检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通报 2011年第11期27卷 88-94,100页

作者：于水燕陈颢周志刚上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海高校水产养殖E-研究院上海201306 国家海洋局第一海洋研究所青岛266061

缺刻缘绿藻(Myrmecia incisa)系单细胞淡水绿藻,能够大量合成并积累花生四烯酸(arachidonic acid,ArA,20:4ω6),尤其在氮饥饿条件下。基于该绿藻中的延长酶基因序列构建双元表达载体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导侵... 详细信息

缺刻缘绿藻(Myrmecia incisa)系单细胞淡水绿藻,能够大量合成并积累花生四烯酸(arachidonic acid,ArA,20:4ω6),尤其在氮饥饿条件下。基于该绿藻中的延长酶基因序列构建双元表达载体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导侵染拟南芥(Arabidopisis thaliana),筛选得到携带MiFAE基因的拟南芥转化株。在转基因第3代(T3)植株中应用PCR扩增目的基因片段和GUS染色,分别在DNA、mRNA和表达水平上均成功地检测到MiFAE基因的存在。GC-MS对不同组织甲酯化的脂肪酸进行检测,结果表明,在转基因的拟南芥营养生长期的叶片中,十六碳三烯酸(hexadecaterienoic acid,C16:3^7,10,13)和α-亚麻酸(α-linolenic acid,C18:3^9,12,15,ALA)在总脂肪酸中的百分含量与对照组相比明显下降,分别由10.5%和41.5%降到1.8%和19.6%。结合GUS染色结果,推测这些减少的产物可能通过外源MiFAE基因的作用,直接参与了蜡质或角质的合成代谢途径。

关键词：缺刻缘绿藻花生四烯酸脂肪酸延长酶农杆菌拟南芥

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斑鳢(♀)×乌鳢(♂)不同组合F_1代养殖性能分析

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淡水渔业 2011年第6期41卷 81-84页

作者：朱林谢楠朱树人李忠全冯晓宇李应森李家乐上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306 杭州市农业科学院水产研究所杭州310024

用同一广东群体斑鳢(Channa maculate)和4个不同地理群体乌鳢(***)杂交,建立4个杂交组合:广东斑鳢♀×山东乌鳢♂(SG)、广东斑鳢♀×浙江乌鳢♂(ZG)、广东斑鳢♀×江西乌鳢♂(JG)和广东斑鳢♀×湖南乌鳢♂(HG)。将它们... 详细信息

用同一广东群体斑鳢(Channa maculate)和4个不同地理群体乌鳢(***)杂交,建立4个杂交组合:广东斑鳢♀×山东乌鳢♂(SG)、广东斑鳢♀×浙江乌鳢♂(ZG)、广东斑鳢♀×江西乌鳢♂(JG)和广东斑鳢♀×湖南乌鳢♂(HG)。将它们的F1代鱼苗根据不同阶段,分别饲养在规格为6 m×2 m(长×宽)小水泥池和6 m×5.5 m(长×宽)大水泥池中,将它们的F1代鱼种通过荧光标记后混养在规格为3 m×3 m×1.4 m(长×宽×高)网箱中。对各组合F1代的生长性能和养殖效果进行比较,结果表明:广东斑鳢♀×山东乌鳢♂(SG)组合F1代的养殖效果最好,体重、体长增加量最大,分别为582.54 g和34.80 cm。且生长速度最快,平均起捕规格582.54 g和平均产量38.83(100 g/m2),均显著大于其余3个组合的F1代。

关键词：斑鳢(Channa maculate)(♀)×乌鳢(C.argus)(♂) 组合养殖性能

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乌鳢主要病害的诊断和防治

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湖北农业科学 2011年第10期50卷 2074-2077页

作者：朱林李应森冯晓宇郭水荣谢楠朱树人上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306 杭州市农业科学院水产研究所浙江杭州310024

乌鳢病害主要有寄生虫病、真菌病、细菌病等,对乌鳢主要病害致病病原、流行状况、发病症状及诊断和防治措施等进行了综述,同时对我国乌鳢病害研究提出了展望。

关键词：乌鳢病害诊断防治

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乌鳢养殖及人工育苗技术概述

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江苏农业科学 2011年第3期39卷 298-300页

就近几年乌鳢养殖、人工繁殖与育苗技术的研究进展进行了概述,指出了我国乌鳢养殖和育苗中存在的一些亟待解决的问题,并就我国乌鳢人工养殖及育苗的研究发展提出展望。

关键词：乌鳢养殖育苗展望

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运用微电极技术测定三角帆蚌外套膜Ca^(2＋)流量的研究

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水生生物学报 2011年第3期35卷 545-549页

作者：李文娟施志仪郝莹莹韩健靳雨丽叶显峰上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306 上海市高校水产养殖学E研究院上海海洋大学上海201306 安徽省芜湖市繁昌县农委安徽241200

Ca既是珍珠和贝壳中的主要组成成分（CaCO3占95%以上）,又是普遍存在的细胞内第二信使,在生物体内承担着非常重要生理功能。生物矿化的研究表明外套膜细胞在珍珠和贝壳生长中起着非常重要的作用[1,2],并且Ca^2＋在外套膜中也保持一个较... 详细信息

Ca既是珍珠和贝壳中的主要组成成分（CaCO3占95%以上）,又是普遍存在的细胞内第二信使,在生物体内承担着非常重要生理功能。生物矿化的研究表明外套膜细胞在珍珠和贝壳生长中起着非常重要的作用[1,2],并且Ca^2＋在外套膜中也保持一个较高的水平^[3]。研究贝类Ca代谢，特别是外套膜组织的Ca^2＋跨膜转运，对进一步阐明贝壳以及珍珠形成机理，提高优质珠的产量都有着重要意义。

关键词：三角帆蚌外套膜细胞培养选择性微电极 Ca2+流量

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应用激光共聚焦显微技术研究Ca2+在三角帆蚌组织内的积累与分布

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水产学报 2011年第2期35卷 214-220页

作者：李文娟施志仪郝莹莹叶显峰上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海市高校水产养殖学E-研究院上海海洋大学水产与生命学院安徽省芜湖市繁昌县农委

为了探讨淡水贝类Ca2+吸收和转运信号传递机理,采用激光共聚焦技术研究了三角帆蚌不同组织细胞在静息状态下细胞内游离Ca2+浓度,以及水体Ca2+浓度对外套膜组织细胞内钙沉积的影响。试验选取10只健康的三角帆蚌,分别获得外套膜外膜、内... 详细信息

为了探讨淡水贝类Ca2+吸收和转运信号传递机理,采用激光共聚焦技术研究了三角帆蚌不同组织细胞在静息状态下细胞内游离Ca2+浓度,以及水体Ca2+浓度对外套膜组织细胞内钙沉积的影响。试验选取10只健康的三角帆蚌,分别获得外套膜外膜、内膜、斧足、腮及内脏团上表皮组织细胞,短期培养后用Fluo-3/AM荧光探针孵育细胞1 h,观察细胞内Ca2+荧光强度。研究结果表明,蚌不同组织细胞内Ca2+荧光强度存在显著差异,外套膜外膜细胞内Ca2+荧光强度最高,内脏团上表皮细胞的最低(P<0.05);育珠三角帆蚌在相同Ca2+浓度的孵育水平下,外套膜细胞内Ca2+荧光强度比非育珠蚌都有增加的趋势,其中在1.25 mmol/L添加组中,两组外套膜内膜细胞内Ca2+荧光强度差异达到显著水平(P<0.05);不同Ca2+孵育水平对细胞内Ca2+荧光强度有显著影响(P<0.05),随着Ca2+在孵育液中浓度的升高,外套膜细胞内Ca2+荧光强度显著增强(P<0.05),表明外套膜是从外界吸收Ca2+的主要组织,蚌体珍珠的培育增强了其对Ca2+的沉积,并且水体Ca2+浓度在1.25～3.00 mmol/L有助于蚌体内Ca2+的贮藏,这对进一步开展淡水蚌类育珠学研究提供了基础理论,为珍珠培育的生产实践工作提供了依据。

关键词：三角帆蚌细胞培养激光共聚焦技术 Ca2+沉积

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细鳞斜颌鲴(Plagiognathops microlepis)三个群体线粒体Cytb基因的遗传变异

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湖泊科学 2011年第5期23卷 813-820页

作者：乔德亮何晓梅韦传宝杨露胡利李思发皖西学院生物与制药工程系六安237012 安徽仿生传感与检测技术省级实验室六安237012 上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306

应用线粒体Cytb基因序列分析法,研究了细鳞斜颌鲴三个群体(梁子湖群体19尾、龙窝湖群体19尾、淮河群体18尾)的遗传变异关系.结果显示:细鳞斜颌鲴线粒体Cytb基因大小为1149 bp.三个群体共测出10种单倍型,116个核苷酸变异位点,多态位点百... 详细信息

应用线粒体Cytb基因序列分析法,研究了细鳞斜颌鲴三个群体(梁子湖群体19尾、龙窝湖群体19尾、淮河群体18尾)的遗传变异关系.结果显示:细鳞斜颌鲴线粒体Cytb基因大小为1149 bp.三个群体共测出10种单倍型,116个核苷酸变异位点,多态位点百分率为10.09%,碱基组成中A+T含量(57%左右)明显高于G+C含量.淮河群体含5种单倍型、111个变异位点,核苷酸多样性指数为0.031223,核苷酸多样性最丰富;龙窝湖群体含3种单倍型、2个变异位点,核苷酸多样性指数为0.000550,核苷酸多样性最简单.梁子湖-龙窝湖、淮河-梁子湖、淮河-龙窝湖群体间的遗传距离分别是0.001530、0.084682和0.084335.梁子湖-龙窝湖群体间遗传关系较近,群体间的遗传分化仍在亚种范围内;而淮河-梁子湖、淮河-龙窝湖群体间亲缘关系较远,群体间的遗传分化可能已达到亚种水平的分化.

关键词：细鳞斜颌鲴群体遗传变异 Cytb基因

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缢蛏β-ACTIN1基因的分子特性及其表达分析

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水产学报 2011年第5期35卷 650-659页

作者：冯冰冰钟玉民牛东红陈慧林国文李家乐上海海洋大学水产与生命学院农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室福建省闽东水产研究所上海海洋大学水产与生命学院上海市高校水产养殖学E-研究院

为研究缢蛏功能基因的表达调控,利用SMART cDNA文库构建试剂盒成功构建了缢蛏肝脏组织的标准化cDNA文库。对随机选取的5 679个克隆进行随机测序,比对、筛选出2条β-actin同源序列,对其中一条EST序列两端进行扩增、测序,然后进行5′RACE(... 详细信息

为研究缢蛏功能基因的表达调控,利用SMART cDNA文库构建试剂盒成功构建了缢蛏肝脏组织的标准化cDNA文库。对随机选取的5 679个克隆进行随机测序,比对、筛选出2条β-actin同源序列,对其中一条EST序列两端进行扩增、测序,然后进行5′RACE(rapidamplification of cDNA ends,RACE)扩增、测序,拼接得到全长cDNA序列,命名为β-ACTIN 1。该序列全长为1 552 bp,包括73 bp的5′非翻译区和348 bp的3′非翻译区,以及1 131 bp的开放阅读框。阅读框共编码376个氨基酸,推算分子量约为41.95 ku,理论等电点为5.23。与其他7种软体动物的氨基酸序列进行比对发现,β-ACTIN1基因的氨基酸序列中Ile179、G lu229、Ser232、Pro236、Ile248、Asn272、Cys273、Val283、Ser320、Ser325、Val330、Pro339等12个氨基酸残基具有特异性;同时发现缢蛏β-ACTIN 1氨基酸序列与其他软体动物的相似性高达97%以上。系统进化分析显示,缢蛏首先与软体动物聚在一起,然后与节肢动物聚在一起,再依次与鱼类、两栖类、哺乳类聚在一起。荧光定量PCR检测结果显示,β-ACTIN1基因在缢蛏各组织中的表达及鳗弧菌诱导后的表达均不稳定,不适合作为内参基因。

关键词：缢蛏 cDNA文库 β-ACTIN1基因序列分析基因表达

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鳜胃蛋白酶原A、胃质子泵基因cDNA全长的克隆与细胞表达定位

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水产学报 2011年第7期35卷 992-1000页

作者：薛洋赵金良邓燕飞卞云斌顾才弟上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海市浦东新区水产技术推广站上海市浦东新区孙农水产养殖场

利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得了鳜全长1 322 bp的胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)A2 cDNA序列,含1 131 bp的开放阅读框(ORF),共编码376个氨基酸,氨基酸序列包含信号肽、激活肽和胃蛋白酶3部分,胃蛋白酶部分含有2个天冬氨酸活性位点和... 详细信息

利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得了鳜全长1 322 bp的胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)A2 cDNA序列,含1 131 bp的开放阅读框(ORF),共编码376个氨基酸,氨基酸序列包含信号肽、激活肽和胃蛋白酶3部分,胃蛋白酶部分含有2个天冬氨酸活性位点和3个二硫键。鳜胃蛋白酶A2与A1在序列组成、理化性质、功能位点、空间结构上存在明显差异,表明它们可能具有不同的催化功能。胃质子泵(gastric H+/K+-ATPase)是胃酸分泌的关键性酶,研究克隆获得了鳜全长3 581 bp和1 669 bp的胃质子泵α、β亚基cDNA序列。序列相似性分析显示,胃质子泵α亚基具有高度保守性,含多个功能位点,而β亚基具有相对可变性。原位杂交(in situ hybridization,ISH)结果显示,鳜PG A1、PG A2和胃质子泵α亚基mRNA均在胃腺的同一类型细胞中表达,该细胞兼有分泌PG和胃酸的功能,鳜胃腺分泌细胞属于泌酸胃酶细胞。

关键词：鳜胃蛋白酶原A 胃质子泵基因表达定位泌酸胃酶细胞

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缢蛏SRAP-PCR体系的正交优化

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生物技术通报 2011年第6期27卷 99-103页

作者：钟玉民刘达博冯冰冰陈慧林国文李家乐上海海洋大学水产与生命学院农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306 福建省闽东水产研究所宁德352100

运用L_(16)(4~5)正交设计对影响缢蛏SRAP-PCR反应的5个因素:Taq酶浓度、Mg^(2+)浓度、模板DNA浓度、dNTPs浓度和引物浓度在4个水平上进行了优化试验,PCR结果采用SPSS v16.0软件分析。结果表明,各因素对SRAP-PCR反应的影响依次为:引物>... 详细信息

运用L_(16)(4~5)正交设计对影响缢蛏SRAP-PCR反应的5个因素:Taq酶浓度、Mg^(2+)浓度、模板DNA浓度、dNTPs浓度和引物浓度在4个水平上进行了优化试验,PCR结果采用SPSS v16.0软件分析。结果表明,各因素对SRAP-PCR反应的影响依次为:引物>Taq酶>模板DNA>Mg^(2+);缢蛏SRAP反应最佳体系为:在20μL PCR反应体系中,引物0.3μmol/L、Taq酶0.5 U、模板DNA 50 ng、dNTPs 0.2 mmol/L及Mg^(2+)2 mmol/L。用不同缢蛏的基因组DNA两次SRAP-PCR扩增,8对引物均能扩增出清晰且重复性好的谱带。因而建立的缢蛏反应体系稳定可靠。

关键词：缢蛏 SRAP 正交设计优化

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