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第十一届全国水产青年学术年会

作者：刘达博牛东红冯冰冰钟玉民李家乐上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海市高校水产养殖学E研究院上海201306

利用微卫星标记分析了我国浙江乐清湾翁垟(ZWY)、乐成(ZYC)、南岳(ZNY)、南塘(ZNT)、清江(ZQJ)、湖雾(ZHW)、坞根(ZWG)、海山(ZHS)和芦浦(ZLP)缢蛏9个群体和福建三沙湾漳湾(FZW)、梅田(FMT)、三都(FSD)、渔江(FYJ)、白招(FBZ)、霞塘(FXT... 详细信息

利用微卫星标记分析了我国浙江乐清湾翁垟(ZWY)、乐成(ZYC)、南岳(ZNY)、南塘(ZNT)、清江(ZQJ)、湖雾(ZHW)、坞根(ZWG)、海山(ZHS)和芦浦(ZLP)缢蛏9个群体和福建三沙湾漳湾(FZW)、梅田(FMT)、三都(FSD)、渔江(FYJ)、白招(FBZ)、霞塘(FXT)、长春(FCC)、沙江(FSJ)和溪尾(FXW)缢蛏9个群体的遗传多样性和遗传分化.结果表明,缢蛏18个群体的平均有效等位基因数Ne为7.457-10.457,平均期望杂合度He为0.846-0.909,显示乐清湾和三沙湾缢蛏群体的遗传多样性仍处于较高水平.群体间FST结果表明,各群体间存在一定程度的遗传分化(FST=0.0001-0.0523).基于DA遗传距离构建UPGMA系统树和NJ系统树结果基本一致,18个群体分成了2支,即除了ZWY和ZWG群体外,其它浙江群体单独聚为一支;而ZWY、ZWG群体与9个福建群体聚类在一起,说明福建群体和浙江群体之间有交流.

关键词：缢蛏乐清湾三沙湾微卫星遗传多样性

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三角帆蚌GPX基因cDNA全序列的克隆及其编码蛋白的结构分析

三角帆蚌GPX基因cDNA全序列的克隆及其编码蛋白的结构分析

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2010年中国水产学会学术年会

作者：李西雷汪桂玲李家乐袁一鸣上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海市高校水产养殖学E研究院

根据本实验室构建的三角帆蚌cDNA文库中已标注的eST序列,文章利用cDNA末端快速扩增法(RACe)克隆了三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPX)基因cDNA全序列,序列分析表明,该基因cDNA序列全长1286bp... 详细信息

根据本实验室构建的三角帆蚌cDNA文库中已标注的eST序列,文章利用cDNA末端快速扩增法(RACe)克隆了三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPX)基因cDNA全序列,序列分析表明,该基因cDNA序列全长1286bp,包括5'端非翻译区(UntranslatedRegion)39bp、3'端非翻译区659bp和开放阅读框(Open reading frame,ORF)588bp,共编码195个氨基酸,分子量约为22.2 KDa,理论等电点为8.44,属于含硒类GPX。该氨基酸序列具有GPX所有亚型中均高度保守的3个环状结构,对酶的三级结构起稳定作用。在线分析结果表明:GPX基因的氨基酸序列不存在明显的疏水区,也不存在信号肽序列。氨基酸相似性对比结果显示,三角帆蚌GPX氨基酸序列与脊椎动物GPX-2及GPX-1的序列相似度较高,为73.1%-80.8%,与其他型GPX相似度较小,相似度低于60%。构建的系统进化树显示三角帆蚌GPX与其他几种鱼类GPX聚为一类,与其他已发表的几种软体动物GPX相距较远,推测本实验克隆的三角帆蚌GPX基因和已发表的软体动物不属于同一种GPX类型。

关键词：三角帆蚌 GPX基因 RACe 编码蛋白

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瘤背石磺产卵前后生殖系统的组织学变化

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水生生物学报 2009年第6期33卷 1038-1045页

作者：吴旭干胡冰杨筱珍成永旭上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室及上海市高校水产养殖学E-研究院上海201303

瘤背石磺(Onchidium struma)是雌雄同体、异体交配的腹足纲贝类,其生殖系统较为复杂,通过解剖学和组织切片技术对成体瘤背石磺的生殖系统及产卵前后的组织学变化进行了系统的研究。结果表明:(1)雄性生殖系统主要由阴茎囊、阴茎、雄性附... 详细信息

瘤背石磺(Onchidium struma)是雌雄同体、异体交配的腹足纲贝类,其生殖系统较为复杂,通过解剖学和组织切片技术对成体瘤背石磺的生殖系统及产卵前后的组织学变化进行了系统的研究。结果表明:(1)雄性生殖系统主要由阴茎囊、阴茎、雄性附性腺、两性腺(早期主要产生精子)和储精囊等部分组成,而雌性生殖系统则由两性腺(后期主要产生卵子)、生殖细胞输送管、蛋白腺、黏液腺、受精囊和阴道等组成;(2)雄性生殖系统的组织学结构在产卵前后变化较小,但两性腺、卵蛋白腺和黏液腺的组织学在产卵前后变化显著;(3)产卵后的两性腺由于成熟卵子的排放,整体结构松散,部分腺泡中有少量未排出的成熟卵细胞和卵黄合成早期的卵母细胞;(4)产卵前的卵蛋白腺中含有许多强嗜碱性的小颗粒(组织学结构类似于卵鞘中的胚胎外周蛋白),产卵后腺体中的颗粒相对较大,且呈嗜酸性;(5)产卵前的黏液腺中存在嗜碱性区、嗜酸性区和混杂区三种区域,但是产卵前黏液腺以嗜酸性细胞为主,而产卵后的黏液腺中以嗜碱性细胞区域为主,且分泌管道中有一些嗜碱性物质。由此可见,卵蛋白腺的主要功能是分泌卵蛋白包裹受精卵形成卵外周蛋白层,而黏液腺则在产卵过程中分泌黏液物质形成卵鞘结构及链状的卵带。

关键词：瘤背石磺产卵生殖系统组织学卵蛋白腺黏液腺

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三角帆蚌金属硫蛋白基因的克隆及序列分析

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动物学杂志 2009年第5期44卷 98-104页

作者：袁一鸣汪桂玲李家乐上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海市高校水产养殖学E研究院上海201306

采用RACe技术,获得了三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)金属硫蛋白基因的全长cDNA序列。该序列全长467 bp,由长92 bp的5′UTR(untranslated region),159 bp的3′UTR,和216 bp的开放阅读框(openreadingframe,ORF)组成。共编码71个氨基酸,分子量大约为7.1 ku,理论等电点为7.24。该蛋白序列中半胱氨酸含量最丰富(29.6%),其次是甘氨酸(14.1%),存在软体动物金属硫蛋白的特征序列CKCXXXCXCX,且C-末端的氨基酸序列也符合软体动物金属硫蛋白标签序列C-X-C-X(3)-C-T-G-X(3)-C-X-C-X(3)-C-X-C-K。蛋白序列特征分析表明,该序列与其他贝类的金属硫蛋白基因具有很高的相似性,具备金属硫蛋白的典型特征,是金属硫蛋白家族的成员。

关键词：三角帆蚌金属硫蛋白基因 RACe cDNA

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三疣梭子蟹胚胎发育过程中肝胰腺的发生与卵黄物质利用的关系

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Zoological Research 2009年第4期30卷 449-456页

作者：吴旭干刘智俊姚桂桂成永旭杨筱珍王春琳上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室及上海市高校水产养殖学E-研究院上海201306 宁波大学生命科学与生物工程学院浙江宁波315211

通过对三疣梭子蟹胚胎进行连续采样和组织切片,系统研究了三疣梭子蟹胚胎发育过程中卵黄囊和肝胰腺的发生与卵黄物质利用的关系。结果表明:(1)三疣梭子蟹胚胎的卵黄岛和卵黄囊结构分别出现在原肠期和无节幼体期,胚胎从原肠期至卵内第一... 详细信息

通过对三疣梭子蟹胚胎进行连续采样和组织切片,系统研究了三疣梭子蟹胚胎发育过程中卵黄囊和肝胰腺的发生与卵黄物质利用的关系。结果表明:(1)三疣梭子蟹胚胎的卵黄岛和卵黄囊结构分别出现在原肠期和无节幼体期,胚胎从原肠期至卵内第一期溞状幼体期,始终存在卵黄岛结构,且卵黄岛中的卵黄物质不断被分解和利用.(2)卵内第二期溞状幼体后,卵黄囊分为两个区域,卵黄囊壁中出现肝胰腺细胞(柱状上皮细胞),此时肝胰腺前体已开始形成,卵黄岛开始融合.(3)卵内第三期溞状幼体阶段,卵黄囊发育成一双肝胰腺,由于肝胰腺中的卵黄物质互相融合,卵黄岛结构消失。此阶段胚胎对卵黄物质的利用加快,卵黄物质中存在许多空泡状结构;(4)胚胎发育进入孵化前期后,肝胰腺腔内的卵黄物质极少,而初孵溞状幼体肝胰腺腔内卵黄物质已完全消失,肝胰腺为一对囊状结构。这些结果表明在三疣梭子蟹胚胎发育从原肠期到孵化前的过程中,卵黄岛和肝胰腺细胞对于卵黄物质分解和利用起着十分重要的作用。

关键词：三疣梭子蟹胚胎发育卵黄囊肝胰腺卵黄利用组织学

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三角帆蚌5个野生群体线粒体DNA 16S rRNA遗传特性研究

三角帆蚌5个野生群体线粒体DNA 16S rRNA遗传特性研究

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第十届全国水产青年学术年会

作者：汪桂玲李家乐白志毅上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海市高校水产养殖学E-研究院上海201306

对中国主要淡水湖泊三角帆蚌5个野生群体的线粒体DNA 16S rRNA基因片段进行了扩增和测序,得到473bp的碱基序列,没有发现插入/缺失突变的核苷酸位点。检测到了32个多态性核苷酸位点,共7种单倍型。鄱阳湖群体的222(C→G3)和325(A→G)位点... 详细信息

对中国主要淡水湖泊三角帆蚌5个野生群体的线粒体DNA 16S rRNA基因片段进行了扩增和测序,得到473bp的碱基序列,没有发现插入/缺失突变的核苷酸位点。检测到了32个多态性核苷酸位点,共7种单倍型。鄱阳湖群体的222(C→G3)和325(A→G)位点,太湖群体的233(A→G)位点,巢湖群体的40(A→G),138(A→T)和294(C→T)位点,洪泽湖群体的241(A→C)位点的变异可以作为区分群体分子遗传标记位点。洞庭湖群体未发现特异位点。在5个群体间鄱阳湖群体多态性位点、核苷酸多态性、单倍型多态性和单倍型数量4个指标都最高,表明鄱阳湖群体具有最为丰富的遗传结构,遗传变异最大,可作为三角帆蚌选育的基础群体。

关键词：三角帆蚌 mtDNA 16S rRNA 遗传变异

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褶纹冠蚌线粒体基因组全序列分析

褶纹冠蚌线粒体基因组全序列分析

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中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学会分会第十四次学会研讨会

作者：蒋文枰李家乐郑润玲汪桂玲上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海市高校水产养殖学E研究院

采用LA-PCR扩增获得褶纹冠蚌（Cristaria plicata）线粒体基因组全序列。分析表明:序列全长15 712 bp,包括13个蛋白质基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因和26个长度为2bp～328bp的非编码区。碱基组成为36.54%A、27.22%T、23.22%C、13.02%... 详细信息

采用LA-PCR扩增获得褶纹冠蚌（Cristaria plicata）线粒体基因组全序列。分析表明:序列全长15 712 bp,包括13个蛋白质基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因和26个长度为2bp～328bp的非编码区。碱基组成为36.54%A、27.22%T、23.22%C、13.02%G。大部分基因在L链编码,其中ND3～ND5、ND4L、COI～COIII、ATP6、ATP8、tRNA、tRNA在H链编码。基因排列与同科的射线佩饰真珠蚌（Lampsilis ornata）一致,与三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）在COIII和12S rRNA之间存在差异。13个蛋白质基因具有I（AUU、AUC）、V（GUG）、M（AUA、AUG）3种起始密码子,除ND2终止密码子为不完整的T,其余基因均为典型的UAA或UAG。22个tRNA中,除tRNA、tRNA、tRNA、tRNA、tRNA、tRNA和tRNA之外,其他15个tRNA都具有典型三叶草结构。与其他淡水双壳贝类一样,褶纹冠蚌具有ATP8基因,该基因可能与细胞质的渗透压平衡有关。

关键词：褶纹冠蚌线粒体基因组序列分析 ATP8基因系统进化

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泥螺微卫星分子标记的分离及特征分析

泥螺微卫星分子标记的分离及特征分析

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第十届全国水产青年学术年会

作者：王树亮李家乐牛东红冯建彬上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海市高校水产养殖学E-研究院上海201306

采用生物素-磁珠吸附微卫星富集法，分离泥螺的微卫星分子标记.结果在筛选的111白色菌落中，经测序共获得微卫星序列68个，阳性克隆率为61.3％.其中完美型占42.7％，非完美型占38.2％，复合型占19.1％.除探针中使用的CA重复外，还得到TG... 详细信息

采用生物素-磁珠吸附微卫星富集法，分离泥螺的微卫星分子标记.结果在筛选的111白色菌落中，经测序共获得微卫星序列68个，阳性克隆率为61.3％.其中完美型占42.7％，非完美型占38.2％，复合型占19.1％.除探针中使用的CA重复外，还得到TG、AG、TAG、GTT、TCTG、AAAG、CTGG等的重复序列.本实验所获得的泥螺微卫星序列重复数在10次以上的占总数的87.3％，最多重复次数为64次.用在线引物设计软件Primer3设计引物52对，挑选其中的25对合成，得到14对能扩增出多态性片段的微卫星引物.

关键词：泥螺微卫星磁珠富集

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三角帆蚌GPX基因cDNA全序列克隆及其结构特征

三角帆蚌GPX基因cDNA全序列克隆及其结构特征

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中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学会分会第十四次学会研讨会

作者：李西雷汪桂玲李家乐上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海市高校水产养殖学E研究院

根据本实验室构建的三角帆蚌cDNA文库中已标注的eST序列,利用cDNA末端快速扩增法(RACe)克隆了三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)GPX基因cDNA全长,序列分析表明,该基因cDNA序列全长1338p,包括5′端非翻译区(Untranslated Region)91bp,3′端... 详细信息

根据本实验室构建的三角帆蚌cDNA文库中已标注的eST序列,利用cDNA末端快速扩增法(RACe)克隆了三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)GPX基因cDNA全长,序列分析表明,该基因cDNA序列全长1338p,包括5′端非翻译区(Untranslated Region)91bp,3′端非翻译区659bp和开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)588bp,共编码195个氨基酸,分子量约为22217.4u,理论等电点为8.44,属于含硒类GPX。该氨基酸序列具有GPX所有亚型中均高度保守的3个环状结构,对酶的三级结构起稳定作用。在线分析结果表明GPX基因的氨基酸序列不存在明显的疏水区,也不存在信号肽序列。氨基酸同源对比结果显示,三角帆蚌GPX氨基酸序列与脊椎动物GPX-2及GPX-1的序列相似度较高,为73.1%-80.8%,与其它型GPX相似度较小,相似度低于60%。构建的系统进化树显示三角帆蚌GPX和与其他几种鱼类GPX聚为一类,与其他已发表的几种软体动物GPX相距较远,推测本实验克隆的三角帆蚌GPX基因和已发表的软体动物不属于同一种GPX类型。

关键词：三角帆蚌 GPX基因 RACe 分子结构特征

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褶纹冠蚌线粒体基因组全序列分析

褶纹冠蚌线粒体基因组全序列分析

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第十届全国水产青年学术年会

作者：蒋文枰李家乐郑润玲汪桂玲上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海市高校水产养殖学E-研究院上海201306

采用LA-PCR扩增获得褶纹冠蚌(Cristaria plicata)线粒体基因组全序列.分析表明：序列全长15 712 bp,包括13个蛋白质基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因和26个长度为2～328 bp的非编码区.碱基组成为36.54％A、27.22％T、23.22％C、13.02％G... 详细信息

采用LA-PCR扩增获得褶纹冠蚌(Cristaria plicata)线粒体基因组全序列.分析表明：序列全长15 712 bp,包括13个蛋白质基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因和26个长度为2～328 bp的非编码区.碱基组成为36.54％A、27.22％T、23.22％C、13.02％G.大部分基因在L链编码,其中ND3～ND5、ND4L、COⅠ ～ COⅢ、ATP6、ATP8、tRNAAsp、tRNAHis在H链编码.基因排列与同科的射线佩饰真珠蚌(Lampsilis ornata)一致,与三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)在COⅢ和12S rRNA之间存在差异.13个蛋白质基因具有I(AUU、AUC)、V(GUG)、M(AUA、AUG)3种起始密码子,除ND2终止密码子为不完整的T,其余基因均为典型的UAA或UAG.22个tRNA中,除tRNAThr、tRNALys、tRNASer(UCN)、tRNAAsp、tRNAArg、tRNATyr和tRNAMet之外,其他15个tRNA都具有典型三叶草结构.与其他淡水双壳贝类一样,褶纹冠蚌具有ATP8基因,该基因可能与细胞质的渗透压平衡有关.

关键词：褶纹冠蚌线粒体基因组序列分析 ATP8基因系统进化

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