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大宗淡水鱼类产业技术可持续发展学术研讨会

作者：刘峰李家乐岳根华傅建军周正峰沈玉帮上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306 上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306 上海海洋大学上海高校E-研究院上海201306 新加坡国立大学淡马锡生命科学实验室新加坡117604

肝表达抗菌肽-2 (LEAP-2)基因是一种新型的抗菌肽，最近刚从脊椎动物中发现。与其他多肽相比，它有不同的氨基酸序列、二级结构和表达模式。本研究克隆了草鱼肝表达抗菌肽-2基因和它的cDNA全长。草鱼肝表达抗菌肽-2基因由2个内含子和3... 详细信息

肝表达抗菌肽-2 (LEAP-2)基因是一种新型的抗菌肽，最近刚从脊椎动物中发现。与其他多肽相比，它有不同的氨基酸序列、二级结构和表达模式。本研究克隆了草鱼肝表达抗菌肽-2基因和它的cDNA全长。草鱼肝表达抗菌肽-2基因由2个内含子和3个外显子组成。翻译后的蛋白质由92个氨基酸组成，其中包括26个氨基酸的信号肽和41个氨基酸的成熟肽。

关键词：肝表达抗菌肽-2基因抗菌肽表达肝脏草鱼

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新一代生物柴油原料——微藻

新一代生物柴油原料——微藻

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2009'全国可再生能源—生物质能利用技术交流研讨会

作者：童牧周志刚上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海高校水产养殖E-研究院

生物柴油指的是来自生物体的油脂经转酯作用而形成的单烷基脂肪酸酯。随着化石能源资源的枯竭及环境与气候的恶化,世界各国对可再生能源越来越重视,并致力于生物质能源尤其是生物柴油的大力开发和利用。从目前的情况来看,以高等植物、... 详细信息

生物柴油指的是来自生物体的油脂经转酯作用而形成的单烷基脂肪酸酯。随着化石能源资源的枯竭及环境与气候的恶化,世界各国对可再生能源越来越重视,并致力于生物质能源尤其是生物柴油的大力开发和利用。从目前的情况来看,以高等植物、动物等油脂等为原料生产的生物柴油根本无法满足人们的需求。某些微藻因含油量高、易于培养、单位面积产量大等优点,而被视为新一代的、甚至是唯一能实现完全替代石化柴油的生物柴油原料。本文结合中国生物柴油的发展状况,剖析了利用微藻生产生物柴油的优势,并就其存在的劣势重点地从优良藻种的筛选、产油培养条件与技术的改进、生物柴油提炼方法与过程系统化等方面,提出了应对措施以及展望其应用的前景。

关键词：微藻生物柴油中性脂可再生能源转酯作用

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海带配子体Ihcf5基因的克隆及在雌、雄配子体中的差异表达分析

海带配子体Ihcf5基因的克隆及在雌、雄配子体中的差异表达分析

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庆祝中国藻类学会成立30周年暨第十五次学术讨论会

作者：邹丹燕陆广琴毕燕会周志刚上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海高校水产养殖学E-研究院

根据海带(Laminaria japonica)雄配子体抑制消减cDNA文库中E04克隆序列及糖海带(***)lhcf5基因的cDNA序列(GenBank登录号:AF226861)设计引物并进行反转录PCR扩增,获得海带雄配子体lhcf5基因的全长cDNA序列(GenBank登录号:EU751620),它长1078 bp,其中5’-非翻译区(UTR)长22 bp,开放阅读框(ORF)长657 bp,3’-UTR长399 bp并具有典型的poly(A)尾巴,且雌、雄配子体lhcf5基因的cDNA序列完全一致。海带配子体lhcf5基因的ORF编码218个氨基酸,与糖海带lhcf5所编码氨基酸序列的相似性高达98%;编码蛋白氨基端的前40个氨基酸组成了跨质体内质网和叶绿体膜信号肽;跨膜酶切后变为含178个氨基酸的成熟蛋白,它的分子量为19.3 kD,等电点为4.86。预测的成熟蛋白LHCF5高级结构存在4个保守性的β-折叠和3个跨类囊体膜的α-螺旋区。利用基因组DNA为模板,锚定PCR扩增产物的序列结果表明海带雌、雄配子体lhcf5基因都存在着一个1134bp的内含子,位于ORF的第62 bp后。实时荧光定量PCR(Q-RT-PCR)结果显示,lhcf5基因在黑暗中接近不转录;雌配子体在40μmol m·s时转录量最高,而雄配子体的最高转录量出现在80μmol m·s的光照强度处;高于最适宜的光照强度,lhcf5基因的转录量会随光照强度增加而降低。相对于同强度的白光来说,短时间(3 d)和长时间(7 d)的红光照射,都会促进这个基因的相对转录水平;蓝光对雌配子体lhcf5基因转录的促进作用不明显,而它对雄配子体lhcf5基因的转录有一定的促进作用。将海带配子体从营养生长转至有利于配子发生的条件下,雌、雄配子体lhcf5基因在第1天的转录量都明显增加;雌配子体在第4天以及第14天显著增加,第6及第10天接近不转录;雄配子体在第8天及第14天增加,第10天也近似不转录;发育阶段其它时间内的转录量都低于营养生长期的。结果表明海带配子体lhcf5的转录受光诱导,其中红光的促进作用最明显;其转录可能因有利于配子体细胞叶绿体结构的完善及物质与能量的积累,而利于细胞分裂与营养生长。

关键词：海带雌配子体雄配子体 lhcf5基因光转录量

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缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因的特性以及在氮限制条件下相对转录量的分析

缺刻缘绿藻ω3脂肪酸去饱和酶基因的特性以及在氮限制条件下相对...

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庆祝中国藻类学会成立30周年暨第十五次学术讨论会

作者：李春阳杜道海于水燕周志刚上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海高校水产养殖学E-研究院

根据莱茵衣藻（Chlorella vulgaris）和普通小球藻（***）的ω3脂肪酸去饱和酶的氨基酸序列（登录号分别为ABL09485和BAB78717）的保守区（TMFWALF和HHDIGTH）设计简并引物,以缺刻缘绿藻（Myrmecia incise）RNA为模板,通过反转录PCR和c... 详细信息

根据莱茵衣藻（Chlorella vulgaris）和普通小球藻（***）的ω3脂肪酸去饱和酶的氨基酸序列（登录号分别为ABL09485和BAB78717）的保守区（TMFWALF和HHDIGTH）设计简并引物,以缺刻缘绿藻（Myrmecia incise）RNA为模板,通过反转录PCR和cDNA末端快速克隆技术（RACE）,获得了缺刻缘绿藻ω3肪酸去饱和酶基因的cDNA全长（GenBank登录号:EU658930）。该基因cDNA序列长2330 bp,其中开放阅读框1311 bp,5’-非翻译区107 bp;3’-非翻译区912 bp且具有明显的poly（A）尾巴。预测该基因编码一436个氨基酸的蛋白质,分子量为49.06 kD,等电点7.85。该蛋白为膜结合蛋白,含有明显的疏水区域和三个保守的组氨酸簇。荧光定量PCR结果显示,缺刻缘绿藻的ω3脂肪酸去饱和酶基因的相对转录量,在氮限制4 h时有所提高,然后迅速下降,并在24 h达到最低,此后保持在较稳定的低水平波动。气象色谱结果表明,缺刻缘绿藻花生四烯酸的相对含量,在缺氮条件下实验的时间范围内逐步增加,72 h时它的相对含量提高了约2%。说明ω3脂肪酸去饱和酶基因的相对低转录量,有利于缺刻缘绿藻的花生四烯酸,在氮饥饿条件下沿着ω6的途径来合成与积累。

关键词：缺刻缘绿藻 ω3脂肪酸去饱和酶氮限制荧光定量PCR 气象色谱

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海带配子体srp基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

海带配子体srp基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

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庆祝中国藻类学会成立30周年暨第十五次学术讨论会

作者：陈晶王丽丽石微微周志刚上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海高校水产养殖学E-研究院

利用抑制消减杂交法（suppression subtractive hybridization,SSH）构建海带（Laminaria japonica）雄配子体抑制消减cDNA文库。通过Southern点杂交及序列分析,发现一段未知功能的差异表达基因片段（克隆b9）。根据该克隆序列设计基因... 详细信息

利用抑制消减杂交法（suppression subtractive hybridization,SSH）构建海带（Laminaria japonica）雄配子体抑制消减cDNA文库。通过Southern点杂交及序列分析,发现一段未知功能的差异表达基因片段（克隆b9）。根据该克隆序列设计基因特异性引物,利用cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends,RACE）,自雄配子体中克隆了一条长831 bp的cDNA序列,其中开放阅读框450 bp,5’-非翻译区182 bp,3’-非翻译区199 bp且具有明显的poly（A）尾巴。同样利用PCR方法自雌配子体中克隆了该基因的cDNA序列,它与雄配子体的序列完全一致。蛋白同源搜索显示,其与点形念珠藻（Nostoc punctiforme）孢子形成蛋白具有30%相似性,故暂拟名为孢子形成相关蛋白基因（sporulation-ralated-protein gene,srp）。为了进一步了解该目的蛋白的结构及功能,构建了srp基因原核表达载体pET-28a-srp,并将其转化至大肠杆菌（Escherichia coli）BL21中进行表达,获得了分子量大小约19 kD的目的蛋白,且表达量与诱导物IPTG的量成正比。通过串联质谱法检测及图谱分析,表达蛋白与目的蛋白氨基酸序列一致。

关键词：海带配子体 srp基因 RACE 原核表达串联质谱法

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中国红鲤的数量遗传学分析与瓯江彩鲤配套系育种

中国红鲤的数量遗传学分析与瓯江彩鲤配套系育种

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第十五次全国动物遗传育种学术讨论会

作者：王成辉项松平王剑农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海海洋大学浙江龙泉省级瓯江彩鲤良种场

引言红鲤是我国鲤中的特殊类群,是极为优良的鱼类遗传育种材料,尤其是兴国红鲤和荷包红鲤,曾作为杂交亲本生产了许多有较高经济价值的杂交组合,在我国的水产养殖中发挥了重要作用。但我国对这些红鲤的

关键词：红鲤生长相关性状遗传效应配套系育种

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坛紫菜(红藻门,红毛菜纲)化学成分分析(英文)

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中国海洋药物 2009年第1期28卷 29-35页

作者：谢程亮黄健孙彬宋武林申宗岩马家海上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室福建省水产技术推广总站全南國立大學水産海洋學院

目的对产自福建省的坛紫菜的化学成分进行了分析。方法利用常规分析方法对坛紫菜的蛋白质、碳水化合物、粗脂肪、灰分、游离氨基酸、矿物质元素、叶绿素a和类胡萝卜素及藻胆蛋白进行测定。结果粗蛋白、碳水化合物、粗脂肪、灰分占藻体... 详细信息

目的对产自福建省的坛紫菜的化学成分进行了分析。方法利用常规分析方法对坛紫菜的蛋白质、碳水化合物、粗脂肪、灰分、游离氨基酸、矿物质元素、叶绿素a和类胡萝卜素及藻胆蛋白进行测定。结果粗蛋白、碳水化合物、粗脂肪、灰分占藻体干重的比例分别为34.88%～37.21%、46.86%～49.27%、1.68%～2.09%、8.75%～9.92%;光合色素中叶绿素a、类胡萝卜素、藻红蛋白、藻蓝蛋白的含量分别为601～646、120～130、1289～1802、1255～1743 mg·(100g)-1。藻体中所含游离氨基酸以及K、Na、Mg、Fe、P、Zn等无机离子含量丰富,重金属离子如Cu、Cd、Cr含量很低。结论坛紫菜是一种典型的高蛋白、低脂肪、富含无机元素的保健食品。

关键词：坛紫菜化学成分保健食品

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光对海带雌、雄配子体lhcf5基因相对转录量的影响

光对海带雌、雄配子体lhcf5基因相对转录量的影响

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第十届全国水产青年学术年会

作者：邹丹燕周志刚上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海市高校水产养殖学E-研究院上海201306

根据糖海带lhcf5基因的cDNA序列(GenBank登录号：AF226861)和海带(Laminaria japonica)雄配子体抑制消减文库内已知序列的E04克隆拼接后设计引物并进行反转录PCR扩增,获得海带lhcf5基因的全长cDNA序列。利用实时荧光定量PCR(Q-RT-PCR)... 详细信息

根据糖海带lhcf5基因的cDNA序列(GenBank登录号：AF226861)和海带(Laminaria japonica)雄配子体抑制消减文库内已知序列的E04克隆拼接后设计引物并进行反转录PCR扩增,获得海带lhcf5基因的全长cDNA序列。利用实时荧光定量PCR(Q-RT-PCR)方法分析了在不同光照强度、光质及有利于配子产生条件下,lhcf5基因在海带雌、雄配子体中转录量的变化。不同光照强度条件下,lhcf5基因在黑暗中接近不转录;雌配子体在40μmol/(m2·s)时转录量最高,而雄配子体的最高转录量出现在80 μmol/(m2·s)的光照强度处;高于最适宜的光照强度,lhcf5基因的转录量会随光照强度增加而降低。相对于同强度的白光来说,短时间(3 d)和长时间(7 d)的红光照射,都会促进这个基因的相对转录水平;蓝光对雌配子体中lhct5基因转录的促进作用不明显,而其对它在雄配子体中的转录有一定的促进作用。将海带配子体从营养生长转至有利于配子发生的条件下,雌、雄配子体lhcf5基因在第1天的转录量都明显增加;雌配子体在第4天以及第14天显著增加,第6及第10天接近不转录;雄配子体在第8天及第14天增加,第10天也近似不转录;发育阶段其它时间内的转录量都低于营养生长期的。结果表明海带配子体lhcf5的转录受光诱导,其中红光的促进作用最明显;其转录可能因有利于配子体细胞叶绿体结构的完善及物质与能量的积累,而利于细胞分裂与营养生长。

关键词：海带雌配子体雄配子体 lhcf5基因光转录量

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饲料中添加不同水平的维生素D3对草鱼幼鱼生长和体成分的影响

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淡水渔业 2009年第5期39卷 38-42页

作者：蒋明吴凡文华冷向军刘伟中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水鱼类种质资源与生物技术重点开放实验室湖北荆州434000 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心江苏无锡214081 上海海洋大学水产与生命学院上海200090

本文以酪蛋白和脱脂豆粕为蛋白源,糊精为糖源,玉米油和豆油为脂肪源的半纯化饲料为基础饲料,研究维生素D3对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼生长及体成分的影响。维生素D3共设0,100,200,500,1000,2000,3000 IU/kg 7个添加梯度,每一... 详细信息

本文以酪蛋白和脱脂豆粕为蛋白源,糊精为糖源,玉米油和豆油为脂肪源的半纯化饲料为基础饲料,研究维生素D3对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼生长及体成分的影响。维生素D3共设0,100,200,500,1000,2000,3000 IU/kg 7个添加梯度,每一梯度设3个重复,每个重复放养60尾初始体质量(3.86±0.34)g的草鱼,在(26.9±3)℃的流水系统中养殖8周。结果显示:维生素D3对草鱼幼鱼增重率、特定生长率、饲料系数、存活率、体水分、粗蛋白质、粗脂肪含量和血清钙浓度没有显著性影响(P>0.05);对照组和添加100 IU/kg维生素D3的试验组中,草鱼幼鱼的粗灰分显著低于其它试验组(P<0.05);与对照组相比,饲料中添加维生素D3对全鱼钙磷含量、血清磷离子浓度以及碱性磷酸酶活性影响显著(P<0.05)。根据维生素D3对全鱼钙磷含量的影响,草鱼幼鱼饲料中维生素D3适宜的添加量为1000 IU/kg。

关键词：草鱼(Ctenopharyngodon idellus) 维生素D3 生长

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我国主要水系鲤的系统进化历史与基因流

我国主要水系鲤的系统进化历史与基因流

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第十届全国水产青年学术年会

作者：王成辉刘豪王军邹记兴李学军上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306 华南农业大学动物科学学院广东广州510642 河南师范大学生命科学学院河南新乡453007

鲤是世界上最重要的淡水鱼类之一,在我国的河流和湖泊中广泛分布.而目前对我国主要水系鲤的群体遗传结构和系统进化历史尚缺乏研究.本研究对我国主要水系(黑龙江、松花江、黄河、长江、瓯江、岷江、珠江和额尔齐斯河)鲤的线粒体DNA的CO... 详细信息

鲤是世界上最重要的淡水鱼类之一,在我国的河流和湖泊中广泛分布.而目前对我国主要水系鲤的群体遗传结构和系统进化历史尚缺乏研究.本研究对我国主要水系(黑龙江、松花江、黄河、长江、瓯江、岷江、珠江和额尔齐斯河)鲤的线粒体DNA的COⅡ基因和D-loop区进行了序列分析.Bayesian系统树未发现3个明显的亚种存在：*** haematopterus,*** rubrofuscus和*** carpio;AMOVA分析表明各水系间存在较低程度的遗传分化;基因流表明各迁移子以长江为中心,向北、向南和西北迁移;黑龙江和额尔齐斯河是鲤的东亚类群与欧洲类群的混杂区;当前分布于广东珠江流域的鲤并不属于亚种*** rubrofuscus,而南岭也不是亚种*** haematopterus和*** rubrofuscus的分隔带;长江中下游流域可能是鲤的东亚类群的起源中心.

关键词：鲤线粒体DNA 遗传分化基因流

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