏中表达量最高,其余大部分组织中也可检测到表达;采用灭活嗜水气单胞菌诱导后4h,该基因在肝、鳃、皮、肌、脾、肠中的表达均显著上调;该基因在16细胞期即具有较高的转录本丰度,并逐步降低,表明早期胚胎携带有母源转录产物。体外表达获得的草鱼LEAP-2成熟肽具有选择性的抗菌活性。本研究结果为全面理解LEAP-2在草鱼中的生理功能奠定了基础,并可望应用于抗菌肽类药物或饲料添加剂的生产和研究。

关键词：草鱼 Ⅱ型肝表达抗菌肽克隆

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不同化学试剂对稀有(鱼句)鲫受精卵脱粘效果的比较

不同化学试剂对稀有(鱼句)鲫受精卵脱粘效果的比较

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第十届全国水产青年学术年会

作者：叶斐菲蔡生力王豪杰李媛媛上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306

介绍了实验室养殖条件下对稀有约鲫所产粘性卵的化学脱粘方法.使用4种溶液：(1)1.5％ Na2SO3;(2)1.5％ Na2SO3 +0.2％木瓜酶;(3)1.5％L-半胱氨酸-HCL+0.2％木瓜酶;(4)1.0％ Na2SO3 +0.5％ L-半胱氨酸-HCL+ 0.2％木瓜酶对稀有鲍鲫的粘性... 详细信息

介绍了实验室养殖条件下对稀有约鲫所产粘性卵的化学脱粘方法.使用4种溶液：(1)1.5％ Na2SO3;(2)1.5％ Na2SO3 +0.2％木瓜酶;(3)1.5％L-半胱氨酸-HCL+0.2％木瓜酶;(4)1.0％ Na2SO3 +0.5％ L-半胱氨酸-HCL+ 0.2％木瓜酶对稀有鲍鲫的粘性卵进行处理.结果表明：1.5％ Na2SO3和1.5％ Na2SO3+0.2％木瓜酶处理组在孵化率上均显著高于其他实验组(P＜0.05),且与对照组之间无显著性差异(P＞0.05).在脱粘时间上,1.5％ Na2SO3处理组要显著长于其他各组(P＜0.05).在出膜时间上,1.5％L-半胱氨酸-HCL +0.2％木瓜酶和1.0％ Na2SO3 +0.5％L-半胱氨酸-HCL +0.2％木瓜酶处理组要显著快于其余实验组和对照组(P＜0.05).畸形率在各实验组和对照组间无显著性差异(P＞0.05).

关键词：稀有(鱼句)鲫受精卵化学脱粘

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银鲳人工育苗技术研究

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海洋渔业 2009年第1期31卷 53-57页

作者：施兆鸿赵峰傅荣兵黄旭雄王建钢中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业重点开放实验室上海200090 浙江省舟山市水产研究所舟山316000 上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海200090

2005—2006年，在舟山海域银鲳繁殖季节（4～5月），随流刺网和张网捕鱼船出海，捕捞性腺成熟的银鲳进行人工授精，把胚胎运回岸上在孵化桶中继续孵化，得到初孵仔鱼并移入水泥池中进行培育。在水温19．0—24．0℃、盐度25．0～28．0的... 详细信息

2005—2006年，在舟山海域银鲳繁殖季节（4～5月），随流刺网和张网捕鱼船出海，捕捞性腺成熟的银鲳进行人工授精，把胚胎运回岸上在孵化桶中继续孵化，得到初孵仔鱼并移入水泥池中进行培育。在水温19．0—24．0℃、盐度25．0～28．0的人工育苗条件下培育苗种。饵料为轮虫、卤虫无节幼体和配合饲料，孵化后3d仔鱼开始开口摄食。银鲳初孵仔鱼～12日龄为仔鱼期，13～40日龄为稚鱼期，41日龄起转为幼鱼期。经50d培育，获得20～27mm叉长的银鲳幼鱼。育苗成活率为5％～14％。

关键词：银鲳苗种培育舟山

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水产品保活运输方法综述

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安徽农业科学 2009年第15期37卷 7303-7305页

作者：李利江敏马允李晓琴上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海200090 水域环境生态上海高校工程研究中心上海200090 新疆奔腾生物技术有限公司新疆乌鲁木齐830016

介绍了影响水产品运输效率的主要因素,如水产品的自身条件、监控措施、温度和水质等。对传统密闭式运输法、无水湿法运输、干法运输、机组运输以及常用辅助运输手段等进行了详尽的阐述。提出了水产品保活运输中亟待解决的问题。

关键词：水产品保活运输存活率

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悬浮物对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)幼鱼肝脏溶菌酶、超氧化物歧化酶和鳃丝Na^＋-K^＋ATPase活力的影响

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海洋与湖沼 2009年第3期40卷 367-372页

作者：周勇马绍赛曲克明傅雪军徐勇农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛266071 上海海洋大学水产与生命学院 201306

在实验室条件下构建不同的悬浮物浓度环境,采用试剂盒分析方法研究了不同浓度悬浮物对半滑舌鳎幼鱼肝脏溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)和鳃丝Na+-K+-ATPase活力的影响。养殖水体中悬浮物浓度添加量分别为0(对照)、50、100、200和400m... 详细信息

在实验室条件下构建不同的悬浮物浓度环境,采用试剂盒分析方法研究了不同浓度悬浮物对半滑舌鳎幼鱼肝脏溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)和鳃丝Na+-K+-ATPase活力的影响。养殖水体中悬浮物浓度添加量分别为0(对照)、50、100、200和400mg/L,每5天采样测定一次,实验周期为25天。结果表明,当悬浮物浓度添加量为50和100mg/L时,肝脏LSZ和SOD活力与对照组无显著差异(P>0.05),当添加量为200和400mg/L时,肝脏LSZ和SOD活力与对照组有显著差异(P<0.05);实验后期各实验组鳃丝Na+-K+-ATPase活力与对照组均有显著差异(P<0.05)。在悬浮物效应的25天内,各实验组肝脏LSZ活力呈峰值变化,10天时除100mg/L浓度添加组外均达到最大值;而肝脏SOD活力在50和100mg/L浓度添加组略有升高,在200和400mg/L浓度添加组则基本呈下降趋势;鳃丝Na+-K+-ATPase活力前10天各实验组较对照组无显著变化,之后则显著降低,后期基本趋于稳定,其活力低于初始水平;实验结束时,各实验组其肝脏LSZ、SOD和鳃丝Na+-K+-ATPase活力相对于对照组都受到了不同程度的抑制,其中各实验组鳃丝Na+-K+-ATPase活力抑制率分别达到了27.6%、65.2%、57.0%和71.1%。

关键词：悬浮物半滑舌鳎溶菌酶超氧化物歧化酶 Na+-K+-ATPase

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草鱼肝表达抗菌肽-2(LEAP-2)基因的克隆、表达分析

草鱼肝表达抗菌肽-2(LEAP-2)基因的克隆、表达分析

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大宗淡水鱼类产业技术可持续发展学术研讨会

作者：刘峰李家乐岳根华傅建军周正峰沈玉帮上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306 上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306 上海海洋大学上海高校E-研究院上海201306 新加坡国立大学淡马锡生命科学实验室新加坡117604

肝表达抗菌肽-2 (LEAP-2)基因是一种新型的抗菌肽，最近刚从脊椎动物中发现。与其他多肽相比，它有不同的氨基酸序列、二级结构和表达模式。本研究克隆了草鱼肝表达抗菌肽-2基因和它的cDNA全长。草鱼肝表达抗菌肽-2基因由2个内含子和3... 详细信息

肝表达抗菌肽-2 (LEAP-2)基因是一种新型的抗菌肽，最近刚从脊椎动物中发现。与其他多肽相比，它有不同的氨基酸序列、二级结构和表达模式。本研究克隆了草鱼肝表达抗菌肽-2基因和它的cDNA全长。草鱼肝表达抗菌肽-2基因由2个内含子和3个外显子组成。翻译后的蛋白质由92个氨基酸组成，其中包括26个氨基酸的信号肽和41个氨基酸的成熟肽。

关键词：肝表达抗菌肽-2基因抗菌肽表达肝脏草鱼

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新一代生物柴油原料——微藻

新一代生物柴油原料——微藻

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2009'全国可再生能源—生物质能利用技术交流研讨会

作者：童牧周志刚上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海高校水产养殖E-研究院

生物柴油指的是来自生物体的油脂经转酯作用而形成的单烷基脂肪酸酯。随着化石能源资源的枯竭及环境与气候的恶化,世界各国对可再生能源越来越重视,并致力于生物质能源尤其是生物柴油的大力开发和利用。从目前的情况来看,以高等植物、... 详细信息

生物柴油指的是来自生物体的油脂经转酯作用而形成的单烷基脂肪酸酯。随着化石能源资源的枯竭及环境与气候的恶化,世界各国对可再生能源越来越重视,并致力于生物质能源尤其是生物柴油的大力开发和利用。从目前的情况来看,以高等植物、动物等油脂等为原料生产的生物柴油根本无法满足人们的需求。某些微藻因含油量高、易于培养、单位面积产量大等优点,而被视为新一代的、甚至是唯一能实现完全替代石化柴油的生物柴油原料。本文结合中国生物柴油的发展状况,剖析了利用微藻生产生物柴油的优势,并就其存在的劣势重点地从优良藻种的筛选、产油培养条件与技术的改进、生物柴油提炼方法与过程系统化等方面,提出了应对措施以及展望其应用的前景。

关键词：微藻生物柴油中性脂可再生能源转酯作用

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鱼类性别决定及其研究方法进展

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上海海洋大学学报 2009年第1期18卷 94-100页

作者：姚延丹龙华陈建武付元帅陶玲李谷中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水鱼类种质资源与生物技术重点开放实验室湖北荆州434000 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

近二十年,有关鱼类性别决定的研究取得了很大进展,主要集中在温度、激素以及性别连锁基因、BKM、ZFY、芳香化酶基因、H-Y抗原、Sox、SRY、DMRT1、DMY、DAX-1、核受体基因家族、SF-1和WT-1等性别决定基因对性别分化的调控方面,杂交和分... 详细信息

近二十年,有关鱼类性别决定的研究取得了很大进展,主要集中在温度、激素以及性别连锁基因、BKM、ZFY、芳香化酶基因、H-Y抗原、Sox、SRY、DMRT1、DMY、DAX-1、核受体基因家族、SF-1和WT-1等性别决定基因对性别分化的调控方面,杂交和分子标记技术则提供了有效的技术手段。这些研究为进一步阐明鱼类决定机制提供了基础和手段,但仍存在一些问题有待探索。阐述了近些年有关鱼类性别决定因子及其研究方法方面的研究动态和进展,并对鱼类性别决定的研究前景、存在的问题和发展的趋势做了简述,以期为系统研究鱼类性别决定机制提供参考。

关键词：鱼类性别决定研究方法进展

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