检索结果-内蒙古大学图书馆

水产学报 2011年第9期35卷 1293-1301页

作者：李雪松刘至治赵雪锦马晓茜冯维王成辉上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室

利用一对特异性引物DABF和DABR,分别从21尾感病和16尾抗病"全红"体色瓯江彩鲤的cDNA中,扩增出长度为624 bp的MHC-DAB基因片段。共测序185个有效克隆,获得76个不同的核苷酸序列。MHC-DAB基因片段包括第1～4外显子,分别编码信... 详细信息

利用一对特异性引物DABF和DABR,分别从21尾感病和16尾抗病"全红"体色瓯江彩鲤的cDNA中,扩增出长度为624 bp的MHC-DAB基因片段。共测序185个有效克隆,获得76个不同的核苷酸序列。MHC-DAB基因片段包括第1～4外显子,分别编码信号肽、β1和β2结构域及跨膜区。长度为276 bp的β1结构域有144个核苷酸变异位点(52.17%)和70个氨基酸变异位点(76.07%),而长度为282 bp的β2结构域只有98个核苷酸变异位点(34.75%)和50个氨基酸变异位点(53.19%),显示β1结构域的变异要明显大于β2结构域。在β1结构域的24个抗原结合位点(PBR)上,有23个发生了变异。β1结构域的PBR、非抗原结合位点(non-PBR)及β2结构域的ω值(ω=dN/dS)分别为1.367、0.886和0.754,表明"全红"体色瓯江彩鲤MHC-DAB基因(特别是β1结构域)在进化过程中受到正向选择作用。在所得的20个不同的等位基因中,基因DAB3*15在抗病群体中出现的频率(13.75%)显著高于感病群体中出现的频率(3.81%)(P<0.05);基因DAB3*09和DAB3*10的出现频率都为3.75%(P<0.05),仅存在于抗病群体中;而基因DAB3*02和DAB3*14的出现频率分别为7.62%(P<0.05)和8.57%(P<0.01),仅存在于感病群体中。

关键词：瓯江彩鲤主要组织相容性复合体多态性抗病力

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“新吉富”罗非鱼、“吉丽”罗非鱼及萨罗罗非鱼耐寒力的测定

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上海海洋大学学报 2011年第4期20卷 499-503页

作者：王兵李思发蔡完其上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306

在上海地区室外自然降温条件下,连续3年观察测定了"新吉富"罗非鱼、"吉丽"罗非鱼("新吉富"罗非鱼♀×萨罗罗非鱼♂)及萨罗罗非鱼对低温的耐受力,计算和分析了平均半致死水温。2008年,"新吉富&qu... 详细信息

在上海地区室外自然降温条件下,连续3年观察测定了"新吉富"罗非鱼、"吉丽"罗非鱼("新吉富"罗非鱼♀×萨罗罗非鱼♂)及萨罗罗非鱼对低温的耐受力,计算和分析了平均半致死水温。2008年,"新吉富"罗非鱼死亡水温范围是7.5～5.8℃,平均半致死水温是6.8℃,对水温降低过程中罗非鱼行为活动的变化进行了观察;2009年,"新吉富"罗非鱼和"吉丽"罗非鱼的死亡水温范围分别是10.8～7.6℃、12.4～9.2℃,平均半致死水温分别是9.2℃和11.4℃;2010年3种实验鱼的死亡水温范围分别是11.0～7.0℃、12.8～11.4℃、13.8～12.4℃,平均半致死水温分别是8.3℃、12.5℃、13.1℃,且3者间差异显著(P<0.05)。综合3年实验结果,开始死亡和100%死亡的水温为"新吉富"罗非鱼11℃、5.8℃,"吉丽"罗非鱼12℃、9.2℃,萨罗罗非鱼13.8℃、12.4℃。3种遗传型罗非鱼耐寒力之间存在显著或极显著的种间差异,杂交能一定程度地改良耐寒能力。

关键词： “新吉富”罗非鱼 “吉丽”罗非鱼萨罗罗非鱼水温

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牙鲆变态中IGF-I基因表达及甲状腺激素对其的调节作用

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水生生物学报 2011年第2期35卷 355-359页

作者：张俊玲施志仪付元帅程琦上海海洋大学农业部水产种质资源和养殖生态重点开放实验室上海201306

胰岛素样生长因子（Insulin-like growth factors,IGFs）是一类具有胰岛素样代谢和促有丝分裂功能的蛋白质,参与脊椎动物的胚胎发育、生长和生殖。IGF系统包括两个配体（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）、IGF受体（IGF-I receptor,IGF-I R;IGF-II rece... 详细信息

胰岛素样生长因子（Insulin-like growth factors,IGFs）是一类具有胰岛素样代谢和促有丝分裂功能的蛋白质,参与脊椎动物的胚胎发育、生长和生殖。IGF系统包括两个配体（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）、IGF受体（IGF-I receptor,IGF-I R;IGF-II receptor,IGF-ⅡR）以及IGF结合蛋白（IGF binding proteins，IGFBPs）。

关键词：牙鲆变态发育 IGF-I 基因表达甲状腺激素

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总状毛霉甲壳素脱乙酰酶(CDA2)全长cDNA的克隆及原核表达

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上海海洋大学学报 2011年第1期20卷 44-49页

作者：蒋霞云袁襄南魏福卫周培根邹曙明上海海洋大学食品学院上海201306 上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306

采用快速扩增cDNA末端(RACE)克隆技术,通过设计甲壳素脱乙酰酶简并引物,从总状毛霉(Mucor racemosus)菌丝体中克隆了CDA2的基因(EF468349)及其全长cDNA(DQ678929)序列。与已获得的总状毛霉菌cda1基因相比,cda2基因中不含内含子。总状毛... 详细信息

采用快速扩增cDNA末端(RACE)克隆技术,通过设计甲壳素脱乙酰酶简并引物,从总状毛霉(Mucor racemosus)菌丝体中克隆了CDA2的基因(EF468349)及其全长cDNA(DQ678929)序列。与已获得的总状毛霉菌cda1基因相比,cda2基因中不含内含子。总状毛霉cda2全长cDNA为1 378 bp,包含23 bp 5’端非翻译区、1 254 bp开放阅读框和101 bp 3’端非翻译区,编码一条由418个氨基酸残基组成的多肽链,其N端包含一段21个氨基酸残基组成的信号肽,在150～272氨基酸残基区存在一个多糖脱乙酰酶保守结构域。通过构建pET28a-cda2表达载体和进行原核表达研究,结果显示:原核表达产生的重组蛋白CDA2的分子量约为46ku,表达形式以包涵体为主,纯化获得的重组蛋白CDA2具有甲壳素脱乙酰酶催化活性。本研究为进一步研究总状毛霉CDA2的结构和功能奠定了基础。

关键词：甲壳素脱乙酰酶甲壳素脱乙酰酶2基因 cDNA克隆总状毛霉原核表达

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基因组步移技术克隆稀有鲫角蛋白18基因序列及序列分析

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上海海洋大学学报 2011年第5期20卷 661-668页

作者：叶莹蔡生力刘红上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306

角蛋白18是角蛋白的一种,属于S型角蛋白,是在哺乳动物和两栖类动物胚胎发育中第一个表达的中间纤维蛋白。根据已发表的人、爪蟾及斑马鱼角蛋白18 DNA序列,通过DNAman同源性比较获得保守序列,并从中设计二对引物。从稀有鲫基因组中PCR... 详细信息

角蛋白18是角蛋白的一种,属于S型角蛋白,是在哺乳动物和两栖类动物胚胎发育中第一个表达的中间纤维蛋白。根据已发表的人、爪蟾及斑马鱼角蛋白18 DNA序列,通过DNAman同源性比较获得保守序列,并从中设计二对引物。从稀有鲫基因组中PCR扩增得到2 779 bp的角蛋白18的DNA序列片段;通过基因组步移,分别获得该基因的上游和下游序列片段;最后将获得的全基因片段克隆至质粒载体pMD19-T进行序列测定检验。结果显示所克隆的稀有鲫角蛋白18基因全长3 765 bp。对该基因进行NCBI的Blastn同源性比较分析,表明稀有鲫同斑马鱼比较角蛋白18 DNA序列存在73.6%同源相似性;同时对该基因进行生物学分析,开放阅读框(Open ReadingFrame,ORF)预测表明稀有鲫角蛋白18是含有7个外显子和6个内含子,共编码367个氨基酸的蛋白质。研究亮点:首次成功克隆了稀有鲫角蛋白18基因全长序列3 765 bp,并且通过软件预测分析得出氨基酸序列,把氨基酸序列在DNA序列中进行标记,显示稀有鲫角蛋白18基因全长序列含有7个外显子和6个内含子,共编码367个氨基酸。另外,没有采用常用的从RNA反转录为cDNA为模板获得基因全长,而是直接以DNA为模板出发,利用基因组步移的方法获得基因全长。

关键词：稀有鲫角蛋白18 克隆基因组步移

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阳澄湖养蟹网围内外轮虫群落结构的变化及分析

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水产学报 2011年第8期35卷 1247-1257页

作者：陈立婧刘樵彭自然胡忠军薛俊增王武上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室

2008年6月至2009年5月对阳澄湖养蟹网围及湖区3组对照点中轮虫群落结构及部分水质特征参数进行调查,分析了轮虫群落结构与环境变量的关系,利用多种参数对其水质进行评价。经鉴定,共采集到轮虫83种,隶属于12科30属。研究表明,网围内3个... 详细信息

2008年6月至2009年5月对阳澄湖养蟹网围及湖区3组对照点中轮虫群落结构及部分水质特征参数进行调查,分析了轮虫群落结构与环境变量的关系,利用多种参数对其水质进行评价。经鉴定,共采集到轮虫83种,隶属于12科30属。研究表明,网围内3个采样点的年平均生物密度及生物量低于湖区3个采样点,生物密度与水温呈极显著正相关(P<0.01)。不同月份受不同环境变量的影响,除4月份外,环境变量对生物密度的影响在采样点之间无差异。相似度分析表明,网围内及相邻湖区的轮虫优势种相似性高。水质分析表明,6个采样点均为富营养化、β-α中污染水体,东湖网围C1和中湖网围A12采样点程度稍轻,但6个采样点之间无显著性差异,这与用卡尔森营养状态指数得出的结果相似。

关键词：网围养蟹轮虫群落结构阳澄湖

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赖氨酸对半滑舌鳎稚鱼消化系统发育和激素水平的影响

赖氨酸对半滑舌鳎稚鱼消化系统发育和激素水平的影响

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中国海洋湖沼学会、中国动物学会鱼类学分会2012年学术研讨会

作者：常青马静滕玉清王新星中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛266071 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛266071 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

通过投喂经赖氨酸及裂壶藻强化的卤虫,研究其对半滑舌鳎稚鱼生长性能,主要消化酶活性(淀粉酶,酸性蛋白酶,碱性蛋白酶),碱性磷酸酶活性及胆囊收缩素(CCK)、甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)和皮质醇浓度的影响.结果显示，赖氨酸组淀... 详细信息

通过投喂经赖氨酸及裂壶藻强化的卤虫,研究其对半滑舌鳎稚鱼生长性能,主要消化酶活性(淀粉酶,酸性蛋白酶,碱性蛋白酶),碱性磷酸酶活性及胆囊收缩素(CCK)、甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)和皮质醇浓度的影响.结果显示，赖氨酸组淀粉酶活力在8D时显著高于裂壶藻组，12D和16D时显著高于空白组。赖氨酸组的CCK浓度在16天时达到3187.3pg/g，显著高于空白组。赖氨酸组T3浓度在16D时显著高于空白组。T4和皮质醇浓度在3个组无显著性差异。实验组半滑舌鳎肠道微绒毛长度和黏膜厚度均显著高于空白组。本研究表明，游离赖氨酸能够促进半滑舌鳎稚鱼的生长、消化道发育和CCK及T3水平。

关键词：半滑舌鳎赖氨酸消化系统生长发育激素水平

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中华绒螯蟹和罗氏沼虾cyclin B蛋白的原核表达、抗体制备及其鉴定

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中国水产科学 2011年第4期18卷 713-719页

作者：冯海洋邱高峰上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海高校水产养殖学E-研究院上海201306

从中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)和罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)卵巢cDNA中克隆了cyclin B基因的开放阅读框,分别连接到pGEX-2T和pET-32a表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组蛋白GST-EsCB和Trx-MrCB。通过优化培养温度、IPTG浓度以及诱导时间,得出重组蛋白的最佳表达条件分别为:0.1 mmol/L IPTG、37℃、4 h和0.1 mmol/L IPTG、30℃、6 h。重组蛋白主要以包涵体形式存在。亲和层析纯化重组蛋白,作为抗原免疫家兔,制备GST-EsCB和Trx-MrCB多克隆抗体。ELISA检测抗体效价均高达1∶80 000,Western blot鉴定该抗体能特异性识别重组蛋白,而且均能够从卵巢总蛋白中检测到cyclin B蛋白。在中华绒螯蟹未成熟卵巢中cyclin B蛋白出现2种亚型,在罗氏沼虾未成熟卵巢中只有1种亚型,推测虾和蟹cyclin B蛋白调控卵母细胞成熟的分子机制不同。本研究制备了cyclin B抗体,旨为在蛋白水平研究cyclin B在卵母细胞成熟过程中的作用机制提供基础条件。

关键词：中华绒螯蟹罗氏沼虾 cyclinB多克隆抗体原核表达卵母细胞成熟

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海带lhcf4基因克隆和配子体差异表达研究

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华北农学报 2011年第6期26卷 41-49页

作者：毕燕会周志刚上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海高校水产养殖学E-研究院上海201306

根据糖海带(Laminaria saccharina)光捕获蛋白基因lhcf4的cDNA全长序列(GenBank登录号:AF226860)设计引物,通过RT-PCR方法获得海带(Saccharina japonica)配子体lhcf4基因的cDNA全长序列,共1 042 bp,编码一个含218个氨基酸的前体蛋白LHCF4,推测分子量为23.11 kDa,等电点为5.36。与其同源基因相似度分析表明,lhcf基因的开放阅读框(Open reading frame,ORF)在家族内及物种间高度保守,变异主要发生在非翻译区(Untranslated re-gion,UTR)。预测LHCF4成熟蛋白三级结构存在4个α螺旋区,其中第一、三螺旋较长,形成跨膜螺旋,第二个螺旋相对较短,完全镶嵌在膜中,另外一个为短螺旋,位于类囊体膜-类囊体腔界面上。杂色藻类、绿藻及豌豆光捕获蛋白氨基酸多序列比对显示叶绿素a结合位点及盐桥形成氨基酸残基在植物进化中高度保守;将预测的海带LHCF4蛋白3D结构与豌豆X-衍射晶体结构进行空间重叠,获得了结合在LHCF4蛋白上的5个叶绿素a的空间分布。Neighbor-joining分子进化树显示原绿球藻、绿藻和杂色藻类的光捕获蛋白基因是三个独立进化的系统,共同起源于蓝细菌的只结合叶绿素a的光捕获蛋白;海带lhcf4基因与糖海带lhcf4及巨藻的fcpb基因为直系同源;糖海带lhcf4、lhcf7及lhcF1基因为旁系同源。实时荧光定量PCR结果证实lhcf4基因具有雌、雄配子体差异表达特征。

关键词：海带配子体 lhcf4 基因克隆序列分析差异表达

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塔玛亚历山大藻对中国明对虾肝胰腺和鳃HSP90和Caspase基因表达的影响

塔玛亚历山大藻对中国明对虾肝胰腺和鳃HSP90和Caspase基因表达的...

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第八届世界华人虾蟹养殖学术研讨会

作者：梁忠秀李健刘萍李吉涛何玉英常志强刘德月上海海洋大学水产与生命学院上海201306 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室山东青岛266071 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室山东青岛266071

本论文选择在我国分离得到的一株能典型产生麻痹性贝毒(PSP,Paralytic Shellfish Poison)的有毒赤潮甲藻塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense,ATHK株),研究了其对一种我国重要的经济虾类中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的肝胰... 详细信息

本论文选择在我国分离得到的一株能典型产生麻痹性贝毒(PSP,Paralytic Shellfish Poison)的有毒赤潮甲藻塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense,ATHK株),研究了其对一种我国重要的经济虾类中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的肝胰腺和鳃HSP90和Caspase基因表达的影响.将中国明对虾暴露于浓度为200cells/ml、1000cells/ml的塔玛亚历山大藻中96 h,于胁迫后1、3、6、12、24、48、72、96 h测定肝胰腺和鳃Caspase和HSP90基因表达的影响.荧光定量PCR结果显示,暴露在浓度为200cells/ml和1000cells/ml藻液中1～6 h,中国明对虾肝胰腺和鳃的HSP90基因表达均增加,但1000cells/ml藻液胁迫24～96h,鳃HSP90基因表达受到抑制.暴露在以上两个浓度组中,中国明对虾肝胰腺的Caspase基因在各个时间点基本处于较低的表达水平,而鳃的Caspase基因表达水平在各个时间点基本高于对照组.实验结果表明,塔玛亚历山大藻对中国明对虾HSP90基因表达有一定的诱导效果,这可能表明HSP90被诱导以应对胁迫,但暴露在1000cells/ml藻液24～96h则该基因在鳃中的表达受到抑制,这可能会导致中国明对虾机体氧化损伤等情况的出现.Caspase基因在肝胰腺和鳃中表达水平的差异可能与不同组织应对胁迫时的不同功能有关,塔玛亚历山大藻能够诱导中国对虾鳃Caspase基因的表达水平升高,这可能促使鳃细胞凋亡的发生.

关键词：中国明对虾塔玛亚历山大藻细胞凋亡 caspase HSP 90 基因表达

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