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中国海洋湖沼学会鱼类学分会、中国动物学会鱼类学分会2012年学术研讨会

作者：常青马静滕玉清王新星中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室上海海洋大学水产与生命学院

通过投喂经赖氨酸及裂壶藻强化的卤虫,研究其对半滑舌鳎稚鱼(初始体长1.68±0.23cm)生长性能,主要消化酶活性(淀粉酶,酸性蛋白酶,碱性蛋白酶),碱性磷酸酶活性及胆囊收缩素(CCK)、甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)和

关键词：半滑舌鳎稚鱼赖氨酸消化酶胆囊收缩素

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赖氨酸对半滑舌鳎稚鱼消化系统发育和激素水平的影响

赖氨酸对半滑舌鳎稚鱼消化系统发育和激素水平的影响

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中国海洋湖沼学会、中国动物学会鱼类学分会2012年学术研讨会

作者：常青马静滕玉清王新星中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛266071 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛266071 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

通过投喂经赖氨酸及裂壶藻强化的卤虫,研究其对半滑舌鳎稚鱼生长性能,主要消化酶活性(淀粉酶,酸性蛋白酶,碱性蛋白酶),碱性磷酸酶活性及胆囊收缩素(CCK)、甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)和皮质醇浓度的影响.结果显示，赖氨酸组淀... 详细信息

通过投喂经赖氨酸及裂壶藻强化的卤虫,研究其对半滑舌鳎稚鱼生长性能,主要消化酶活性(淀粉酶,酸性蛋白酶,碱性蛋白酶),碱性磷酸酶活性及胆囊收缩素(CCK)、甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)和皮质醇浓度的影响.结果显示，赖氨酸组淀粉酶活力在8D时显著高于裂壶藻组，12D和16D时显著高于空白组。赖氨酸组的CCK浓度在16天时达到3187.3pg/g，显著高于空白组。赖氨酸组T3浓度在16D时显著高于空白组。T4和皮质醇浓度在3个组无显著性差异。实验组半滑舌鳎肠道微绒毛长度和黏膜厚度均显著高于空白组。本研究表明，游离赖氨酸能够促进半滑舌鳎稚鱼的生长、消化道发育和CCK及T3水平。

关键词：半滑舌鳎赖氨酸消化系统生长发育激素水平

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塔玛亚历山大藻对中国明对虾肝胰腺和鳃HSP90和Caspase基因表达的影响

塔玛亚历山大藻对中国明对虾肝胰腺和鳃HSP90和Caspase基因表达的...

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第八届世界华人虾蟹养殖学术研讨会

作者：梁忠秀李健刘萍李吉涛何玉英常志强刘德月上海海洋大学水产与生命学院上海201306 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室山东青岛266071 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室山东青岛266071

本论文选择在我国分离得到的一株能典型产生麻痹性贝毒(PSP,Paralytic Shellfish Poison)的有毒赤潮甲藻塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense,ATHK株),研究了其对一种我国重要的经济虾类中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的肝胰... 详细信息

本论文选择在我国分离得到的一株能典型产生麻痹性贝毒(PSP,Paralytic Shellfish Poison)的有毒赤潮甲藻塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense,ATHK株),研究了其对一种我国重要的经济虾类中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的肝胰腺和鳃HSP90和Caspase基因表达的影响.将中国明对虾暴露于浓度为200cells/ml、1000cells/ml的塔玛亚历山大藻中96 h,于胁迫后1、3、6、12、24、48、72、96 h测定肝胰腺和鳃Caspase和HSP90基因表达的影响.荧光定量PCR结果显示,暴露在浓度为200cells/ml和1000cells/ml藻液中1～6 h,中国明对虾肝胰腺和鳃的HSP90基因表达均增加,但1000cells/ml藻液胁迫24～96h,鳃HSP90基因表达受到抑制.暴露在以上两个浓度组中,中国明对虾肝胰腺的Caspase基因在各个时间点基本处于较低的表达水平,而鳃的Caspase基因表达水平在各个时间点基本高于对照组.实验结果表明,塔玛亚历山大藻对中国明对虾HSP90基因表达有一定的诱导效果,这可能表明HSP90被诱导以应对胁迫,但暴露在1000cells/ml藻液24～96h则该基因在鳃中的表达受到抑制,这可能会导致中国明对虾机体氧化损伤等情况的出现.Caspase基因在肝胰腺和鳃中表达水平的差异可能与不同组织应对胁迫时的不同功能有关,塔玛亚历山大藻能够诱导中国对虾鳃Caspase基因的表达水平升高,这可能促使鳃细胞凋亡的发生.

关键词：中国明对虾塔玛亚历山大藻细胞凋亡 caspase HSP 90 基因表达

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氮饥饿与磷饥饿促使缺刻缘绿藻花生四烯酸含量增加的比较

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水产学报 2011年第5期35卷 763-773页

作者：童牧于水燕欧阳珑玲周志刚上海海洋大学水产与生命学院农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海高校水产养殖E-研究院

以富含花生四烯酸(AA)的缺刻缘绿藻H4301为研究对象,探讨了不同光照强度条件下氮饥饿与磷饥饿对藻生物量、AA及脂肪酸含量变化的影响。发现氮饥饿与磷饥饿均降低了藻类的生长速率与生物量,当在60μmol photons/(m2.s)的低光照强度下,磷... 详细信息

以富含花生四烯酸(AA)的缺刻缘绿藻H4301为研究对象,探讨了不同光照强度条件下氮饥饿与磷饥饿对藻生物量、AA及脂肪酸含量变化的影响。发现氮饥饿与磷饥饿均降低了藻类的生长速率与生物量,当在60μmol photons/(m2.s)的低光照强度下,磷饥饿时的藻类平均生长速率最低[0.025 g/(d.L)],不足BG-11完全培养基中该藻生长速率的一半;氮饥饿与磷饥饿均能提高藻细胞总脂肪酸及AA的含量,但在低光照强度下磷饥饿的促进效果比较差;无论是完全培养基中还是饥饿处理时,200μmol photons/(m2.s)的高光照强度都不利于藻细胞AA及多不饱和脂肪酸的合成与积累;随着饥饿时间的不断持续,AA占总脂肪酸的百分含量逐渐增加,而亚油酸的百分含量逐渐降低,但在磷饥饿时,油酸的百分含量也增加,特别在高光照强度下,以油酸为主的单不饱和脂肪酸含量在第27天时占细胞干重的5.28%,以致AA含量的增加没有氮饥饿时的显著。从脂肪酸成分的变化来分析,该藻在氮或磷饥饿过程中主要是从亚油酸到γ-亚麻酸再到20∶3ω6这个途径来合成并积累AA,其中Δ6去饱和酶是限速酶,而ω3去饱和酶催化步骤受饥饿处理的负调控对确保AA的合成与积累有较大的积极作用。氮饥饿使藻细胞蛋白质合成受阻以及磷饥饿使核酸合成、糖类与能量代谢产生障碍,从而阻止藻类的生长并迫使细胞代谢流转向不含氮和磷的脂肪酸合成代谢,以提高藻细胞总脂肪酸及AA含量。

关键词：缺刻缘绿藻生物量花生四烯酸(AA) 氮饥饿磷饥饿

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鲢、鳙对三角帆蚌池塘藻类影响的围隔实验

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水产学报 2011年第5期35卷 729-737页

作者：周小玉张根芳刘其根鄢灵兰李家乐上海海洋大学水产与生命学院农业部水产种质资源与利用重点开放实验室浙江金华职业技术学院

以浙江金华汤溪威旺养殖基地的三角帆蚌养殖水体为研究对象,通过围隔实验比较研究了单养鲢、鳙和三角帆蚌的池塘浮游植物密度、生物量和优势种(属)组成等的差异,以及养蚌池混养鲢鳙对水体浮游植物密度、生物量以及优势种变化的影响。结... 详细信息

以浙江金华汤溪威旺养殖基地的三角帆蚌养殖水体为研究对象,通过围隔实验比较研究了单养鲢、鳙和三角帆蚌的池塘浮游植物密度、生物量和优势种(属)组成等的差异,以及养蚌池混养鲢鳙对水体浮游植物密度、生物量以及优势种变化的影响。结果表明,养蚌(10#)围隔的浮游植物平均密度和生物量均显著高于高密度鲢(12#)围隔(P<0.05),其蓝藻数量及生物量显著高于高密度鲢(12#)和低密度鳙(13#)围隔(P<0.05),绿藻数量则显著低于低密度鲢单养(11#)围隔(P<0.05)。在鱼蚌混养的情况下,单养蚌(10#)围隔浮游植物平均数量显著高于鲢-蚌混养(15#,16#)和鳙-蚌混养(17#,18#)围隔(P<0.05),其蓝藻数量及生物量极显著高于鲢-蚌混养(15#,16#)或鳙-蚌(17#,18#)围隔(P<0.01),其绿藻数量显著低于混养高密度鲢(16#)或低密度鳙(17#)的混养围隔(P<0.05)。研究结果充分说明,鲢、鳙和三角帆蚌三者对水体藻类组成的影响有别,三角帆蚌养殖池中适当混养鲢或鳙可以有效控制蓝藻(铜绿微囊藻)的生长,促进绿藻(四尾栅藻)的生长,并最终有利于三角帆蚌的养殖,混养鲢密度的增加有利于控制藻类生长,而鳙密度的增加促进了裸藻等中大型藻类的生长。

关键词：浮游植物三角帆蚌鲢鳙生物量

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总状毛霉甲壳素脱乙酰酶(CDA2)全长cDNA的克隆及原核表达

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上海海洋大学学报 2011年第1期20卷 44-49页

作者：蒋霞云袁襄南魏福卫周培根邹曙明上海海洋大学食品学院上海201306 上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306

采用快速扩增cDNA末端(RACE)克隆技术,通过设计甲壳素脱乙酰酶简并引物,从总状毛霉(Mucor racemosus)菌丝体中克隆了CDA2的基因(EF468349)及其全长cDNA(DQ678929)序列。与已获得的总状毛霉菌cda1基因相比,cda2基因中不含内含子。总状毛... 详细信息

采用快速扩增cDNA末端(RACE)克隆技术,通过设计甲壳素脱乙酰酶简并引物,从总状毛霉(Mucor racemosus)菌丝体中克隆了CDA2的基因(EF468349)及其全长cDNA(DQ678929)序列。与已获得的总状毛霉菌cda1基因相比,cda2基因中不含内含子。总状毛霉cda2全长cDNA为1 378 bp,包含23 bp 5’端非翻译区、1 254 bp开放阅读框和101 bp 3’端非翻译区,编码一条由418个氨基酸残基组成的多肽链,其N端包含一段21个氨基酸残基组成的信号肽,在150～272氨基酸残基区存在一个多糖脱乙酰酶保守结构域。通过构建pET28a-cda2表达载体和进行原核表达研究,结果显示:原核表达产生的重组蛋白CDA2的分子量约为46ku,表达形式以包涵体为主,纯化获得的重组蛋白CDA2具有甲壳素脱乙酰酶催化活性。本研究为进一步研究总状毛霉CDA2的结构和功能奠定了基础。

关键词：甲壳素脱乙酰酶甲壳素脱乙酰酶2基因 cDNA克隆总状毛霉原核表达

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缢蛏β-ACTIN1基因的分子特性及其表达分析

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水产学报 2011年第5期35卷 650-659页

作者：冯冰冰钟玉民牛东红陈慧林国文李家乐上海海洋大学水产与生命学院农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室福建省闽东水产研究所上海海洋大学水产与生命学院上海市高校水产养殖学E-研究院

为研究缢蛏功能基因的表达调控,利用SMART cDNA文库构建试剂盒成功构建了缢蛏肝脏组织的标准化cDNA文库。对随机选取的5 679个克隆进行随机测序,比对、筛选出2条β-actin同源序列,对其中一条EST序列两端进行扩增、测序,然后进行5′RACE(... 详细信息

为研究缢蛏功能基因的表达调控,利用SMART cDNA文库构建试剂盒成功构建了缢蛏肝脏组织的标准化cDNA文库。对随机选取的5 679个克隆进行随机测序,比对、筛选出2条β-actin同源序列,对其中一条EST序列两端进行扩增、测序,然后进行5′RACE(rapidamplification of cDNA ends,RACE)扩增、测序,拼接得到全长cDNA序列,命名为β-ACTIN 1。该序列全长为1 552 bp,包括73 bp的5′非翻译区和348 bp的3′非翻译区,以及1 131 bp的开放阅读框。阅读框共编码376个氨基酸,推算分子量约为41.95 ku,理论等电点为5.23。与其他7种软体动物的氨基酸序列进行比对发现,β-ACTIN1基因的氨基酸序列中Ile179、G lu229、Ser232、Pro236、Ile248、Asn272、Cys273、Val283、Ser320、Ser325、Val330、Pro339等12个氨基酸残基具有特异性;同时发现缢蛏β-ACTIN 1氨基酸序列与其他软体动物的相似性高达97%以上。系统进化分析显示,缢蛏首先与软体动物聚在一起,然后与节肢动物聚在一起,再依次与鱼类、两栖类、哺乳类聚在一起。荧光定量PCR检测结果显示,β-ACTIN1基因在缢蛏各组织中的表达及鳗弧菌诱导后的表达均不稳定,不适合作为内参基因。

关键词：缢蛏 cDNA文库 β-ACTIN1基因序列分析基因表达

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新疆乌伦古湖浮游甲壳动物的季节演替及与环境因子的关系

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生态学报 2011年第15期31卷 4468-4476页

作者：杨丽丽周小玉刘其根胡忠军王钰博江敏沈建忠刘军李周永郝志才上海海洋大学农业部水产种质资源创新与利用重点开放实验室上海201306 华中农业大学水产学院武汉430070 新疆维吾尔自治区福海县水产局福海836400

通过2006年11月至2008年8月2周年8个季度的野外采样调查和室内分析,研究了新疆乌伦古湖浮游甲壳动物的季节演替格局及其与环境因子的相关性。结果表明,枝角类和桡足类的总种类数为25种,其中枝角类6种,桡足类19种。枝角类Shannon-Wiener... 详细信息

通过2006年11月至2008年8月2周年8个季度的野外采样调查和室内分析,研究了新疆乌伦古湖浮游甲壳动物的季节演替格局及其与环境因子的相关性。结果表明,枝角类和桡足类的总种类数为25种,其中枝角类6种,桡足类19种。枝角类Shannon-Wiener指数2007年夏季和2008年夏季较高,2007年冬季最低;Pielou指数2006年冬季最高;桡足类Shannon-wiener指数和Pielou指数除冬季较低外,其余三季较高。方差分析结果表明枝角类和无节幼体的密度与生物量呈现出显著的季节变动格局,其中,枝角类密度和生物量在夏秋季形成单一高峰,最大值出现在2007年夏,最大密度和生物量分别为2.12个/L和0.062 mg/L,而无节幼体密度和生物量形成春秋双高峰,其最大值出现在2007年春,密度和生物量分别为5.14个/L和0.015mg/L,桡足类密度和生物量季节变化不明显。优势种的季节演替方面,象鼻溞和模式有爪猛水蚤全年形成优势,其他枝角类、哲水蚤和剑水蚤不同季节的优势种各异。经典范对应分析(CCA)结果表明,长刺溞等与水体中的pH值、SD呈正相关,与浮游植物生物量呈负相关;长额象鼻溞等与水深呈正相关,无节幼体等与水温也呈正相关性。

关键词：浮游甲壳动物季节演替环境因子典范对应分析

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应用激光共聚焦显微技术研究Ca2+在三角帆蚌组织内的积累与分布

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水产学报 2011年第2期35卷 214-220页

作者：李文娟施志仪郝莹莹叶显峰上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海市高校水产养殖学E-研究院上海海洋大学水产与生命学院安徽省芜湖市繁昌县农委

为了探讨淡水贝类Ca2+吸收和转运信号传递机理,采用激光共聚焦技术研究了三角帆蚌不同组织细胞在静息状态下细胞内游离Ca2+浓度,以及水体Ca2+浓度对外套膜组织细胞内钙沉积的影响。试验选取10只健康的三角帆蚌,分别获得外套膜外膜、内... 详细信息

为了探讨淡水贝类Ca2+吸收和转运信号传递机理,采用激光共聚焦技术研究了三角帆蚌不同组织细胞在静息状态下细胞内游离Ca2+浓度,以及水体Ca2+浓度对外套膜组织细胞内钙沉积的影响。试验选取10只健康的三角帆蚌,分别获得外套膜外膜、内膜、斧足、腮及内脏团上表皮组织细胞,短期培养后用Fluo-3/AM荧光探针孵育细胞1 h,观察细胞内Ca2+荧光强度。研究结果表明,蚌不同组织细胞内Ca2+荧光强度存在显著差异,外套膜外膜细胞内Ca2+荧光强度最高,内脏团上表皮细胞的最低(P<0.05);育珠三角帆蚌在相同Ca2+浓度的孵育水平下,外套膜细胞内Ca2+荧光强度比非育珠蚌都有增加的趋势,其中在1.25 mmol/L添加组中,两组外套膜内膜细胞内Ca2+荧光强度差异达到显著水平(P<0.05);不同Ca2+孵育水平对细胞内Ca2+荧光强度有显著影响(P<0.05),随着Ca2+在孵育液中浓度的升高,外套膜细胞内Ca2+荧光强度显著增强(P<0.05),表明外套膜是从外界吸收Ca2+的主要组织,蚌体珍珠的培育增强了其对Ca2+的沉积,并且水体Ca2+浓度在1.25～3.00 mmol/L有助于蚌体内Ca2+的贮藏,这对进一步开展淡水蚌类育珠学研究提供了基础理论,为珍珠培育的生产实践工作提供了依据。

关键词：三角帆蚌细胞培养激光共聚焦技术 Ca2+沉积

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缢蛏SRAP-PCR体系的正交优化

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生物技术通报 2011年第6期27卷 99-103页

作者：钟玉民刘达博冯冰冰陈慧林国文李家乐上海海洋大学水产与生命学院农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海201306 福建省闽东水产研究所宁德352100

运用L_(16)(4~5)正交设计对影响缢蛏SRAP-PCR反应的5个因素:Taq酶浓度、Mg^(2+)浓度、模板DNA浓度、dNTPs浓度和引物浓度在4个水平上进行了优化试验,PCR结果采用SPSS v16.0软件分析。结果表明,各因素对SRAP-PCR反应的影响依次为:引物>... 详细信息

运用L_(16)(4~5)正交设计对影响缢蛏SRAP-PCR反应的5个因素:Taq酶浓度、Mg^(2+)浓度、模板DNA浓度、dNTPs浓度和引物浓度在4个水平上进行了优化试验,PCR结果采用SPSS v16.0软件分析。结果表明,各因素对SRAP-PCR反应的影响依次为:引物>Taq酶>模板DNA>Mg^(2+);缢蛏SRAP反应最佳体系为:在20μL PCR反应体系中,引物0.3μmol/L、Taq酶0.5 U、模板DNA 50 ng、dNTPs 0.2 mmol/L及Mg^(2+)2 mmol/L。用不同缢蛏的基因组DNA两次SRAP-PCR扩增,8对引物均能扩增出清晰且重复性好的谱带。因而建立的缢蛏反应体系稳定可靠。

关键词：缢蛏 SRAP 正交设计优化

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